关键词： TGF-β   信号通路   TβR   转化生长因子   肾细胞癌   受体   凋亡   介导  

关键词： 埋针   内关   心肌缺血   心肌TGF-β3   TGF-β3   mRNA  

摘要： 目的:研究"内关"穴位埋针对心肌缺血损伤小型猪心肌转化生长因子(TGF)-β3 mRNA和蛋白表达的影响,探讨穴位埋针抗心肌缺血的可能机制。方法:32只小型猪随机分为假手术组、模型组、内关组和膈俞组,采用左冠状动脉前降支结扎建立心肌缺血模型,内关组和膈俞组分别进行"内关""膈俞"穴埋针治疗,用realtime PCR和Western blot方法检测TGF-β3 mRNA和蛋白表达水平。结果:假手术组有少量TGF-β3 mRNA和蛋白表达,模型组TGF-β3 mRNA和蛋白表达量比假手术组升高(P<0.05),"内关"及"膈俞"穴位埋针治疗可上调TGF-β3 mRNA和蛋白表达量,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01),且在上调TGF-β3 mRNA和蛋白表达量方面"内关"优于"膈俞"(P<0.05)。结论:"内关"穴位埋针可能通过上调TGF-β3 mRNA和蛋白表达,刺激内皮细胞增殖,促进侧支循环建立,增加缺血心肌血流,实现对心肌组织的保护作用。

关键词： 病理性瘢痕   瘢痕疙瘩   增生性瘢痕   Smad3   转化生长因子β1   流式细胞术   皮肤组织工程  

摘要： 目的:与病理性瘢痕发生机制相关的Smad3/转化生长因子β1信号传递通路研究多集中在体外成纤维细胞的培养上,在瘢痕疙瘩中的表达少见报道。检测病理性瘢痕中Smad3和转化生长因子β1蛋白的表达,探讨其在病理性瘢痕发生及发展中的作用。方法:实验标本均来自2004-06/2008-06河北医科大学附属唐山工人医院烧伤整形科手术患者,瘢痕疙瘩48例,年龄16～52岁;增生性瘢痕40例,年龄18～56岁;选取同期因其他手术切除的正常皮肤组织40例作为对照组。应用流式细胞术检测48例瘢痕疙瘩、40例增生性瘢痕及40例正常皮肤组织Smad3和转化生长因子β1的表达。结果:Smad3和转化生长因子β1在瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中的表达明显高于正常皮肤组织中的表达(P<0.05),Smad3和转化生长因子β1在瘢痕疙瘩和增生瘢痕中的表达差异无显著性意义(P>0.05)。瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中Smad3和转化生长因子β1表达呈正相关(r=0.4892,P=0.0004;r=0.4710,P=0.0022),Smad3和转化生长因子β1在正常皮肤组织中的表达未见明显相关性(P=0.4714)。结论:Smad3和转化生长因子β1在病理性瘢痕中高表达,Smad3和转化生长因子β1的协同作用可能参与病理性瘢痕的发生发展。

关键词： 肾小管上皮细胞转分化   转化生长因子β1   甲状旁腺激素   激素诱导   肾间质纤维化   肌成纤维细胞   TGF-β   纤维化作用  

摘要： 甲状旁腺激素（PTH）能够诱导体外培养的人肾小管上皮细胞转分化成肌成纤维细胞、并促进致纤维化的细胞因子转化生长因子β1（TGF-β1）表达上调，因此，PTH可能是造成肾间质纤维化的重要因素之一。1，25（OH）2D3具有防治肾间质纤维化的潜能。本研究探讨1，25（OH）2D3抗肾间质纤维化作用的机制。

关键词： 慢性肾功能衰竭   复方   转化生长因子β1   Smad2   Smad3   大鼠  

摘要： 目的:观察参芪解毒汤对腺嘌呤诱导的慢性肾衰大鼠肾脏组织转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、Smad2和Smad3蛋白表达的影响,探讨参芪解毒汤治疗慢性肾衰竭(chronic renal failure,CRF)的作用机制。方法:将90只健康Wistar雄性大鼠随机分成正常对照组、模型组、氯沙坦组、低剂量参芪解毒汤组、中剂量参芪解毒汤组和高剂量参芪解毒汤组。腺嘌呤灌胃复制慢性肾衰大鼠模型,检测造模后血浆肌酐(creati-nine,Cr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平判断造模是否成功。治疗8周后,检测血浆Cr、BUN、三酰甘油(triacylglycerol,TAG)、胆固醇(cholesterol,Chol)和白蛋白(albuminous,ALB)水平,HE染色观察大鼠肾脏组织病理学变化,蛋白印迹法检测肾组织TGF-β1、Smad2和Smad3蛋白的表达情况。结果:与治疗前相比,氯沙坦组和低、中、高剂量参芪解毒汤组Cr、BUN水平明显降低(P<0.01);治疗后,各治疗组Cr、BUN和Chol水平低于模型组(P<0.01,P<0.05),ALB水平高于模型组(P<0.01)。病理结果显示,各治疗组大鼠的肾组织病理损伤明显轻于模型组。蛋白印迹法检测提示各治疗组肾组织TGF-β1、Smad2和Smad3的蛋白表达低于模型组(P<0.01)。结论:参芪解毒汤通过抑制TGF-β1/Smads信号传导通路发挥抗肾脏纤维化作用,减缓CRF进程。

关键词： 滋养细胞   侵袭   转化生长因子   血管内皮生长因子  

摘要： 目的:观察白细胞介素等多种细胞因子对绒癌细胞系表达转化生长因子-β3及血管内皮生长因子的影响。方法:将JEG-3细胞分别予12.5ng/mL白细胞介素-2、10ng/mL白细胞介素-3、50u/mL白细胞介素-6、5ng/mL白细胞介素-8、10ng/mL白细胞介素-10、10ng/mL白细胞介素-15、10ng/mL表皮生长因子、10ng/mL粒-巨噬细胞集落刺激因子、10ng/mL巨噬细胞集落刺激因子处理24h后,采用RT-PCR方法检测JEG-3绒癌细胞系中转化生长因子-β3及血管内皮生长因子的转录表达。结果:白细胞介素-2、白细胞介素-3、白细胞介素-6、白细胞介素-8、巨噬细胞集落刺激因子对转化生长因子-β3和血管内皮生长因子均表现出诱导表达的作用,表皮生长因子、粒-巨噬细胞集落刺激因子仅诱导转化生长因子-β3的表达,白细胞介素-10则仅诱导血管内皮生长因子的表达,而白细胞介素-15则对JEG-3细胞表达转化生长因子-β3和血管内皮生长因子均无显著影响。结论:在调节滋养层细胞侵入的复杂细胞因子网络中,各种细胞因子之间存在相互影响。

关键词： 前软骨干细胞   转化生长因子β3   细胞外基质   自组装肽纳米凝胶  

摘要： 目的探讨软骨组织工程方法中修复软骨缺损理想的种子细胞和支架材料。方法免疫磁珠分离纯化新生大鼠前软骨干细胞(PSCs),分别采用KLD-12自组装肽纳米凝胶三维培养(实验组)和普通培养瓶平面培养(对照组),用转化生长因子β3(TGFβ-3)诱导两组PSCs向软骨细胞特性方向分化。利用RT-PCR、免疫组化等方法测定其向软骨细胞特性方向分化过程中特异性细胞外基质Ⅱ型胶原(collagenⅡ)和聚集蛋白聚糖(aggrecan)表达的情况。结果RT-PCR和免疫组化检测结果表明KLD-12自组装肽纳米凝胶组细胞在诱导7、14 d后均有collagenⅡ和aggrecan表达,且RT-PCR检测结果表明KLD-12自组装肽凝胶组细胞的collagenⅡ和aggrecan mRNA表达水平较对照组高,其差异有统计学意义(均P<0.05)。结论TGFβ-3诱导后的PSCs可向成软骨方向分化,诱导后的PSCs与KLD-12自组装肽凝胶复合有望构建组织工程化软骨,KLD-12自组装肽纳米凝胶是较好的软骨组织工程细胞支架。

关键词： 转化生长因子β3   瘢痕形成   创面愈合   TGF-β1   细胞生长因子   TGF-β2   细胞间基质   哺乳类动物  

摘要： TGF—β是指能调节细胞增殖、分化、细胞间基质蛋白表达的一类多功能细胞生长因子，其特征性表现是能可逆地抑制多种细胞的生长增殖。TGF-β至少有6种亚型，各亚型之间有64％～82％的同源性。目前在哺乳类动物中检测到TGF-β1、TGF-β2、TGF—β3种亚型，由于高度保守且对受体的亲和力各不相同，

关键词： 软骨   分化   骨髓基质细胞   基因克隆   生长转化因子-β3  

摘要： 目的 构建潜在相关肽（LAP）为潜伏位点,基质金属蛋白酶（MMP）切位点为导向位点,转化生长因子（TGF）-β3活性部分（mTGF-β3）为治疗位点的具有靶向治疗作用的新型TGF-β3融合蛋白LAP-MMP-mTGF-β3,并转染大鼠来源的骨髓基质干细胞（MSCs）,并检验其特异性的靶向治疗作用.方法 将人工合成的编码MMP酶切位点氨基酸的正反义DNA序列经基因重组定向克隆插入真核表达载体pIRES-EGFP中,获得pIRES-EGFP-MMP重组体,用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从大鼠胚胎组织中获取TGF-β3的LAP（781 bp）段和TGF-β3的活性片段mTGF-β3（313bp）,分别插入pIRES-EGFP-MMP中MMP的上游和下游,获得pIRES-EGFP-LAP-MMP-mTGF-β3重组质粒.然后将其转染入大鼠来源的MSCs,将转染后的MSCs在有MMP-1和无MMP-1的条件下进行球团培养,分别于第7、14、21天检测胶原2（COLⅡ）,Aggrecan（Agc）和TIPM的表达.结果 经过测序和酶切鉴定,构建pIRES-EGFP-LAP-MMP-mTGF-β3质粒;转染MSCs后,我们成功获得了LAP-MMP-mTGF-β3融合蛋白（39 kDa）的表达,并验证了其只有在MMP酶环境中才能被激活生成具有生物学效应的特异性的mTGF-β3二聚体（22.2 kDa）;球团培养中,MMP酶存在的条件下第21天COLⅡ、Agc、TIPM的相对表达量分别为1.45±0.07、1.61±0.09、1.80±0.08,无MMP酶存在的条件下第21天COLⅡ、Agc、TIPM的相对表达量分别为0.42±0.09、0.38±0.15、0.27±0.07.结论 构建了一种新型具有靶向治疗作用的融合蛋白LAP-MMP-mTGF-β3.

关键词： 前软骨干细胞   转化生长因子β3   细胞外基质   自组装肽凝胶  

摘要： 目的利用前软骨干细胞（PSCs）作为软骨缺损修复的种子细胞并在KLD-12自组装肽纳米纤维凝胶中培养,以探讨软骨组织工程方法中修复软骨缺损理想的种子细胞和支架材料。方法免疫磁珠分离纯化新生大鼠PSCs,分别采用KLD-12自组装肽纳米纤维凝胶三维培养（实验组）和普通培养瓶平面培养（对照组）,用转化生长因子β3（TGF-β3）诱导两组PSCs向软骨细胞特性方向分化。利用RT-PCR、免疫组化等方法测定其向软骨细胞特性方向分化过程中特异性细胞外基质II型胶原（Collagen II）和聚集蛋白聚糖（Aggrecan）表达的情况。结果逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫组化结果表明KLD-12自组装肽纳米纤维凝胶组细胞在诱导7、14d后均有Collagen II和Aggrecan表达,且RT-PCR结果表明KLD-12自组装肽凝胶组细胞的Collagen II和Aggrecan mRNA表达水平较培养瓶组高,其差异有统计学意义（均p<0.05）。结论TGF-β3诱导后的PSCs可向成软骨方向分化,诱导后的PSCs与KLD-12自组装肽凝胶复合有望构建组织工程化软骨,KLD-12自组装肽纳米纤维凝胶是较好的软骨组织工程细胞支架。