关键词： Runx3基因   转化生长因子β   信号传导通路   Runx1   Runx2   造血相关基因   染色体易位   树状突细胞  

摘要： 人Runx家族包括三个成员,分别是Runx1、Runx2和Runx3基因,它们的基因产物在结构上具有许多相似之处,但功能各不相同。Runx1可调节造血相关基因的表达,是白血病染色体易位最常见的靶位点;Runx2对骨组织的形成和重建起重要作用,是骨细胞的特异转录因子;Runx3参与了多种生理过程,包括神经和树状突细胞的成熟等。

关键词： 补体C3f去精氨酸片段   系统性硬化症   皮肤纤维化   转化生长因子-β1  

摘要： 目的探讨补体C3f去精氨酸片段(DRC3f)对于系统性硬化症(SSc)小鼠皮肤纤维化模型构建和转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法采用DRC3f联合博来霉素皮下注射的方法构建SSc小鼠模型,并用纤维染色和免疫组化方法比较联合与不联合DRC3f对SSc小鼠皮肤纤维化、皮肤增厚程度和TGF-β1表达的影响。结果联合DRC3f和博来霉素注射组与单用博来霉素和博来霉素联合无关多肽组比较,皮肤纤维化程度更加明显,TGF-β1的表达也明显增多(P<0.05)。结论 DRC3f能够促进SSc模型小鼠皮肤纤维化和炎症因子TGF-β1的表达。

关键词： 肝硬化   转化生长因子β1   磷脂酶类   点突变  

摘要： 目的探讨patatin样磷脂酶域(PNPLA3)I148M基因突变在非酒精性脂肪性肝纤维化发生发展中的作用机制。方法构建携带PNPLA3 I148M基因突变型和野生型的慢病毒载体,转染大鼠肝星状细胞(HSC-T6),采用实时荧光定量PCR的方法检测转化生长因子(TGF)β1 mRNA的表达水平。采用t检验进行组间比较。结果构建了携带PNPLA3 I148M突变型和野生型的慢性病毒载体,并成功转染HSC-T6细胞,建立了能够稳定表达PNPLA3突变型和野生型基因的HSC-T6细胞系;PNPLA3 I148M突变型与野生型相比,TGFβ1 mRNA相对表达量明显上调,差异具有统计学意义(1.25±0.15 vs 0.48±0.07,t=11.826,P<0.001)。结论PNPLA3 I148M基因突变能够促进HSC中TGFβ1的表达,为进一步探讨PNPLA3 I148M基因突变在非酒精性脂肪性肝纤维化中的作用提供了细胞模型和新的研究思路。

关键词： 牙髓干细胞   转化生长因子-β3   肝素   成骨向分化   兔  

摘要： 目的探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β_3联合肝素在体外诱导兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSCs)成骨向分化中的能力。方法新西兰幼兔4只,采用酶解组织块法分离培养兔DPSCs,传代培养至第3代兔DPSCs,分为空白对照组、TGF-β_3组和TGF-β_3+肝素组;空白对照组正常培养,TGF-β_3组在细胞培养基中加入20μg/L TGF-β_3,TGF-β_3+肝素组在细胞培养基中同时加入20μg/L TGF-β_3和5u/mL肝素。采用碱性磷酸酶(alkailine phosphate,ALP)试剂盒检测各组兔DPSCs成骨向诱导后第7、14天细胞内ALP活性,细胞爬片采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物RUNT相关转录因子2(runt related transcription factor 2,RUNX-2)和骨钙素(osteocalcin,OC)表达情况,采用茜素红染色观察矿化结节形成情况。结果兔DPSCs在诱导体系中生长状态良好;TGF-β_3+肝素组第7、14天ALP活性[(27.20±1.01)、(29.06±1.39)u/(mg·pro)]高于TGF-β_3组[(12.69±1.03)、(9.44±1.05)u/(mg·pro)]和对照组[(5.96±3.68)、(6.10±3.66)u/(mg·pro)](P<0.01),TGF-β_3组高于对照组(P<0.01);TGF-β_3组和TGF-β_3+肝素组成骨诱导第7天RUNX-2开始出现阳性表达,第14天OC有阳性表达,对照组均为阴性;第21天茜素红染色对照组为阴性,TGF-β_3组为阳性,TGF-β_3+肝素组为强阳性。结论肝素有促进TGF-β_3体外诱导兔DPSCs成骨向分化的能力。

关键词： 转化生长因子-β3   纤维连接蛋白   绝经   子宫肌瘤   子宫肌层  

摘要： 目的:探讨转化生长因子(TGF)-β3与纤维连接蛋白(FN)在绝经或未绝经妇女子宫肌瘤及子宫肌层中表达的水平变化及其意义。方法:采用免疫组化法(SP)检测40例绝经后子宫肌瘤妇女(绝经组)、40例未绝经子宫肌瘤妇女(未绝经组)肌瘤组织及肌壁组织中的TGF-β3、FN的表达差异,同时将绝经组妇女根据肌瘤是否发生萎缩分为萎缩组(17例)、未萎缩组(23例)并进行上述指标的比较。结果:绝经组的肌瘤组织、肌壁组织中的TGF-β3表达评分分别为(3.11±0.78)分、(1.85±0.69)分均显著的低于未绝经妇女的(3.98±0.67)分、(2.31±0.82)分(P<0.05);两组妇女肌瘤组织和肌壁组织中的FN表达评分差异不显著(P>0.05)。子宫肌瘤萎缩和未萎缩患者的子宫肌瘤组织、肌壁组织中TGF-β3、FN表达在两组间差异均不显著(P>0.05),萎缩组和未萎缩组的肌瘤组织TGF-β3表达分别为(2.90±0.65)分、(3.32±0.74)分均显著的高于本组肌壁组织中的(1.85±0.67)分、(2.25±0.61)分(P<0.05);两组肌瘤和肌壁组织中的FN表达差异不显著(P>0.05)。结论:TGF-β3表达可能与患者绝经前后的激素水平改变有关。

关键词： 牙髓干细胞   转化生长因子-β3   增殖   骨分化  

摘要： 目的探讨转化生长因子-β3（transforminggrowthfactor-β3，TGF-β3）对体外培养的兔牙髓干细胞（dentalpulpstemceils，DPSCs）增殖和分化的影响。方法采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养获得DPSCs，光镜下行形态学观察；将体外培养的第3代DPSCs分为5组，分别为对照组、20μg／LTGF-β3组、40μg／LTGF-β3组、80tag／LTGF-β3组和100μg／LTGF-β3组，分别加入0、20、40、80、100μg／LTGF-β3；采用MTT法检测5组DPSCsA490值，采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物骨钙素（osteocalcin，OC）、I型胶原酶（collagenI，Col—I）、骨涎蛋白（bonesialoprotein，BSP）表达情况，采用茜素红染色检测出现矿化结节情况，并进行比较。结果兔DPSCs呈集落状生长，在体外有一定克隆形成能力；对照组及20、40、80、100μg／LTGF-β3组兔DPSCsA490值分别为0．34±0．55、0．34±0．19、0．33±0．47、0．334±0．30、0．34±0．47，各组间两两比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；80、100μg／LTGF—B3组诱导后第3天出现Col—I阳性表达，第7天开始消失，第5-7天出现BSP阳性表达，第7-14天出现0c阳性表达，第7天出现矿化结节；40μg／LTGF-β3陆组第5-7天均有Col—I阳性表达，第7天出现BSP阳性表达，第14天出现OC阳性表达，第14天出现矿化结节；20μg／L组第7天出现Col—I阳性表达，第14天消失，第14天出现BSP阳性表达，第21天出现OC阳性表达，第21天出现矿化结节；对照组Col-I、BSP和OC均为阴性，未出现矿化结节。结论TGF-β3风对体外培养的兔DPSCs增殖无影响，但对兔DPSCs向成骨细胞分化能力有一定促进作用，并在一定范围内呈浓度依赖关系。

关键词： 普伐他汀   洛沙坦   环孢素A   转化生长因子   转化生长因子诱导基因h3   大鼠  

摘要： [目的]探讨普伐他汀和洛沙坦联合应用对慢性环孢素A(CsA)肾毒性模型大鼠抗纤维化作用的分子机制.[方法]取Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为对照组(橄榄油1mg/kg)、CsA毒性组(皮下注射CsA 15mg/kg)、洛沙坦治疗组(洛沙坦10mg/kg+CsA)、普伐他汀治疗组(普伐他汀20mg/kg+CsA)、联合治疗组(CsA+洛沙坦+普伐他汀),均每日给药1次,持续4周.检测各组大鼠肾功能、收缩期血压、血脂水平;利用三色染色观察肾组织纤维化程度;利用Northern杂交、RNA原位杂交、免疫印迹法分别检测转化生长因子β1(TGF-β1)和TGF-β诱导基因h3(βig-h3)的表达.[结果]与CsA毒性组比较,普伐他汀和洛沙坦单独治疗组肾小管间质纤维化明显减轻(洛沙坦24.1%±4.0%,普伐他汀30.3%±5.2%,P<0.01,2.0%±3.0%),同时TGF-β1(洛沙坦230%±20%,普伐他汀240%±15%,P<0.01)和βig-h3(洛沙坦178%±21%,普伐他汀167%±10%,P<0.01)表达均明显降低,联合治疗进一步降低上述指标水平(肾小管间质纤维化程度13.5%±2.5%,TGF-β1 150%±28%,βig-h3 126%±9%,P<0.01).直线相关分析结果显示,βig-h3表达与TGF-β1(r=0.787,P<0.001)和肾小管间质纤维化程度(r=0.688,P<0.001)呈正相关.但是各组收缩期血压和血脂水平间差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]在慢性CsA肾毒性中,普伐他汀和洛沙坦联合应用通过抑制βig-h3表达起到抗纤维化协同作用,而不依赖于降低血压或降低血脂作用.

关键词： 丝氨酸蛋白酶A3   转化生长因子-β   免疫组织化学   酶联免疫吸附试验   子宫内膜异位症  

摘要： 目的探讨子宫内膜异位症(EMT)患者内膜组织中丝氨酸蛋白酶A3(Htr A3)、转化生长因子-β(TGF-β)及血清中Htr A3水平变化及其临床意义。方法选取2014年9月至2015年6月于佳木斯大学附属第一医院确诊的EMT患者30例(观察组)和卵巢囊肿患者30例(对照组),观察组患者取其异位内膜、在位内膜组织及外周血,对照组患者取其正常子宫内膜及外周血,采用免疫组织化学方法分别检测Htr A3、TGF-β在异位内膜、在位内膜及正常子宫内膜组织中的表达;应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Htr A3在2组患者血清中的水平。结果观察组患者异位内膜、在位内膜Htr A3表达水平显著低于对照组正常子宫内膜(P<0.01),且观察组患者异位内膜Htr A3表达水平显著低于在位内膜(P<0.01)。观察组患者异位内膜、在位内膜TGF-β表达水平显著高于对照组正常子宫内膜(P<0.01),且观察组患者异位内膜TGF-β表达水平显著高于在位内膜(P<0.01)。Htr A3与TGF-β水平在异位内膜组织中的表达呈负相关(r=-0.485,P<0.01)。与对照组比较,观察组患者术前、术后第2、7天血清Htr A3水平显著降低(P<0.01);观察组患者术前、术后第2天外周血中Htr A3水平均显著低于术后第7天(P<0.01);观察组患者术前血清中Htr A3水平与术后第2天比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EMT患者内膜组织中Htr A3、TGF-β的表达异常,可能在EMT发病的初始阶段发挥作用,血清中低水平表达的Htr A3可能有助于临床诊断和预后评估。

关键词： facial nerve injury   neural regeneration   transforming growth factor-beta 3  

摘要： The present study investigated the effects of transforming growth factor (TGF)-beta 3 on the regeneration of facial nerves in rabbits. A total of 20 adult rabbits were randomly divided into three equal groups: Normal control (n=10), surgical control (n=10) and TGF-beta 3 treatment (n=10). The total number and diameter of the regenerated nerve fibers was significantly increased in the TGF-beta 3 treatment group, as compared with in the surgical control group (P<0.01). Furthermore, in the TGF-beta 3 treatment group, the epineurial repair of the facial nerves was intact and the nerve fibers, which were arranged in neat rows, were morphologically intact with visible myelin swelling. However, in the surgical control group, the epineurial repair was incomplete, as demonstrated by: Atrophic nerve fibers, partially disappeared axons and myelin of uneven thickness with fuzzy borders. Electron microscopy demonstrated that the regenerated fibers in the TGF-beta 3 treatment group were predominantly myelinated, with clear-layered myelin sheath structures and axoplasms rich in organelles. Although typical layered myelin sheath structures were observed in the surgical control group, the myelin sheaths of the myelinated nerve fibers were poorly developed and few organelles were detected in the axoplasms. Neuro-electrophysiological examination demonstrated that, as compared with the surgical control group, the latency period of the action potentials in the TGF-beta 3 treatment group were shorter, whereas the stimulus amplitudes of the action potentials were significantly increased (P<0.01). The results of the present study suggest that TGF-beta 3 may improve the regeneration of facial nerves following trauma or injury.

关键词： 电针   抑郁   转化生长因子β3   碱性成纤维细胞生长因子   海马   神经血管再生  

摘要： 目的:观察电针对慢性应激模型大鼠海马转化生长因子β3(TGF-β3)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)蛋白表达的影响,探讨电针对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经的营养再生作用。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、电针组、氟西汀组,每组10只。除空白组外,其余组均采用慢性应激结合孤养方法造模28d。电针组于造模前1h选取"百会""印堂"穴进行电针,氟西汀组于造模前1h给予盐酸氟西汀混悬液5mL/kg灌胃治疗。通过旷场实验对大鼠进行行为学评价,采用生物素标记抗体芯片技术筛选出海马中差异蛋白TGF-β3、bFGF。结果:造模结束后,与空白组相比,模型组大鼠水平穿越格数、竖立次数均显著减少(P<0.01);与模型组相比,电针组和氟西汀组大鼠水平穿越格数、竖立次数均显著增加(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠海马TGF-β3蛋白水平下降(fold change=0.48),bFGF蛋白水平上升(fold change=1.36);与模型组比较,电针组、氟西汀组TGF-β3蛋白水平上升(fold change=1.61,1.61),bFGF蛋白水平下降(fold change=0.61,0.45)。结论:电针可能通过上调TGF-β3蛋白表达水平参与促进神经血管的营养再生,并且良性调节具有神经保护作用的bFGF,使其趋于正常水平,从而改善慢性应激抑郁模型大鼠的行为学症状,这可能是针刺抗抑郁作用的分子机制之一。