关键词： 垂体腺瘤   转化生长因子   半乳凝素   视网膜母细胞瘤蛋白   蛋白表达  

摘要： 1 TGF-β、Gal-3、Rb的蛋白表达和垂体腺瘤的增殖活性的关系2 TGF-β、Gal-3和Rb的蛋白表达与垂体泌乳素腺瘤的侵袭性的关系小结***-β作为细胞信号转导由膜外到膜内的起点,在垂体腺瘤中其蛋白表达水平增强,可引起垂体腺瘤细胞过渡的增殖,是导致垂体腺瘤侵袭性的基础信号.研究证实此传导途径在垂体腺瘤中的GH型腺瘤、TSH型腺瘤、ACTH型腺瘤、无功能型腺瘤的类型中是存在的.2.在垂体侵袭性PRL腺瘤中,galectin-3的表达是独特的,在TGF-β的作用下,细胞外信号至胞浆使得本应抑制的galectin-3却激活,同时高尔基体与galectin-3连接,对其进行修复3.三种蛋白表达在侵袭性组与非侵袭组中阳性率比较蛋白表达率水平较非侵袭性组比较均增高,统计学差异显著.

关键词： 甲状腺转录因子-2   转化生长因子β3   载体   腭突   Southern Blotting   免疫组织化学  

摘要： 甲状腺转录因子-2(TTF-2)是由titf2/foxel基因编码,为仅含有一个外显子的基因,全长为2807bp,定位于鼠4C2。TTF-2蛋白在个体发生中的表达具有高度组织特异性和发育阶段特异性,其表达受激素和细胞因子调节控制。 TTF-2蛋白具有双向调节作用,即TTF-2蛋白的转录活化作用和转录抑制作用。TTF-2蛋白通过其叉头DNA结合域与编码甲状腺过氧化物酶(TPO)和甲状腺球蛋白(Tg)基因的启动子的特殊DNA调节序列结合,调节Tg和TPO转录;TTF-2蛋白通过羧基末端抑制结构域与甲状腺特异性基因有关的辅助因子(TTF-1、PaX-9)相互作用,特异性抑制其转录活化,是启动子特异性转录抑制子。 转基因动物是将外源基因引入基因组的基因转移技术,它主要目的是把外源DNA导入动物细胞核内改变动物遗传性状,是从四维时空观察转基因的整体效应,是将外源基因转移从细胞水平到机体水平的一大飞跃。利用转基因动物技术可以建立人类疾病相关基因的转基因动物模型,以探讨目的基因的表达调控规律。 titf-2小鼠和人类titf-2基因纯合缺陷表现为腭裂及甲状腺发

关键词： 慢性   肾功能衰竭   转化生长因子-β1   血小板源性生长因子-β1  

摘要： 目的 :观察慢性肾功能衰竭 ( CRF)转化生长因子β1 ( TGFβ1 )的表达 ,探讨中药肾衰 3号颗粒剂缓解 CRF恶化的作用机制。方法 :6 0只 Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药低剂量组、中药高剂量组和洛丁新组。从大鼠尾静脉注射阿霉素 7.5 m g/kg造成阿霉素肾病模型 ;观察 2 4 h尿蛋白量、血肌酐 ( SCr)、尿素氮 ( BU N)、肌酐清除率 ( CCr)及肾小管间质病理变化 ;免疫组化法观察 TGFβ1 、血小板源性生长因子 β( PDGFβ)在肾脏的表达及药物影响。结果 :中药高剂量组尿蛋白含量、SCr、BUN改善程度均较其他治疗组明显 ,与模型组相比差异显著 ( P均 <0 .0 1) ;肾小管间质病变减轻最为明显 ;TGFβ1 主要表达于肾小球内皮细胞和肾小管上皮细胞 ,PDGFβ主要表达于肾小球系膜区及肾小管近曲和远曲上皮细胞 ,且阳性表达率均为各组最低 ( TGFβ1 为 2 5 .0 % ,PDGFβ为 33.3% )。结论 :肾衰 3号颗粒剂对 CRF的保护作用机制可能是通过下调 TGFβ1 表达而减少肾小球细胞外基质沉积 ,下调 PDGFβ表达而减少肾小球系膜细胞过度增殖。

关键词： TGF-β3   Ⅲ型胶原   转染   瘢痕成纤维细胞   转化生长因子-β3   基因   真核表达质粒   RNA   质粒   RT—PCR  

摘要： 目的　观察转染人转化生长因子 β3 (hTGF β3 )基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法　通过脂质体介导的方法 ,将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒 (pBK CMV) TGF β3 质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞 ,采用RT PCR法检测TGF β3 mRNA的表达 ,放射免疫 (RIA)法测定细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原的浓度。结果　构建的TGF β3 质粒可成功转染成纤维细胞 ,并增强Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达 ,下调Ⅰ /Ⅲ型胶原比值。结论　转染hTGF β3

关键词： 转化生长因子β3   颌下腺细胞   淀粉酶   细胞培养  

摘要： 目的　研究转化生长因子β3(transforming growth factorβ3,TGF-β3)对鼠颌下腺细胞 (ratsubmandibular gland cells,RSGCs)分泌淀粉酶功能的影响。　方法　原代及传代培养 Wistar大鼠 RSGCs,免疫组织化学鉴定细胞来源 ,按加入不同浓度 TGF-β3(0 .5、1.0、5 .0、10 .0、2 5 .0 ng/ ml)分组 ,未加入 TGF-β3的为对照组。采用噻唑蓝 (MTT)比色法、自动生化分析仪和免疫印迹法检测 2 4、4 8、72和 96小时后 TGF-β3对细胞增殖及淀粉酶分泌功能的影响。　结果　培养的 RSGCs免疫组织化学鉴定 CK 8.13、S- 10 0蛋白染色呈阳性 ,波形丝蛋白染色呈阴性。 MTT法检测各组细胞吸光度 A值与对照组比较 ,差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。 72和 96小时后 ,0 .5～ 10 .0 ng/ ml TGF-β3组与对照组比较 ,细胞分泌的淀粉酶明显增加 ,差异有统计学意义 (P<0 .0 1)。免疫印迹法检测颌下腺组织及培养细胞的淀粉酶提取物形成蛋白表达一致的电泳带。　结论　 TGF-β3能促进 RSGCs的分化和淀粉酶的分泌功能 。

关键词： 肾组织   βig-h3   糖尿病大鼠   表达   治疗组   TGF-β1   黄芪   克隆   RNA   人类  

摘要： 目的探讨人类转化生长因子β诱导基因-克隆3(TGF-β-inducedgene-human,clone3,βig-h3)在糖尿病大鼠肾组织中的表达意义,以及血管紧张素受体拮抗剂洛沙坦losartan和中药黄芪对糖尿病大鼠肾组织βig-h3表达的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型。将SD大鼠随机分成5组,每组6只:正常对照组(N组)、糖尿病组(D组)、losartan治疗组(DL组)、黄芪治疗组(DA组)和losartan黄芪联合治疗组(DLA组)。治疗8周后取肾组织,观察肾脏病理改变;半定量RT-PCR法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1mRNA的表达;免疫组化方法检测各组肾组织中βig-h3和TGF-β1蛋白质的表达水平。结果处理8周后,与N组相比,D组肾小球系膜增生、基质大量堆积,部分肾小球出现硬化;各治疗组系膜增生均有减轻。D组肾组织βig-h3、TGF-β1mRNA和蛋白表达均明显升高(与C组比较,P<0.05);各治疗组上述指标均有不同程度的下降(与D组相比,P<0.05)。βig-h3的表达与TGF-β1呈正相关(r=0.81,P<0.05)。结论βig-h3在糖尿病肾病发生发展过程中可能起重要作用;losartan和黄芪可能部分通过下调肾组织βig-h3mRNA和蛋白的表达对糖尿病肾病发挥抗纤维化作用。

关键词： 前软骨干细胞   免疫磁珠   磁性细胞分选系统   成纤维细胞生长因子受体-3   细胞培养   转化生长因子β   软骨形成   细胞外基质   软骨细胞   增强型绿色荧光蛋白   基因转染   骨基质明胶   藻酸盐水凝胶   骺板样组织   转化生长因子β3  

摘要： 研究目的 建立PSC<,s>的分离纯化方法及PSC<,s>细胞库,探讨TGFβ(transforming growth factorβ)诱导PSC<,s>向成软骨方向定向分化的可行性及特异性软骨细胞外基质的表达机制;评价增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因修饰PSC<,s>的效果及其与骨基质明胶(BMG)复合物异位移植的成软骨能力;探讨藻酸盐水凝胶(alginate hydrogel,AH)与PSC<,s>复合物体内构建骺板样组织的可行性.研究方法 利用磁性细胞分选术分离纯化有FGFR-3表面标志的骨骺PSC<,s>,用流式细胞术(FACS)、免疫组化、免疫荧光等技术鉴定纯化后的PSC<,s>.将PSC<,s>体外扩增至第3代,采用液氮深低温保存细胞,应用RT-PCR、免疫组化免疫荧光等技术定期对复苏PSC<,s>行生物学特性鉴定.采用藻酸盐凝胶培养,分别以TGFβ3诱导分离纯化的PSC<,s>向成软骨方向分化,应用免疫组化、RT-PCR、免疫沉淀、western blot和分光光度等技术测定PSC<,s>向成软骨方向分化过程中特异性软骨细胞外基质成分的表达.用脂质体介导法将EGFP基因表达载体pEGFP转染PSC<,s>,G418筛选得到EGFP基因修饰PSC<,s>,将EGFP基因修饰PSC<,s>与BMG复合体体外培养后植入大鼠体内,荧光显微镜下定期观察复合体GFP表达,免疫组化检测Ⅱ型胶原表达.用多聚赖氨酸和藻酸盐制备AH,将PSC<,s>在含有TGF-β3的藻酸盐微珠中培养,分别于7、14、21d将被诱导的PSC<,s>包埋入AH制备成AH-PSC<,s>复合物;分别将AH-PSC<,s>自体植入大鼠背部肌肉中,定期取材测定移植物的重量、细胞数,并行组织学检查及Ⅱ型胶原免疫组化检测.研究结论 磁性细胞分选术可有效地分离纯化PSC<,s>.可用液氮深低温保存的方法建立新生大鼠PSC<,s>细胞库.TGFβ能诱导PSC<,s>向成软骨方向定向分化,此分化过程伴随特异性软骨细胞外基质成分的沉积.EGFP基因修饰PSC<,s>在体外能长期稳定表达GFP,EGFP基因修饰PSC<,s>与BMG共移植时可形成软骨组织及骨组织,但无骺板样结构.TGF-β3诱导PSC<,s>7d的AH-PSC<,s>复合物在体内能构建骺板样组织,可望成为修复骺板组织的有效方法.

关键词： 再生障碍性贫血   白细胞介素-3转化生长因子-β1   发病机制  

摘要： 再生障碍性贫血(AA)是一种造血功能低下而导致的以全血细胞减少为主要特征的一组疾病,近年来的研究表明,造血调控异常与再障发病密切相关.白细胞介素-3(IL-3)对造血有刺激作用,转化生长因子β1(TFF-β1)是造血系统重要的负调节因子,对造血细胞有显著抑制作用.为此,我们检测了42例再障患者外周血IL-3及TGF-β1水平,以探讨其与再障发病机制及治疗等方面的关系.

关键词： 转化生长因子-β3   增生性瘢痕   成纤维细胞   生物学   Ⅲ型胶原   Ⅰ型胶原  

摘要： 背景:哺乳类动物有3种TGF-β异构体即TGF-β1,β2,β3,这3种异构体各自具有独特而不同的生物学作用,TGF-β1是明显的促瘢痕形成因子,而TGF-β3可减少TGF-β1,β2的产生,从而减少细胞外基质(ECM)合成,因此,TGF-β3有可能是人体内天然的抗瘢痕形成因子。目的:通过外源性TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)生长增殖及Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,了解其生物学行为,为临床治疗提供理论依据。设计:随机对照实验研究。地点和对象:汕头大学医学院第二附属医院整形烧伤外科完成,对象为新鲜无菌增生性瘢痕组织,来源于本科收治及门诊手术的增生性瘢痕患者6例,男3例,女3例;年龄5～45岁。干预:6例增生性瘢痕成纤维细胞体外培养,分为4组,实验组又分为5,10,50mg/L组分别加TGF-β35,10,及50mg/L,对照组加入FBM1.5mL,采用MTT比色法测定TGF-β3对HSFB增殖活性的影响,3H-脯氨酸掺入法测定其胶原合成,免疫组化检测Ⅰ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达情况。主要观察指标:TGF-β3对HSFB体外增殖,HSFBⅠ,Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响,TGF-β3作用后HSFB胶原合成情况。结果:转化生长因子β3可抑制HSFB细胞增殖,作用120h后实验组细胞密度分别为(6.34±0.51),(6.01±0.38),(5.24±0.65)×105/瓶,明显低于对照组(10.

关键词： tumor angiogenesis   IL-3   TGF beta   smooth muscle cells   endothelial cells  

摘要： Interleukin-3 (IL-3) express ion by tumor-infiltrating lymphocytes (TILs) and its effects on vessel assembly were evaluated. TILs from 'in situ' human breast cancers expressed CD4/CD25 antigens and IL-3. An injection of Matrigel containing SMC and IL-3 or basic-fibroblast growth factor ( bFGF) into SCID mice confirmed the neoangiogenetic effect of both factors. However, in response to IL-3, but not to bFGF, only few SMC became incorporated into the nascent vessels. To evaluate the possibility that signals emanated by the nascent vasculature in the presence of IL-3 may negatively regulate SMC recruitment, conditioned media ( CM) from IL-3-treated endothelial cells (EC) or SMC were tested for their biological effects on SMC and EC. CM from IL-3-treated SMC stimulated the migration of EC. In contrast, the migration of SMC was not affected by CM from IL-3-stimulated EC;however, it was greatly enhanced by blocking transforming growth factor beta (TGFbeta) activity. TGFbeta immunoenzymatic assay demonstrated the following: (i) the absence of TGFbeta activity in CM from IL-3-stimulated EC;(ii) a barely detectable TGFbeta activity in CM from IL-3-stimulated SMC;and (iii) the presence of TGFbeta activity in the supernatants of SMC stimulated with CM from IL-3-,but not from bFGF-stimulated EC. Increased TGFbeta mRNA expression was only detected in SMC stimulated with CM from IL-3-treated EC. Finally, the inhibitory signals induced by IL-3 in vivo were abrogated by the addition of the neutralizing TGFbeta antibody. Thus, the positive immunostaining for IL-3 by TILs in 'in situ' breast cancers sustains the possibility that early in tumor development, IL-3 can contribute to the chronic immaturity of these vessels.