关键词:
盐酸小檗碱
蛋鸡
脂肪肝出血综合征
肝
脂质代谢
摘要:
本试验旨在探讨盐酸小檗碱(BBR)对蛋鸡脂肪肝出血综合征(FLHS)的防治作用及其量效关系。选取180羽19周龄罗曼灰蛋鸡,随机分为6组,每组30羽:Control组(饲喂玉米-豆粕型基础日粮),HELP组(饲喂高能低蛋白日粮,代谢能3104.80 kcal/kg,蛋白12.11%),HELP+LBBR组(饲喂高能低蛋白日粮+BBR50mg/kg),HELP+MBBR组(饲喂高能低蛋白日粮+BBR 100mg/kg),HELP+HBBR组(饲喂高能低蛋白日粮+BBR 200mg/kg),HELP+Met组(饲喂高能低蛋白日粮+二甲双胍500mg/kg)。试验期为140d。于试验第20d、40d、60d及140d,每组随机选取6羽蛋鸡,采集血液,并检测血浆中TG、TC、LDL-Ch、HDL-Ch含量及AST、ALT和CHE的活力。于试验第140d剖检全部蛋鸡,称体重、肝湿重及腹部脂肪重量,并计算肝指数及腹脂率;并采集肝脏,制作病理组织切片,利用索氏提取法测定肝脂率,并通过实时荧光定量PCR法检测肝脂代谢通路相关基因(LXRα、SREBP-1c、FAS、ACC、SCD1、PPARα、CPT1、AMPKα1)m RNA表达量以及通过蛋白免疫印迹法检测肝蛋白SREBF1及FASN的表达量。试验结果如下:1在试验第140d,与Control组相比,HELP组血浆TG、TC、LDL-Ch含量及AST、ALT、CHE活力均显著上升(P<0.05);肝指数、腹脂率及肝脂率呈极显著上升(P<0.01)。此外,剖检HELP组蛋鸡,可见肝脏呈油黄色,表面常伴有出血点;病理组织学观察发现,肝细胞有大量大小不等脂肪滴,细胞核常被挤于边缘,呈明显肝脏脂质沉积增多。以上结果呈现典型FLHS病理表现,预示模型成功。2与HELP组同期相比,所有防治组血浆TG、TC、LDL-Ch含量及AST、ALT、CHE活力均下降,且于试验第140d差异显著(P<0.05)。在试验第140d,与HELP组相比,所有防治组肝指数、腹脂率及肝脂率极显著下降(P<0.01)。此外,在试验第140d,与HELP+LBBR组相比,HELP+MBBR组、HELP+HBBR组及HELP+Met组血浆TC、TG、LDL-Ch含量及ALT的活力均显著下降(P<0.05);但各防治组之间血浆AST、CHE活力及肝指数、腹脂率和肝脂率差异不显著(P>0.05)。3肝脂合成通路相关基因m RNA表达:与Control组比,HELP组肝脏LXRα、SREBP-1c、FAS、ACC及SCD1 m RNA表达量均显著上升(P<0.05)。与HELP组相比,所有防治组上述基因m RNA表达量均呈下降趋势,尤其是,在小檗碱处理组中,SREBP-1c和SCD1 m RNA表达量极显著降低(P<0.01)。4肝脂氧化分解通路相关基因m RNA表达:与Control组比,HELP组蛋鸡肝脏PPARα及CPT1 m RNA表达量均呈下降趋势,且AMPKα1 m RNA表达量极显著降低(P<0.01)。所有防治组肝脏PPARα、CPT1、AMPKα1 m RNA表达量均显著高于HELP组(P<0.05);在防治组中,HELP+MBBR组上述基因m RNA表达量最高,且其AMPKα1 m RNA表达量极显著高于其它试验组(P<0.01)。5肝蛋白SREBF1及FASN的表达:与所有试验组相比,HELP组蛋白表达量极显著上升(P<0.01);HELP+MBBR组与其它防治组,蛋白表达量无显著性差异(P>0.05)。综上:不同剂量BBR能够缓解高能低蛋白日粮导致的血脂紊乱,减轻肝损伤,并通过调控肝脂合成与氧化分解代谢信号通路来降低肝脂沉积,从而有效防治高能低蛋白日粮诱导的蛋鸡FLHS。