关键词:
富血小板血浆
肌腱干细胞
肌腱病
动物实验
摘要:
目的:观察PRP与TSCs联合应用对兔跟腱病动物模型中的肌腱组织结构和IGF-1和b FGF含量表达的影响情况,初步分析PRP与TSCs合用对肌腱病修复的影响,探讨PRP与TSCs合用治疗肌腱病可能的作用机制,为研究PRP与TSCs合用治疗肌腱病奠定相关的理论依据及为临床治疗肌腱病提供新思路。方法:将48只雄性新西兰大白兔,适应性喂养1周后,随机分为6组,每组8只。A组为PRP组、B组为TSCs组、C组为PRP与TSCs合用组、D组为生理盐水组、E组为模型对照组、F组为空白对照组。A、B、C、D、E组参照化学造模法(距离跟骨附着点上约2.0cm处注射前列腺素E2 300ng/0.2ml,1周/次,共4次)建立兔跟腱病动物模型;F组不予任何处理。造模完成后1周,A组予以0.5mlPRP造模处肌腱周围注射治疗,1次/3周,共2次;B组予以0.5ml TSCs肌腱周围注射治疗,1次/3周,共2次;C组予以0.5ml PRP与TSCs混悬液肌腱周围注射治疗,1次/3周,共2次;D组予以0.9%生理盐水0.5ml肌腱周围注射治疗,1次/3周,共2次;E、F组不予任何处理。干预6周后,处死动物,收集兔跟腱标本。(1)对收集跟腱组织切片染色后进行普通光学显微镜观察,观察跟腱组织纤维排列、炎症细胞浸润、细胞排列等情况。(2)收集跟腱标本,用ELISA法测定各组肌腱组织中IGF-1和bFGF含量表达情况,比较各组间的差异。结果:(1)标本切片染色结果显示,A、B两组胶原纤维排列呈波浪形,可见部分断裂,细胞核多呈圆形;C组胶原纤维连续,排列有序,细胞核呈长梭形;D、E两组未见明显的纤维组织,可见明显新生血管,新生血管周围有较多炎性细胞浸润。说明PRP、TSCs及PRP与TSCs合用均对跟腱病均有不同程度的促进修复作用,以PRP与TSCs合用促进修复效果较好。(2)IGF-1含量表达测定结果,从高到低分别是C组(4.589±0.117 ng/ml)、B组(2.502±0.083 ng/ml)、A组(1.384±0.028 ng/ml)、D组(0.350±0.037 ng/ml)、E组(0.347±0.027 ng/ml)、F组(0.286±0.033 ng/ml)。A、B、C三组分别与E组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);A、B两组分别与C组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);D组分别与E比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)bFGF表达含量测定结果,从高到低分别是C组(267.415±13.251 ng/ml)、B组(124.969±1.959 ng/ml)、A组(62.779±3.255 ng/ml)、F组(21.750±1.063 ng/ml)、D组(19.861±2.025 ng/ml)、E组(19.251±1.114 ng/ml)。A、B、C三组分别与E组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);A、B两组分别与C组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);D组与E比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PRP与TSCs联合应用能够提高兔跟腱病动物模型肌腱组织中IGF-1和bFGF的含量表达,减轻肌腱周围炎症细胞浸润,促进TSCs向肌腱细胞增殖分化,恢复肌腱纤维的排列,协同促进肌腱组织的修复。