关键词:
富血小板血浆
环磷酸腺苷
肌腱病
实验研究
合用
摘要:
目的:观察富血小板血浆(PRP)与环磷酸腺苷(cAMP)合用对兔跟腱病动物模型组织形态学及IGF-1、bFGF含量表达的影响,分析PRP与cAMP合用促进肌腱病修复的可能作用机制,为PRP与cAMP合用治疗肌腱病奠定理论基础。方法:将48只雄性新西兰大白兔,适应性喂养1周后,随机分为6组,每组8只。A组采用PRP干预、B组采用cAMP干预、C组采用PRP与cAMP混悬液干预、D组采用生理盐水干预、E组为模型对照、F组为空白对照。A、B、C、D、E组参照化学造模法(距离跟骨附着点约2.0cm处注射前列腺素E2500ng/0.2 ml,1次/周,共4次)建立兔跟腱病动物模型;F组不予任何处理。动物模型建立完成并用超声检测证实成功后,用不同方法进行干预。A组于造模处跟腱腱围内注射1ml PRP,B组于造模处跟腱腱围内注射1ml cAMP悬液,C组于造模处跟腱腱围注射内1ml由0.5ml PRP与0.5ml cAMP悬液组成的混悬液,D组于造模处跟腱腱围内注射1ml生理盐水,均为1次/3周,共2次;E组、F组不予任何干预。干预完成后,采用空气栓塞法处死动物,收集跟腱组织制作标本。(1)对收集跟腱组织切片染色后进行普通光学显微镜观察,观察跟腱组织纤维排列、炎症细胞浸润、细胞排列等情况。(2)ELISA法检测肌腱组织中IGF-1和bFGF的含量表达影响情况。结果:(1)组织形态学观察。光镜下C组胶原纤维较为粗大,排列较整齐,走行方向一致,细胞分布均匀;A、B组纤维粗细介于C组与E组之间,呈波浪形改变,排列稍显杂乱,可见部分胶原纤维呈纵行撕裂样、基质较正常处略有减少,细胞分布欠均匀,呈带状;D、E组胶原纤维较细,损坏较严重,排列杂乱、稀疏,走行方向不一致,可见胶原纤维呈纵行撕裂样、基质减少,细胞分布不均匀。表明PRP、cAMP以及二者合用对兔跟腱病修复均有一定的作用,以合用效果最佳。(2)IGF-1含量表达测定结果。IGF-1含量测定结果:从高到低分别是C组(4.861±0.264 ng/ml)、B组(2.492±0.061 ng/ml)、A组(1.379±0.031ng/ml)、E组(0.345±0.031 ng/ml)、D组(0.344±0.040 ng/ml)、F组(0.296±0.041 ng/ml),6组组间比较差异具有统计学差异(P<0.001)。A、B组与E组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);C组和E组结果比较,差异具有统计学意义(P<0.05);A、B组与C组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);D组与F组比较,差异无统计学意义(P>0.05);E组和F组结比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)bFGF含量表达测定结果。bFGF含量测定结果:从高到低依次是C组(255.460±1.661 ng/ml)、B组(125.189±1.875 ng/ml)、A组(63.067±4.337 ng/ml)、D组(33.686±22.555 ng/ml)、F组(20.980±0.858 ng/ml)、E组(18.838±1.323 ng/ml),6组间比较差异具有统计学意义(P<0.001)。A、B组与E组比较,差异有统计学意义(P<0.05);C组和E组结果比较,差异有统计学意义(P<0.05);A、B组与C组比较,差异有统计学意义(P<0.05);D组与F组比较,差异无统计学意义(P>0.05);E组和F组结比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PRP中含有促进肌腱病修复的生长因子,cAMP可提高细胞内部磷酸化水平,二者联合应用能够提高肌腱细胞中IGF-1、bFGF含量表达水平,减轻病变肌腱周围炎症细胞浸润,促进肌腱细胞增殖分化,协同促进肌腱病的修复。