关键词:
肌腱腱病
肌腱炎
前列腺素E
动物模型
白三烯B
摘要:
目的:通过分子生物学手段和动物实验,探讨炎性介质_花生四烯酸(AA)代谢产物_前列腺素E<,2>(PGE<,2>)和白三烯B<,4>(LTB<,4>)与肌腱腱病(Tendinopathy)之间的关系,阐述肌腱腱病的发病机理.方法:该研究分为两部分.体外实验应用改进的细胞培养、拉伸系统,把人肌腱成纤维细胞(HPTFs)种植于有微型沟槽的可变性硅胶盘中,使细胞的生长能够模拟其体内生长状态,分别在不同的拉伸强度(4%,8%,12%),不同的拉伸时间(2h,4h,8h),不同的拉伸频率(0.1Hz,0.5Hz,1.0Hz)等条件下进行单轴性循环机械拉伸刺激,而把非拉伸组设为对照.检测机械刺激HPTFs后AA的两条代谢途径_环氧化酶途径(COX pathway)和5脂加氧酶途径(5_LO pathway)中的主要产物PGE<,2>和LTB<,4>以及相关酶(COX,5-LO,PLA<,2>)的变化,并应用相关酶的阻滞剂研究两条途径的相互影响.动物实验选用10只新西兰大白兔,右腿设为试验组,分别注射50ng(n=5)和500ng(n=5) PGE<,2>到兔膑腱;左腿设为对照组,采用三种不同形式的对照:非注射组(n=2)、针刺组(n=2)、注射生理盐水组(n=6).每周一次共三次注射,第四周处死动物,行肌腱的组织学检查.结果:种植于有微型沟槽的可变形硅胶盘中的HPTFs,其形状、排列均与在体情况相似,并且在实验过程中始终保持其形态.循环机械拉伸刺激HPTFs可产生高水平的PGE<,2>和LTB<,4>,其产生量为拉伸强度、拉伸时间、拉伸频率依赖趋势,PGE<,2>的产生与COX<,2>的表达增加有关,而LTB<,4>的产生与5-LO的活性增加有关.两条AA代谢途径密切相关,当阻断COS减少PGE<,2>的产生时,将产生更多的LTB<,4>,反之亦然.动物实验证明,肌腱内注射PGE<,2>能够引起肌腱腱病的病理表现,即肌腱细胞增生,胶原纤维退行性变.结论:改进的体外细胞拉伸系统,能够模拟肌腱细胞在体生长的情况,适用于研究肌腱细胞的运动损伤;循环重复拉伸肌腱成纤维细胞能产生高水平的炎性介质,临床上常用的单纯阻断COX途径的治疗因可能引起LTB<,4>的异常增高,可能对治疗肌腱腱病不利;肌腱内注射PGE<,2>的动物模型可望成为一种新的研究肌腱腱病的模型.