关键词： 转化生长因子β3   石墨烯   分子对接   吸附行为  

摘要： 石墨烯在进入人体后,因其本身有较大的比表面积和丰富的功能基团而吸附各种各样的生物大分子,但其具体的结合位点和自由能变化却不得而知,因此从微观角度研究石墨烯及其衍生物与生物大分子的吸附行为是至关重要的。本研究基于经典蛋白质-石墨烯材料的界面作用,研究转化生长因子β3与石墨烯C_(62)H_(20)表面的吸附行为。并在该理论基础上,采用基于密度泛函理论(DFT)的第一性原理及分子对接计算方法,得出石墨烯与转化生长因子β3的最佳结合位置在Cys7~Tyr21、Tyr39~Gly46残基附近。两者之间的最低结合能为-12.52 kcal/mol,结合亲和力为662.9 pmol/L。本研究的结论可为实验上探究转化生长因子β3与石墨烯C_(62)H_(20)的相互作用模式提供详细的微观细节和理论支撑。

关键词： 整合素avβ3   转化生长因子β1   胎盘   子痫前期   免疫组织化学  

摘要： 目的 探讨子痫前期患者胎盘组织中整合素αvβ3、转化生长因子β1(TGF-β1)的表达变化情况及意义。方法 以2020年12月至2021年12月在苏州明基医院住院分娩的子痫前期轻度患者20例、子痫前期重度患者20例、正常妊娠产妇20例为研究对象,用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接(SP)法来检测胎盘组织中整合素αvβ3和TGF-β1表达情况,并用计算机图像分析系统对正常、子痫前期轻度组、子痫前期重度组进行定量分析。结果(1)TGF-β1在3组间表达情况显示,子痫前期组高于对照组,且重度组高于轻度组,差异有统计学意义(χ2=6.468,P<0.05)。(2)整合素αvβ3在子痫前期组表达低于对照组,且重度组低于轻度组,差异有统计学意义(χ2=6.145,P<0.05)。在子痫前期组胎盘绒毛合体滋养细胞中两种因子不存在相关性(r=-0.223,P>0.05)。结论 与正常妊娠组比较,子痫前期患者胎盘组织整合素αvβ3的表达随病情的加重而逐渐减少;TGF-β1的表达随病情的加重而逐渐增加;二者在子痫前期组不存在相关性。

关键词： 慢性心力衰竭   心阳亏虚   参附汤   茯苓四逆汤   转化生长因子β1   Smad同源物3  

摘要： 目的探讨参附汤联合茯苓四逆汤治疗心阳亏虚型慢性心力衰竭患者的疗效及对其转化生长因子β1(transforming growth factor-β,TGF-β1)、Smad同源物3(Smad homolog 3,Smad3)表达的影响。方法选取2020年1月—2023年1月期间北京市怀柔区中医医院收治的90例心阳亏虚型慢性心力衰竭患者,按随机数字表法分为对照组和研究组,每组各45例。对照组予常规西医治疗,研究组在对照组的基础上加用参附汤合茯苓四逆汤治疗。4周为1个疗程,两组患者均治疗4个疗程。观察比较两组患者治疗前后心功能[左室舒张末期内径(Left ventricular end diastolic diameter,LVEDD)、左室收缩末期内径(Left ventricular end systolic diameter,LVESD)、左室射血分数(Left ventricular ejection fraction,LVEEF)、每搏输血量(Blood transfusion volume per stroke,SV)]、心衰因子[心型脂肪酸结合蛋白(Heart-type Fatty Acid Binding Protein,H-FABP)、脑钠肽(Natriuretic peptide,BNP)]、心肌纤维化指标[Ⅰ型前胶原氨基端前肽(Type I procollagen amino terminal peptide,PICP)、Ⅲ型前胶原氨基端末肽(TypeⅢprocollagen amino terminal peptide,PⅢNP)、心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin IcTnI)]、TGF-β1、Smad3表达量变化,评价活动耐力、心衰评分、明尼苏达评分、中医证候积分,并统计临床疗效及主要心血管不良事件(MACE)发生情况。结果治疗后两组患者心功能LVEDD、LVESD指标均较治疗前降低,LVEF、SV指标较治疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组心功能LVEDD、LVESD指标明显低于对照组,LVEF、SV指标明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者心衰因子H-FABP、cTnI、BNP水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组心衰因子H-FABP、cTnI、BNP水平均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者心肌纤维化PICP、PⅢNP水平均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组心肌纤维化PICP、PⅢNP水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者TGF-β1、Smad3表达量均较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组TGF-β1、Smad3表达量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者活动耐力较治疗前升高,心衰、明尼苏达评分较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组活动耐力评分明显高于对照组,心衰、明尼苏达评分均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者中医证候积分较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);且研究组中医证候积分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后研究组临床总有效率95.56%(43/45)明显高于对照组80.00%(36/45),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,研究组MACE发生率4.44%(2/45)明显低于对照组17.78%(8/45),差异有统计学意义(P<0.05)。结论参附汤合茯苓四逆汤可显著改善心阳亏虚型慢性心力衰竭患者临床症状及体征,降低TGF-β1、Smad3表达,抑制心肌纤维化,促进心脏功能恢复,效果理想。

关键词： 3-甲基腺嘌呤   肝脏星形细胞株   HSC-T6细胞   细胞活化   转化生长因子-β   细胞自噬   肝纤维化  

摘要： 目的观察3-甲基腺嘌呤(3-MA)对转化生长因子-β(TGF-β)诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬的影响。方法取对数生长期的HSC-T6细胞分为空白组、TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组。TGF-β+3-MA组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入3-MA(0.5 mg/mL)处理24 h,TGF-β+PBS组细胞加入浓度为2 ng/mL TGF-β培养72 h后加入等量PBS处理24 h,空白组加入等量PBS处理,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA,采用Western blotting法检测各组细胞活化标志物α-SMA、TGF-β蛋白和自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5蛋白。结果TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞活化标志物α-SMA、TGF-βmRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。TGF-β+PBS组、TGF-β+3-MA组细胞自噬标志物LC3、Beclin-1、Atg5 mRNA和蛋白均高于空白组,且TGF-β+3-MA组均低于TGF-β+PBS组(P均<0.05)。结论3-MA可抑制TGF-β诱导的大鼠肝星形细胞株HSC-T6活化及自噬。

关键词： 脊柱结核病灶清除术   利福平   脊柱结核   临床疗效  

摘要： 目的探讨脊柱结核(spinal tuberculosis,STB)患者采用STB病灶清除术联合利福平治疗对疗效及转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白细胞抑制因子2(drosophila mothers against decapentaplegic protein 2,Smad2)、白细胞抑制因子3(drosophila mothers against decapentaplegic protein 3,Smad3)的影响。方法选取2020年3月—2021年3月在博白县人民医院治疗的78例STB患者,按照随机数字表法分成观察组39例和对照组39例。2组均行STB病灶清除术,对照组给予常规治疗,观察组给予利福平治疗。比较2组临床疗效,TGF-β1、Smad2、Smad3水平,影像学检查结果及不良反应。结果观察组治疗总有效率(94.87%)高于对照组(79.49%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后2组TGF-β1、Smad2、Smad3水平降低,观察组较对照组更低(P<0.05);观察组矫正后丢失角度较对照组更低,观察组后凸矫正率较对照组更高(P<0.05);观察组不良反应发生率(7.69%)与对照组(10.26%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论STB患者采用STB病灶清除术与利福平联合治疗,可有效提高临床疗效,改善TGF-β1、Smad2、Smad3水平及影像学检查结果,安全性较高。

关键词： 奶山羊   chi-miR-345-3p   半胱天冬酶9   转化生长因子β3   乳腺上皮细胞  

摘要： 奶山羊非泌乳期乳腺正常退化对乳腺发育具有重要意义,其泌乳过程的具体调控机制目前尚未完全阐明。miRNA在乳腺发育中起着关键作用,可通过靶向细胞凋亡基因调节乳腺上皮细胞的退化。本实验室前期发现chi-miR-345-3p、chi-miR-29a-5p和chi-miR-1307-3p等miRNA在泌乳后期(LL)、干奶期(DP)和妊娠后期(LG)3个非泌乳阶段的山羊乳腺组织中鉴定为差异表达的miRNA;CASP9(Caspase-9,半胱天冬酶9)和TGFβ3(Transforming growth factor beta 3,转化生长因子-β3)鉴定为这3个非泌乳阶段的差异表达基因,并且为乳腺发育和泌乳网络的核心基因。 首先通过双荧光素酶试验、Western blot等试验确定chi-miR-345-3p等其他miRNA与CASP9和TGFβ3之间的靶向关系。通过q RT-PCR、CCK-8试验和流式细胞术检测chi-miR-345-3p等miRNA在非泌乳期山羊乳腺组织中的表达以及对山羊乳腺上皮细胞增殖和细胞周期的影响;确定CASP9和TGFβ3在非泌乳期山羊乳腺组织中的表达和定位以及其对山羊乳腺上皮细胞的功能。进一步明确了CASP9和TGFβ3对相关信号通路的调控作用。此外,还通过q RT-PCR和Western blot等试验确定了chi-miR-345-3p通过靶向CASP9和TGFβ3,对Smad/MAPK/PI3K-Akt信号通路以及p53/CCND1蛋白的调节影响,进一步丰富了对这一调控网络的认识。 主要结果如下: 1.证明chi-miR-345-3p对CASP9和TGFβ3均有靶向调控作用,与对照组相比chi-miR-345-3p对CASP9和TGFβ3荧光活性分别下调62.58%±13.98%(P<0.01)和58.65%±4.23%(P<0.001)。chi-miR-345-3p对t-CASP9蛋白表达量下调17.07%±4.21%(P<0.05);对c-CASP9蛋白表达量下调38.23%±5.47%(P<0.01);对TGFβ3蛋白表达量下调29.89%±2.01%(P<0.001)。与对照组相比,chi-miR-29a-5p对CASP9荧光活性下调96.72%±27.46%(P<0.01);对t-CASP9和c-CASP9表达量分别下调15.16%±3.94%(P<0.05)和8.06%±4.16%(P<0.01)。chi-miR-1307-3p对TGFβ3荧光活性下调58.65%±4.23%(P<0.001);对TGFβ3蛋白的表达水平下调29.55%±1.76%(P<0.001)。chi-miR-29a-5p和chi-miR-345-3p共转染后对CASP9的调控能力增强;chi-miR-1307-3p和chi-miR-345-3p共转染后调控能力增强。 2.证明chi-miR-29a-5p、chi-miR-345-3p和chi-miR-1307-3p均促进山羊乳腺上皮细胞的增殖,CASP9和TGFβ3均促进山羊乳腺上皮细胞的凋亡。chi-miR-29a-5p、chi-miR-345-3p和chi-miR-1307-3p在山羊乳腺上皮细胞中0h、24h、48h和72h四个时间点细胞增殖活性存在明显差异。与对照组相比72h时,过表达chi-miR-29a-5p和干扰chi-miR-29a-5p细胞增殖活性分别升高114.50%±4.38%(P<0.001)和降低91.21%±12.05%(P<0.001);过表达chi-miR-345-3p和干扰chi-miR-345-3p细胞增殖活性分别升高154.3%±14.1%(P<0.001)和降低117.9%±12.0%(P<0.001);过表达chi-miR-345-3p和干扰chi-miR-345-3p细胞增殖活性分别升高45.63%±1.93%(P<0.01)和降低38.78%±2.88%(P<0.01)。CASP9和TGFβ3在山羊乳腺上皮细胞中0h、24h、48h和72h四个时间点细胞增殖活性存在明显差异。72h时,干扰CASP9细胞增殖活性显著升高148.03%±9.06%(P<0.001);过表达CASP9细胞增殖活性显著降低59.15%±9.71%(P<0.001)。干扰TGFβ3细胞增殖活性升高102.2%±0.06%(P<0.001);过表达TGFβ3细胞活性降低44.3%±6.2%(P<0.001)。 3.在山羊乳腺上皮细胞中干扰TGFβ3激活MAPK信号通路而TGFβ3的过表达抑制MAPK信号通路。干扰TGFβ3使p-MAPK/MAPK的比值极显著增加(P<0.001);过表达TGFβ3极显著减少了p-MAPK/MAPK的比

关键词： 骨关节炎   转化生长因子-β3   四面体框架核酸   干细胞疗法  

摘要： 研究背景 骨关节炎(Osteoarthritis,OA)是以关节软骨退行性和不可逆的损伤为特征,老年人中最常见的慢性关节疾病,目前尚无修复受损关节软骨的有效手段。骨髓间充质干细胞(MSCs)在保护OA软骨方面发挥重要作用。近期研究表明,激活内源性MSCs生物学功能,是保护OA受损软骨的关键策略之一。转化生长因子-β3(TGF-β3)是高度保守的TGF-β超家族的重要成员,也是体外常用的成软骨诱导物。但由于较短的关节内半衰期和毒副作用,使其在OA体内治疗的应用受限。四面体框架核酸(TFNA)是一种新型的DNA纳米材料,在生物医学领域显示出巨大的潜力,被广泛应用于各种炎症性疾病治疗中。据报道,一种名为HM69的DNA适配体可以识别和招募MSCs,将HM69连接在TFNA中或可构建一个靶向MSCs的药物框架。因此,在本研究中,我们构建了具有靶向功能的载药框架HM69-TFNA,并结合TGF-β3形成HM69-TFNA@TGF-β3复合物(HTT),有望克服TGF-β3单药在关节内应用的局限性,为干细胞疗法治疗OA提供新策略。 方法 本研究利用碱基互补配对的方法构建HM69-TFNA载药框架(HT)。并在HT上修饰二硫键,使用异-双官能试剂SPDP通过酶链反应结合TGF-β3形成HTFNA-TGF-β3(HTT)。并检测HTT的形貌特征,粒径大小,Zeta电位,以及生物稳定性等表征。同时,我们检测了 HTT体外促进MSCs的生物功能,包括促增殖,促迁移,促成软骨分化,提高保护软骨细胞效能。并在内侧半月板失衡术(DMM)制造的OA模型小鼠上进一步验证HTT对OA的治疗作用。 结果 本研究成功的合成了 HM69-TFNA,并通过SPDP反应结合TGF-β3形成了HM69-TFNA@TGF-β3复合物(HTT)。体外检测HTT生物稳定性较好,具有良好的生物学功能,可以促进MSCs体外增殖,迁移;同时具有良好的诱导MSCs分化为软骨细胞的能力,并增强了其保护OA软骨细胞的能力。此外,体内试验结果也表明HTT具有良好的缓解OA疼痛作用,改善OA关节功能,保护OA软骨的作用。 结论 本研究首次创新性地合成了 HM69-TFNA@TGF-β3载药系统,通过靶向骨髓间充质干细胞递送药物提高TGF-β3的生物效能和关节内利用率,有效地保护OA软骨细胞,改善OA疼痛症状和病情进展。

关键词： 长链非编码RNA Meg3   腭裂   腭突间充质细胞   全反式维甲酸   转化生长因子β3   小鼠  

摘要： 目的:探索长链非编码RNA(lncRNA)Meg3在全反式维甲酸(atRA)和转化生长因子β3(TGF-β3)影响胎鼠腭突间充质细胞增殖过程中的作用。方法:分离、培养妊娠13 d胎鼠腭突间充质细胞。EdU法检测对照组(未处理)、atRA组(5μmol/L atRA)和TGF-β3组(10μg/L TGF-β3)处理48 h腭突间充质细胞增殖能力的变化。荧光原位杂交和实时荧光定量PCR法检测上述3组Meg3的定位和相对表达量。利用EdU实验检测Meg3 siRNA转染前后atRA和TGF-β3对腭突间充质细胞增殖的影响。结果:与对照组相比,atRA处理48 h可抑制腭突间充质细胞的增殖,TGF-β3处理48 h可促进腭突间充质细胞增殖(P<0.05)。与对照组相比,atRA可促进腭突间充质细胞中Meg3的表达,TGF-β3可抑制Meg3的表达(P<0.05)。Meg3基因沉默后,与对照组相比,Meg3 siRNA组、atRA和TGF-β3处理组胎鼠腭突间充质细胞增殖能力均增强(P<0.05)。结论:atRA对胎鼠腭突间充质细胞的增殖抑制作用可能主要通过Meg3介导,而TGF-β3对腭突间充质细胞增殖的促进作用可能与Meg3基因无直接关系。

关键词： 盆炎通络方   输卵管炎性阻塞性不孕   转化生长因子β1   Ⅱ型转化生长因子-β受体  

摘要： 目的:研究盆炎通络方对输卵管炎性阻塞性不孕症(Salpingitis Obstructive Infertility,SOI)模型大鼠转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、Ⅱ型TGF-β受体(TGF-βTypeⅡReceptor,TβRⅡ)和Smad3表达的影响,并探讨其作用机制。方法:采用双侧输卵管注射苯酚糊剂法制备SOI大鼠模型。造模成功后随机分为假手术组、模型组、康妇炎胶囊组、盆炎通络方低剂量组、盆炎通络方中剂量组、盆炎通络方高剂量组共6组。灌胃治疗30 d后,观察输卵管外观形态,并收集输卵管组织,采用苏木精-伊红染色法观察病理情况,免疫组化法检测输卵管组织中TGF-β1、TβRⅡ和Smad3表达。结果:肉眼观察,与模型组对比,各治疗组输卵管组织充血、肿胀现象均有不同程度的改善,以盆炎通络方高剂量组最为明显。光镜下,各治疗组均不程度地减轻了大鼠输卵管组织炎性反应、改善了输卵管组织纤维化。与假手术组对比,模型组输卵管组织中TGF-β1、TβRⅡ和Smad3表达量明显增加(P<0.01)。与模型组对比,各治疗组输卵组织中TGF-β1、TβRⅡ和Smad3表达量均减少(P<0.05,P<0.01)。结论:盆炎通络方是治疗SOI的有效方剂,其可能的机制是下调输卵管组织中TGF-β1及TβRⅡ和Smad3表达,减轻炎症反应、抑制输卵管组织纤维化,从而改善输卵管组织结构。

关键词： 骨关节炎,膝   穴位弹拨疗法   牵引术   针刀疗法   塞来昔布   基质金属蛋白酶3   转化生长因子β_(1)  

摘要： 目的观察弹拨牵引松解三部平衡法联合塞来昔布治疗膝骨关节炎(KOA)的临床疗效。方法将72例KOA患者按照随机数字表法分为2组。对照组36例予塞来昔布治疗,治疗组36例在对照组治疗基础上加弹拨牵引松解三部平衡法治疗,2组疗程均为4周。比较2组临床疗效及不良反应,比较2组治疗前后疼痛视觉模拟评分(VAS)、西安大略和麦克马斯特大学(WOMAC)骨关节炎指数评分(以下简称为WOMAC评分)、膝关节活动度、Lysholm膝关节评分及基质金属蛋白酶3(MMP-3)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、内皮素-1(ET-1)水平。结果治疗后,2组疼痛VAS、WOMAC评分均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组膝关节活动度、Lysholm膝关节评分均较本组治疗前增加(P<0.05),且治疗组均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组MMP-3、ET-1水平均较本组治疗前降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组TGF-β_(1)水平均较本组治疗前升高(P<0.05),且治疗组高于对照组(P<0.05)。治疗组总有效率91.7%(33/36),对照组总有效率75.0%(27/36),治疗组总有效率高于对照组(P<0.05)。2组均未见不良反应。结论弹拨牵引松解三部平衡法联合塞来昔布可提高KOA患者的治疗效果,缓解疼痛,抑制炎症反应,改善血管内皮损伤和膝关节功能,安全性高,值得临床推广。