关键词： 胶质母细胞瘤   肿瘤微环境   转化生长因子β   T淋巴细胞   免疫组织化学  

摘要： 目的分析胶质母细胞瘤免疫微环境中相关免疫细胞及免疫抑制因子的表达。方法纳入2020年11月至2021年4月在暨南大学附属第一医院和广东三九脑科医院行手术切除并保存完整的30例胶质瘤标本,均为胶质母细胞瘤,IDH野生型,免疫组化染色检测胶质母细胞瘤免疫微环境中T淋巴细胞(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞)、抑制性免疫细胞[FoxP3^(+)调节性T细胞(Treg)]、免疫抑制因子[转化生长因子-β(TGF-β)]和免疫抑制信号[细胞程序性死亡蛋白配体(PDL1)]分布和表达。结果CD4^(+)T细胞在胶质母细胞瘤中占比极低;15例(50%)CD3^(+)T细胞占比>3%,CD8^(+)T细胞分布与CD3^(+)T细胞相似;仅2例(6.67%)检测到极少FoxP3^(+)Treg细胞。24例(80%)胶质母细胞瘤胞质强阳性表达TGF-β,且其表达与CD3^(+)T细胞分布存在相关性,TGF-β高表达区域未见CD3^(+)T细胞,TGF-β低表达区域CD3^(+)T细胞分布较广;无一例检测到PDL1表达。结论TGF-β蛋白在胶质母细胞瘤中呈高表达,未来针对TGF-β为靶点设计的药物或免疫疗法可能有助于胶质母细胞瘤的临床治疗。

摘要： 肝星状细胞(HSC)是介导肝纤维化发生的关键效应细胞, 而有氧糖酵解是HSC活化的重要代谢特征。转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导有氧糖酵解, 葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)是分布最广泛的葡萄糖转运蛋白并参与糖代谢的调节, 从而影响细胞增殖和生长。然而, TGF-β1和GLUT1在肝纤维化过程中的关系及具体分子机制尚不明确。因此本文研究探讨GLUT1、TGF-β1在肝纤维化过程中的分子机制。

关键词： 滋肾育胎丸   肾阳虚   绝经期患者  

摘要： 目的 探讨滋肾育胎丸对肾阳虚绝经期患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、Nod样受体蛋白3(NLRP3)、转化生长因子-β(TGF-β)的影响。方法 选取武警广东省总队医院妇科2020年1—12月收治的100例肾阳虚绝经期患者作为研究对象,依据随机数字表法分为对照组和试验组,各50例。对照组予以戊酸雌二醇片治疗,试验组在对照组基础上采用滋肾育胎丸治疗,比较两组的治疗效果。结果 试验组治疗后Kupperman指数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组治疗有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,试验组睾酮(T)水平高于对照组,黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组治疗后中医证候积分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);试验组治疗后血清VEGF、NLRP3、TGF-β水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 肾阳虚绝经期患者接受滋肾育胎丸治疗,能有效调节其血清VEGF、NLRP3、TGF-β水平,整体治疗效果较为理想。

关键词： 子宫肿瘤   转化生长因子β   Smad蛋白质类   miRNA-186-3p   细胞增殖   细胞凋亡   肿瘤侵润  

摘要： 目的探讨miRNA-186-3p(miR-186-3p)对子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭的影响及与转化生长因子β(TGF-β)-Smad信号通路的关系。方法将载有miR-186-3p抑制基因、miR-186-3p模拟物的质粒分别转染至子宫颈癌CaSki细胞,分别为miR-186-3p-I组、miR-186-3p-M组;另将转染空载质粒的CaSki细胞作为对照,为miR-186-3p-C组。采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率,采用Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力;采用蛋白质印迹法检测各组细胞TGF-β-Smad信号通路相关蛋白表达水平;采用Starbase软件预测miR-186-3p靶基因,并用双荧光素酶报告基因实验进行验证。结果miR-186-3p-M组细胞凋亡率均低于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[(7.5±3.2)%比(13.9±0.7)%、(12.7±0.6)%,均P<0.05]。miR-186-3p-M组迁移细胞数[(218±25)个比(168±13)个、(175±13)个,均P<0.001]和侵袭细胞数均多于miR-186-3p-I组和miR-186-3p-C组[(165±21)个比(130±11)个、(142±12)个,均P<0.001]。miR-186-3p-M组TGF-β、Smad2、Smad3、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad3(p-Smad3)蛋白相对表达量均最低,与另两组比较,差异均有统计学意义(均P<0.001)。采用Starbase软件预测miR-186-3p与XIST RNA互补结合;双荧光素酶报告基因实验显示,XIST野生型载体+miR-186-3p模拟物质粒共转染的细胞相对荧光素酶活性低于XIST野生型载体+miR-186-3p空载质粒共转染的细胞(P<0.001)。结论miR-186-3p可能直接与XIST RNA结合而下调TGF-β-Smad信号通路活性,进而增强子宫颈癌CaSki细胞凋亡、迁移、侵袭活性。

关键词： 转化生长因子β3   骨形成蛋白2   牙髓干细胞   增殖   成骨分化  

摘要： 背景:转化生长因子β3与骨形成蛋白2对牙髓干细胞的增殖和成骨向分化能力对比相关研究甚少。目的:探讨相同质量浓度转化生长因子β3与骨形成蛋白2对牙髓干细胞成骨向分化的作用及其初步机制。方法:采用酶解组织块法从新西兰大白兔牙髓组织中分离培养牙髓干细胞;将第3代牙髓干细胞分为空白组、骨形成蛋白2(80μg/L)组和转化生长因子β3(80μg/L)组,采用MTT法检测各组细胞的增殖活力;培养第7,14天行碱性磷酸酶活性定量检测,Runt相关转录因子2、骨涎蛋白免疫细胞化学染色,RT-qPCR法检测成骨相关基因的表达;培养第14,21天进行茜素红染色观察矿化结节形成能力。结果与结论:①骨形成蛋白2组和转化生长因子β3组的牙髓干细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性均高于空白组(P<0.05);转化生长因子β3组第7天碱性磷酸酶活性高于骨形成蛋白2组(P<0.05);②转化生长因子β3组与骨形成蛋白2组Runt相关转录因子2、骨涎蛋白表达均高于空白组(P<0.05),其中转化生长因子β3组第7天Runt相关转录因子2蛋白表达高于骨形成蛋白2组(P<0.05);③转化生长因子β3组与骨形成蛋白2组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原A1、Runt相关转录因子2、骨钙蛋白、骨桥蛋白和Osx基因表达量高于空白组(P<0.05),第7天转化因子β3组碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原A1、Runt相关转录因子2基因的表达高于骨形成蛋白2组(P<0.05);④转化生长因子β3组与骨形成蛋白2组矿化结节较空白组明显;⑤结果表明,转化生长因子β3与骨形成蛋白2均能促进牙髓干细胞增殖和成骨向分化;转化生长因子β3对牙髓干细胞成骨早期促进作用优于骨形成蛋白2。

关键词： 鼻黏膜间充质干细胞   骨髓间充质干细胞   转化生长因子β3   软骨损伤   成软骨分化  

摘要： 背景:目前骨髓间充质干细胞已在软骨损伤治疗中取得了显著成效,但与其相比,鼻黏膜间充质干细胞移植具有更多优势,例如取材方便患者更易接受、可安全活检不损伤嗅觉。目的:探索骨髓间充质干细胞和鼻黏膜间充质干细胞在转化生长因子β3作用下的成软骨诱导效果差异。方法:体外分离培养SD大鼠鼻黏膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞,用含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基分别进行成软骨诱导,相应的对照组用不含有转化生长因子β3的成软骨诱导分化培养基培养。在第7,14天行整体结构观察,并提取细胞RNA与蛋白,采用RT-PCR和Western blot检测软骨细胞相关COL2A1、SOX-9、Aggrecan的表达。结果与结论:①经过7 d成软骨诱导后骨髓间充质干细胞和鼻黏膜间充质干细胞均能形成半透明膜片结构,离心后成团吹打难以分散;②与对照组相比,加入转化生长因子β3成软骨诱导分化后COL2A1、Aggrecan mRNA表达均显著上调(P<0.01),其中鼻黏膜间充质干细胞组的COL2A1、Aggrecan mRNA表达高于骨髓间充质干细胞组(P<0.01);干预7 d,骨髓间充质干细胞实验组中SOX-9 mRNA表达与其对照组无明显差异(P>0.05),而在鼻黏膜间充质干细胞实验组中SOX-9 mRNA表达较其对照组显著增高(P<0.01);③与对照组相比,加入转化生长因子β3成软骨诱导分化后COL2A1、SOX-9蛋白表达均显著上调(P<0.01);干预14 d,骨髓间充质干细胞实验组的COL2A1蛋白表达高于鼻黏膜间充质干细胞实验组,差异有显著性意义(P<0.01);干预7,14 d,鼻黏膜间充质干细胞实验组的SOX-9蛋白表达高于骨髓间充质干细胞实验组,差异有显著性意义(P<0.01);④结果表明,转化生长因子β3对鼻黏膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞均有成软骨的刺激作用,鼻黏膜间充质干细胞也是未来软骨修复策略的潜在候选者。

关键词： 痹通   IL-17   TGF-β   Foxp3   SIRT1   Th17/Treg  

摘要： 目的探讨中药痹通(BT)对佐剂性关节炎(AA)大鼠白介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)、叉头蛋白P3(Foxp3)及沉默调节蛋白1(SIRT1)表达影响,并分析其治疗作用机理。方法建立AA大鼠模型,分别以痹通高、中、低剂量为干预因素,观测大鼠踝关节病理,酶联免疫吸附法(Elisa)检测外周血IL-17、TGF-β表达,免疫组织化学法(IHC)检测踝关节Foxp3表达、免疫荧光法(IF)检测踝关节SIRT1表达。结果BT高、中、低剂量组IL-17的表达显著降低(P<0.01),TGF-β、Foxp3、SIRT1的表达显著增加(P<0.05);痹通高、中、剂量对AA大鼠踝关节病理评分结果有显著改善(P<0.05)。结论痹通对AA大鼠足踝关节肿胀有显著改善作用,其机理可能与调节辅助性T细胞17/调节性T细胞(Th17/Treg)平衡有关。

关键词： 鼻咽癌   放射性皮肤损伤   25-羟维生素D3   转化生长因子β1  

摘要： 目的探讨鼻咽癌患者放疗致放射性皮肤损伤程度与血清25-羟维生素D[25(OH)D]、血清转化生长因子β1基因多态性的相关性。方法选取河南科技大学第一附属医院2020-02-01-2021-02-01收治的90例行放疗的鼻咽癌患者为研究对象。随访3个月,根据是否发生放射性皮肤损伤分为发生组(n=30)和未发生组(n=60)。分析转化生长因子β1基因多态性分布情况及其与放射性皮肤损伤的关系,比较2组患者放疗前、放疗1个周期和放疗结束后血清25(OH)D水平。结果30例发生放射性皮肤损伤的患者中,Ⅰ~Ⅱ级损伤12例,Ⅲ~Ⅳ级损伤18例。-509C/T突变中,TT等位发生Ⅲ~Ⅳ级损伤的患者多于CC基因型患者,P=0.034;CT/TT基因患者发生Ⅲ~Ⅳ级损伤的风险高于CC基因型,P=0.041。869T/C突变中,TC/CC基因型(P=0.031)和CC基因型(P=0.037)发生Ⅲ~Ⅳ级损伤的风险高于TT基因型,转化生长因子β1与Ⅰ~Ⅱ级损伤关系不大。发生组放疗前血清25(OH)D水平为13.96±1.33,低于未发生组的16.79±2.01,t=6.976,P<0.001;放疗1个周期血清25(OH)D水平为12.33±1.20,低于未发生组的14.94±0.98,t=11.037,P<0.001;放疗结束后血清25(OH)D水平为10.67±1.13,低于未发生组的12.96±1.01,t=9.744,P<0.001。结论鼻咽癌患者血清25(OH)D均呈低表达,25(OH)D水平越低发生放射性皮肤损伤的风险越大;血清转化生长因子β1基因多态性与患者放射性皮肤损伤有关,其可作为患者放疗不良反应评价的预测指标。

关键词： 转化生长因子β3   牙髓干细胞   甲基丙烯酰化肝素   成骨分化  

摘要： 目的:探讨载转化生长因子β3(TGF-β3)甲基丙烯酰化肝素(HepMA)对牙髓干细胞(DPSCs)成骨分化能力的促进作用,阐明其可能的作用机制。方法:体外分离培养人牙髓干细胞(hDPSCs)并通过流式细胞术进行细胞鉴定。合成光固化HepMA水凝胶,利用扫描电子显微镜观察材料表面形态特征。合成载不同浓度(20、40、60、80和100μg·L^(-1))TGF-β3的HepMA(TGF-β3-HepMA),采用其浸提液分别培养hDPSCs 1、3和5 d,同时设对照组,采用CCK-8法筛选出载TGF-β3的最适浓度。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各时间点TGF-β3-HepMA中TGF-β3的累积释放量并绘制药物释放曲线。hDPSCs分为对照组、HepMA组和载最适浓度TGF-β3的HepMA(TGF-β3-HepMA)组,加入含有相对应浸提液的培养基培养24 h,配制成骨诱导液分别诱导hDPSCs 7、14和21 d,采用碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红染色法检测各组细胞ALP染色及钙结节形成情况,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中成骨相关因子mRNA表达水平。结果:分离培养的hDPSCs在光学显微镜下观察呈长梭形;流式细胞术检测,培养的hDPSCs中CD105和CD90呈阳性表达,CD34和CD45呈阴性表达,验证本研究中分离培养的细胞为hDPSCs。扫描电子显微镜(SEM)观察,HepMA平均孔径为50~70μm。ELISA法检测,TGF-β3在7 d内呈突释阶段后缓慢释放,21 d左右达到平衡。CCK-8法检测,与0μg·L^(-1) TGF-β3-HepMA组比较,20、40和60μg·L^(-1) TGF-β3-HepMA组hDPSCs增殖率呈剂量依赖性升高(P<0.05),故载TGF-β3的最适浓度为60μg∙L^(-1)。成骨诱导7和14 d时,与对照组和HepMA组比较,TGF-β3-HepMA组细胞中ALP染色面积最大且染色颜色最深,14 d时细胞中ALP染色较7 d时更加明显;成骨诱导21 d时,与对照组和HepMA组比较,TGF-β3-HepMA组细胞中茜素红染色的矿化钙结节面积最大。RT-qPCR法检测,培养7和14 d时,与对照组比较,HepMA组和TGF-β3-HepMA组细胞中Runt相关转录因子2(Runx2)、ALP、骨钙桥素(OCN)和Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)mRNA表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与HepMA组比较,TGF-β3-HepMA组细胞中Runx2、ALP、OCN和COL-ⅠmRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:载TGF-β3的HepMA能够提高hDPSCs成骨分化能力,其机制可能与上调成骨相关因子的表达有关。

关键词： 胰腺癌   微小RNA   转化生长因子-β诱导基因-克隆3   侵袭性  

摘要： 目的观察微小RNA-200c(miR-200c)对人胰腺癌细胞株PANC-1中转化生长因子-β诱导基因-克隆3(βig-h3)表达的影响。方法将miR-200c前体片段和阴性对照片段分别转染到PANC-1细胞中。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后的PANC-1细胞中miR-200c和βig-h3的表达。应用Transwell实验检测转染后PANC-1细胞的侵袭能力。采用t检验。结果转染miR-200c前体片段和阴性对照片段的PANC-1细胞中miR-200c的相对表达值分别为1.00±0.12和0.17±0.06,差异有统计学意义(t=3.008,P<0.05)。βig-h3的相对表达值分别为0.21±0.16和0.71±0.23,差异有统计学意义(t=2.236,P<0.05)。转染miR-200c前体片段和阴性对照片段的PANC-1细胞平均穿膜细胞数分别为(65.00±18.19)和(308.00±5.73)个,差异有统计学意义(t=2.107,P<0.05)。结论miR-200c可以抑制胰腺癌细胞的侵袭能力,可能与下调βig-h3的表达有关。