关键词： 多囊卵巢综合症   雄激素受体   性激素结合球蛋白   毛细管电泳  

摘要： 背景和目的:多囊卵巢综合征(PCOS)是育龄期女性常见的一种高度异质性的内分泌代谢紊乱性疾病,临床表现多种多样,典型的表现为不同程度的月经异常、卵巢多囊性改变、高雄激素血症、不孕、多毛、痤疮、肥胖等,并常伴有随年龄增长而日益明显的胰岛素抵抗、高胰岛素血症和高脂血症,常合并2型糖尿病和心血管疾病。迄今为止,PCOS的病因尚不清楚,其明显的家族聚集性提示遗传因素在PCOS的发病中起重要作用,由于临床表现的异质性,多数研究认为:PCOS很可能是少数几个关键基因与微效基因共同作用,这种遗传易感性与环境因素相互作用而发病的,而且对于不同种族,不同家庭,起关键作用的基因可能不同。国外对PCOS的多种基因进行了研究,结果不尽相同,国内对PCOS的致病基因研究不多。国外学者还研究表明指长比有性别、种族和地域差异,与个体攻击性行为、艾滋病病毒易感性、心肌梗塞、乳腺癌、精子数量、及同性恋等有关,但国内研究较少。 本课题针对PCOS常见的高雄激素血症的内分泌特征,选择与雄激素有关的雄激素受体(AR)基因和性激素结合球蛋白(SHBG)基因进行研究,旨在探讨AR基因微卫星(CAG)n多态性和SHBG基因(TAAAA)n多态性与PCOS发病及临床特征的关系,寻找PCOS的致病基因,以期为PCOS的预防和治疗提供理论基础。同时研究指长比与PCOS的相关性,以期为国内女性PCOS患者的早期筛选、诊断和预防提供一定的理论依据。 方法:收集2008年10月-2010年4月在宁夏医科大学附属医院生殖医学中心就诊的PCOS患者191例作为PCOS组,并与PCOS患者同时期因单纯输卵管因素或男性因素不孕就诊的70名女性作为对照组。所有女性均排除其他内分泌疾患,近3月内未使用激素类药物,行血清性激素水平、空腹血糖、餐后2小时血糖、空腹胰岛素、餐后2小时胰岛素水平及血脂水平测定。并且记录月经、痤疮及脂肪肝的发生情况,测量体重、身高、腰围、臀围、血压、计算体重指数(BMI)、腰臀比、胰岛素抵抗(IR)、按照是否存在高雄激素血症将PCOS患者分为高雄激素组和雄激素水平正常组;按照是否存在胰岛素抵抗分为胰岛素抵抗组和非胰岛素抵抗组;按照BMI分为肥胖组和非肥胖组。对照组测定血清性激素水平及血脂水平。对各指标进行比较。从血液标本中提取DNA,PCR扩增所有标本的雄激素受体AR基因的CAG微卫星片段和性激素结合球蛋白SHBG基因的TAAAA片段,分别进行琼脂糖凝胶、毛细管电泳检测目的基因产物,对目的基因测序确定CAG和TAAAA重复次数。测量左右手第2-5指长度(掌侧),并计算各手指间的指长比值。 结果:***患者的临床资料分析 1.1 PCOS组于正常对照组比较,两组的年龄、初潮年龄、收缩压、舒张压、FSH、PRL、E2、CHOL、LDL、HDL之间没有差异,月经周期、腰围、臀围、WHR、BMI、痤疮发生率、LH、T、TG之间有差异,PCOS组均大于正常对照组。 1.2 PCOS患者高雄激素组和雄激素正常组比较,两组的年龄、空腹胰岛素、空腹血糖、餐后2小时血糖、LH、FSH、PRL、E2均无差异,餐后2小时胰岛素、T、BMI有差异,PCOS组均大于正常对照组。 1.3 PCOS患者胰岛素抵抗组与胰岛素非抵抗组比较,两组的年龄、E2、FSH、LH、PRL水平之间没有差异,而胰岛素抵抗组的PCOS患者的T、BMI、WHR和两个时点的血糖及胰岛素水平均高于胰岛素非抵抗组的PCOS患者,且差异有显著性。在高雄激素组中存在胰岛素抵抗的患者例数与雄激素正常组中存在的胰岛素抵抗的患者的例数有差异,高雄激素组例数高于雄激素正常组例数。 1.4 PCOS患者肥胖组与非肥胖组比较,两组患者的年龄、空腹血糖、餐后2小时血糖、E2、FSH、LH、PRL水平之间没有差异,而空腹胰岛素、餐后2小时胰岛素、IR、T、BMI、WHR之间有差异,肥胖组均大于非肥胖组。 ***基因(CAG)n重复次数与多囊卵巢综合征的相关性研究 2.1 AR基因(CAG)n重复次数的整体分布:AR-CAG重复次数在PCOS组为11-33,主要分布在22、23、21;在对照组为13-30,主要分布在22、21、23,两组均以22居多,两组均以22为界,按AR基因所含CAG重复次数,将其分为短组CAG(n≤22)与长组CAG(n>22),两组基因重复次数相似,无统计学意义。 2.2短组与长组AR基因CAG重复在PCOS患者高雄激素组与雄激素水平正常组的分布中短组患者例数高于长组,差异有统计学意义。短组与长组AR基因CAG在PCOS患者胰岛素抵抗组和非胰岛素抵抗组的分布无差异。 3. SHBG基因(TAAAA)n重复次数与多囊卵巢综合征的相关性研究 3.1

关键词： 多囊卵巢综合症   胰岛素抵抗   性激素  

摘要： 目的: 研究多囊卵巢综合征(PCOS)性激素水平与胰岛素抵抗之间的相关性,早期干预治疗多囊卵巢综合征及胰岛素抵抗,并期望降低由其所引致的相关疾病的发生率。 方法: 按ESHRE/ASRM诊断标准,随机选择30例多囊卵巢综合征患者为研究组(A组),另设20例正常育龄妇女为对照组(B组),采用放射免疫法测定雌二醇(E2)、睾酮(T)、脱氢表雄酮(DHEA)的水平,以及空腹葡萄糖(FG)、空腹胰岛素(FIN)水平、计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。 结果: 1、PCOS组与正常对照组比较,T、FIN、Homa-IR水平均较对照组高,且有显著性差异(P0.05);E2水平较对照组低,无显著性差异(P>0.05)。 2、胰岛素抵抗组中DHEA值较非胰岛素抵抗组高,且差异有统计学意义(P<0.05);胰岛素抵抗组中T值较非胰岛素抵抗组高,但差异无统计学意义(P>0.05)。 3、PCOS组中T、FG、FIN、DHEA水平与Homa-IR呈正相关(r=0.511、0.421、0.964、O.376,P<0.05);E2水平与Homa-IR无明显相关性。 结论: PCOS患者体内存在一定程度的性激素紊乱,其中睾酮及脱氢表雄酮水平与胰岛素抵抗密切相关,通过性激素的检测可早期干预治疗多囊卵巢综合征及胰岛素抵抗,为降低其引致的相关妇科疾病的发生率提供思路。

关键词： 中西医结合   多囊卵巢综合症   排卵率   妊娠率  

摘要： 目的:探讨多囊卵巢综合症的中西医结合治疗方法。方法:选取2010年1月至2010年11月我院收治的94例多囊卵巢综合症患者,随机将其分为两组,即研究组和对照组。其中研究组应用中西医结合治疗联合指导同房;对照组应用常规西药联合指导同房治疗。研究两组排卵、妊娠率的差别。结果:中西医结合治疗排卵率、妊娠率明显高于单用西药的排卵率、妊娠率,且有统计学差异(P<0.05)。结论:中西医结合治疗多囊卵巢综合症可增加排卵率、妊娠率,优于单用西药治疗。

关键词： 单核苷酸多态性   瘦素   实时荧光定量PCR   多囊卵巢综合症  

摘要： 目的：目前多囊卵巢综合症的病因尚不清楚，研究发现多囊卵巢综合征及非胰岛素依赖性糖尿病（NIDDM）拥有相同基因易感性。第一个通过基因扫描及定位克隆出的NIDDM易感性基因是钙调节蛋白家族中的calpain-10。calpain-5基因是calpain-10的异构基因，已被证实能对多种细胞功能进行调节，包括细胞内信号传导，细胞增值，细胞分化以及细胞凋亡。　　瘦素(1eptin)是肥胖基因(Ob)编码的蛋白质，由成熟脂肪细胞分泌，主要调节食物摄入与平衡，可促进发育，启动青春期，调节生殖功能。多项研究表明瘦素与PCOS有一定关系。　　本文研究calpain-5基因单核苷酸多态性、瘦素mRNA表达与多囊卵巢综合征之间的相关性，以此来对多囊卵巢综合症的病因做进一步的探讨。　　方法：选取多囊卵巢综合征患者45名及对照组50名，并将两组分为正常体重组及超重和肥胖组，均于月经来潮第2-3天空腹抽取静脉血，提取DNA及RNA，RT-qPCR法检测 Calpain-5基因 rs948976,rs4945140,rs2233546以及rs2233549四个位点的单核苷酸多态性;运用RT-qPCR技术对瘦素mRNA表达水平进行分析。　　结果：四个位点PCOS组和对照组间基因型无显著差异（p>0.05）：rs948976:χ2=2.041,p=0.360>0.05;rs4945140:χ2=1.035,p=0.596>0.05;rs2233546:χ2=0.836，p=0.658>0.05;rs2233549:χ2=4.481,p=0.106>0.05;四个位点PCOS组和对照组间等位基因频率无显著差异（p>0.05）,rs948976:χ2=1.956,p=0.163>0.05;rs4945140:χ2=0.080,p=0.777>0.05;rs2233546:χ2=0.898,p=0.343>0.05;rs2233549:χ2=0.015,p=0.901>0.05;PCOS组瘦素mRNA表达明显高于对照组（p<0.05），差异有统计学意义。　　结论：calpain-5基因四个位点单核苷酸多态性可能与本地区多囊卵巢综合征易感性没有相关性，可能不是本地区多囊卵巢综合征的易感基因多态位点;多囊卵巢综合征患者瘦素表达增加，肥胖者及胰岛素抵抗者有较高表达;calpain-5基因四个位点单核苷酸多态性可能与瘦素之间没有相关性。

关键词： 癫痫   丙戊酸   生殖内分泌   多囊卵巢综合症  

摘要： 背景和目的 癫痫(Epilepsy, EP)是一种十分常见的中枢神经系统疾病,可发生于任何年龄段。全球大约有五千万癫痫患者,为了控制其发作,需要长期口服抗癫痫药物,尤其是难治性癫痫,甚至可能终身服药。随着癫痫诊疗技术的不断完善,越来越多的临床医生开始关注抗癫痫药物的不良反应,以及由此对患者生活质量造成的影响。丙戊酸(Valproate,VPA)是一种传统的广谱抗癫痫药物(Antiepileptic drugs,AEDs),无论对于全面性发作还是部分性发作均具有很好的疗效,已广泛应用于临床40余年,目前仍有二百万患者使用。丙戊酸价格低廉,无肝酶诱导作用,不会加速口服避孕药的代谢,因此在一些经济相对落后的农村及偏远地区成为青春期女性癫痫患者的首选药物。但长期的临床应用观察到,丙戊酸可影响女性癫痫患者的代谢和生殖内分泌功能,出现肥胖、脱发、多毛、痤疮、月经紊乱、多囊卵巢(Polycytic ovaries,PCO)、不孕等多囊卵巢综合症(Polycystic ovaryian syndrome,PCOS)的相关症状。因此针对丙戊酸与女性癫痫患者生殖内分泌之间的关系,国内外进行了大量的研究。Isojarvi、Morrell、Betts、Joffe等均发现服用丙戊酸后患者可以出现多囊卵巢综合症的相关症状,而Bilo、Bauer、Luef却持相反的观点。出现这种现象的原因可能是,既往研究多是回顾性的,容易出现回忆误差,并且所选病例绝大多数不是新诊断的,这样就不能排除之前服用药物及长期癫痫发作对内分泌所造成的影响。青春期和育龄期女性癫痫患者是一个特殊的群体,而国外研究对象多是丙戊酸对成年女性癫痫患者内分泌的影响,国内大部分是针对儿童的研究。本实验选择青春期和育龄期新诊断且未经药物治疗的女性癫痫患者,进行一项为期12个月的临床研究,以探讨丙戊酸和女性癫痫患者生殖内分泌之间的关系,为青春期和育龄期女性癫痫患者更好的选择抗癫痫药物提供理论依据,提高患者保留率。 方法 选择2009年7月至2010年3月在郑州大学第一附属医院癫痫中心确诊为癫痫,并准备单独服用丙戊酸镁缓释片治疗的青春期和育龄期女性癫痫患者30例(5例月经初潮前,25例月经初潮后),在征得患者及家属同意情况下,入组患者开始服用丙戊酸镁缓释片,起始剂量为0.5g/天,若无发作,原药量维持,若仍有发作,则渐增加剂量至1g/天维持。分别于服药前、服药3个月、6个月、12个月检测卵泡刺激素(Follicle-stimulating hormone, FSH)、黄体生成素(Luteinizing hormone,LH)、催乳素(Prolactin, PRL)、雌二醇(Estradiol, E2)、孕酮(Progesterone,P)、睾酮(Testosterone, T)水平,彩超检查卵巢变化情况；同时详细询问服药前、服药3个月、6个月、12个月时月经情况；服药3个月、6个月、12个月时检测丙戊酸镁血药浓度。 结果 1.服药前后激素变化情况服药3个月、6个月较服药前催乳素显著下降(p<0.05)。服药3个月、6个月、12个月较服药前雌二醇显著下降(p<0.05)。服药3个月较服药前孕酮显著下降(p<0.05)。服药3个月、6个月、12个月较服药前睾酮显著升高(p<0.05)。服药3个月、6个月、12个月较服药前黄体生成素、卵泡刺激激素没有显著差异(p>0.05)。 2.服药前后月经变化情况25例月经初潮后的患者服用丙戊酸镁治疗期间,6例月经异常,其中3例月经周期延长大于7天,2例延长大于15天,1例3个月未来月经。 3.服药前后卵巢情况3例彩超发现卵巢异常,为多囊卵巢,其中2例见于服药6个月,1例见于服药12个月。 4.服药后丙戊酸血药浓度与睾酮水平的相关性经Pearson相关性分析发现,服药12个月后睾酮水平升高和丙戊酸镁血药浓度无关性。 5.不同因素之间出现多囊卵巢综合症相关症状发生率的比较小于20岁的患者月经延后和高雄激素血症的发生率明显高于大于20岁的患者。结论 1.在服用丙戊酸的早期可以引起催乳素和孕酮的下降。 2.丙戊酸引起雌二醇水平持续降低,且于服药的前3个月较为明显。 3.丙戊酸引起睾酮水平持续升高,但睾酮水平升高与丙戊酸血药浓度无相关性。 4.不同年龄组患者服用丙戊酸后出现多囊卵巢综合症相关症状的发生率不同。

关键词： 多囊卵巢综合症   肿瘤坏死因子   胰岛素样生长因子   血清水平   胰岛素抵抗  

摘要： 目的:探讨血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、胰岛素样生长因子(IGF-1)及胰岛素敏感指数(ISI)与多囊卵巢综合症(PCOS)发病的关系。　　 方法:采集90例PCOS患者和41例正常人血清，应用电化学发光法检测胰岛素水平，葡萄糖氧化酶终点法检测空腹葡萄糖(FPG)水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TNF-α、IGF-1水平。　　 结果:(1)PCOS患者FPG、血清胰岛素水平明显高于正常对照组(t=16.72，2.24;P<0.01)，且均与患者是否肥胖高度相关(t=5.08，2.07;P<0.01)。　　 (2)PCOS患者胰岛素敏感性明显低于对照组，差别有显著性意义(t=3.12，P<0.05)。　　 (3)PCOS患者血清TNF-α及IGF-1的表达水平明显高于对照组，差别有显著性意义(t=2.85，4.51;P<0.01)，两种因子含量均与患者是否肥胖高度相关(t=2.16，3.30;P<0.05)。　　 (4)PCOS患者血清TNF-α及IGF-1的含量与胰岛素敏感指数均呈显著负相关，差别有显著性意义(r=-0.71，-0.57，P<0.05);PCOS肥胖组于非肥胖组间TNF-α及IGF-1与ISI的相关性无明显差异(u=0.52，0.79;P>0.05)。　　 (5)对照组血清TNF-α及IGF-1含量与胰岛素敏感指数均无明显相关性(r=0.21，0.14，P>0.05)。　　 (6)PCOS患者血清TNF-α与IGF-1的含量存在明显相关性(r=0.74，P<0.05);但是这种相关性与肥胖无明显的关系(u=0.66，P>0.05)。　　 (7)对照组血清TNF-α与IGF-1的含量无明显相关性(r=0.30，P>0.05)。　　 结论:多囊卵巢综合症患者存在不同程度的胰岛素抵抗(IR)，TNF-α和IGF-1水平增高与PCOS患者发生IR有关，可能参与PCOS患者IR发生发展过程，TNF-α和IGF-1可能与PCOS发生、发展有一定的内在联系并起协同作用。

关键词： microRNAs   多囊卵巢综合症   大鼠   动物模型   基因芯片  

摘要： 目的: 1.采用来曲唑灌胃方法构建雌性Wistar大鼠PCOS动物模型,并分析比较模型组与对照组的血清睾酮(T),雌二醇(E2)和黄体生成素(LH)水平变化,胰岛素抵抗相关的特征及卵巢的形态学改变。 2.利用基因芯片的技术筛选两组之间差异表达的microRNAs,探讨其参与PCOS发生和发展过程中的可能机制。 方法: 1、选取6周龄清洁级的雌性Wistar大鼠,随机分组为模型组和对照组,每组各20只。PCOS模型组:每日来曲唑1 mg/( kg·d)溶于1%的羧甲基纤维素(CMC)中,连续灌服21 d;对照组:不予处理,正常喂养。从用药的第10天开始每日进行阴道涂片至用药期结束,在最后一次应用来曲唑24h(并禁食12h)后,同时在处理对照组大鼠时,尽量控制其在动情间期。水合氯醛麻醉后切取卵巢,心脏取血,分离血清。全自动化学发光检测仪测定血清T,E2和LH;放射免疫学方法测定空腹血清胰岛素(FINS),血糖仪测定空腹血糖(FBG),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA1-IR);称重卵巢并测定大鼠体重;卵巢组织切片,HE染色,并观察其病理变化。 2.从造模成功的PCOS模型组及正常对照组中各随机选取3只大鼠,10%的水合氯醛腹腔麻醉后,心脏取血后迅速取出双侧卵巢,称重后将其中的一个卵巢液氮冷冻固定保存,送往北京博奥生物有限公司应用最新版本15.0的LC-science microRNAs表达谱微阵列芯片进行筛选microRNAs。 结果: 1.阴道涂片结果显示模型组无明显的动情周期的改变,大多处于动情间期,而对照组则有明显的动情周期的变化。模型组卵巢切片HE染色显示:卵巢有较多的囊状扩张卵泡,而黄体及发育阶段卵泡数目明显减少,卵泡内卵母细胞和放射冠消失,颗粒细胞层数减少或消失,卵泡膜细胞及间质细胞增生。对照组可见多个黄体及不同发育阶段的卵泡,卵泡内颗粒细胞呈多层,多为8-9层。 2.与对照组比较,PCOS模型组血清T显著高于对照组(P<0.01),而血清FBG,FINS和HOMA1-IR无统计学差异(均为P>0.05),两组大鼠体重变化无统计学差异(P>0.05),去除体重影响后PCOS模型组大鼠卵巢重量显著大于对照组(P<0.05)。 3.基因芯片结果表明,对照组与模型组两组的卵巢之间大量有差异表达的microRNAs。与对照组比较,在模型组表达明显增多有57个microRNAs(P<0.01)其中有23个信号值较高差异较明显,34个是信号值低于500但是也有差异的;表达明显减少的有43个microRNAs(P<0.01),其中20个信号值较高差异显著,23个是信号值低于500差异也显著的,包括差异较大、且有证实意义的、与细胞增殖凋亡相关的mir-16, mir-21, mir-24, mir-31, mir-98, mir-125b, mir-143, mir-145, mir-150等。 结论:1.来曲唑诱导雌性Wistar大鼠PCOS动物模型的卵巢病理改变及血内分泌改变与PCOS病人相似。阴道图片也显示出模型组无明显的排卵周期的变化,这些改变类似于PCOS患者的病理生理变化,但是此种模型无胰岛素抵抗相关的改变征象。可以作为研究非胰岛素抵抗型PCOS的动物模型。 2.模型组与正常组之间存在大量表达差异的microRNAs,说明microRNAs可能在PCOS疾病的发生发展中有着重要的作用,可以为研究PCOS疾病的病理机制提供新的方向和线索,及进一步验证相关microRNAs有重要的参考价值。 目的:结合文献报道与基因芯片筛选结果,选择mir-21和mir-320进行验证,观察它们在PCOS模型组与正常组之间的表达差异,并探讨其在PCOS疾病的发生发展中的可能机制。 方法:采用实时荧光定量PCR检测两组大鼠卵巢中mir-21和mir-320的表达水平,选择snRNA U6为内参照miRNA,每份标本均设2个平行复孔和1个阴性对照。 结果:荧光定量PCR结果分析显示模型组的mir-21的表达量相对对照组的表达量约是0.48,而mir-320在两组之间的含量相当,无明显的差别。 结论:从real-timePCR验证的结果我们得知,mir-21和mir-320在两组中的含量变化与基因芯片结果相符合。因此可以推测PCOS患者中卵泡的发育成熟障碍可能与mir-21的含量减少有关。Mir-320是与胰岛素抵抗发病有关的一种microRNA,而在我们的结果中证明了其在两组中的含量是相当的,所以进一步证明了来曲唑诱导的PCOS动物模型是没有胰岛素抵抗特点的,这点是与雄激素造模法的不同之处。

关键词： 克罗米芬   人绒毛膜促性腺激素   多囊卵巢综合症  

摘要： 目的观察克罗米芬结合人绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗多囊卵巢综合症的疗效。方法将56例多囊卵巢综合症肥胖患者随机分为两组,分别用克罗米芬和克多米芬加人绒毛膜促性腺激素促排卵治疗。结果治疗组28例治疗后血清胰岛素水平明显降低(P<0.01),血睾酮、胰岛素抵抗指数有显著降低(P<0.05),而对照组治疗前后无明显变化。两组都无明显不良反应。结论克罗米芬结合人绒毛膜促性腺激素(HCG)治疗多囊卵巢综合症能明显改善多囊卵巢综合症的临床症状,提高妊娠率,改善肥胖,值得临床推广。

关键词： 多囊卵巢综合症   针灸   中药   穴位注射   针挑疗法  

摘要： 本文主要总结了临床上常用的针刺法、针药结合法、穴位埋线法、穴位注射法、针挑法、针灸耳压法等不同方法治疗多囊卵巢综合征的临床疗效情况,为临床上治疗多囊卵巢综合症寻找有效地针灸治疗方法提供依据.

关键词： 多囊卵巢综合症   胰岛素抵抗   二甲双胍   罗格列酮  

摘要： 目的利用随机对照试验(RCT)评估PCOS患者行为治疗(锻炼及饮食控制)、二甲双肌与胰岛素增敏剂(罗格列酮)治疗的疗效,并进行疗效比较。总结3种胰岛素增敏治疗在临床的应用效果。方法将PCOS患者随机分为行为治疗、二甲双肌与罗格列酮3组,总结各组的治疗前后患者的人体学、生化、内分泌激素水平、治疗效果等观察指标并进行比较。结果 3组在治疗后的人体学、生化、激素指标无统计学差异,3组的疗效无明显差异。对3组排卵、月经情况比较,发现罗格列酮组优于行为治疗组。结论 PCOS是涉及多系统的疾病,要重视PCOS患者代谢综合征的筛查与诊治。二甲双胍,罗格列酮等胰岛素增敏治疗只造用于部分合并IR的PCOS患者,不能滥用。对PCOS患者实行个体化治疗,胰岛素增敏联合其它药物的应用。