关键词： 牙髓干细胞   转化生长因子-β3   种植体  

摘要： 目的探讨外源性TGF-β3联合体外培养的DPSCs在种植体骨结合中的作用。方法(1)采用酶解组织块法从新西兰幼兔牙髓组织中分离DPSCs,体外培养,光镜下行细胞形态学观察,将DPSCs传至P3,液氮储存待用;(2)将36只2月龄新西兰大白兔随机分为PBS组;DPSCs组;TGF-β3+DPSCs组,每组12只。在兔下颌前牙及磨牙区随机拔除两颗牙齿,在拔牙窝即刻植入种植体,PBS组植入Bio-Oss粗颗粒骨粉0.30g+PBS 20ul;DPSCs组植入Bio-Oss粗颗粒骨粉0.30g+1×108/L DPSCs 20ul;TGF-β3+DPSCs组植入Bio-Oss粗颗粒0.30g+80ng/L TGF-β3 20ul+1×108/L DPSCs20ul。DPSCs+TGF-β3组则植入1×108/L DPSCs 20ul+80ng/L TGF-β3 20ul。术后第四周、第八周分别处死新西兰大白兔各18只,行HE染色、茜素红染色检测成骨质量,行免疫组织化学法检测骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、I型胶原蛋白(collagenase-Ⅰ,COL-Ⅰ)及骨钙素(osteocalcin,OC)的表达,行骨形态计量学分析检测种植体周围骨板宽度(combined bone lamella width,CBLW)、骨结合率(implant bone contact rate,IBCR)、骨小梁宽度(trabecular width,TW)及骨小梁视野面积百分比(trabecular area,TA)。结果原代培养的兔DPSCs呈集落生长,多呈梭形或纺锤形,少数呈多角形;HE染色:术后4周,TGF-β3+DPSCs组在骨小梁数量、成骨细胞密度、新骨形成方面均明显强于其他两组,术后8周,新骨形成进一步增多;茜素红染色:术后4周,TGF-β3+DPSCs组较其他两组出现更多的红色钙化结节,术后8周,钙化结节进一步增多;免疫组织化学图像灰度分析显示:术后4周,TGF-β3+DPSCs组BSP、OC及COL-I指标为(0.35±0.04)、(0.36±0.03)及(0.39±0.01),DPSCs组BSP、OC及COL-I指标为(0.27±0.02)、(0.24±0.01)及(0.28±0.03),PBS组BSP、OC及COL-I指标为(0.13±0.03)、(0.15±0.02)及(0.16±0.02),术后8周,TGF-β3+DPSCs组BSP、OC及COL-I指标为(0.51±0.02)、(0.49±0.03)及(0.53±0.02),DPSCs组BSP、OC及COL-I指标为(0.35±0.02)、(0.37±0.01)及(0.38±0.01),PBS组BSP、OC及COL-I指标为(0.21±0.03)、(0.19±0.02)及(0.22±0.02),术后4周及8周,TGF-β3+DPSCs组BSP、OC及COL-I的表达均显著高于DPSCs组及PBS组(P<0.05),DPSCs组及PBS组差异无统计学意义(P>0.05)。;术后8周,TGF-β3+DPSCs组CBLW、IBCR、TW、TA均显著高于DPSC组及PBS组(P<0.05),DPSCs组及PBS组差异无统计学意义(P>0.05)。结论DPSCs具有高度增殖的生物学特性,并具有成骨向分化潜能;TGF-β3对DPSCs成骨向分化具有一定促进作用;TGF-β3联合DPSCs可有效促进种植体的骨结合。

关键词： 慢性萎缩性胃炎   脾虚血瘀   健脾活血法   转化生长因子-β1   Smad3蛋白  

摘要： 目的:采取随机、对照的方法，观察健脾活血法治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)脾虚血瘀证的临床疗效及对转化生长因子(TGF-β1)，Smad3表达的影响，探讨可能的作用机制。　　方法:根据本研究的纳入标准，收集就诊于江苏省中医院普内科门诊符合CAG脾虚血瘀证诊断标准的患者共78例。采用数字随机法将患者分为两组，治疗组40例，脱落2例，对照组38例，脱落3例，治疗组予口服健脾活血方（炙黄芪15克，炒白术10克，炒苡仁15克，莪术10克，炒枳壳10克，佛手10克，鸡内金10克，石见穿15克，每日1剂，水煎服，200ml，早晚各一次），共治疗3个月;对照组予口服胃复春片（每次4片，每天3次），共治疗3个月。观察两组患者治疗前后的临床症状、病理变化及治疗组治疗前后TGF-β1、Smad3表达的情况，进行统计学分析。　　结果:　　1.症候疗效比较:治疗组患者38例，其中临床治愈13例，显效10例，有效11例，无效4例，总有效率达89.50％;对照组患者35例，其中临床治愈2例，显效6例，有效14例，无效13例，总有效率为62.86％。经统计学分析P＜0.01，两组症候疗效之间存在高度显著性差异。说明治疗组疗效明显优于对照组。　　2.胃黏膜病理检查比较:在改善患者胃黏膜萎缩、肠上皮化生的程度上，两组治疗前后积分对比具有高度显著性差异(P＜0.01)，且治疗后两组组间对比亦具有高度显著性差异(P＜0.01)，说明两组均可以明显改善患者胃黏膜萎缩及肠上皮化生，治疗组明显优于对照组。　　3.治疗组治疗前后胃黏膜免疫组化病理比较:治疗后TGF-β1及Smad3的表达比治疗前显著下降，具有显著性差异(P＜0.05)，且TGF-β1与Smad3的表达在治疗前(r=0.793)与治疗后的表达(r=0.735)均呈正相关(P＜0.05)。　　4.两组在治疗过程中，均无发现任何不良反应。　　结论:运用健脾活血法治疗CAG脾虚血瘀证可显著改善患者的临床症状，减轻萎缩、肠化的程度，并可以降低患者TGF-β1及Smad3蛋白的表达，提示健脾活血法可能通过改善胃黏膜血流量、诱导细胞分化、调节细胞增殖与凋亡、调节细胞免疫等机制达到治疗CAG的目的。

关键词： 慢性心力衰竭   半乳糖凝集素-3   转化生长因子β1   H2松弛素   心肌纤维化  

摘要： 目的:研究慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血浆半乳糖凝集素-3(Galectin-3,Gal-3)水平的变化及其与转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、H2松弛素(H2 relaxin,H2RLX)的相关性,明确影响Gal-3水平的因素及其评估心衰预后的价值,探讨三者对CHF心肌纤维化(myocardial fibrosis,MF)的影响,为CHF患者的发病机制研究及其临床治疗提供理论依据。方法:选取2014年12月至2015年12月在济宁医学院附属医院心内科收治的CHF患者88例作为心衰组,选取患者均符合纳入标准。按照美国纽约心脏病学(NYHA)心功能分级,心功能II级24例,心功能III级38例,心功IV级26例,选取同期本院体检健康者40例作为正常对照组。采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定两组血浆Gal-3、TGF-β1和H2RLX水平,通过Spearman等级相关分析心衰组Gal-3、TGF-β1和H2RLX水平与NYHA分级之间的关系。采用超声心动图测量左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和左室舒张末内径(left ventricular end-diastolic dimension,LVEDD),通过Pearson相关分析心衰组Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平与LVEF、LVEDD的相关性及Gal-3、TGF-β1、H2RLX三者之间的相关性,建立CHF患者血浆Gal-3多因素模型,行多元逐步回归分析,确定影响血浆Gal-3水平的独立相关因素。对88例CHF患者随访1年并计算1年内因心衰加重再住院率及病死率,通过Spearman等级相关分析Gal-3水平与CHF患者再住院率及病死率之间的相关性。结果:1.心衰组患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平在不同病因间的差异未见统计学意义(P>0.05)。2.心衰组患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平显著高于正常对照组(t=7.383,t=9.113,t=8.678,P<0.05),心功能II级、III级、IV级之间LSD两两比较显示,患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平存在显著差异(P<0.05),Spearman等级相关分析显示,血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX与NYHA分级均呈正相关(r=0.682,r=0.741,r=0.634,P<0.05)。***相关性分析显示,心衰组患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平与LVEF均呈负相关(r=-0.466,r=-0.467,r=-0.436,P<0.05),与LVEDD均呈正相关(r=0.487,r=0.489,r=0.475,P<0.05)。Gal-3分别与TGF-β1、H2RLX呈正相关(r=0.852,r=0.820,P<0.05),TGF-β1与H2RLX呈正相关(r=0.830,P<0.05)。4.以Gal-3为因变量,将TGF-β1、H2RLX、LVEF、LVEDD、BNP、TC、TG、LDL、HDL纳入自变量,行多元逐步回归分析,回归方程:Y=-1.602+0.509(TGF-β1)+0.312(H2RLX)+0.160(BNP)。5.心衰组以Gal-3均数254.44pg/ml为界,分为高Gal-3组(40人)、低Gal-3组(48人)两组,高Gal-3组1年内CHF再住院率为42.5%、病死率为27.5%,明显高于低Gal-3组再住院率20.8%、病死率10.4%(P<0.05),Spearman等级相关分析显示,血浆Gal-3水平与CHF患者再住院率、病死率存在正相关(r=0.234,r=0.221,P<0.05)。结论:***患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX水平升高,其水平与心功能分级相关,可作为判断CHF病情严重程度的指标。2.血浆Gal-3水平可以预测CHF患者再住院率及病死率,可作评估CHF患者预后的客观指标。***-β1、H2RLX、BNP为影响CHF患者血浆Gal-3水平的独立相关因素。***患者血浆Gal-3、TGF-β1、H2RLX三者之间存在相关性,对MF的发生发展产生一定影响,参与了CHF的病理生理过程。

关键词： CAG   脾虚血瘀   健脾活血   TGF-β1   Smad3  

摘要： 目的:采取随机、对照的方法,观察健脾活血法治疗慢性萎缩性胃炎(CAG)脾虚血瘀证的临床疗效及对转化生长因子(TGF-β1),Smad3表达的影响,探讨可能的作用机制。方法:根据本研究的纳入标准,收集就诊于江苏省中医院普内科门诊符合CAG脾虚血瘀证诊断标准的患者共78例。采用数字随机法将患者分为两组,治疗组40例,脱落2例,对照组38例,脱落3例,治疗组予口服健脾活血方(炙黄芪15克,炒白术10克,炒苡仁15克,莪术10克,炒枳壳10克,佛手10克,鸡内金10克,石见穿15克,每日1剂,水煎服,200ml,早晚各一次),共治疗3个月;对照组予口服胃复春片(每次4片,每天3次),共治疗3个月。观察两组患者治疗前后的临床症状、病理变化及治疗组治疗前后TGF-β1、Smad3表达的情况,进行统计学分析。结果:1.症候疗效比较:治疗组患者38例,其中临床治愈13例,显效10例,有效11例,无效4例,总有效率达89.50%;对照组患者35例,其中临床治愈2例,显效6例,有效14例,无效13例,总有效率为62.86%。经统计学分析P<0.01,两组症候疗效之间存在高度显著性差异。说明治疗组疗效明显优于对照组。2.胃黏膜病理检查比较:在改善患者胃黏膜萎缩、肠上皮化生的程度上,两组治疗前后积分对比具有高度显著性差异(P<0.01),且治疗后两组组间对比亦具有高度显著性差异(P<0.01),说明两组均可以明显改善患者胃黏膜萎缩及肠上皮化生,治疗组明显优于对照组。3.治疗组治疗前后胃黏膜免疫组化病理比较:治疗后TGF-β1及Smad3的表达比治疗前显著下降,具有显著性差异(P<0.05),且TGF-β1与Smad3的表达在治疗前(r=0.793)与治疗后的表达(r=0.735)均呈正相关(P<0.05)。4.两组在治疗过程中,均无发现任何不良反应。结论:运用健脾活血法治疗CAG脾虚血疲证可显著改善患者的临床症状,减轻萎缩、肠化的程度,并可以降低患者TGF-β1及Smad3蛋白的表达,提示健脾活血法可能通过改善胃黏膜血流量、诱导细胞分化、调节细胞增殖与凋亡、调节细胞免疫等机制达到治疗CAG的目的。

关键词： 胸苷激酶1   磷脂酰肌醇蛋白3   转化生长因子β   肝硬化  

摘要： 目的:研究胸苷激酶1(TK1)、磷脂酰肌醇蛋白3(GPC-3)及转化生长因子β(TGF-β)在慢性乙型肝炎和肝硬化患者及健康人血清中表达差异.方法:收集我院肝硬化患者96例,慢乙肝患者80例,健康体检者47例,分别设为一、二、三组,检测三组患者血清中TK1、GPC-3及TGF-β含量,比较三组血清TK1、GPC-3及TGF-β水平有无统计学差异.结果:第一二组患者血清TK1含量,GPC-3及TGF-β阳性率均高于第三组患者,且第一组高于第二组(P<0.05).结论:血清TK1、GPC-3及TGF-β有助于监测慢乙肝及肝硬化的病程进展,协助临床肝癌的早期诊断,早期治疗.

关键词： 苯肾上腺素   心肌纤维化   转化生长因子-β1  

摘要： 目的:观察苯肾上腺素对压力超负荷介导的大鼠心肌纤维化(MF)的调节及其与转化生长因子-β1(TGF-β1)、果蝇母性DPP同源蛋白3(Smad3)及结缔组织生长因子(CTGF)信号通路的关系。方法:将雄性SD大鼠28只随机分为对照组、腹主动脉缩窄(AAC)组、AAC+苯肾上腺素组和AAC+哌唑嗪组,每组7只。通过心肌胶原形态学测定左心室组织胶原容积分数(CVF)观察大鼠MF的变化,应用免疫组化法检测各组大鼠左心室组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、TGF-β1、Smad3及CTGF表达,用蛋白免疫印迹(Western blot)法测定左心室组织α-SMA表达。结果:(1)心肌胶原形态学显示:与对照组比,AAC组、AAC+苯肾上腺素组和AAC+哌唑嗪组的CVF均明显升高(P均<0.01);与AAC组比,AAC+苯肾上腺素组的CVF显著减少(P<0.01)。(2)免疫组化法显示:与对照组比,AAC组、AAC+苯肾上腺素组和AAC+哌唑嗪组的α-SMA、TGF-β1、Smad3及CTGF表达均上调(P均<0.01);与AAC组比,AAC+苯肾上腺素组的α-SMA、TGF-β1、Smad3及CTGF表达均降低(P均<0.01)。(3)Western blot法显示:与对照组比,AAC组、AAC+苯肾上腺素组和AAC+哌唑嗪组的α-SMA表达均上调(P均<0.05);与AAC组比,AAC+苯肾上腺素组的α-SMA表达降低(P<0.01)。结论:苯肾上腺素可以改善压力超负荷诱导的大鼠MF,该作用可能与抑制TGF-β1/Smads信号通路及下调CTGF有关。

关键词： IL-12   IL-4   IL-8   转化生长因子-β1   1,25-二羟基维生素D3   婴幼儿喘息性支气管炎  

摘要： 目的探讨IL-12、IL-4、IL-8、转化生长因子-β1及1,25-二羟基维生素D3在婴幼儿喘息性支气管炎表达水平及其临床意义。方法选取2013年1月至2015年1月于我院接受治疗的40例喘息性支气管炎患儿为研究对象,设为喘息组;选取同一时期来我院健康中心接受体检的婴幼儿40名为研究对象,设为对照组。检测两组婴幼儿1,25-(OH)D3及TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12表达水平。比较两组婴幼儿的1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-4、IL-8、IL-12水平及其相互关系。结果喘息组1,25-(OH)D3、TGF-β1明显低于对照组(P<0.05);喘息组患儿IL-4、IL-8水平明显高于对照组(P<0.05);喘息组IL-12水平明显低于对照组(P<0.05);1,25-(OH)D3与TGF-β1呈正相关(r=0.749,P<0.05);1,25-(OH)D3与IL-12呈正相关(r=0.802,P<0.05);1,25-(OH)D3与IL-4呈负相关(r=-0.895,P<0.05);1,25-(OH)D3与IL-8呈负相关(r=-0.736,P<0.05)。结论 1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12降低及IL-4、IL-8升高与婴幼儿喘息型支气管炎发病有关,检测1,25-(OH)D3、TGF-β1、IL-12、IL-4、IL-8表达水平可作为判断婴幼儿喘息型支气管炎的重要指标。

关键词： 糜酶   肝星状细胞   转化生长因子β1   Smad3  

摘要： 目的研究糜酶对肝星状细胞转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad3信号通路的影响。方法对大鼠肝星状细胞株HSC-T6进行体外培养,设定2组,空白对照组(加入等量磷酸盐缓冲液)及糜酶处理组(加入终浓度为10mg/L的糜酶),作用24h后收集细胞培养上清液,提取全细胞蛋白,收集细胞爬片。TGF-β1在培养上清液中的表达采用免疫印迹法及ELISA法检测,Smad3、p-Smad2/3、纤维连接蛋白(Fn)的表达采用免疫印迹法检测。结果免疫印迹法及ELISA检侧结果均表明在糜酶处理组培养上清液中TGF-β1蛋白表达量均较空白对照组高[免疫印迹法:(0.33±0.05)vs(0.18±0.03),t=3.826,P<0.05;ELISA法:(178.05±34.63)ng/L vs(138.42±20.17)ng/L,t=3.401,P<0.05],差异均有统计学意义;而糜酶处理组与空白对照组在培养上清液中Smad3相对表达量比较差异无统计学意义[(0.65±0.06)vs(0.62±0.05),t=0.086,P=0.891>0.05];p-Smad2/3蛋白相对表达量、p-Smad2/3与Smad3蛋白相对表达量的比值则明显高于空白对照组,差异均有统计学意义[(0.72±0.04)vs(0.45±0.03),t=8.101,P=0.001;(1.11±0.13)vs(0.70±0.04),t=5.210,P=0.006<0.05];糜酶处理组Fn的表达量较空白对照组明显升高,差异有统计学意义[(0.56±0.04)vs(0.34±0.02),t=6.141,P<0.05]。结论对体外培养的HSC-T6,糜酶可促进其产生TGF-β1,并使其中的Smad3的磷酸化增加。在糜酶作用下HSC-T6的细胞外基质成分Fn分泌明显增加。

关键词： 肾间质纤维化   转化生长因子-β1/Smad3信号通路  

摘要： 目的探讨转化生长因子(TGF)-β1/Smad3信号通路在肾间质纤维化(RIF)大鼠肾脏组织中的表达和作用。方法 80只SD雄性大鼠编号,随机平均分为单侧输尿管结扎(UUO)模型组和假手术组,UUO模型组行大鼠左侧输尿管结扎术,假手术组游离左侧输尿管但不予结扎,术后第3、7、10、14、21天时每组分别处死8只,留取大鼠左侧肾脏用于病理以及蛋白测定,HE、Masson染色光镜观察肾脏组织形态学的改变,应用蛋白质印迹法(Western印迹)和免疫组化法(SP)检测TGF-β1、Smad3蛋白表达,PCR检测TGF-β1、Smad3 mRNA的表达。结果电镜观察结果显示RIF大鼠建模成功,随着结扎时间延长,UUO模型组RIF指数、Smad3与TGF-β1蛋白及mRNA表达均逐渐升高(P<0.05),同一时间UUO模型组各指标均高于假手术组(P<0.05)。Smad3、TGF-β1与RIF指数呈正相关(r=0.564,0.735,P<0.05),TGF-β1与Smad3间呈正相关(r=0.673,P<0.05)。结论通过检测肾脏组织中Smad3、TGF-β1的表达可判断RIF病情,对疾病的早期发现有重要意义。

关键词： 脂肪干细胞   转化生长因子β3   成软骨分化  

摘要： 目的对兔脂肪来源的干细胞(RADSCs)进行分离、培养和鉴定,并对转化生长因子β3(TGF-β3)促进RADSCs向软骨细胞分化进行初步探讨,为软骨组织工程中种子细胞的选择提供新思路。方法取成年大耳白兔脂肪组织获得细胞,进行原代和传代培养,观察细胞变化并绘制细胞生长曲线;用流式细胞术和免疫荧光技术鉴定细胞,将获取的第三代细胞进行体外成软骨细胞诱导,分别进行形态学观察和Ⅱ型胶原(ColⅡ)的免疫组化染色。结果所获取细胞呈类成纤维细胞样贴壁快速生长,传代后生长、增殖稳定,生长曲线呈典型的"S"型,细胞表面抗原CD34、CD45呈阴性反应,CD44、CD29呈阳性反应;在TGF-β3的诱导下,RADSCs成软骨细胞分化。结论成功分离得到了ADSCs,细胞体外增殖稳定快速,具有成软骨分化的潜能,含TGF-β3的诱导液有利于ADSCs向软骨细胞分化。ADSCs有望成为软骨组织工程中理想的种子细胞。