关键词： 子宫内膜   骨髓间充质干细胞   外泌体   子宫内膜   宫腔粘连   损伤修复   骨髓间充质干细胞   外泌体  

摘要： 第一部分新西兰大白兔骨髓间充质干细胞及其来源的外泌体的分离、培养及鉴定目的:体外分离新西兰大白兔骨髓间充质干细胞（BMSCs）,进行培养、纯化及生物学特性和表型特征的研究;提取BMSCs来源的exosome进行鉴定,测定exosome蛋白含量,用于后续兔子宫内膜损伤的实验研究。方法:1.取4周龄雄性新西兰大白兔的胫骨和股骨分离出骨髓,采用全骨髓贴壁法培养及纯化BMSCs;流式细胞仪检测BMSCs的表面标记物,并向脂肪细胞方向诱导鉴定纯化的BMSCs;采用CCK8法检测细胞增殖速度,绘制生长曲线。2.收集第3代BMSCs的培养上清,Exo Quick-TCTM试剂盒提取exosome,并在透射电镜下观察形态;BCA法测定exosome蛋白含量。结果:1.（1）原代培养的兔BMSCs在接种48h后可见少量细胞贴壁,呈不规则多角形或扁梭形;培养6～8d后细胞绝大数处于贴壁状态,呈纺锤形或梭形,可见散在分布的细胞集落;14～16d可进行首次传代。传代后4h可见贴壁细胞,24h细胞基本完全贴壁铺展,呈长梭形,增殖迅速,5～6d后细胞基本融合。纯化至3代以后细胞形态趋向一致,呈均一纤维细胞样贴壁生长。（2）纯化的BMSCs高表达表面分子标志物CD29（97.60%）,不表达CD45（1.89%）,表明培养的细胞为间充质干细胞;对BMSCs诱导分化的成脂细胞进行染色鉴定,可见明显的空泡样脂滴,证实MSCs具有向脂肪细胞分化的能力。（3）正常传代P3 BMSCs与冻存复苏P3代细胞的生长曲线无明显差异。2.（1）透射电镜下观察exosome形态,可见较多圆形或椭圆形膜性小囊泡,包膜完整,直径约40-160nm,腔内含有低电子密度成分。（2）BCA蛋白定量法测得稀释20倍的exosome蛋白浓度为1.986μg/μl。结论:1.全骨髓贴壁细胞分离法能够成功分离并扩增骨髓间充质干细胞,这类细胞生长稳定、增值力强,且纯度较高、活性较好、表型均一。2.分离纯化的兔骨髓间充质干细胞高表达特异性抗原CD29,而几乎不表达造血干细胞特异性抗原CD45。3.冻存的BMSCs复苏后其生物活性无明显改变,冻存细胞可用于后续的体内实验研究。4.采用ExoQuick-TC试剂盒可以成功提取BMSCs培养液中的exosome,且操作简单。第二部分兔骨髓间充质干细胞来源的外泌体修复子宫内膜损伤的体内实验研究目的:构建稳定的新西兰大白兔子宫内膜损伤动物模型,为后续体内实验提供一个平台;初步探讨BMSCs来源的exosome是否具有修复受损子宫内膜的潜能及其作用机制,作为临床中治疗宫腔粘连的理论依据。方法:选取2-3月龄雌性新西兰大白兔60只,随机分为四组,每组15只,A组:对照组（假手术组）;B组:模型组（双重损伤组）;C组:BMSCs组;D组:exosome组。A组只开腹不损伤,B、C、D三组采用机械和感染双重损伤法建立兔子宫内膜损伤动物模型,造模一周后C、D组分别局部注射BMSCs、exosome悬液,A、B组局部注射等量PBS,分别于处理后1w、2w、4w处死5只新西兰兔,收集子宫组织,采用HE/Masson染色观察子宫内膜形态学改变及纤维化改变,免疫组化及Western Blot检测子宫内膜标记蛋白CK、VIM的表达。结果:1.兔子宫内膜损伤后形态学改变:子宫内膜表面上皮大量脱落,内膜间质变薄甚至裸露;间质出血,毛细血管破裂、出血。可见宫腔粘连带形成,腺体稀疏,间质纤维化增生。***/Masson染色结果:治疗后4w,BMSCs组和exosome组兔子宫内膜腺体数量显著高于模型组（P＜0.05）,纤维化面积比率显著低于模型组（P＜0.05）。3.治疗后4w,BMSCs组和exosome组CK-19蛋白相对表达量显著高于模型组（P＜0.05）,与对照组无差异（P＞0.05）;治疗后4w,BMSCs组和exosome组VIM蛋白相对表达量与模型组及对照组均有显著差异（P＜0.05）。结论:1.双重损伤法致兔子宫内膜发生不可逆性损伤,形成瘢痕修复,能够建立稳定的子宫内膜损伤动物模型。2.骨髓间充质干细胞可以作用在损伤的子宫内膜中,促进受损内膜的修复,可能作为外源性的干细胞修复损伤的子宫内膜。3.作为骨髓间充质干细胞来源的外泌体具有同干细胞类似的作用,可以在损伤的子宫内膜中作用,促进受损内膜的修复。

关键词： 阴道超声   宫腔粘连   诊断方案   效果  

摘要： 目的:探究将阴道超声应用于检查宫腔粘连中的效果.方法:选择我院中,2015年1月至2016年12月间收治的宫腔粘连患者34例作为研究对象,将其命名为实验组;选择同期内我院中收入的宫腔粘连患者34例,作为对照组进行对照检查;对照组患者采用腹部超声检查,而实验组患者采用阴道超声诊断,对两组患者的诊断准确率对比,分析两组差异.结果:实验组患者的诊断阳性率较对照组明显更高,准确率更高,组间差异具有统计学意义(P>0.05).结论:将阴道超声应用于宫腔粘连的诊断中,能够通过良好的超声图像来确定患者的病症状况,对于宫腔粘连的诊断有十分积极的作用,值得推广.

关键词： 球囊子宫支架   宫内节育器   宫腔粘连  

摘要： 目的探究球囊子宫支架和宫内节育器对中重度宫腔粘连患者的治疗效果。方法选择2015年6月2016年9月在本院进行诊治的中重度宫腔粘连患者做研究,随机分2组/24例,对照组:宫内节育器,观察组:宫内节育器联合球囊子宫支架,相比2组患者的治疗效果、并发症情况、生活质量评分。结果护理后,观察组患者的优良率高达91.67%,且并发症发生率仅为8.33%,生活质量各项分值较对照组高7分左右,相比对照组更具优势（P<0.05）。结论相比宫内节育器,球囊子宫支架对于中重度宫腔粘连患者的临床效果更为显著。

关键词： 宫腔粘连   转化生长因子-β   结缔组织生长因子(CTUF)  

摘要： 宫腔粘连(IUA)是由于子宫内膜损伤导致的以子宫内膜组织纤维化为主要病理学特征、宫腔部分或完全闭塞为临床结局,临床表现为继发闭经、月经过少、不孕等。目前,其发病机制尚不完全明确,可能与体内部分促进创面修复或抑制组织纤维化的相关细胞因子异常表达密切相关。为此,探讨相关细胞因子在宫腔粘连中的表达,对于了解IUA的发病机制、为治疗宫腔粘连、提高妊娠率提供新的前景。

关键词： 宫腔镜下粘连切除术   再粘连   宫内节育器   生物防粘连膜  

摘要： 目的:探究宫腔粘连分离术后宫腔内置入包裹生物防粘连膜的宫内节育器(intrauterinedevice,IUD)与仅使用生物防粘连膜预防粘连复发的疗效。方法:回顾性分析2015年7月至2016年7月重庆医科大学附属第一医院经宫腔镜检查诊断为中重度IUA患者120例,于宫腔镜粘连分离术后被随机分为A组(包裹生物防粘连膜的金属圆形IUD被置入宫腔)70例,B组(生物防粘连膜被置入宫腔)50例。对照2组患者术后的再粘连形成、月经量的变化、宫腔解剖构造恢复、妊娠情况。结果:术后A组宫腔再粘连发生率(37.1%)明显低于B组再粘连发生率(56.0%),P=0.041;A、B组妊娠率分别为22.9%、22.0%(P=0.912);A、B组月经量治疗有效率(治愈率+改善率)分别为72.9%、62.0%(P=0.523);A、B组宫腔形态恢复有效率(治愈率+改善率)分别为100%、98%(P=0.554)。结论:术后宫腔内留置金属圆形IUD+生物防粘连膜防止粘连复发的效果明显优于单纯放置防粘连膜,而对于改善月经、恢复宫腔解剖结构及妊娠,2种方法均可。

关键词： 宫腔粘连   高危因素   预防  

摘要： 目的:探究宫腔粘连发病的高危因素,并针对此提出相关的预防措施。研究方法:收集2013年6月至2016年6月在中国医科大学附属盛京医院妇产科病房因宫腔粘连行手术治疗的病例,共计315例。对患者的年龄、既往宫腔手术操作史、既往宫腔操作次数、前次宫腔操作与粘连分离术间隔时间、以及术后月经改变的情况进行整理和分析。采用SSPS17软件,组间差异使用卡方检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.本研究中28-37岁组,占所有病例的46.3%,是发病年龄最多的年龄段。2.人工流产术导致的宫腔粘连,占67.3%,是导致宫腔粘连所占例数最多。3.宫腔操作的次数,在三次及以上组,重度宫腔粘连占36.4%,二次组及一次组,较之减少。4.在病程6个月以上组,重度宫腔粘连占63.2%。其他组的重度粘连的比例逐步减少。5.在闭经组,重度宫腔粘连的占49.4%。在其他组,月经越多,发生重度宫腔粘连的比例越少。结论:1.人工流产术是宫腔粘连的主要致病原因。2.依宫腔操作的次数增加,无论妊娠组和非妊娠组,均与宫腔粘连的发病及严重程度相关。3.宫腔粘连的病程与宫腔粘连的严重程度呈正相关。4.月经减少、甚至闭经,高度提示宫腔粘连的可能。从预防角度,可以提出两项预防措施:1、落实育龄期妇女的避孕措施,减少非意愿妊娠的发生;2、宫腔手术术后月经减少、甚至闭经时,建议直接行宫腔镜检查,实现宫腔粘连早发现,早处理,改善生殖预后。

关键词： 宫腔粘连   经血干细胞   动物模型   干细胞治疗  

摘要： 背景:宫腔粘连是一种以月经障碍和受孕困难为主要特点的妇科疾病,发病率逐年上升,严重影响女性生育能力。研究显示,宫腔粘连的形成与子宫内膜干细胞所处的内膜基底层损伤直接相关,因此宫腔粘连等子宫内膜创伤性疾病也被认为是一种干细胞缺乏或功能障碍有关的疾病。近年来,再生医学和组织工程学不断发展,干细胞移植疗法逐步应用于临床,具有良好的治疗前景。经血干细胞是从人体排出的月经血中提取出来的子宫内膜干细胞,获取过程高效无创且在体外培养条件下展示出了极强的增殖能力。越来越多的研究结果证明经血干细胞对损伤性疾病具有极佳的治疗效果,是一种新兴的治疗性干细胞。我们的前期实验已经证明,经血干细胞可以在大鼠损伤子宫中定植,并促进宫腔粘连大鼠子宫形态的恢复。本实验拟通过子宫浆膜下注射法向大鼠宫腔粘连模型移植经血干细胞,并探究经血干细胞产生治疗效果的可能机制。方法:通过机械刮宫建立大鼠子宫内膜损伤—宫腔粘连模型,两个大鼠生理周期后向子宫内膜下多点注射对数增长期的经血干细胞进行治疗。通过子宫大体荧光成像和子宫切片免疫荧光了解人源经血干细胞在大鼠子宫内迁徙定植情况;通过组织切片染色、免疫组化、免疫荧光、Realtime-PCR和Western-blot等检测方法评估经血干细胞对大鼠宫腔粘连模型的治疗效果;治疗四个周期后,与公鼠合笼统计妊娠情况评估经血干细胞移植对宫腔粘连大鼠受孕能力的影响。结果:1、经血干细胞具有间充质干细胞特性,表达血管前细胞标志PDGFR,CD146和SUSD2以及子宫内膜基质细胞细胞标志波蛋白(Vimentin);2、带有荧光标记的经血干细胞移植后示踪结果显示,经血干细胞可以在大鼠子宫内存活,并趋向迁移至受损子宫内膜区域,可定植于腺体周围;3、经血干细胞移植可以显著提高宫腔粘连大鼠子宫腺体数量和子宫内膜厚度,促进组织细胞增殖,减轻子宫内膜纤维化程度,上调大鼠子宫波蛋白(Vimentin)和角蛋白(CK18)表达,下调胶原蛋白1(Collagen 1)表达;4、Realtime-PCR和多因子检测及Western-blotting结果显示,经血干细胞移植后,宫腔粘连大鼠子宫组织内IL1-β,IL4和IL10表达量增加,IL6和CTGF表达下降;5、妊娠实验统计结果显示,经血干细胞移植后,宫腔粘连大鼠的胚胎数和活胎率均显著高于安慰剂组。结论:1、外源性经血干细胞能够定植于宫腔粘连大鼠的子宫内膜,分布于子宫腔和血管腺体周围,具有损伤趋化性;2、经血干细胞可以促进宫腔粘连大鼠子宫内膜细胞增殖,促进腺体再生,提高子宫内膜干细胞特异性标志表达;3、经血干细胞移植后,宫腔粘连大鼠子宫内膜纤维化程度减轻,炎症状态得到改善。4、经血干细胞移植可以提高大鼠的妊娠率和活胎率,显著改善宫腔粘连大鼠的妊娠结局。综上,经血干细胞能够改善和治疗大鼠宫腔粘连,具有临床意义。本实验研究结果为经血干细胞治疗宫腔粘连及其他子宫内膜损伤性疾病的临床应用提供了理论基础。

关键词： 不全流产   米非司酮   清宫术   宫腔粘连  

摘要： 目的:比较不同治疗方法在不全流产中的应用及临床疗效.方法:将2016年1月—2018年1月我院收治的94例不全流产患者随机分为清官组47例、米非司酮组47例,观察两组不同治疗方案的阴道出血、血h C G值下降情况、月经恢复周期、闭经及宫腔粘连等并发症的发生率,评估治疗效果及并发症的发生.结果:米非司酮组再次清宫及宫腔粘连发生率少于清宫组(P<0.05),月经复潮天数米非司酮组小于清宫组(P<0.01),清宫组并发症高于米非司酮组.结论:对于宫腔残留物较小,血HCG值小于2000IU/L的不全流产患者口服米非司酮保守治疗效果好,并发症少,并缩短阴道出血时间、减少阴道流血量.

关键词： 人脂肪干细胞   细胞膜片   宫腔粘连   子宫内膜上皮细胞   诱导分化  

摘要： 研究背景自从1978年第一例试管婴儿诞生至今,目前全世界已有约600万试管婴儿出生,但依然有辅助生殖技术解决不了的不孕难题,宫腔粘连(Intrauterine adhesions,IUA),是指子宫内膜损伤后,应激性修复引起大量的纤维细胞增生,导致宫腔粘连,又称为Asherman综合征,临床表现为闭经、不孕和妊娠后各种并发症,包括胎盘早剥、胎膜早破、先露异常等,严重威胁我国育龄期女性的生殖健康。据统计宫腔粘连导致的不孕占继发性不孕患者发病原因的8%。目前治疗方法主要局限于外科手术重建子宫腔,对于重度宫腔粘连的患者来说,即使手术恢复了宫腔形态,但因子宫内膜基底层损伤严重,无法增殖足够的子宫内膜功能层,故无论采取何种治疗措施,患者的妊娠率无明显提高。因此我们考虑给受损的子宫内膜处移植外源性干细胞,以用于修复子宫内膜。基于以上原因我们课题组选用人脂肪干细胞诱导构建脂肪干细胞膜片,对细胞膜片的基本结构进行分析,并通过探讨其对子宫内膜修复的初步作用机制,探讨脂肪干细胞膜片应用于宫腔粘连治疗的可行性。目的:体外分离、纯化人脂肪干细胞(Adipose derived stem cells,ADSCs),利用分离纯化的脂肪干细胞构建脂肪干细胞膜片,探讨脂肪干细胞膜片的活性及其应用于宫腔粘连治疗的可行性。方法:1、人脂肪干细胞的体外分离培养与构建人脂肪干细胞膜片:收集年轻女性腹部皮下脂肪组织,用酶消化法分离培养人ADSCs;CCK-8法检测细胞的自我增殖能力;取第3代ADSCs流式鉴定其表面标记物;成骨、成脂诱导实验检测ADSCs的体外多向分化能力。构建脂肪干细胞膜片:使用完全培养液加入维生素C及地塞米松等活性细胞因子诱导构建脂肪干细胞膜片;扫描电镜观察细胞膜片的结构及组织学形态。2、人脂肪干细胞膜片修复功能的初步研究:qRT-PCR和ELISA检测细胞膜片相关优势促生长因子的表达。3、人脂肪干细胞向子宫内膜上皮细胞方向分化的体外研究:原代分离培养人子宫内膜细胞并鉴定,将第3代人脂肪干细胞分别用以下4种培养方法进行培养。第1组:ADSCs用对照培养液(5%FBS+α-MEM)单独培养;第2组:ADSCs使用诱导分化培养液(5%FBS+α-MEM,10ng/ml TGF-β1,10ng/ml EGF,10ng/ml PDGF-BB,1x10-7mol/L 17β-雌二醇)单独培养;第3组:ADSCs与子宫内膜细胞,对照培养液共培养;第4组:ADSCs与子宫内膜细胞,诱导分化培养液共培养。第5组:脂肪干细胞膜片与子宫内膜细胞,诱导分化培养液共培养。之后采用免疫荧光化学方法鉴定诱导分化后的ADSCs是否表达特异性角蛋白CK18,以及qRT-PCR实验,检测上皮标记CK7,CK18,CK19和EMA的mRNA的表达。结果:1、脂肪干细胞原代培养约4h贴壁,24h后细胞完全贴壁生长,体外分离培养的人ADSCs生长状态良好,原代人ADSCs成短梭形、多角形。P3代以后细胞大小形态基本均一,呈成纤维细胞样;对培养的P3代脂肪干细胞鉴定发现其间充质干细胞表面标记CD29、CD44、CD90、CD105表达阳性,造血干细胞表面标记CD45表达阴性;油红O与茜素红染色阳性,提示该ADSCs具有多向分化潜能。人P3代ADSCs使用细胞膜片诱导培养液连续培养10-14天后就可获得白色膜状的细胞膜片,光镜下观察膜片中的细胞呈长梭形重叠生长,成熟的细胞膜片可用细胞刀轻轻刮下,具有一定的韧性和弹性;扫描电镜观察膜片中的细胞呈网格样叠加生长,大量的细胞外基质使细胞之间连接紧密,形成细胞膜片。2、qRT-PCR提示该脂肪干细胞膜片高表达TGF-β1、FGF2、HGF、VEGF和Col1A1等促生长细胞因子,同样高表达OCT4、NANOG等干性基因;ELISA检测结果显示该脂肪干细胞膜片上清液高表达TGF-β1、FGF、HGF、VEGF等促生长细胞因子。3、免疫荧光化学方法结果提示:第1、2组中的角蛋白CK18表达阴性,第3、4、5组角蛋白CK18表达阳性,但第4组诱导后的人ADSCs的形态更接近上皮细胞形态;按上述培养方式连续培养5天后,qRT-PCR方法检测5组人ADSCs表面上皮细胞标记(CK7、CK18、CK19、EMA)表达发现:CK18、CK19 mRNA表达量在1、2、3、4和5组中逐渐上升,在第5组表达量最高,且各组均有差异。CK7、EMA mRNA在2、3、4和5组表达量比第1组表达升高,但后4组无差异。结论:1、我们课题组在完全培养液中加入维生素C及地塞米松等活性因子诱导培养人ADSCs,成功获得脂肪干细胞膜片,该膜片取材简单,具有一定的韧性和弹性,同时膜片可分泌更高含量的促生长细胞因子并表达更高水平的干性基因,为人ADSCs膜片在子宫内膜损伤修复中的应用提供

关键词： 人早孕蜕膜间充质干细胞   宫腔粘连   活性氧   氧化应激   凋亡   Meta分析  

摘要： 目的:1.通过Meta分析评价中重度宫腔粘连（intrauterine adhesion,IUA）宫腔镜下粘连带电切术（transcervical resection of adhesion,TCRA）术后应用球囊及节育器预防复发的有效性,以期为TCRA术后选用合适的治疗方法提供循证学依据。2.建立人早孕蜕膜间充质干细胞（human decidual mesenchymal stem cells,hDMSCs）氧化应激模型,模拟宫腔粘连损伤,通过观察细胞形态学、细胞活性氧水平、线粒体膜电位及凋亡相关蛋白的变化,探讨氧化应激条件下hDMSCs损伤机制。方法:1.搜索公开发表的关于中重度宫腔粘连TCRA术后使用球囊及节育器治疗的文献进行Meta分析,计算机检索数据库,时间为2010年1月至2017年9月的中/英文公开发表的研究。制订纳入及排除标准,对文献进行严格筛选,所有数据采用Revman 5.2统计软件进行分析,并使用森林图和漏斗图分析结果。2.以过氧化氢模拟宫腔粘连环境,建立hDMSCs体外氧化应激模型。分别以0μM、10μM、40μM、80μM、160μM、320μM的过氧化氢溶液作用于P3代hDMSCs,6小时后,观察其细胞形态学改变、氧化及抗氧化指标、线粒体膜电位变化及凋亡相关蛋白相对量的变化。结果:1.根据标准排除,纳入的文献有15篇。中重度宫腔粘连宫腔镜粘连分离术后进行球囊和节育环治疗的总共有1389例,使用球囊和节育环预防术后再粘连分别为698例和691例。Meta分析发现:（1）15个研究比较了术后再粘连情况,宫腔镜粘连分离术后节育环组再粘连发生率高于球囊组,组间比较差异有显著性（Z=5.83,OR 0.46,95%CI 0.36～0.60,P<0.00001）,（2）3个研究比较了两组的术后再妊娠率,宫腔镜粘连分离术后节育环组与球囊组术后再妊娠率比较,组间比较差异无统计学意义（Z=1.34,OR 1.56,95%CI 0.82～2.96,P=0.18）。（3）10篇文献报道了术后月经改善率,宫腔镜粘连分离术后球囊组月经改善率高于节育环组,差异有统计学意义（Z=6.83,OR 3.23,95%CI 2.31～4.53,P<0.00001）。2.细胞形态学改变:正常的hDMSCs为梭形贴壁细胞;10μM H2O2处理6小时候后,细胞尚保持原有梭形外观,但细胞轻度肿胀,密度轻度下降;随着H2O2浓度的增加,细胞渐进性皱缩并密度降低,可见凋亡细胞,并出现细胞碎裂现象。3.氧化与抗氧化能力变化:超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）酶活力随着过氧化氢浓度的增加而降低,二者呈负相关关系（rs=-0.904,P=0.035）,各浓度组细胞SOD酶活力与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;谷胱甘肽浓度随着过氧化氢浓度增加而降低,二者呈负相关关系（rs=-0.975,P=0.05）,各浓度组细胞谷胱甘肽浓度与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;丙二醛（Malondialdehyde,MDA）浓度随着过氧化氢浓度增加而升高,二者呈正相关关系（rs=0.975,P=0.005）,各浓度组细胞MDA浓度与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）;酶标仪显示细胞内ROS的平均荧光值随H2O2浓度的增加而增加,各浓度组细胞与空白组比较,ROS的平均荧光值升高,差异均有统计学意义（P=0.000）。4.线粒体膜电位变化:与空白对照组相比,10μM组红绿荧光比率无明显变化,差异无统计学意义（P>0.05）;余四个浓度组细胞与空白组比较,线粒体膜电位降低,差异均有统计学意义（P=0.000）。除80μM组与160μM组比较无统计学意义（P>0.05）,余不同浓度组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。5.各组PARP-1蛋白相对表达量均数由高到低依次为320μM组（1.004）、160μM组（0.959）、80μM组（0.740）、40μM组（0.406）、10μM组（0.211）、空白对照组（0.150）。各实验组与对照组相比,10μM组无显著性差异（P=0.154）,其余4组均有显著性差异,五个实验组之间,除320μM组与160μM组之间差异无显著性差异（P=0.282）外,余各实验组间均有显著性差异。各组Caspase-3蛋白相对表达量均数由高到低依次为320μM组（0.973）、160μM组（0.730）、80μM组（0.620）、40μM组（0.096）、10μM组（0.092）、空白对照组（0.003）。各实验组与对照组相相比均有显著性差异,五个实验组之间,除10μM组与40μM组之间差异无显著性差异（P=0.895）外,余各实验组间比较均有显著性差异。结论1.与宫内节育器相比