关键词： 尿失禁,压力性   转化生长因子β3   层黏连蛋白   松弛素  

摘要： 目的:探讨转化生长因子β-3(TGFβ-3)、层黏连蛋白(Lamin)和松弛素(Relaxin)mRNA的表达与压力性尿失禁(SUI)鼠发病的关系。方法:分别提取SUI模型鼠与正常大鼠(各8只)的阴道前壁及肛提肌组织,提取组织中RNA,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法分别测定上述3种因子含量的变化。结果:SUI大鼠与正常大鼠比较,阴道前壁和肛提肌中TGFβ-3 mRNA和Lamin mRNA的表达明显降低,Relaxin mRNA的表达明显增高,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:SUI的发生与阴道前壁及肛提肌组织中TGFβ-3、Lamin表达减少、Relaxin表达增多有关。

关键词： 岩藻糖基转移酶类   受体   转化生长因子β   RNA   小分子干扰   Smad蛋白质类   肾小管上皮细胞  

摘要： 目的探讨α-1，6核心岩藻糖基转移酶（FUT8）小分子干扰RNA（siRNA）对肾小管上皮细胞转化生长因子（TGF）β．Smad2／3信号通路的影响。方法HK．2细胞共分为6组：正常组、阴性对照组、TGF-β1组、TGF-β1加FUT8干扰组、TGF-β1加阴性对照组、FUT8干扰组。利用外源性TGF-β1激活HK-2细胞TGF-β—Smad2／3信号通路。应用siRNA技术沉默FUT8。用免疫荧光方法测定细胞表面核心岩藻糖链表达；用免疫沉淀、凝集素免疫印迹以及免疫双染的方法测定FUT8基因沉默后TGF-αⅡ型受体（TGF-βRⅡ）、TGFα-Ⅰ型受体（ALK-5）的核心岩藻糖基化变化，并检测Smad2／3蛋白表达和磷酸化（P）．Smad2／3蛋白表达及其核转位的变化。结果与正常组及阴性对照组相比，加入5p^g／L的TGF-β1孵育HK-2细胞48h，能显著上调TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白表达水平（P〈0．05），导致p-Smad2／3表达水平明显升高（P〈0．05），并促使其发生核转位。HK-2细胞表面存在核心岩藻糖链表达。与正常组及阴性对照组相比，TGF-β1孵育后，TGF-βRⅡ与ALK-5两种受体的核心岩藻糖链均显著升高（P〈0．05），FUT8siRNA能显著抑制TGF-βRII与ALK-5核心岩藻糖链表达（P〈0．05），从而抑制P—Smad2／3表达升高（P〈0．05）及其核转位，但不影响TGF-βRⅡ和ALK-5的蛋白表达（P〉0．05）。结论在肾小管上皮细胞中，TGF-βRⅡ和ALK-5蛋白翻译后的核心岩藻糖基化修饰是它们发挥生物学功能所需要的，阻止TGF-βRⅡ和ALK-5的核心岩藻糖基化，能抑制TGF-β—Smad2／3信号转导通路的活化。

关键词： 肝硬化   转化生长因子β3   cAMP反应元件结合蛋白质  

摘要： 目的观察转化生长因子β3（TGF—β3）自反馈调节信号通路中正向调节因子的作用。方法用外源性TGF—β3诱导大鼠肝星状细胞系（HSC—T6），在不同时间点用荧光素酶报告基因分析法检测TGF．83的启动子活性，Western印迹法检测cAMP反应元件（CRE）结合蛋白1（CREB-1）和磷酸化CREB-1的表达，实时荧光定量PCR法检测CREB-1mRNA的表达情况。结果外源性TGF—β3处理HSC—T6后，TGF—β3启动子活性表现出时间依赖性增高，并于诱导后24h达峰值[10．68±0．57，2．2倍于对照组（4．83±0．56）]。TGF-β3启动子的基础活性下降了85％（0．73±0．03，P〈0．05）。外源性TGF-β3可在短时问内上调磷酸化CREB-1的表达，与对照组（比值为1）相比，15min即可见明显增加（1．5倍于对照组），1h时其表达量达到最大值（2．0倍于对照组），12h略见下降（1．9倍于对照组，均P〈0．05）。外源性TGF-β3对HSC—T6中CREB-1 mRNA和CREB-1蛋白的表达均无影响（均P〉0．05）。结论外源性TGF—β3可促进TGF—β3启动子活性增强，且CRE位点在外源性TGF—β3介导的TGF—β3启动子活性中发挥重要作用；外源性TGF—β3可活化CREB-1，但不能促进CREB-1蛋白及mRNA的表达。

关键词： 腭裂   2,3,7,8-四氯二噁英   转化生长因子β3  

摘要： 目的探讨转化生长因子(TGF-β3)在2,3,7,8-四氯二噁英(TCDD)诱导C 57 BL/6 J胎鼠腭裂发生中的作用。方法在小鼠怀孕第10 d(GD 10),二噁英组以TCDD 64μg/kg灌胃,对照组以玉米油16 mL/kg灌胃,于GD18.5解剖显微镜下观察胎鼠腭裂发生率,并于GD 13.5、14.5、15.5剪取胎鼠腭突组织提取RNA及蛋白,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和western blot分别检测腭突组织中TGF-β3 mRNA和TGF-β3蛋白表达情况。结果二噁英组腭裂发生率为100%(39/39),对照组无腭裂发生(0/42);在GD 13.5、14.5、15.5时,二噁英组TGF-β3 mRNA相对表达量分别为(0.392±0.056)、(0.467±0.064)、(0.192±0.032),明显高于对照组(0.081±0.020)、(0.178±0.011)、(0.113±0.016)(P<0.05);二噁英组TGF-β3蛋白相对表达量分别为(0.046±0.009)、(0.089±0.015)、(0.028±0.003),明显高于对照组(0.017±0.001)、(0.039±0.003)、(0.005±0.001)(P<0.05)。结论 TCDD可诱导C 57 BL/6 J胎鼠形成腭裂,并明显上调胎鼠腭突组织中TGF-β3表达。

关键词： 转化生长因子-β   肺癌   增殖   脱噬作用  

摘要： 目的探讨转化生长因子-β（TGF-β）在人肺癌细胞株A549中对细胞增殖的影响及其机制。方法通过抑制组50例和促进组50例两个方面验证TGF-β对肺癌细胞株A549的促增殖作用，噻唑蓝（MTT）比色法测定细胞增殖速率，流式细胞仪检测细胞的早晚期凋亡和细胞增殖状态。结果经过siTGF-βR2处理的细胞，细胞增殖率为（91．8±2．3）％，增殖能力明显减弱；而经过mTGF-β处理的细胞，细胞增殖率为（112．8±5．6）％，增殖能力则明显增强。流式细胞仪结果显示各组的凋亡率分别为：空白组（6．81±0．11）％，随机干扰siRNA组为（6．75±0．12）％，rhTGF-β1组为（6．10±0．10）％，siTGF-βR2组为（7．77±0．09）％，LY294002组为（7．82±0．14）％。结论TGF-β通过P13K／AKT信号通路促进人肺腺癌细胞株A549的增殖。

关键词： 转化生长因子β3   面神经   胶原纤维酸性蛋白   巢蛋白  

摘要： 目的:探讨外源性转化生长因子β_3(Transforrning growth factorβ_3,TGF-β_3)对动物面神经愈合的作用。方法:采用新西兰大白兔面神经损伤模型,将50 ng/μg TGF-β_3注射到神经切断嵌入的硅胶管明胶海绵内,16只成年兔随机分为1周组及3月组。两组内右侧面神经上颊支为实验组,左侧为对照组;通过GFAP(胶原纤维酸性蛋白)及Nestin(巢蛋白)等免疫组织化学染色方法进行愈合评估。结果:给予TGF-β_3的1周组Nestin及GFAP,3月组Nestin及GFAP及1周组与3月组Nestin及GFAP与对照组之间都统计学有差异。结论:在外源性TGF-β_3作用可促进内源性TGF-β_3产生或共同通过Smad通路引起神经损伤后修复标志物Nestin及GFAP的表达增加,这表明TGF-β_3在面神经的损伤后修复起促进愈合作用。

关键词： 转化生长因子β3   腺相关病毒   软骨   骨髓间充质干细胞   Ⅱ型胶原   蛋白多糖  

摘要： 背景:内源性诱导软骨分为就是通过一定的载体将目的基因整合入干细胞内,使其自行分泌诱导因子诱导自身进行分化。目的:观察将转化生长因子β3通过腺相关病毒载体转染诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨表型转化的能力。方法:取体外培养的第3代骨髓间充质干细胞进行重组腺相关病毒转染,将转染后3,6,9,12d细胞裂解提取蛋白进行酶联免疫检测目的蛋白转化生长因子β3的体外表达。RT-PCR,免疫印迹westernblot分别从基因和蛋白水平上检测1,2周Ⅱ型胶原的表达,甲苯胺蓝染色检测1,2周蛋白多糖的表达。结果与结论:重组腺相关病毒转染后,骨髓间充质干细胞可以较稳定的表达目的蛋白转化生长因子β3,并且转染成功的骨髓间充质干细胞较阴性对照组能够更好的向软骨表型转化。证实转化生长因子β3可以腺相关病毒为载体转染骨髓间充质干细胞并诱导其向软骨表型分化。

关键词： 糖尿病   α3   β1整合素   转化生长因子β1   厄贝沙坦  

摘要： 目的探讨糖尿病大鼠肾脏TGF-β1及α3、β1整合素的相关性及厄贝沙坦对其的影响。方法 30只8周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别为正常对照组(对照组,n=7)、糖尿病对照组(DM组,n=14)和厄贝沙坦干预组(DM+Irb组,n=9),一次性腹腔注射链脲菌素造糖尿病大鼠模型,造模成功4周后开始灌胃法给予相应计量厄贝沙坦干预8周。ELISA测定各组大鼠24尿白蛋白排泄率,PAS染色观察肾脏病理变化,免疫组化法半定量足细胞密度,实时荧光定量PCR检测各组大鼠肾脏TGF-β1、α3、β1整合素mRNA的表达。结果糖尿病大鼠肾脏TGF-β1mRNA的表达显著升高,伴α3、β1整合素mRNA的表达减少,足细胞密度降低,蛋白尿增加,厄贝沙坦干预后上述现象改善。结论糖尿病大鼠肾脏TGF-β1可能通过调控α3、β1整合素mRNA的表达,减少足细胞,抑制此途径可能是厄贝沙坦发挥肾保护作用的机制之一。

关键词： 硫代乙酰胺   小鼠肝损伤   肝纤维化模型   转化   病理过程   慢性肝病   病理改变   肝硬化  

摘要： 硫代乙酰胺（TAA）是一种弱致癌物,具有肝毒性。其诱导的肝纤维化模型简单可靠,造模时间短,模型成功率高,且形成相对稳定[1]。肝纤维化是多种慢性肝病共有的病理过程。目前,肝纤维化仍是影响肝硬化发病率和病死率的重要原因[2]。肝纤维化是可逆的病理改变,而肝硬化是不可逆的。因此。

关键词： 脑胶质瘤   转化生长因子β_2   Smad3   免疫组织化学  

摘要： 目的探讨人脑胶质瘤组织中转化生长因子β2(TGF-β2)、Smad3蛋白表达水平与患者预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测80例人脑胶质瘤组织TGF-β2、Smad3蛋白表达水平,并分析其与患者无进展生存期及总生存期的关系。结果 TGF-β2蛋白和Smad3蛋白在不同级别胶质瘤之间表达具有显著性差异(P<0.05),其表达与病理级别呈正相关(r=0.545,r=0.570,P<0.01)。将所有患者分为TGF-β2或Smad3高表达组和低表达组,其无进展生存期和总生存期均有显著性差异(P0.05)。结论 TGF-β2、Smad3蛋白表达与胶质瘤发生及恶性程度相关;检测两者表达情况可为脑胶质瘤的临床诊治及预后判断提供依据。