关键词:
宫腔粘连
人脐带间充质干细胞
透明质酸
纤维化
炎症反应
摘要:
目的探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)联合透明质酸钠凝胶局部注射治疗宫腔粘连大鼠的效果及可能机制。方法按照随机数字表法将25只无特定病原级雌性Sprague Dawley大鼠分为空白对照组、宫腔粘连组、透明质酸钠凝胶组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠凝胶组,每组5只。空白组大鼠不做任何处理;其余4组大鼠使用体积分数950 mL·L^(-1)乙醇注射法制备宫腔粘连模型。宫腔粘连模型制备1周后,hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠双侧子宫角内分别注射100μL的1×10^(10) L^(-1) hUC-MSCs混悬液,宫腔粘连组、透明质酸钠组大鼠双侧子宫角内注射生理盐水100μL;随后,透明质酸钠组和hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠双侧子宫角内注射透明质酸钠凝胶300μL,宫腔粘连组和hUC-MSCs组大鼠双侧子宫角内注射等量生理盐水。干预3 d后,将5组大鼠与具有生殖能力的成熟雄大鼠依照1∶2的数量混合饲养、进行交配;交配7 d观察大鼠阴道栓,以确定交配成功。抽取5组妊娠大鼠腹主动脉血,采用酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平;取血后,将大鼠过量麻醉处死,开腹取双侧子宫,用生理盐水冲洗,首先计数妊娠孕囊数量;然后,小心分离子宫内膜组织,采用Western blot法检测大鼠子宫内膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。结果宫腔粘连组、透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠妊娠孕囊数量显著少于空白对照组,透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠妊娠孕囊数量显著多于宫腔粘连组,hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠妊娠孕囊数量显著多于透明质酸钠组和hUC-MSCs组(P<0.05);透明质酸钠组与hUC-MSCs组大鼠妊娠孕囊数量比较差异无统计学意义(P>0.05)。宫腔粘连组、透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠血清中IL-6和IL-8水平显著高于空白对照组,透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠血清中IL-6和IL-8水平显著低于宫腔粘连组,hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠血清中IL-6和IL-8水平显著低于透明质酸钠组和hUC-MSCs组(P<0.05);透明质酸钠组与hUC-MSCs组大鼠血清中IL-6和IL-8水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。宫腔粘连组、透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1相对表达量显著高于空白对照组,MMP-9相对表达量显著低于空白对照组(P<0.05);透明质酸钠组、hUC-MSCs组、hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1相对表达量显著低于宫腔粘连组,MMP-9相对表达量显著高于宫腔粘连组(P<0.05);hUC-MSCs+透明质酸钠组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1相对表达量显著低于透明质酸钠组和hUC-MSCs组,MMP-9相对表达量显著高于透明质酸钠组和hUC-MSCs组(P<0.05);透明质酸钠组与hUC-MSCs组大鼠子宫内膜组织中TGF-β1和MMP-9相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论hUC-MSCs联合透明质酸钠凝胶注射可通过上调宫腔粘连大鼠子宫内膜组织MMP-9蛋白表达水平、降低TGF-β1及炎症因子IL-6、IL-8水平,修复受损子宫内膜,提高妊娠孕囊数量。