关键词： 二甲双胍片   达英-35   多囊卵巢综合症   血清性激素水平  

摘要： 目的探讨在多囊卵巢综合症治疗中二甲双胍片与达英-35的联合应用价值。方法选择2017年12月~2020年3月本院收治的多囊卵巢综合症患者84例,并依照奇偶数字抽签法将其分为对照组仅给予达英-35治疗,研究组在对照组的基础上联合二甲双胍片治疗,每组各42例。治疗3个月后,观察两组临床疗效以及治疗前后的身体质量指数与血清性激素水平变化情况。结果研究组临床治疗总有效率95.24%(40/42),对照组78.57%(33/42),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后的身体质量指数与血清性激素水平研究组均优于对照组,且组间相关数据存在统计学差异(P<0.05)。结论达英-35联合二甲双胍片对多囊卵巢综合症患者进行治疗,不仅能够快速降低其身体质量指数,并且还可进一步调节其血清性激素水平,提高临床疗效,值得临床借鉴和推广。

关键词： 脾肾相关   低体重   多囊卵巢综合症   人体成分   临床观察  

摘要： 目的本课题旨在观察基于“脾肾相关”理论的治疗方案干预下低体重型PCOS的临床疗效及人体成分变化,探讨该方案的疗效,以期为低体重型PCOS患者提供有效的治疗方案。方法本研究共纳入有效资料67例,为治疗组34例,予中药联合生活方式改变干预,对照组33例,予达英-35联合生活方式改变干预。两组治疗前后分别进行中医症状评分、检测LH、FSH、E2、T等性激素及BMI、骨骼肌标准占比、体脂率、WHR、基础代谢率等人体成分指标。比较两组治疗前后的综合疗效、中医证候积分、性激素及人体成分指标。结果1.两组年龄、身高,治疗前中医证候积分、LH、FSH、LH/FSH、T、E2、BMI、WHR、体脂率、骨骼肌标准占比、基础代谢率比较,差异无统计学意义（P>0.05）,具有可比性。2.综合疗效:两组治疗后均有明显疗效,且治疗组综合疗效显著优于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）。3.中医证候积分:两组治疗后均明显降低,且治疗组较对照组降低更明显,差异具有统计学意义（P<0.05）。表示两组患者治疗后中医证候均明显改善,且治疗组改善更加显著。4.人体成分指标:两组骨骼肌标准占比、基础代谢率治疗后明显升高,且治疗组升高较对照组更显著,以上差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗组BMI治疗后明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）,对照组治疗后无明显变化（P>0.05）。治疗组体脂率治疗后明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）,对照组治疗后无明显变化（P>0.05）。两组中高体脂患者体脂率治疗后明显降低,差异具有统计学意义（P<0.05）。两组WHR治疗后无明显变化（P>0.05）。表示两组均可明显提高患者骨骼肌质量及基础代谢率,且治疗组较对照组治疗效果更佳。治疗组可提高患者BMI,降低患者体脂率。经两组治疗后可降低高体脂患者的体脂率。5.性激素水平:两组LH、LH/FSH、T治疗后明显下降,差异具有统计学意义（P<0.05）。FSH、E2治疗后无明显变化（P>0.05）。两组间LH、LH/FSH、T治疗后差异无统计学意义（P>0.05）。这表示两组均能降低LH、LH/FSH、T,且两组疗效相当。6.人体成分变化与疗效及性激素之间的相关性分析:治疗后BMI较治疗前增加越多则总体疗效越好、中医证候积分下降越多（P<0.05）。BMI治疗前后差值与其余指标无相关性（P>0.05）,骨骼肌标准占比治疗前后差值与疗效及性激素之间无相关性（P>0.05）。结论1.在脾肾相关理论指导下使用中药治疗低体重型PCOS患者有明显疗效,治疗组治疗效果优于对照组。2.在脾肾相关理论指导下使用中药治疗低体重型PCOS可调节患者LH、LH/FSH、T等性激素,BMI、骨骼肌标准占比、体脂率、基础代谢率等人体成分指标。3.健脾益肾法治疗低体重型PCOS患者有增加骨骼肌含量的效果。4.治疗后BMI较治疗前增加越多则总体疗效越好、中医证候积分下降越多。

关键词： 小鼠   多囊卵巢综合症   颗粒细胞   睾酮   雌激素受体  

摘要： 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是青春期及育龄女性最常见的一种生殖内分泌紊乱性疾病,常伴有雄激素水平异常升高、卵巢多囊性改变、稀发排卵或不排卵等症状,严重威胁女性生殖健康。迄今为止其发病原因不明确,研究证据显示,血清雄激素水平异常升高与雌激素受体α和β(estrogen receptor alpha/beta,ERα/β)表达异常是评定PCOS病症的两项标志性指标,但两者间的相关性尚少见文献报道。本研究利用改良脱氢表雄酮(dehydroepiandrosterone,DHEA)法诱导PCOS小鼠模型。将DHEA的溶解方式改良,即在油性溶剂里添加95%的乙醇以提高DHEA的溶解率,随后对3周龄昆明白雌性小鼠持续20d皮下注射DHEA诱导PCOS小鼠模型,前期本课题组通过多种技术检测结果显示该模型构建成功,但缺乏分子层面的鉴定。本研究采用“阴道脱落细胞涂片法”检测模型小鼠性周期的变化;采用免疫印迹技术检测正常与PCOS小鼠颗粒细胞中ERα与ERβ蛋白表达差异;采用酶联免疫吸附技术检测PCOS小鼠模型构建过程中睾酮浓度的变化趋势;最后在健康小鼠颗粒细胞培养体系中添加生理与病理两种睾酮浓度,检测其对培养细胞ERα与ERβ表达的影响。结果显示:改良DHEA诱导法建立的模型小鼠显示典型PCOS性周期发育特征;建模过程中睾酮浓度持续显著升高,建模20d睾酮浓度高于正常生理水平的90倍以上,与PCOS典型症状相同;以正常小鼠卵巢颗粒细胞为对照,模型小鼠颗粒细胞ERα表达与ERα/ERβ比值均显著升高(P<0.05);小鼠卵巢颗粒细胞体外培养体系中添加高浓度睾酮后,ERα表达与ERα/ERβ比值均显著升高(P<0.05)。综上,本研究利用改良的DHEA诱导法成功构建了具有典型ERα与ERβ蛋白表达特征的PCOS小鼠模型,且建模完成后PCOS小鼠血清睾酮浓度能够将体外培养健康小鼠颗粒细胞成功诱导为PCOS样细胞。

关键词： 多囊卵巢综合征   代际传递   子代代谢异常  

摘要： 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)是育龄期妇女最常见的生殖代谢性疾病之一。依据诊断标准和纳入人群的不同, 全球范围内患病率在6.1%～18.7%之间不等。近几十年来随着中国经济的迅猛发展, 人们生活水平不断提高, 生活习惯和饮食结构都发生了明显改变, 在这些因素的影响下, PCOS患病率不断攀升。以排卵障碍和卵巢多囊性改变叠加胰岛素抵抗、糖脂代谢紊乱和肥胖等多种方式, PCOS严重损害着我国育龄期女性生育力。同时, PCOS存在明显的家族聚集现象, 具有很强的遗传特性, 双生子研究结果显示其遗传度最高可达71%, 本文从代际传递和子代表型两个方面对多囊卵巢综合征近年来进展进行梳理分析, 以期有助于代际传递的阻断探索和PCOS患者子代的早防、早诊和早治。

关键词： 多囊卵巢综合症   不孕症   补肾活血化痰方   妊娠率  

摘要： 目的 探讨多囊卵巢综合症（PCOS）所致不孕症的具体治疗策略及应用效果。方法 选取80例PCOS所致不孕症患者，依照随机数字表法分为对照组和研究组，各40例。对照组采用常规西医治疗，研究组在对照组基础上联合补肾活血化痰中药方剂治疗。对比两组各项指标。结果 研究组治疗后的临床总有效率及治疗后3个月的妊娠率均高于对照组；与治疗前比较，治疗后两组血清睾酮、卵泡雌激素、黄体生成素水平均降低，且研究组低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 补肾活血化痰方剂应用于PCOS所致不孕症患者可有效调节机体激素水平，提高临床妊娠率，治疗效果显著。

关键词： 多囊卵巢综合症   外泌体   miRNA-143-3p   miRNA-155-5p   糖酵解  

摘要： 卵泡颗粒细胞（granulosa cells,GCs）的糖酵解能量供应不足是多囊卵巢综合症（Polycystic ovary syndrome,PCOS）患者卵泡发育障碍的重要原因,卵泡液（follicular fluid,FF）外泌体miRNAs被证明广泛调控GCs的功能。为探讨FF外泌体miRNAs是否参与调节GCs糖酵解,本研究通过临床患者FF外泌体转录组测序（RNA-seq）和体外细胞模拟实验,筛选发现了人FF外泌体miRNA-143-3p和miRNA-155-5p拮抗调节PCOS患者卵泡颗粒细胞糖酵解。具体结果如下:***外泌体的搜集与鉴定:本研究以鹿特丹共识（2003）为标准招募了PCOS因素不孕患者（PCOS组,n=6）和非PCOS因素不孕患者（Control组,n=6）。通过测定两组患者的基线激素水平,结果显示促黄体生成素（LH）、抗缪勒管激素（AMH）、睾酮（T）和窦卵泡数为PCOS组显著上调的临床特征。通过短效长方案促排卵并穿刺取双侧卵泡液,超速离心法收集外泌体,透射电镜（TEM）和纳米追踪（NTA）鉴定外泌体,结果显示所有采集的样品中均存在直径为100-150nm的杯口状囊泡外泌体。***外泌体RNA-seq差异分析:通过RNA-seq数据分析,本研究在PCOS组中筛选出83个差异miRNAs（44个上调,39个下调）和337个差异m RNAs（120上调,117下调）。随机RNAs实时荧光定量PCR（RT-q PCR）结果表现出与RNA-seq高度相关的一致性差异趋势。通过对差异RNAs进行KEGG通路富集分析结果显示,在PCOS组FF外泌体中,糖酵解相关通路下调和细胞凋亡相关通路上调呈现出显著差异。3.调控GCs糖酵解的miRNA-m RNA靶向关系筛选:应用miRBD、Target Scan和RNAhybrid筛选发现RNA-seq中差异表达的miRNA-143-3p和miRNA-155-5p与糖酵解关键基因（HK2、PKM2和LDHA）存在潜在靶点。经过双荧光素酶报告基因实验验证,结果显示HK2是miRNA-143-3p和miRNA-155-5p调控糖酵解通路的关键基因。***环境对人卵巢颗粒肿瘤细胞系（KGN cells）糖酵解和细胞凋亡的影响:分别采用高葡萄糖培养基和含睾酮的高葡萄糖培养基模拟Control组和PCOS组患者体内环境,以此培养KGN cells。本研究发现相对于Control组,PCOS组中miRNA-143-3p表达量显著上调,miRNA-155-5p表达量下调但不显著,KGN cells糖酵解强度显著降低,细胞凋亡率显著上升。***-143-3p和miRNA-155-5p差异表达体系对不同环境中KGN cells糖酵解和细胞凋亡的影响:通过构建Control和PCOS环境中miRNA-143-3p和miRNA-155-5p差异表达体系,本研究发现miR-143-3p抑制KGN cells的糖酵解并促进凋亡,敲低miR-143-3p可以显著缓解PCOS组KGN cells的糖酵解下调和加速凋亡现象;miR-155-5p促进KGN cells的糖酵解并促进增殖,过表达miR-155-5p可以显著促进PCOS组KGN cells的糖酵解和增殖。综上所述,PCOS患者FF外泌体miRNA显著抑制GCs糖酵解并加速细胞凋亡。FF外泌体miRNA-143-3p和miRNA-155-5p通过HK2拮抗调节PCOS患者GCs的糖酵解。

关键词： 小鼠   多囊卵巢综合征   颗粒细胞   脱氢表雄酮   雌二醇  

摘要： 多囊卵巢综合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种严重影响女性生殖健康的综合征,主要表现为高雄激素、卵巢囊泡化、排卵障碍、胰岛素抵抗等症状。目前PCOS的发病机制并不清晰。鉴于道德、试验成本等因素,使用脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)诱导形成的PCOS样小鼠,成为了研究这一问题的重要动物模型。据此,本研究使用DHEA(6 mg/100 g)对三周龄昆明白小鼠进行20天的皮下注射,诱导PCOS的产生;利用HE染色的方式确定卵巢发育状况;并通过结晶紫染色查看小鼠性周期是否发生停滞;利用ELISA技术调查建模过程中雌二醇(estradiol,E)血清浓度的变化规律;最后,分别以建模第10天对照与DHEA组小鼠血清E水平为低(生理浓度)与高(病理浓度)体外添加浓度,利用Western blot蛋白表达技术,探讨其对体外培养颗粒细胞中雌激素受体α和β(Estrogen receptor alpha/beta,ERα/β)表达的影响。结果显示,自昆明白小鼠3周龄起,连续皮下注射DHEA可使得小鼠的卵泡发生囊泡化,性周期发生一定程度的停滞,且伴随着肥胖和高雄激素血症的病理特征。提示DHEA能够成功诱导昆明白小鼠具有PCOS模型特征。在建模过程中,发现PCOS发生伴随有血清E水平先升后降的阶段性变化。为了深入探讨建模过程中E瞬时升高可能的病理意义,本研究首先利用3周龄小鼠颗粒细胞建立体外培养体系。使用机械法释放的卵巢细胞为促卵泡激素受体阳性的颗粒细胞,且F1代细胞呈现典型“S”型生长曲线,表明体外培养颗粒细胞生长良好,可用于后续实验。随后使用上述两种不同浓度E对F1代颗粒细胞进行体外诱导。低浓度E(7 ng/m L)和高浓度E(21 ng/m L)均能促进颗粒细胞的增殖;低浓度和高浓度E对于ERα和ERβ的表达水平无显著影响,但高浓度E显著促进了ERα与ERβ间比值的上升。这种比例的失衡也同样体现在PCOS小鼠体内的颗粒细胞中,提示高浓度E诱导下的ERα与ERβ间的比例上升可能是导致PCOS发生的一个关键环节。综上,本研究利用昆明白小鼠建立了DHEA诱导PCOS模型;该模型的构建过程中血清E水平呈现先上升后下降的阶段性变化;体外添加对应病理浓度E可以提升颗粒细胞中ERα与ERβ间的比例,这与PCOS小鼠体内颗粒细胞相似,即高E可能通过提升ERα/ERβ比率,参与PCOS样颗粒细胞诱导与疾病发生。

关键词： 多囊卵巢综合症   肥胖   健脾化痰法   脾虚痰湿型  

摘要： 目的:本课题通过选取60例中医证型为脾虚痰湿证的肥胖型PCOS患者,研究健脾化痰法联合生活方式干预治疗肥胖型PCOS的临床总疗效、BMI、腰围、性激素水平、AMH及中医症候积分的改善情况,探讨中医药治疗本病的优势,以期寻找一种安全简便的治疗方法,减少副作用的发生,同时为临床治疗本病提供新的研究思路,值得临床上推广应用。方法:选取60例符合中医、西医及肥胖诊断标准的PCOS患者,随机分为对照组1、对照组2和研究组,每组各20例。研究组服用健脾化痰方,每日一剂,连服21天,根据月经的不同时期加减用药,连续治疗三个月,同时配合运动+饮食干预;对照组1单纯服用健脾化痰方,服药方法同研究组;对照组2仅运动+饮食干预。通过观察三组患者治疗前后中医症候积分、AMH、FSH、LH、LH/FSH、T值的变化以及治疗后三组患者的临床总疗效、BMI、腰围疗效,进而评价健脾化痰法联合生活方式治疗肥胖型多囊卵巢综合症的临床效果。结果:中医症候积分:三组患者经过不同模式治疗3个月后,中医症候积分分别为6.90±3.40、9.15±3.57、11.45±3.00,与治疗前相比,经t检验,P均<0.01,有显著差异,说明三组治疗都能较少积分值,三组患者治疗后相比,研究组效果最明显,其次为对照组1,最后为对照组2。临床总疗效:经过3个月治疗后,研究组(健脾化痰方+生活方式干预)总有效率80%;对照组1(健脾化痰方)总有效率55%;对照组2(运动+饮食)总有效率40%。经卡方检验,卡方值=6.720,P值0.035<0.05,差异有统计学意义,提示三组治疗均有疗效,且研究组效果最佳,其次为对照组1。AMH的比较:经统计学分析,三组患者治疗前后AMH比较,P<0.01,有显著差异,提示三组治疗均能降低AMH值,三组治疗后相比较,P<0.05,其改善程度从高到低依次为研究组、对照组1、对照组2。性激素水平的比较:研究组(健脾化痰方+生活方式干预)、对照组1(健脾化痰方)和对照组2(运动+饮食)治疗前后FSH差异不大,经t检验,P>0.05,说明三组治疗对FSH值影响不大;三组治疗前后LH、LH/FSH、T值相比较,P<0.05,说明三组治疗均可改善LH、LH/FSH、T值;三组治疗后LH、LH/FSH、T值对比,P<0.05,说明研究组疗效最好,对照组1次之,对照组2再次。BMI的疗效分析:等级资料采用秩和检验,卡方值为12.327,P<0.01,有显著差异,在降低体指数方面,研究组最优越,对照组2最差,对照组1居中。腰围的疗效分析:经秩和检验,卡方值8.310,P值0.016(小于0.05),研究组减腰围效果比对照组1和对照组2更好,而对照组1比对照组2好。结论:三组治疗均可有效改善肥胖型PCOS患者的中医症候积分、AMH、LH、LH/FSH、T值、降低体重指数及腰围,但研究组效果最佳,其次为对照组1。研究表明,健脾化痰法联合生活方式干预在改善肥胖型PCOS患者的临床症状具有较明显的优势,且中药安全、副作用小,能被广大患者接受,值得临床推广。

关键词： 多囊卵巢综合症   不孕症   克罗米芬   来曲唑   联合用药   临床效果  

摘要： 研究联合使用克罗米芬和来曲唑治疗多囊卵巢综合症,对患者排卵及妊娠情况的影响。方法:选取本院2020年2月-2021年2月期间收治的55例多囊卵巢综合症患者作为研究对象,随机选出其中27例纳入对照组,并予以单药治疗方案(克罗米芬),其余28例患者接受联合用药方案治疗(克罗米芬+来曲唑),并视为观察组;评析两种治疗方案的临床价值。结果:①观察组宫腔容积(5.41±0.85)ml、子宫内膜厚度(9.78±1.34)mm、成熟卵泡直径(23.85±2.67)mm,均明显优于对照组,P1<0.0001,P2<0.0001,P3<0.0001,有统计学意义;②两组患者的T、LH水平较为接近,P4=0.5930,P5=0.8615,无统计学意义;两组患者E2水平差异显著,P6<0.0001,有统计学意义;③观察组排卵率(78.57%)、妊娠率(53.57%)均明显高于对照组,P5=0.0372,P5=0.0364,有统计学意义。结论:相比单药治疗方案,联合用药方案治疗多囊卵巢综合症的临床效果更为理想,可以显著改善子宫情况及激素水平,提高排卵率及妊娠成功率,从而更好的满足患者需求。