关键词： 急性重症胰腺炎   骨髓间充质干细胞   干细胞移植  

摘要： 目的探索骨髓间充质干细胞(bMSCs)治疗大鼠急性重症胰腺炎(SAP)模型的高效移植方式。方法将大鼠随机分为对照组(control)、急性重症胰腺炎组(SAP)(胰胆管内逆行注射5%硫磺胆酸钠)。SAP模型制作成功6 h后,分为尾静脉骨髓间充质干细胞移植组(tail vein)、腹腔注射移植组(intraperitoneal)和尾静脉-腹腔注射联合移植组(tail vein+intraperitoneal),每组18只。在移植后第24、48和72 h分别安乐死6只大鼠,收集胰腺组织及血清,使用ELISA试剂盒测定血清中抗炎因子IL-10及炎性因子IL-1β、TNF-α和IL-6的水平;HE染色后光学显微镜下观察胰腺组织病理和第72 h后各组大鼠小肠黏膜及肺泡组织病理改变;冰冻切片在荧光显微镜下观察DAPI标记的bMSCs在胰腺组织的分布。结果SAP组胰腺组织有大量出血、水肿、炎性反应及坏死;与对照组相比,3种不同方式bMSCs移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死明显减少(P<0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平显著降低,IL-10水平显著升高(P<0.05);尾静脉+腹腔联合移植组较单纯尾静脉或腹腔移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死进一步减少(P<0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平进一步降低(P<0.05),IL-10的水平进一步升高(P<0.05);DAPI标记的bMSCs在移植组的胰腺组织内均有分布,且在尾静脉+腹腔联合移植组观察到更多的荧光分布;72 h后可见移植组小肠黏膜及肺泡组织完整性较SAP组明显好转,中性粒细胞浸润及出血情况较SAP组明显减轻,相比于腹腔和单纯尾静脉移植,联合移植组情况进一步改善。结论在大鼠SAP模型中,bMSCs通过尾静脉+腹腔联合移植能显著抑制炎性反应,减少SAP相关性胰腺、小肠黏膜及肺损伤,其效果显著优于单纯尾静脉移植和腹腔注射移植。

关键词： 类风湿关节炎   胶原诱导的关节炎   骨髓间充质干细胞   干扰素  

摘要： 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的最佳方法。方法不同时间点给CIA小鼠静脉注射BMSCs,观察诱导42 d各组小鼠的关节炎临床评分和病理学评分;监测CIA小鼠诱导不同时间点的干扰素-γ(IFN-γ)浓度;进一步观察免疫第28天IFN-γ联合BMSCs对CIA小鼠的疗效。结果 PBS注射组、BMSCs 14 d注射组、BMSCs 21 d注射组、BMSCs 28 d注射组的CIA小鼠关节炎临床评分分别为(9.2±0.5)分、(5.6±0.41)分、(10.2±0.53)分、(7.5±0.40)分(P<0.05);关节破坏病理评分分别为(7.3±0.5)分、(2.9±0.3)分、(10.2±0.6)分、(5.6±0.4)分(P<0.05);故与仅注射PBS相比,第14天和第28天注射BMSCs可显著缓解CIA小鼠的关节炎症,第21天注射BMSCs则加重小鼠的关节炎症。BMSCs 14 d注射组和BMSCs 28 d注射组,血清中IFN-γ的浓度分别为(500.14±34.0)pg/mL和(480.22±36.7) pg/mL;CIA小鼠血清中IFN-γ浓度在免疫第14天和第28天达到最高峰。PBS注射组、BMSCs注射组、BMSCs+IFN-γ28 d注射组、IFN-γ注射组对CIA小鼠关节破坏影响的病理评分分别为(7.8±0.3)分、(5.4±0.3)分、(4.6±0.2)分、(8.0±0.4)分(P<0.05)。结论 IFN-γ联合BMSCs可显著提高BMSCs对CIA的治疗效果。

关键词： 间充质干细胞   音猬因子蛋白,大鼠   骨质疏松   细胞移植  

摘要： 目的探讨转染音猬因子的骨髓间充值干细胞移植对卵巢切除骨质疏松大鼠的治疗作用。方法选取40只雌性SD大鼠,分为假手术组、模型组、骨髓间充值干细胞(BMSCs)移植组和音猬因子修饰的骨髓间充值干细胞(Shh-BMSCs)移植组,每组10只动物。假手术组手术中仅摘除卵巢附近的脂肪组织,但不摘除卵巢。其余的3组均进行双侧的卵巢切除手术,建立骨质疏松模型,在骨质疏松造模后的2个月,BMSCs移植组和Shh-BMSCs移植组分别通过大鼠的尾静脉注射BMSCs与Shh-BMSCs(第四代,约2^*10^6个干细胞),模型组动物注射等量PBS液体。在干细胞移植2 w后,检测尾静脉中血清钙、磷、碱性磷酸酶水平,同时采用双能X射线骨密度仪测量大鼠的股骨、腰椎及全身骨密度,micro-CT扫描进行胫骨的形态计量学指标分析。结果(1)与假手术组相比,模型组的大鼠骨小梁厚度、骨小梁数量和骨体积分数均明显减少,大鼠的骨密度、血清钙与碱性磷酸酶明显降低,而大鼠的血清磷水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),以上表明骨质疏松大鼠模型成功制备。(2)与模型组相比,BMSCs组的大鼠血清钙和和碱性磷酸酶明显升高,而血清磷水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组、BMSCs组相比,Shh-BMSCs组大鼠血清钙、碱性磷酸酶水平明显升高,而血清磷水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)同模型组的骨密度相比,BMSCs组大鼠的骨密度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组、BMSCs组相比,Shh-BMSCs组大鼠的骨密度明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)同模型组相比,BMSCs组的大鼠骨小梁厚度、骨小梁数量和骨体积分数均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),与模型组和BMSCs组相比,Shh-BMSCs组的大鼠骨小梁厚度、骨小梁数量和骨体积分数均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Shh-BMSCs细胞移植后能够治疗大鼠卵巢切除后的骨质疏松。

关键词： 卒中   脑缺血   骨髓细胞   间质干细胞   神经元   细胞分化  

摘要： 研究显示,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植具有恢复缺血性卒中患者机体感觉和运动功能的治疗效果。BMSCs移植是一种很有前景的治疗策略,因为其具有分化为神经元样细胞的能力。文章对在体外促进BMSCs向神经元样细胞分化的诱导剂进行了综述。

关键词： 股骨头坏死   骨移植   同种异体骨   骨髓间充质干细胞  

摘要： 目的研究与探讨微创减压联合同种异体骨复合骨髓间充质干细胞治疗股骨头坏死的临床治疗效果。方法2011年3月~2018年3月期间采用微创减压,彻底刮除股骨头坏死区死骨,将同种异体骨复合骨髓间充质干细胞植入坏死区治疗40例48髋青壮年股骨头缺血性坏死,ARCOⅡB14例,ARCOⅡC34例。分别对术前、术后3个月、术后6个月、术后12个月的髋关节功能进行对比分析和治疗效果评价。结果2例3髋失访,38例45髋得到完整随访(ARCOⅡB14例,ARCOⅡC31例),平均随访时间1年以上,其中36例43髋患者髋关节无明显疼痛及活动受限,X线显示坏死区形成新骨,坏死病变面积减小或消失。2例髋关节病变范围扩大,出现股骨头塌陷,髋关节功能障碍,最后行人工关节置换术。术前患者髋关节Harris平均分为43.02±7.32分,术后3个月髋关节Harris平均分为61.51±6.18分,术后6个月髋关节Harris平均分为75.53±6.33分,术后12个月髋关节Harris平均分为85.33±5.11分,术后12个月髋关节Harris平均分与术前髋关节Harris平均分比较,属于较好。结论同种异体骨复合骨髓间充质干细胞可防止股骨头病变发展和塌陷,预防股骨头坏死,可作为治疗青壮年股骨头坏死ARCOIIB-C的一种选择。

关键词： 骨保护素   骨质疏松   骨髓间充质干细胞   慢病毒重组载体  

摘要： 目的探究骨保护素(OPG)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗SD大鼠骨质疏松的可行性及疗效。方法提取并培养SD大鼠BMSCs,用携带OPG基因的慢病毒(LV-OPG-GFP)感染BMSCs,构建成OPG基因修饰的BMSCs,并将其通过尾静脉注射至去卵巢SD大鼠骨质疏松模型体内,其中A组,注射等量生理盐水;B组,BMSCs,1×10^6/kg;C组,注射LV-BMSCs,1×10^6/kg;D组,注射LV-OPG-GFP-BMSCs,1×10^6/kg。通过对SD大鼠的骨密度、血钙、血磷及血清中骨碱性磷酸酶(B-ALP)和Ⅰ型胶原C端肽(CTX-1)水平进行检测,统计并分析治疗效果及可行性。结果成功提取出SD大鼠BMSCs,细胞呈梭形,呈典型的鱼群样或漩涡样生长。LV-OPG-GFP感染BMSCs72h后,用倒置荧光显微镜观察发现,实验组OPG已成功转入BMSCs中并能稳定表达,细胞转染率可达80%以上,PCR后电泳显示,实验组OPGmRNA在(500~700)bp处出现明显的条带。模型构建术后3个月,模型组SD大鼠骨密度下降明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。LV-OPG-GFP-BMSCs尾静脉注射治疗后3个月,骨密度检测结果显示D组骨密度显著高于A、B、C组(P<0.05),但与正常组相比,仍略显不足(P<0.05);血清中钙、磷检测结果显示,D组及正常组血钙含量均显著低于A、B、C三组(P<0.05),而磷含量均显著高于A、B、C三组(P<0.05),而D组与正常组相比无明显差异(P>0.05);血清中B-ALP、CTX-1检测结果显示,D组及正常组B-ALP、CTX-1水平均显著低于A、B、C三组(P<0.05),D组B-ALP与正常组相比无明显差异(P>0.05),而CTX-1水平比正常组稍高(P<0.05)。结论通过尾静脉注射LV-OPG-GFP-BMSCs,以“全身给药”的方式,治疗SD大鼠骨质疏松,未出现明显的毒副作用,治疗效果良好,方法可行,可为临床骨质疏松的治疗提供一定实验依据。

关键词： 骨髓间充质干细胞   移植   心血管疾病   机制  

摘要： 近年来由于人们生活水平的提高,饮食结构的改变,心血管疾病的发病率越来越高,严重威胁着人类健康。心肌细胞作为永久细胞,一旦坏死后将永久缺失,坏死的心肌由瘢痕取代,从而出现心力衰竭、恶性心律失常等影响心脏功能,如何从根本上改善心脏功能是目前研究最主要的问题。骨髓间充质干细胞因其具有多向分化潜能和旁分泌等功能为治疗心血管疾病提供一种可能。有大量研究表明,通过骨髓间充质干细胞移植可改善心脏功能、提高生活质量。本文将从骨髓间充质干细胞移植治疗心血管疾病机制方面进行论述。

关键词： 急性重症胰腺炎   骨髓间充质干细胞   肿瘤坏死因子α   白细胞介素-10  

摘要： 目的:研究骨髓间充质干细胞(bmMSCs)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型治疗中的应用。方法:经胆管逆行注射牛磺胆酸钠诱导形成大鼠SAP模型。将大鼠随机分为5组:对照组、SAP组、SAP+bmMSCs(尾静脉)组、SAP+bmMSCs(腹腔)组和SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)组,每组18只。在bmMSCs注射各组,诱导SAP后3h分别通过尾静脉、腹膜内和尾静脉加腹膜内途径注射用DAPI标记的bmMSCs。分别在实验开始后的第24、48、72h分别处死6只大鼠,并收集胰腺组织和血液,测定其中血清抗炎细胞因子(IL-10)和炎症细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-6)的水平。光学显微镜下观察胰腺的病理变化,同时在荧光显微镜下检测DAPI标记的体内bmMSCs分布。结果:与对照组相比,SAP组大鼠的胰腺组织有明显的出血、水肿、炎症和坏死。与SAP组相比,3种方式bmMSCs移植组胰腺的炎症、水肿、出血和坏死均明显减少(P<0.05)。在3种方式bmMSCs移植组中,bmMSCs显著降低促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的水平,但是增加了SAP大鼠的抗炎细胞因子(IL-10)水平(P<0.05)。在SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)移植组中,TNF-α、IL-6和IL-1β水平进一步降低,IL-10水平进一步升高(P<0.05);同时,在该组中观察到更多的bmMSCs存在。结论:与腹腔注射法相比,通过尾静脉+腹腔注射或尾静脉注射bmMSCs,可以观察到更多的bmMSCs存在于胰腺组织中,大鼠恢复的更好。

关键词： 骨髓间充质干细胞   5-氮杂胞嘧啶核苷   心肌梗死   凋亡  

摘要： 目的探讨5-Aza诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗大鼠心肌梗死及对凋亡蛋白的影响机制。方法构建SD大鼠心肌梗死模型随机分为4组,每组15只:对照组、模型组、MSCs组和5-Aza-MSCs组。分离获取MSCs并进行体外增殖,5-Aza-MSCs组用5-Aza进行趋化诱导BMSCs分化为心肌细胞,并给予治疗组大鼠移植。HE染色法观察心肌组织病理学改变;采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡的发生;采用Caspase 3活性检测试剂盒检测凋亡蛋白Caspase-3表达;采用Western blot法检测Bcl-2、Bcl-xl、Bax、Bad、Bak蛋白的表达。结果 MSCs组和5-AZA-MSCs组心肌凋亡数量比模型组显著降低,5-Aza-MSC组心肌凋亡数量最低(P<0.05)。MSCs组和5-AZAMSCs组Bcl-2、Bcl-xl蛋白含量表达比模型组显著上升,Bax、Bad、Bak蛋白表达明显下降,5-AZA-MSCs组更为明显(P<0.05),5-AZA-MSCs组bcl-2/bax的比值最大,说明5-AZA-MSCs组抗凋亡能力最强。MSCs组和5-AZA-MSCs组Caspase 3含量比模型组显著降低,5-AZA-MSCs组下降更为明显(P<0.05)。结论 5-Aza诱导MSCs向心肌细胞分化,并可有效改善大鼠心肌梗死,抑制促凋亡蛋白的表达。

关键词： 骨髓间充质干细胞   心肌缺血   再灌注损伤   干细胞   外泌体   细胞因子   骨髓   间质干细胞   组织工程  

摘要： 背景:心肌缺血再灌注损伤是缺血心肌病及心内直视手术中最常见的并发症之一。骨髓间充质干细胞的发展,为临床预防与治疗心肌缺血再灌注损伤提供了新的方法。目的:综述骨髓间充质干细胞对心肌缺血再灌注损伤的治疗作用和潜在机制,旨在为骨髓间充质干细胞指导临床应用提供理论依据。方法:检索中国期刊全文数据库(CNKI)、万方、PubMed等数据库2000年1月至2018年10月期间关于骨髓间充质干细胞应用于心肌缺血再灌注损伤的文献,检索词分别为"骨髓间充质干细胞,心肌缺血再灌注损伤,研究进展"和"bone marrow mesenchymal stem cells,myocardial ischaemia/reperfusion,cell therapy,clinical trial studies"。排除旧的、重复的观点,对检索的文献进行整理,共纳入56篇文献进行分析探讨。结果与结论:(1)总结了骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤中旁分泌的因子、外泌体miRNA及其作用,例如抗炎、抗凋亡、抗纤维化、修复心肌和促新生血管等;(2)总结骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤可能涉及的分子机制,例如介导线粒体融合蛋白2的作用、心肌自噬调节、AMPK/mTOR信号通路的调节作用;(3)为骨髓间充质干细胞治疗心肌缺血再灌注损伤指导临床应用提供理论依据。