关键词： 妊娠期高血压疾病   整合素β3   TGF—β1   免疫组织化学  

摘要： 目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)和整合素β3(Integrinβ3)在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达,并探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法采用免疫组织化学染色(SP法)分别检测Integrinβ3、TGF-β1在12例妊娠期高血压疾病患者及13例正常妊娠者胎盘组织中的表达。结果妊娠期高血压疾病组胎盘Integrinβ3表达明显高于正常妊娠组(P<0.01)。妊娠期高血压疾病组胎盘TGF-β1表达亦明显高于正常妊娠组(P<0.01)。结论与正常妊娠组比较妊娠期期高血压疾病患者胎盘组织integrinβ3、TGF-β1的表达明均显增高。表明integrinβ3、TGF-β1可能参与妊娠期高血压疾病的发生和发展。

关键词： Base Sequence   Cell Line, Tumor   Cell Transformation, Neoplastic   Cell Transformation, Neoplastic   DNA Primers   Hedgehog Proteins/metabolism   Humans   Immunohistochemistry   Immunohistochemistry   Lymphatic Metastasis   Matrix Metalloproteinase 2/metabolism   Matrix Metalloproteinase 9/metabolism   Neoplasm Invasiveness   Neoplasm Metastasis   Phosphorylation   Protein-Serine-Threonine Kinases/metabolism   Receptors, Transforming Growth Factor beta/metabolism   RNA, Small Interfering   RNA, Small Interfering   Signal Transduction   Smad3 Protein/metabolism   Stomach Neoplasms/enzymology   Stomach Neoplasms/metabolism   Stomach Neoplasms/pathology   Transforming Growth Factor beta/physiology  

摘要： It is known that the activation of hedgehog (Hh) signaling is involved in the progression and invasion of various tumors, including gastric carcinoma. In this study, we investigated the impact of transforming growth factor (TGF)-beta signaling on the sonic hedgehog (Shh)-mediated invasion of gastric cancer cells. We found that higher concentrations of N-Shh enhanced cell motility and invasiveness in gastric cancer cells, whereas no increase was observed in cells that were treated with KAAD-cyclopamine (a Shh signaling inhibitor) or anti-Shh blocking antibodies. In addition, the N-Shh-induced migration and invasiveness of gastric cancer cells were reduced by treatment with anti-TGF-beta blocking antibody or TGF-beta 1 small interfering RNA (siRNA) in presence of N-Shh when compared with control groups. Furthermore, TGF-beta 1 secretion, TGF-beta-mediated transcriptional response, expression of activin receptor-like kinase (ALK) 5 protein and phosphorylation of Smad 3 were also enhanced by treatment with N-Shh, but not KAAD-cyclopamine, anti-Shh or TGF-beta 1 blocking antibodies. Blockade of the ALK5 kinase in the presence of N-Shh significantly inhibited phosphorylation of Smad 3, activity of matrix metalloproteinases and Shh-induced cell motility/invasiveness. Importantly, transient expression of ALK5 siRNA or Smad 3 siRNA reduced the ability of N-Shh to stimulate migration and invasion of those cells compared with the cells treated with non-specific control siRNA. In summary, these results indicate that Shh promotes motility and invasiveness of gastric cancer cells through TGF-beta-mediated activation of the ALK5-Smad 3 pathway. Additionally, our findings are the first to suggest a role and mechanism for Shh signaling as it relates to the metastatic potential of gastric cancer, thereby indicating potential therapeutic molecular targets to decrease metastasis.

关键词： 转化生长因子β1   转化生长因子β3   妊娠期高血压疾病   胎盘   滋养细胞   浸润  

摘要： 目的探讨转化生长因子-β1,β3(TGF-β1,TGF-β3)在妊娠期高血压疾病发生和发展中的作用。方法60例为妊娠期高血压疾病患者(妊娠期高血压患者20例,轻度子痫前期患者20例,重度子痫前期患者20例),采用免疫组织化学方法检测分娩后胎盘滋养细胞及蜕膜细胞TGF-β3和TGF-β1的表达,20例正常妊娠孕妇为对照组。取重度子痫前期患者剖宫产后分娩胎盘绒毛体外培养24h,然后分别收集培养后1,4,12,24h上清液,采用ELISA法检测胎盘滋养细胞TGF-β1和TGF-β3的分泌。结果妊娠期高血压疾病组绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞TGF-β3阳性表达率和表达程度明显高于对照组,TGF-β1阳性表达率和表达程度明显高于对照组,差异均有显著性(P<0.05)。重度子痫前期组分娩后胎盘绒毛体外培养24h后,于1,4,12,24h分别收集上清液中TGF-β1和TGF-β3的分泌均显著高于正常孕妇组,差异有显著性(P<0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者胎盘绒毛滋养层细胞的TGF-β3,TGF-β1表达异常在妊娠期高血压疾病的发生发展过程中起重要作用。

关键词： 过氧化氢   转化生长因子β1   Smad3  

摘要： 目的研究过氧化氢对A549细胞表达转化生长因子β1(TGF-β1)和Smad3磷酸化的影响。方法用过氧化氢建立体外A549细胞损伤模型,MTT法检测过氧化氢对A549细胞增殖活性的影响,免疫印迹法(Western Blotting)观察过氧化氢作用不同时间后A549细胞TGF-β1和Smad3磷酸化的表达。结果过氧化氢明显抑制A549细胞的增殖,浓度为1.0mmol/L时,其对A549细胞增殖的抑制率为46.34%;A549细胞在过氧化氢(1.0mmol/L)的刺激下,TGF-β1和Smad3磷酸化的表达量逐渐升高,24h时达到高峰,48h下降。结论氧化损伤早期,A549细胞表达TGF-β1和Smad3磷酸化增加,这可能与肺损伤后依赖Smad3的组织修复有关。

关键词： 糖尿病肾病   转化生长因子β1   Smad2/3   Smad4   纤连蛋白  

摘要： 目的观察1型糖尿病大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)及信号转导蛋白Sm ad2/3、Sm ad4蛋白在肾脏的动态表达,探讨它们在糖尿病肾病(DN)发生发展中的作用及其相互关系。方法实验动物随机分为5组,依病程长短分为①A组(2周组),②B组(4周组),③C组(8周组),④D组(16周组),⑤E组(24周组),每组分别设有正常对照组(N组)和糖尿病组(DM组)。采用尾静脉注射链脲菌素(STZ)法复制糖尿病大鼠模型;免疫组织化学方法检测肾脏TGF-β1、Sm ad2/3、Sm ad4及纤连蛋白(FN)的表达;PAS染色光镜观察肾小球系膜、肾小管基底膜变化及细胞外基质沉积情况等的形态学改变;生化方法测定血糖、血肌酐及24h尿蛋白量。结果正常对照组大鼠肾脏TGF-β1极少表达,Sm ad2/3、Sm ad4有少量表达,而糖尿病大鼠三者的表达均显著高于正常对照组;随糖尿病进展,肾组织纤连蛋白表达及24h尿蛋白都增多;糖尿病16周时肾脏TGF-β1表达分别与Sm ad2/3、Sm ad4及FN、24h蛋白尿均呈正相关关系。结论STZ-1型糖尿病大鼠肾脏TGF-β1和下游信号转导蛋白Sm ad2/3、Sm ad4参与了肾病时肾脏肥大硬化的发生。

关键词： 缺氧诱导因子-1α   转化生长因子-β3   子痫前期滋养细胞  

摘要： 目的:研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和转化生长因子-β3(TGF-β3)在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义。方法:采用免疫组化方法和图像分析系统分别对20例正常孕妇(对照组)和46例子痫前期患者(子痫前期组,其中轻度16例、重度30例)胎盘组织中的HlF-1α和TGF-β3的表达进行分析。结果:①HIF-1α主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞,与正常组胎盘组织(65.2±1.77)比较,子痫前期组HIF-1α的平均光密度(78.10±3.84)显著升高(P<0.05),重度子痫前期(81.49±1.81)显著高于轻度子痫前期(74.71±1.53)(P<0.05)。②TGF-β3主要表达于胎盘绒毛滋养细胞和蜕膜细胞,与正常组胎盘组织(63.55±2.10)比较,子痫前期组TGF-β3的平均光密度(75.34±3.73)显著升高,其中重度子痫前期(78.05±3.14)显著高于轻度子痫前期(72.64±1.79)。③子痫前期组HIF-1α和TGF-β3的表达呈正相关性(γ=0.351,P<0.05)。其中轻度子痫前期γ1=0.549,P<0.05。重度子痫前期γ2=0.577,P<0.05。结论:胎盘滋养细胞HIF-1α和TGF-β3表达升高可能与子痫前期的发病有关。

关键词： 桂皮醛   创伤愈合   bFGF   TGF—β1  

摘要： 目的研究桂皮醛刺激小鼠成纤维细胞瘤NIH3T3细胞后碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及转化生长因子β_1(TGF-β_1)蛋白在不同时相点表达的规律,探讨桂皮醛促进成纤维细胞增殖及胶原合成的机制。方法采用MTT法观察不同质量浓度桂皮醛对NIH3T3细胞增殖的影响;利用羟脯氨酸(Hyp)测试法测定细胞上清中胶原水平;利用免疫细胞化学技术检测桂皮醛对NIH3T3细胞bFGF、TGF-β_1蛋白表达的影响。结果桂皮醛作用NIH3T3细胞48 h后,细胞增殖速度和细胞上清中的胶原量均较对照组明显增加。桂皮醛刺激后,bFGF和TGF-β_1蛋白表达增加,其中bFGF蛋白表达高峰在18 h,TGF-β_1蛋白在刺激后12 h达到峰值。结论桂皮醛可以上调内源性生长因子bFGF、TGF-β_1蛋白的表达,这可能是桂皮醛体外促进NIH3T3细胞增殖及胶原合成,以及在创伤愈合、组织修复方面发挥作用的分子生物学机制。

关键词： 细胞系   受体   芳基烃   转化生长因子α   聚合酶链反应  

摘要： 目的研究2，3，7，8-四氯二苯并二噁英（TCDD）染毒对表皮细胞芳香烃受体（AhR）和转化生长因子（TGF-α）表达的影响。方法利用半定量逆转录PCR技术（RT-PCR）对24hTCDD染毒组进行AhR和TGF-α基因表达的测定，并分析两者之间的相互关系。结果以β-aetin为内参照，测定细胞中AhR和TGF-α mRNA表达的相对含量。结果显示随着TCDD浓度的增高，细胞中AhR mRNA的相对表达量呈现下降的趋势，r=-0．548，各染毒组与对照组相比差异有统计学意义（F=4．124，P=0．021），两两比较7×10^-10mol／L组（0．0620±0．0085）和7×10^-9mol／L组（0．0518±0．0194）与对照组（0．1138±0．0227）之间的差别有统计学意义（t=-3．48，P〈0．05；t=-4．17，P〈0．01），且其相对表达量分别为对照组的55％和45％。TGF-α mRNA的相对表达量随浓度的增加则呈现上升的趋势，相关系数r=0．695（P〈0．01），各组之间差异有统计学意义（F=15．789，P=0．000），在7×10^-10mol／L组（0．1474±0．0390）和7×10^-9mol／L组（0．2133±0．0364）相对表达量与对照组（0．0561±0．0100）的差别具有统计学意义（t=4．49，P〈0．01；t=7．74，P〈0．01），且其相对表达量是对照组的2．6倍和3．8倍。同时对AhR与TGF-α mRNA相对表达水平进行相关分析，两者呈负相关，r=-0．561（P〈0．05）。结论TCDD对细胞增殖过程中可影响基因表达，AhR表现为下调，TGF-α表现为上调，且两基因表达量之间存在负相关关系。

关键词： 转化生长因子β3   肝星状细胞   Ⅰ型胶原  

摘要： 目的观察转化生长因子D3基因（TGFβ3）对大鼠肝星状细胞株（HSC—T6）Ⅰ型胶原合成的影响。方法TGFβ3表达质粒[pcDNA3．1（＋）-TGFβ31和TGFβ1表达质粒[pcDNA3．1（＋）-TGFD11的构建。通过脂质体介导方法，将pcDNA3．1（＋）-TGFβ1、pcDNA3．1（＋）-TGFβ3分别及共同转染体外培养的HSC—T6细胞，荧光定量PCR法及Westernblot法分别检测转染后TGFβ1、TGFD3、Ⅰ型胶原mRNA及蛋白质的表达。将pcDNA3．1（＋）-TGFD1转染HSC—T6细胞，经G418筛选建立高表达TGFD1的HSC～T6细胞克隆，pcDNA3．1（＋）-TGFD3转染克隆细胞，荧光定量PCR法检测转染后TGFβ3、TGFβ1及Ⅰ型胶原mRNA的表达，Westernblot法检测TGFβ1、Ⅰ型胶原蛋白的表达情况。结果构建的pcDNA3．1（＋）TGFD3、pcDNA3．1（＋）-TGFD1质粒可转染HSC—T6细胞，转染率28．2％。pcDNA3．1（＋）TGF侈3转染细胞后，Ⅰ型胶原mRNA及蛋白的表达较空白组及对照组增加，以72h增高最为明显（P〈0．05）；共转染组Ⅰ型胶原mRNA及蛋白质的表达较pcDNA3．1（＋）-TGFβ1转染组明显降低（P〈0．05）。TGF侈3转染克隆细胞后，TGFD1mRNA表达较克隆组无明显改变（P〉0．05），而蛋白质表达明显下降（P〈0．05），Ⅰ型胶原mRNA及蛋白质表达均较克隆组明显降低（P〈0．05）。结论TGFD3基因转染正常培养的HSC—T6细胞，增加Ⅰ型胶原的表达；转染高表达TGFβ1的克隆组HSC—T6细胞，Ⅰ型胶原表达明显降低，提示TGFβ3对肝纤维化的发生有抑制作用。

关键词： .placental   overexpressed   pregnancies   explants   villous   Intrauterine   Growth Restriction   IUGR   endoglin   Preeclampsia   weeks of gestation   preeclamptic  

摘要： Endoglin, a co-receptor for transforming growth factor (TGF)-beta(1) and -beta(3) is expressed in the human placenta and plays an important role in the pathogenesis of preeclampsia. Because preeclampsia is associated with hypoxia, and because TGF-beta 3 is overexpressed in preeclamptic pregnancies, we examined the effect of oxygen and TGF-beta 3 on placental endoglin expression and investigated its expression in pathological models of placental hypoxia such as intrauterine growth restriction (IUGR) pregnancies. Endoglin expression was high at 4 to 9 weeks of gestation, when oxygen tension is low, and decreased after 10 weeks, when oxygen tension increases. Exposure of villous explants to low oxygen (3% O-2) resulted in elevated expression of both membrane and soluble endoglin compared to standard conditions (20% O-2). Moreover, addition of TGF-beta(3) to villous explants under low oxygen conditions increased the expression of endoglin compared to nontreated explants whereas addition of TGF-beta(3)-neutralizing antibodies inhibited the low oxygen stimulatory effect on endoglin expression. Endoglin and soluble endoglin expression were significantly increased in placentas of IUGR singletons compared to controls and in the IUGR twin placentas relative to both the control co-twin and the normal twins. These data demonstrate that oxygen regulates the placental expression of endoglin via TGF-beta 3. Reduced placental perfusion leading to placental hypoxia might contribute to the increased expression of endoglin in IUGR pregnancies.