关键词： 慢性萎缩性胃炎   转化生长因子-β1   Smad3   结缔组织生长因子   幽门螺杆菌  

摘要： 目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、结缔组织生长因子(CTGF)在慢性萎缩性胃炎中的表达及意义,以及Hp感染对慢性萎缩性胃炎的发生及上述因子的影响。方法采用免疫组化法检测128例慢性胃炎胃窦及胃体组织中TGF-β1、Smad3、CTGF的表达情况。幽门螺杆菌经13C呼气试验及快速尿素酶法检测。结果 TGF-β1和CTGF在萎缩性胃窦炎中Hp阳性及阴性患者间表达差异均有统计学意义(P<0.05),在非萎缩与萎缩性胃炎患者间表达差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1、CTGF随着萎缩程度的加重阳性细胞数增多。Smad3在非萎缩与萎缩组间表达有统计学差异(P<0.05)。在胃体部,TGF-β1、Smad3、CTGF主要表达于固有腺细胞中,在萎缩性胃体炎中可见间质中CTGF,TGF-β1及Smad3表达增多。结论 TGF-β1和CTGF可能在萎缩性胃炎的发生、发展中起重要的作用;Hp感染促进及加剧了萎缩性胃炎的发生。

关键词： 组织工程   细胞存活   胶原   胰岛素样生长因子I   转化生长因子β3  

摘要： 目的为肌腱组织工程筛选出一种优化的人肌腱细胞培养基，即使在不添加胎牛血清（fetalbovineserum，FBS）的条件下，通过优化培养基构成维持其存活并分化。方法在α—MEM培养基中，加入最佳组合的生长因子（growthfactors，GF），同时加入不同浓度的FBS（0、1％、5％和10％）和不同浓度的IGF-1（0、10、50ng／ml），TGFβ—3（0、1、10ng／ml），用拉马拉蓝染色法检测人肌腱细胞的生存情况、增殖速度，用天狼星红定量胶原合成。结果在无FBS情况下，含有10ng／mlTGFβ—3和50ng／mlIGF-1两种生长因子的α-MEM培养基中培养14d后，人肌腱细胞依旧存活（6228．68±43．87），高于其他实验组，但低于10％FBS对照组（13576．74±286．75，t=41．29，P〈0．05），胶原合成量[（0．322±0．003）ng]明显大于未添加生长因子组（t=4．13～5．93，P〈0．05）。结论添加50ng／mlIGF-1和10ng／mlTGFβ—3优化的α-MEM培养基可维持人肌腱细胞存活长达14d并促进肌腱细胞分化，而不必添加FBS。

关键词： 转化生长因子β3   腺病毒   转染   髓核细胞   椎间盘退变  

摘要： 背景:通过基因干扰促进某些基因的表达,调控细胞生物学活性刺激有利于椎间盘组织再生的基质合成来达到治疗目的。目的:构建含有转化生长因子β3的腺病毒表达载体,观察其对退变髓核细胞增殖的影响。方法:制作椎间盘突变模型,从而获取原代退变椎间盘髓核细胞,提取总RNA,调取转化生长因子β3cDNA克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV,采用pAdEasy系统进行细菌内同源重组得到含目的基因的腺病毒载体,脂质体转染293A细胞进行包装并扩增病毒。结果与结论:成功构建有较强感染能力的含转化生长因子β3基因重组腺病毒表达载体,滴度达1010pfu/L,MTT法检测表明Ad-TGF-β3可改善退变髓核细胞生物学特性,为研究转化生长因子β3的作用机制及将其用于椎间盘退变的基因治疗提供实验和理论依据。

关键词： 胃癌细胞   体外培养   转化生长因子-β1   βig-h3  

摘要： 目的研究胃癌细胞SGC-7901培养上清液及转化生长因子-β1(TGF-β1)是否可促进人类腹膜间皮细胞表达βig-h3蛋白。方法培养胃癌细胞SGC-7901,取第3天培养液上清与DMEM培养液的混合液(1∶4)以及0、1.0、10.0和50.0 ng/ml的TGF-β1分别刺激人类腹膜间皮细胞HMrSV5 0、3、6、12及24 h,ELISA方法检测上清液中βig-h3蛋白浓度,Western blot法检测细胞内βig-h3蛋白浓度。结果对照组有基础量的βig-h3蛋白表达;胃癌细胞SGC-7901培养上清液及TGF-β1均可明显增加HMrSV5细胞上清液及细胞内的βig-h3蛋白浓度(P<0.05),且TGF-β1的刺激作用呈时间及浓度依赖性。结论胃癌细胞SGC-7901培养上清液及TGF-β1可明显刺激HMrSV5细胞表达和分泌βig-h3蛋白。

关键词： 转化生长因子β1   Samd3   胚胎   心脏  

摘要： 目的观察胚胎Wistar大鼠心脏发育过程中转化生长因子(TGF)-β1、Smad3的表达,探讨其在胚胎心脏发育的意义。方法 28只月龄、体质量均相当的Wistar大鼠,随机分为7组,每组4只,分别在妊娠E12、E13、E14、E15、E16、E17、E18时麻醉,行剖宫术取出胎鼠,取其心脏,液氮保存。采用RT-PCR法检测其TGF-β1、Smad3在妊娠E12～E18胚胎心脏中的表达。结果妊娠E12～E18时,TGF-β1和Smad3表达由弱到强再减弱;TGF-β1表达高峰出现在E14,Smad3高峰出现在E17。结论 TGF-β1/Smad3信号通路对大鼠胚胎的心脏发育起一定的调控作用。

关键词： 转化生长因子β   全反式维甲酸   胶原Ⅲ型   信号转导子和转录激活子3   活化STAT3蛋白抑制剂  

摘要： 目的:研究全反式维甲酸(ATRA)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HFL-I)中Ⅲ型胶原(collagenⅢ)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)和活化STAT3蛋白抑制剂(PIAS3)表达的影响。方法:体外培养HFL-I细胞,5μg/L TGF-β1诱导0 h、6 h、12 h、24 h、48 h和72 h后,RT-PCR法检测colla-genⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,诱导0 d、1 d、3 d和5 d后,Western blotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。不同浓度维甲酸干预,24 h后用RT-PCR法检测collagenⅢ、STAT3和PIAS3 mRNA表达,3 d后用Westernblotting法检测STAT3和p-STAT3蛋白表达。结果:TGF-β1诱导后,HFL-I细胞中collagenⅢ和STAT3 mRNA表达明显上调,PIAS3 mRNA表达明显下调,STAT3和p-STAT3蛋白表达明显上调(P<0.05)。各浓度ATRA都下调TGF-β1诱导的HFL-I细胞中collagenⅢ、STAT3 mRNA和STAT3、p-STAT3蛋白的表达,上调PIAS3 mR-NA表达(P<0.05)。结论:ATRA可通过抑制TGF-β1诱导的HFL-I细胞collagenⅢ和STAT3表达、上调PIAS3表达而起到抗肺纤维化作用。

关键词： 乳腺癌   小干扰核糖核酸   乳腺癌扩增基因3   转化生长因子-β  

摘要： 目的观察小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性干扰乳腺癌扩增基因3(amplifiedin breast cancer 3,AIB3)对乳腺癌细胞转化生长因子-β(transforming growth factor-beta,TGF-β)通路关键分子smad2、smad3及转移相关分子基质金属蛋白-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的影响。方法制备3组靶向AIB3的特异性siRNA分别转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,采用逆转录-聚合酶联反应检测siRNA干涉效果以及smad2、smad3与MMP-9的表达水平变化。结果与空白对照组相比,3组合成的靶向特异性siR-NA均可有效抑制AIB3基因表达;干涉AIB3可同时显著下调smad2、smad3及MMP-9的表达水平。结论成功设计有效干扰AIB3的siRNA序列,在乳腺癌细胞中应用siRNA干扰AIB3可有效抑制TGF-β通路和转移相关通路关键分子的表达,干扰AIB3基因表达有可能成为临床治疗乳腺癌转移的有效策略。

关键词： 转化生长因子β1   纤维化   细胞外基质  

摘要： 目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)与Smad2/3信号传导介导肾小管上皮细胞转分化(EMT)与幼鼠慢性肾间质纤维化的相关性,以及血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)的干预作用。方法本研究以80只幼年雌性SD大鼠为实验动物,制备7/8肾切除残肾慢性进展性肾功能衰竭模型。模型成功后随机将动物分为假手术组、7/8肾切除未治疗组和7/8肾切除干预治疗组。以模型制备后第2、4、8、12周为不同时间点。检测各时间点大鼠肾组织常规病理;采用免疫组织化学染色检测残肾组织中TGF-β1、Smad2/3:α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏连蛋白及纤维连接蛋白(FN)在肾组织表达趋势。结果实验第2周时未治疗组肾小管间质大量炎性细胞浸润、肾小管上皮细胞肿胀、肾小管间隙加宽。至第12周未治疗组肾小管广泛扩张、基底膜增厚、皱缩或断裂,间质纤维化明显。而治疗组残肾组织病理变化较未治疗组有明显改善。免疫组织化学半定量分析显示未治疗组TGF-β1阳性细胞或阳性小管染色积分值呈逐渐升高趋势。对照组与未治疗组各时间点相比较差异有统计学意义(P<0.05)。Smad2/3表达趋势与TGF-β1相似。α-SMA蛋白表达趋势同步上调,E-钙黏连蛋白同步下调,未治疗组各时间点FN均呈现逐渐升高趋势(P<0.05)。未治疗组TGF-β1、Smad2/3、α-SMA、FN各指标不同时间点免疫组织化学蛋白染色积分值呈正相关,而与E-钙黏连蛋白表达趋势呈负相关(P<0.01)。干预组不同时间点TGF-β1、Smad2/3、α-SMA和FN蛋白表达趋势明显弱于未治疗组,但强于对照组,而E-钙黏连蛋白表达下调(P<0.01)。结论在幼年期肾损伤过程中,TGF-β1高表达与Smad2/3分子使其高表达,可能通过介导EMT导致肾小管间质区细胞外基质(ECM)异常合成与沉积,最终引起肾小管间质纤维化形成。早期给予ACEI干预可改善这种病理变化。

关键词： 肝硬化   星形细胞   转化生长因子-β3   细胞增殖   大鼠  

摘要： 目的探讨外源性转化生长因子-β3（TGF-β3）对大鼠肝星状细胞（HSC）分泌内源性TGF-β3及细胞增殖的影响。方法取大鼠HSC接种于12孔板，一组用不同浓度（0．08、0．4、2、10和50ng／ml）的外源性TGF-β3干预2h后收集上清液，另一组用10ng／ml外源性TGF-β3干预后在不同时间点（15min、30min、1h、2h、4h、8h、βh）收集上清液，应用ELISA法检测TGF-β3含量。另取HSC接种于96孔板，一组用不同浓度（0．001、0．005、0．02、0．08、0．32、1．25、5、20、100、500ng／ml）的外源性TGF-β3干预24h，另一组用5ng／ml外源性TGF-β3干预24和48h，用噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖情况。倒置显微镜下观察空白对照组和外源性TGF-β3干预组HSC的大体形态。结果当外源性TGF-β3浓度达2ng／ml时可明显促进内源性TGF-β3表达，随后内源性TGF-β3的表达量呈外源性TGF-β3浓度依赖性增长（F=210．168，P=0．00），该作用3h时达高峰[（0．845土o．028）ng／ml比（0．026±0．022）ng／ml]。外源性TGF-β3浓度≥0．32ng／ml时对HSC增殖有较弱的促进作用，但无剂量依赖关系（F=0．68，P=0．57）。经TGF-β3干预的HSC镜下形态与空白对照组相比未出现明显变化。结论外源性TGF-β3可促进HSC中内源性TGF-β3的表达，还可促进HSC增殖。外源性TOF-β3干预对HSC细胞大体形态无明显影响。

关键词： 组织转化生长因子-β1   肝脏细胞外基质   肝纤维化过程   Smad3蛋白   动态变化   胶原纤维   大鼠   细胞信号通路  

摘要： 肝纤维化是由于肝脏细胞外基质（ECM）合成和降解失衡，ECM过度沉积而发生的。研究结果显示各种细胞信号通路的激活在肝纤维化的发生过程中起重要作用。其中又以转化生长因子（TGF）-β1介导的信号转导通路影响为甚。