关键词： 增生性瘢痕   成纤维细胞   转化生长因子   胶原   病理  

摘要： 目的 :探讨重组人转化生长因子 β3 (rhTGFβ3 )在伤口愈合及瘢痕形成中的作用机制。方法 :取体外培养的人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 (normalskinfibroblast,NSFb ;hypertrophicscarfibroblast ,HSFb) ,应用不同浓度rhTGFβ3 ,通过放射免疫和Northernbloting杂交方法观察NSFb和HSFbⅠ、Ⅲ型胶原蛋白及转录水平mRNA表达的变化。结果 :(1)人正常皮肤和瘢痕组织成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原有明显的不同表达 ;(2 )与对照组相比 ,实验组 (分别加rhTGFβ3 ,终浓度为 1、5、10ng·L-1)Ⅰ、Ⅲ前胶原合成明显增加 (P <0 .0 0 1) ,Ⅰ /Ⅲ前胶原的比例变小 ;(3 )实验组rhTGFβ3 对NSFb和HSFb生物学作用的影响呈明显的量效关系。结论 :rhTGFβ3 可有效提高成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原的合成和Ⅰ、Ⅲ型构成比中Ⅲ型胶原的相对含量 。

关键词： 转化生长因子-β1,β3   肿瘤坏死因子-α   妊娠高血压综合征   胎盘   滋养细胞   浸润  

摘要： 妊娠高血压综合征(简称妊高征)是孕产期危害孕产妇健康和造成胎婴儿死亡的重要疾病之一。由于其病因和发病机制至今尚未阐明，缺乏有效的预防和治疗措施，至今仍然是围产医学的重要研究课题之一。妊高征是妊娠期特有的症候群，随着妊娠终止，胎盘排出而迅速缓解。多数学者认为妊高征患者胎盘滋养细胞浸润功能受损，对螺旋动脉和子宫肌层浸润不良，导致胎盘种植浅植入，是妊高征病理生理的中心环节，但其具体机制不明。 最近研究发现转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β，TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α)是滋养细胞浸润与分化的主要调控因子，胎盘组织中TGF-β和TNF-α表达异常很可能参于妊高征的发生发展。本研究一方面应用免疫组织化学方法，检测正常妊娠孕妇和妊高征患者分娩后胎盘滋养细 郑州大学（2002）研究生论文 转化生长因子－pl、P。和肿瘤坏死因子．Q与妊高征关系的研究 胞及蜕膜细胞中转化生长因子－p。叮GF－p。）和转化生长因子－p； （TG－p；）的表达。另一方面，取正常妊娠孕妇和重度妊高征患者 剖宫产后分娩胎盘绒毛体外培养24小时，然后分别收集培养后1＊、 12、24小时上清液，用ELISA检狈月盘滋养细胞TGF－p；和TNF－口的 分泌。探讨TGF－p；，TGF－p。和TNF－a在妊高征病因和发病机制中的 作用及相互关系，为阐明妊高征病因和发病机制提供有价值的资料， 为临床制定防治措施提供新的途径和理论依据． 材料和方法：兔疫组化SP法研究对象分H组：①妊高征组：50 例，平均年龄26．68土3．55岁，全部病例均按《妇产科学》（第五版） 诊断标准确诊并分类，其中轻度12例，中度18例，重度20例，均 无产科其它并发症及内科合并症；②正常孕妇组：30例，平均年龄 27．37土2．89岁，均为正常健康孕妇。在正常孕妇和妊高征患者胎盘 娩出后立即收集胎盘组织，采用灵敏度高、特异性强的免疫组化SP 法测定胎盘组织兀F－i。才 TGF－p；的表达。 体外培养胎盘绒毛研究对象分二组：①重度妊高征组：6例，平 均年龄26．68士3．55岁，全部病例均按《妇产科学》（第五版）诊断 标准确诊，均无产科其它并发症及内科合并症。②正常孕妇组：6例， 平均年龄27．37士2．89岁，均为正常健康孕妇。取正常妊娠孕妇和重 度妊高征患者剖宫产后分娩胎盘绒毛体外培养24小时，然后分别收“ 集培养后1、4、12、24小时上清液，用ELISA法测定培养胎盘绒毛＿ 上清液中的TGF－p；和TNF－口的含量。 结果：①各组间年龄、分娩孕周、分娩时催产素使用率和剖宫产 率相比差异无显著性u川．05人妊高征组新生儿出生体重明显低于 2 郑州大学（2002）研究生论文 转化生长回子．if、D。和肿瘤坏死回子－Q与妊高征关系的研究 正常孕妇组oN．05人 妊高征组收缩压和舒张压均明显高于正常孕 妇组吓狈．05）；②妊高征组绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞TGF－p。阳 性表达率和表达程度明显高于正常孕妇组，轻、中、重度妊高征组均 0 增高明显，差异有显著性汀的．05人③妊高征组绒毛滋养层细胞和 蜕膜细胞TGF－p；阳性表达率和表达程度均明显低于正常孕妇组，轻、 中、重度妊高征组均降低明显，差异有显著性om．05人④妊高征 组轻、中、重度妊高征组绒毛滋养层细胞TGF－p。与TGF－p；的表达 率及表达程度有明显的负相关关系 ＊值分别为个．85、o．89、

关键词： 转化生长因子β3   先天性唇腭裂   裂隙缘   表达   免疫组织化学   肌肉组织  

摘要： 探讨突变 TGF-β3与人类唇腭裂发生的关系。对 33例唇腭裂患者裂隙缘组织和 12例正常人的口腔唇腭部粘膜及肌肉组织采用 SP法进行免疫组织化学染色。结果发现畸型组阳性 2 5例 ,阴性 8例 ;对照组阳性 3例 ,阴性 9例。经校正的检验 ,显示在唇腭裂患者裂隙缘组织内呈高表达 ,有极显著意义 (P<0 .0 1) 。

关键词： 丹参   NIH/3T3成纤维细胞   转化生长因子β1   Ⅰ型胶原   c-fos   中药   药理  

摘要： 目的:观察丹参对TGFβ_1刺激的NIH/3T3成纤维细胞功能的影响。方法:将丹参灌胃给正常大鼠,分离含药血清,温育TGFβ_1刺激的成纤维细胞。RT-PCR法检测Ⅰ型胶原和c-fos的基因表达。结果:经TGFβ_1刺激后,细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达明显增加,丹参含药血清可分别抑制由TGFβ_1引起的细胞Ⅰ型胶原和c-fos的mRNA表达的增加,结论:丹参可能通过抑制c-fos的基因表达进而抑制Ⅰ型胶原的基因表达。

关键词： 厚性疤痕   成纤维细胞   羧肽酶   cDNA基因芯片   转化生长因子β3   LATEXIN  

摘要： 用基因芯片分析肥厚性疤痕与正常皮肤成纤维细胞在静息及TGF-β刺激下的表达谱的改变.正常成纤维细胞在TGF-β3刺激前后的一达谱与肥厚性疤痕成纤维细胞在TGF-β3刺激前的表达变正相关(r=0.76037),刺激后2种成纤维细胞的表达差异与肥厚性疤痕成纤维细胞TGF-β3刺激前后的表达谱差异正相关(R=0.826762).构成以上差异的基历有620条,涉及细胞骨架蛋白、细胞周期蛋白、细胞因子、受体、转录因子及糖、蛋白质和核到代谢的酶类;未发现Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达水平的改变.cNDA基因芯片分析表明,ECV304细胞、纤维母细胞中有较高水平的表达,在部分肝,肺癌中发现表达水平较高.ORF克隆到表达质粒pQE30,高水平表达一27.45kd的蛋白质,经His Trap亲合层分离后质谱分析证实.其在体外可与羧肽酶A相互作用,而对羧肽酶B无作用.psort2蛋白定位分析提示该蛋白无明确的细胞器定位信号.将ORF克隆到pGEFP-C1及pGEFP-N3转染COS7细胞发现其呈全细胞弥散性分布.

关键词： 肥厚性疤痛   CDNA基因芯片   成纤维细胞   表达谱   转化生长因子β3  

摘要： 用基因芯片分析肥厚性疤痕与正常皮肤成纤维细胞在静息及TGF beta3刺激下的表达谱的改变 .正常成纤维细胞在TGF beta3刺激前后的表达谱与肥厚性疤痕成纤维细胞在TGF beta3刺激前的表达谱正相关 (r=0 .76 0 37) ,刺激后 2种成纤维细胞的表达差异与肥厚性疤痕成纤维细胞TGF beta3刺激前后的表达谱差异正相关 (r =0 .82 6 76 2 ) .构成以上差异的基因有 6 2 0条 ,涉及细胞骨架蛋白、细胞周期蛋白、细胞因子、受体、转录因子及糖、蛋白质和核酸代谢的酶类 ;未发现胶原蛋白Ⅰ ,Ⅲ的表达水平的改变 .结果提示 :1.肥厚性疤痕成纤维细胞在静息状态下表现出与正常细胞受TGF beta3刺激后相似的反应 ,其可能处于一种应激状态 ;2 .TGF beta3刺激后 2种细胞的反应差异与肥厚性疤痕细胞的异常反应相关 ,TGF beta3的作用背景可能是肥厚性疤痕的分子病理学基础之一 ;3 .基因表达变化涉及细胞因子、细胞周期调控、凋亡等 ,其具备疾病遗传异质性的分子基础 ;4.胶原表达无明显上升 ,提示在肥厚性疤痕发病中 ,胶原纤维及细胞外基质堆积有复杂的分子生物学基础 .

关键词： 印迹法   蛋白质   催化域   胶原/代谢   胶原酶类/化学   胶原酶类/遗传学   胶原酶类/代谢   DNA/遗传学   数据库   事实型   动力学   基质金属蛋白酶1/代谢   基质金属蛋白酶13   基质金属蛋白酶3/代谢   诱变   定点   肽库   肽类/化学合成   肽类/代谢   重组蛋白质类/化学   重组蛋白质类/代谢   序列分析   DNA   底物特异性   转化生长因子β/代谢   转化生长因子β3   人类  

摘要： The substrate specificity of human collagenase 3 (MMP-13), a member of the matrix metalloproteinase family, is investigated using a phage-displayed random hexapeptide Library containing 2 x 10(8) independent recombinants, A total of 35 phage clones that express a peptide sequence that can be hydrolyzed by the recombinant catalytic domain of human collagenase 3 are identified. The translated DNA sequence of these clones reveals highly conserved putative P1, P2, P3 and P1', P2', and P3' subsites of the peptide substrates, Kinetic analysis of synthetic peptide substrates made from human collagenase 3 selected phage clones reveals that some of the substrates are highly active and selective. The most active substrate, 2,4-dinitrophenyl-GPLGMRGL-NH2 (CP), has a k(cat)/K-m value of 4.22 x 10(6) M-1 s(-1) for hydrolysis by collagenase 3, CP was synthesized as a consensus sequence deduced from the preferred sub sites of the aligned 35 phage clones. Peptide substrate CP is 1300-, 11-, and 820-fold selective for human collagenase 3 over the MMPs stromelysin-l, gelatinase B, and collagenase 1, respectively. In addition, cleavage of CP is 37-fold faster than peptide NF derived from the major MMP-processing site in aggrecan, Phage display screening also selected five substrate sequences that share sequence homology with a major MMP cleavage sequence in aggrecan and seven substrate sequences that share sequence homology with the primary collagenase cleavage site of human type II collagen. In addition, putative cleavage sites similar to the consensus sequence are found in human type N collagen. These findings support previous observations that human collagenase 3 can degrade aggrecan, type Il and type IV collagens.

关键词： 淫羊藿甙   转化生长因子β   LAK细胞   CD3AK细胞  

摘要： 探讨淫羊藿甙逆转转化生长因子 β2 (TransformingGrowthFactorβ2 ,TGFβ2 )对LAK、CD3AK细胞的免疫抑制作用及其机制。方法 :采用MTT法 ,RT PCR和流式细胞术。结果 :淫羊藿甙能逆转受TGFβ2 抑制的LAK和CD3AK细胞的杀伤活性 ,并能部分恢复受TGFβ2 抑制的LAK细胞表面IL 2Rα表达和CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平 ,以及CD3AK细胞的增殖活性。结论 :淫羊藿甙通过恢复LAK细胞IL 2Rα表达 ,提高CD3AK细胞内穿孔素mRNA水平及促进CD3AK增殖 ,逆转TGFβ2 对LAK、CD3AK的免疫抑制作用。

关键词： 转化生长因子   受体   胚胎植入  

摘要： 目的 :探讨 TGFβ2 、TGFβ3 和 TβR- 与胚胎植入的关系。方法 :取孕 4～ 8d小鼠子宫 ,用免疫组化方法观察 TGFβ2 、TGFβ3 和 TβR- 的表达情况并以非孕小鼠子宫做对照。 结果 :TGFβ2 于孕子宫各型细胞均有表达 ,表达程度以孕 7d为最高 ;TGFβ3 和 TβR- 的表达主要集中于子宫腺和肌细胞。植入阶段 ,TGFβ2 阳性细胞的数量明显高于 TGFβ3 。 结论 :TGFβ2 、TGFβ3 和 TβR- 参与植入过程的调节。

关键词： 骨巨细胞瘤   微血管密度   TGFβ1   TGFβ3   预后  

摘要： 目的 :研究骨巨细胞瘤微血管生成能力及意义 ,并探讨各种细胞的不同来源和功能。方法 :用LSAB法检测骨巨细胞瘤病理标本微血管密度 (MVD)和特征及TGFβ1和TGFβ3 表达。结果 :病理分级之间MVD :Ⅲ级 >Ⅱ级 (P <0 .0 5 ) ,Ⅲ级 >Ⅰ级 (P <0 .0 1) ,瘤组织分化越差 ,微血管异质性越强。TGFβ1表达与MVD增加显著相关 (P <0 .0 1) ,与术后复发等不良预后相关 (P <0 .0 5 )。TGFβ3 表达与病理分级相关 ,而与微血管密度无关 (P <0 .0 5 ) ,与外科分期有关 (P <0 .0 5 ) ,与术后复发等不良预后有关 (P <0 .0 5 )。TGFβ1与TGFβ3 阳性表达相关 (P <0 .0 5 ) ,其表达率之间有显著差异 (P <0 .0 1)。结论 :MVD、TGFβ1和TGFβ3 阳性表达可作为骨巨细胞瘤不良预后的指标。FC可能是真正瘤细胞 ,MGC和MC可能是瘤细胞分泌细胞因子趋化而来的破骨细胞和前体破骨细胞。