关键词： 慢性损伤   肌腱炎   伸肌腱   网球肘   上炎   网球运动   肌腱病   腕关节  

摘要： 为什么不打网球也会得“网球肘”肱骨外上炎是发生在肘关节桡侧伸肌腱的肌腱炎或肌腱病,其病因是腕关节因反复用力背伸导致的反复应力性损伤,因早年国外学者发现其在网球运动人群中发病率高,故将其命名为“网球肘”。实际上,在日常生活中,做拧毛巾、炒菜等家务活动和其他运动也常用到桡侧伸肌腱,也会造成相应部位的慢性损伤。因此,不打网球也会得“网球肘”。

关键词： 过度使用性肌腱病   行为学   超声影像学   病理学   运动损伤  

摘要： 背景过度使用性肌腱病是部队非战斗减员的重要原因,其特征尚不明确,动物实验有助于了解其发病机制和特点。目的从行为学、影像学、组织病理学和细胞因子水平的角度分析过度使用导致的大鼠肌腱损伤特征。方法16只SD大鼠随机分为正常组和损伤组,每组8只。损伤组利用跑台构建大鼠过度使用性跟腱病模型,跑步方案为10°倾斜角上坡、17 m/min、运动频率1 h/d,5 d/周,持续8周;正常组大鼠笼中饲养,自由活动。跑台训练8周后采用CatWalk步态分析系统评估大鼠运动功能,高频超声活体观察跟腱周围炎症水肿浸润情况,病理染色观察肌腱组织学改变,ELISA测定血清白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1)的浓度。结果与正常组相比,损伤组大鼠支撑相缩短(P<0.001),步长缩短(P=0.03),足印面积减小(P<0.001),摆动速度增加(P<0.001)。超声图像显示,损伤组跟腱周围存在炎症和水肿浸润的低回声。病理染色显示,损伤组肌腱细胞形态改变,局部可见胶原纤维破坏、血管异常聚集和蛋白聚糖沉积。与正常组相比,损伤组Bonar评分增加(P<0.001)、血清IL-1β表达水平升高(P=0.03);损伤组TGF-β1表达水平存在高于正常组的差异趋势(P=0.09)。结论过度使用导致肌腱组织病理结构改变,表现为肌腱周围炎症水肿浸润和步态异常,炎症细胞因子和纤维化相关细胞因子的上调可能发挥了重要作用。

关键词： 朱氏舒筋活血汤   针刀   顽固性肱骨外上髁炎   慢性疼痛   肌腱病  

摘要： 研究目的:通过观察朱氏舒筋活血汤联合针松解治疗顽固性肱骨外上髁炎的临床疗效以及安全性,并为其进一步推广以及更好地发挥传统中医药在顽固性肱骨外上髁炎治疗和康复方面的特色提供有效的临床依据。 研究方法:本次研究收集了符合纳入标准的顽固性肱骨外上髁炎患者60例,采用随机数表法,将患者分为2组进行研究。对照组32例患者每1周进行1次肱骨外上髁针刀松解治疗。治疗组28例患者在对照组基础上,每日口服1剂朱氏舒筋活血汤。两组治疗方案为1周1疗程,共进行2个疗程的治疗。分别记录两组患者治疗前、治疗1周和治疗2周视觉模拟量表评分,患侧Mayo肘关节功能评分,患侧无疼握力和两组治疗的临床有效率相关信息。 结果:(1)两组在性别、年龄、病程长短、治疗前视觉模拟量表评分、患侧治疗前Mayo肘关节功能评分以及患侧治疗前无疼握力等方面均无明显差异(P>0.05),具有可比性。 (2)视觉模拟量表评分:治疗1周、治疗2周随访,两组视觉模拟量表评分均较治疗前有所降低(P<0.05),治疗后同时间段治疗组视觉模拟量表评分低于对照组(P<0.05)。 (3)Mayo肘关节功能评分:治疗1周、治疗2周随访,两组Mayo肘关节功能评分均较治疗前有所增高(P<0.05),治疗后同时间段治疗组Mayo肘关节功能评分高于对照组(P<0.05)。 (4)无痛握力:治疗1周、治疗2周随访,两组无痛握力值均较治疗前有所增高(P<0.05),治疗后同时间段治疗组无痛握力值高于对照组(P<0.05)。 (5)临床有效率:治疗2周后两组临床有效率无统计学意义(P<0.34)。 结论:两种方法对肱骨外上髁炎的治疗均有效,且朱氏舒筋活血汤联合针松解治疗疗效优于常规针刀治疗,临床效果更加明显。朱氏舒筋活血汤联合针刀松解治疗在缓解患者肘关节疼痛、增加肘关节活动度方面效果显著,而且安全性较好,值得临床推广。

关键词： 钙化性肌腱病   PPP1R3A   肌腱细胞   成骨基因   Ca2+   离子通道   HuR  

摘要： 研究目的 提出并研究PPP1R3A在CT形成中的作用机制,研究其下游作用通路,以及自身表达的上游调控因素。 通过临床样本、动物CT模型、肌腱细胞体外模型,三个层面研究PPP1R3A通过影响肌腱细胞Ca2+平衡和成骨基因表达,在CT中产生作用;证明PPP1R3A通过影响Piezo1/SERCA2的交互作用,是其影响CT的作用机制;证明其自身表达受Hu R靶向调节。 研究内容和方法 1.使用WB、PCR和IHC染色等方法检测钙化性肌腱炎病例标本中PPP1R3A的表达,分析其与CT的相关性。对既往已发表的文献,进行二次数据分析;回顾既往的临床病例,进行临床病理样本收集,检测PPP1R3A表达,研究其与CT的关系; 2.在动物CT模型中,使用免疫荧光、WB、PCR等方法,研究PPP1R3A对成骨和Ca2+的影响。在体内实验层面研究PPP1R3A在CT形成中的作用; 3.在体外培养的肌腱细胞中,使用流式细胞仪检测、诱导成脂、成骨、ALP、油红O染色等方法,研究PPP1R3A对肌腱细胞成骨和Ca2+影响,明确其与CT形成中的作用; 4.在体外培养的肌腱细胞模型中,使用病毒转染、免疫共沉淀等方法,研究PPP1R3A对Piezo1/SERCA2活性的调控,研究PPP1R3A对下游离子通道的作用,明确PPP1R3A在CT形成中的作用靶点; 5.在体外培养的肌腱细胞模型中,使用免疫共沉淀、双荧光素酶等方法,研究m RNA结合蛋白Hu R对PPP1R3A m RNA的调节,调控其表达在CT的作用。明确PPP1R3A在CT形成中的上游调控机制。 研究结果 1、临床肌腱病样本中,PPP1R3A的m RNA和蛋白表达均有降低; 2、体外使用Ⅰ型胶原酶诱导的大鼠钙化性肌腱病模型中,PPP1R3A过表达能够改善CT的组织结构,减少骨、软骨形成;增加成腱基因的表达,降低成骨基因表达; 3、PPP1R3A的过表达能够促进体外肌腱细胞的增殖和生长,而敲除则能够降低肌腱细胞的增殖;PPP1R3A过表达后,肌腱细胞ALP（碱性磷酸酶）和ARS（茜素红）染色减少,PPP1R3A敲除后相应表达增加;PPP1R3A过表达,细胞内Ca2+减少,而敲除PPP1R3A后,出现Ca2+沉积; 4、CT动物模型中,SERCA2表达量下降,而Piezo1表达量上升;而在PPP1R3A过表达之后,SECRA2的表达量上升,而Piezo1的表达量下降;过表达PPP1R3A使SECRA2蛋白表达增加,敲除PPP1R3A使SECRA2蛋白表达减少;PPP1R3A对Piezo1蛋白的影响与SERCA2趋势完全相反;无论PPP1R3A过表达或敲除,都能够影响SECRA2和Piezo1蛋白之间形成免疫复合体;SERCA2-OE和si Piezo1,均显著减少了si PPP1R3A对成骨基因表达的影响; 5、si Hu R同时影响PPP1R3A m RNA的表达量和蛋白质的合成;Hu R与PPP1R3A m RNA相结合形成RNA-protein复合体;Hu R能与PPP1R3A m RNA的3’-UTR端结合;双荧光素酶报告实验中,si Hu R之后PPP1R3A m RNA的3’-UTR端荧光素酶活性下降; 结论: 1、PPP1R3A在钙化性肌腱病中表达下调; 2、大鼠CT模型中,PPP1R3A的过表达促进了细胞外基质的合成,减少肌腱内的成软骨化生和成骨作用,有利于减轻CT的病理变化,对CT中的肌腱起到保护作用; 3、PPP1R3A是通过抑制大鼠肌腱细胞的成骨分化、减少肌腱细胞内Ca2+沉积而产生作用; 4、PPP1R3A能够通过影响Piezo1/SERCA2表达,减轻Ca2+在细胞内的沉积,从而在CT形成过程中产生了调控作用; 5、Hu R通过结合PPP1R3A m RNA的3’-UTR端,对其转录后翻译进行调控,从而参与CT的发病过程。

关键词： 肌腱病   肌腱干细胞   纳米囊泡   JAK/STAT   微针  

摘要： 目的: 肌腱病(Tendinopathy)是一种常见劳损性疾病,主要表现为肌腱疼痛和功能障碍。肌腱的自愈能力有限,近年来肌腱干/祖细胞(tendon stem/progenitor cells,TSPCs)因其在肌腱自愈和修复中的关键作用而成为研究焦点。特别是TSPCs分泌的外泌体和人工纳米囊泡(nanovesicles,NVs)显示出对肌腱病的治疗潜力。此外,JAK/STAT信号通路被发现在调控TSPCs功能,尤其是其年龄相关功能障碍中发挥关键作用。本研究旨在探索通过微针(microneedle,MN)技术递送负载JAK/STAT抑制剂WP1066的NVs(WP1066-NVs)来治疗肌腱病变的效果与安全性。 研究方法: 采用SPF级SD雄性大鼠作为实验对象,通过I型胶原酶诱导肌腱病模型,进而分为正常组、肌腱病组、NVs治疗组与WP1066-NVs治疗组,采用微针递药系统进行治疗。 通过多种生物学技术评估治疗效果,包括qRT-PCR检测TSPCs中的炎症因子和基因表达,克隆形成及EdU染色实验评估TSPCs的自我更新与增殖能力,划痕和Transwell实验评估迁移与侵袭能力,免疫荧光染色分析TSPCs干细胞特性及细胞对NVs的摄取能力。此外,通过RNA-seq和Western blot等方法分析JAK/STAT信号通路的激活情况及其在肌腱病中的作用。 通过机械挤压TSPCs制备NVs,共孵育将JAK/STAT信号通路抑制剂WP1066负载于NVs,进而将WP1066-NVs装载于MN。通过透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)分析确认NVs、WP1066-NVs和MN-WP1066-NVs的形态及大小。通过小动物活体成像观察MN-WP1066-NVs作用于大鼠跟腱的皮下分布情况。用液相色谱-质谱(LC-MS/MS)测定WP1066-NVs包封率、载药量和释放曲线。 用IFN-γ处理正常TSPCs,评估激活JAK/STAT通路后的TSPCs功能和干细胞特性变化。通过Masson染色、免疫组织化学染色、SEM、步态分析评估微针递送NVs、WP1066-NVs对肌腱结构和功能的恢复效果。 结果: 1.肌腱病大鼠TSPCs功能显著受损 肌腱病TSPCs的自我更新、增殖、迁移能力受到抑制,成腱分化能力降低,细胞干性受到抑制,炎性因子COX-2、MMP3、IL1β、IL6表达明显增高,异性分化能力增加。 ***/STAT信号通路调控肌腱病TSPCs的功能 (1)RNA-seq、通路分析表明JAK/STAT信号通路的激活与功能障碍有关。Western blot结果表明肌腱病TSPCs中p-JAK2和p-STAT3表达增加。PCR结果显示JAK/STAT信号通路的激活因子EGFR、AR、IL6ST和靶标BCL2、PIM1、MYC在肌腱病TSPCs中显著上调。 (2)用能够诱导JAK/STAT信号通路激活的干扰素-γ处理正常TSPCs,其功能变化与肌腱病TSPCs相似。 ***能够负载且有效释放JAK/STAT通路抑制剂WP1066 (1)通过机械挤压TSPCs获得的NVs大小、形态与外泌体类似,表达间充质干细胞表面标记物CD73、CD90,可以被TSPCs高效吸收。 (2)WP1066在37℃环境下的降解符合一级动力学行为,其在NVs中的包封率和载药量分别为76.5%和7.6%。NVs释放WP1066呈初期上升、后期逐渐下降的趋势。 ***和WP1066-NVs能有效改善肌腱病TSPCs功能 NVs与WP1066-NVs均可恢复肌腱病TSPCs的自我更新、增殖、迁移能力,提高干细胞特性及成腱分化能力,抑制炎性因子表达,且WP1066-NVs的促进效果优于NVs。 ***递送NVs与WP1066-NVs改善大鼠肌腱病病理表现,恢复肌腱结构和功能 (1)MN贴片具有优越的生物降解能力以及对WP1066-NVs的有效透皮递送能力,且能缓慢释放WP1066-NVs。 (2)经MN-NVs和MN-WP1066-NVs处理后的肌腱病大鼠,其炎性细胞浸润与腱周处炎症增生明显减轻,胶原纤维水肿受抑制,胶原纤维排列恢复,细胞外基质增加,大鼠行走功能改善明显,成腱相关基因Tnmd、Scx、Nestin和Col1A1表达增加。WP1066-NVs的治疗效果优于单纯NVs治疗。 结论: 1.肌腱病变时,TSPCs的自我更新、增殖、迁移和侵袭能力受抑制,其细胞干性降低,炎性因子表达水平升高,成腱能力下降,异性分化风险增加。 ***/STAT信号通路的激活可能在肌腱病变中发挥关键作用,并成为治疗肌腱病的潜在靶点。 3.通过物理挤压TSPCs制备的NVs,能有效地将JAK/STAT信号通路抑制剂WP106

关键词： 肌腱病   16s r RNA基因测序   肠道菌群   丰度   标志性物种  

摘要： 目的:通过建立大鼠肌腱病动物模型,采用16s r RNA基因测序方法观测肠道菌群的丰度与结构变化,分析肌腱病发病与肠道菌群的相互关系,寻找肌腱病肠道菌群可能的特征性微生物,从微生物角度为肌腱病的治疗提供研究基础。 方法:选取8周龄健康成年雌性大鼠18只,平均体质量为(307.44±27.33)g。将大鼠适应性喂养1周后,按随机数字表法随机分为2组:分别是正常对照组(CK组,n=8)、肌腱病模型组(AT组,n=10)。参照文献使用I型胶原酶跟腱周围注射诱导AT组建立大鼠肌腱病动物模型。造模5d后随机处死AT组大鼠两只,确认造模是否成功。在造模成功后第25d,颈椎脱臼法处死大鼠,采集两组大鼠回盲结合处粪便样本,利用16S r RNA基因测序技术进行DNA提取、定量及检测,分析两组大鼠粪便中肠道菌群的多样性、丰度及均匀度;同时提取两组肌腱组织,制作光镜切片,观察肌腱组织形态学变化,分析肌腱组织评分、胶原容积分数。 结果:实验期间,两组实验动物健康状况良好,未出现意外死亡情况。(1)肌腱组织病理学变化:CK组肌腱结构完好,胶原纤维平行排列,跟腱细胞单个或线状分布于纤维间隙中,跟腱组织周围见血管散在分布;AT组跟腱局部胶原纤维变细、断裂、排列疏松且紊乱,纤维间见炎性细胞浸润,主要以核圆深染的淋巴细胞为主,且伴有纤维组织增生,主要以核呈长椭圆形的成纤维细胞增多为主,可见新生毛细血管生成长入。(2)肌腱改良Movin评分及胶原容积分数:CK组改良Movin评分为(0.00±0.00)分,AT组为(8.83±0.82)分,两组肌腱组织学评分比较,差异有统计学意义(P<0.01);CK组胶原容积分数为(76.71±2.00)%,AT组胶原容积分数为(49.09±2.85)%,两组胶原容积分数相比,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)菌群多样性分析:AT组与正常对照组肠道菌群在α多样性上的差异无统计学差异(P>0.05);在β多样性(weighted unifrac距离)上存在显著差异(P<0.05)。(4)菌群组成差异分析:AT组与正常对照组在菌门水平上肠道菌群相对丰度的差异无统计学意义(P>0.05);在菌科水平上,AT组的肠杆菌科和消化链球菌科的相对丰度低于CK组(P<0.05);在菌属水平上,AT组的颤螺菌属和罗氏菌属的相对丰度高于CK组(P<0.05);颤螺菌属是AT组中的标志性物种,线性判别分析(LDA)值为3.7617。 结论:肌腱病动物模型大鼠肠道菌群的结构和组成存在显著差异,肠杆菌科和消化链球菌科的相对丰度降低,颤螺菌属和罗氏菌属的相对丰度增高,颤螺菌属可能是肌腱病动物模型大鼠肠道菌群中的特征性肠道微生物。肌腱病模型中有益菌丰度的升高对肌腱病的诊疗提供了新的思路。

关键词： 弹道式冲击波   肌腱末端病损伤   肩关节功能   生活质量  

摘要： 探究对肌腱末端病损伤患者采用弹道式冲击波的疗效。方法 选取本院2022年全年内200例肌腱末端病损伤患者,采用随机数字表法分为参照组(n=100,常规治疗)及治疗组(n=100,弹道式冲击波治疗),观察疗效、疼痛指数、肩关节功能、生活质量、复发情况及并发症。结果 参照组疗效、复发率分别为86%、8%,治疗组分别为95%、1%,数据存在差异(P<0.05)。参照组不良反应发生率(4%)与治疗组(1%)无差异(P>0.05)。治疗前,患者疼痛指数、肩关节功能、生活质量均无差异(P>0.05),治疗后,参照组疼痛评分[(3.52±1.01)分]高于治疗组[(2.04±0.47)分],肩关节功能[(77.23±5.07)分]及生活质量[(84.33±5.49)分]低于治疗组[(84.34±5.23)分]、[(90.56±5.76)分],数据差异有统计学意义(P<0.05)。结论 弹道式冲击波对肌腱末端病损伤患者具有较佳疗效,可缓解疼痛,改善肩关节功能,提升生活质量,同时减少复发率及并发症发生率。

关键词： 跟腱病   富血小板血浆   肌腱干细胞   组织工程  

摘要： 跟腱病是对复杂、多方面病理跟腱的总称,在临床中突出的特征表现是跟腱及腱周组织的肿胀、疼痛和跟腱功能受限.跟腱作为人体最大、最强壮的肌腱,是踝关节跖屈的主要力量,跟腱病的发生会严重影响患者的生活质量.目前对于跟腱病治疗多以保守治疗为主,而伴随着组织工程和再生医学的发展,其中富血小板血浆(Platelet-Rich Plasma,PRP)与肌腱干细胞(Tendon Stem Cells,TSCs)治疗肌腱相关疾病成为近期研究的热点.本文回顾了与PRP和TSCs治疗跟腱病相关的研究,对PRP和TSCs治疗跟腱病的进展作一综述.