关键词： 同种异体骨   骨髓间充质干细胞   股骨头坏死  

摘要： 目的对微创减压结合同种异体骨复合骨髓间充质干细胞对股骨头坏死的治疗效果进行探究。方法选择某院2015年1月～2018年12月收治的采用微创减压,把股骨头坏死区死骨彻底刮除,在坏死区植入同种异体骨复合骨髓间充质干细胞的股骨头缺血性坏死青壮年患者48例,评价和分析髋关节功能治疗效果要分别在手术前和手术后三个月和手术后六个月和手术后一年。结果术后12个月患者的髋关节Harris平均分相比较于术前属于良好。结论对于股骨头治疗采用同种异体骨复合骨髓间充质干细胞可避免其发展和塌陷,对股骨头坏死起到较好的预防作用,青壮年治疗股骨头坏死可重点考虑。

关键词： 大鼠   类风湿性关节炎   治疗   TNF-α   siRNA   BMSCs  

摘要： 类风湿性关节炎(RA)是一种以关节滑膜炎症和软骨破坏为主的、系统性的自身免疫性疾病。动物RA虽然致死率不高,但难以治愈,导致养殖效益降低。有大量研究表明,小干扰RNA(siRNA)在体内可通过抑制目标基因的表达,有效治疗相关疾病。骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有多向分化能力及归巢特性,可从多个环节参与免疫调节,促进损伤修复,而用于免疫性疾病的治疗。本研究运用RA大鼠模型,在探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达量与RA发生发展关系的基础上,采用siRNA体内转染抑制TNF-α过表达,同时进行BMSCs体内移植,研究siRNA基因联合BMSCs移植治疗RA的可行性及其机制。1.类风湿性关节炎大鼠模型优化及部分发病机制研究实验以胶原诱导(CIA组)和冷水浴+胶原诱导(冷水浴+CIA组)两种方案制备大鼠RA模型,CIA组于背部、尾根分点皮内注射鸡Ⅱ型胶原和完全弗氏佐剂乳化液,冷水浴+CIA组同前法注射,辅以持续1 w冷水游泳。同时设置正常对照(对照组),皮内注射等量生理盐水。根据大鼠生长发育、行为学、影像学和病理学等指标,筛选出稳定RA模型的制备方案。通过监测模型大鼠血清白细胞介素1β(IL-1β)及TNF-α、踝关节骨组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1),分析RA的发病机制,深入探究TNF-α在RA发生发展中的意义。结果显示,造模组大鼠体重增长缓慢,其中冷水浴+CIA组更显著;足趾部肿胀严重,踝关节及膝关节僵直不能弯曲。造模组大鼠脾脏脏器指数均极显著高于对照组(P<0.01),且冷水浴+CIA组极显著高于CIA组(P<0.01);造模组大鼠强迫游泳不动时间均极显著高于对照组(P<0.01);冷水浴+CIA组鼠膝关节出现RA典型的滑膜炎病变。模型鼠在造模第4、6 w血清IL-1β和TNF-α浓度均极显著高于对照组(P<0.01),第6 w时冷水浴+CIA组极显著高于CIA组;造模组大鼠MMP-9蛋白表达量较对照组上升,TIMP-1蛋白表达量较对照组下降,而CIA组与对照组差异显著(P<0.05),且冷水浴+CIA组与对照组差异极显著(P<0.01)。说明采用Ⅱ型胶原诱导辅以冷水游泳成功制备出稳定的RA大鼠模型;且随病程发展TNF-α升高,TNF-α是RA发生发展的重要因子。***-α-siRNA干扰BMSCs中TNF-α表达的体外研究针对RA大鼠血清TNF-α含量显著上升的结果,提示通过抑制机体TNF-α的分泌有望治疗RA。本实验首先在体外以不同浓度脂多糖(LPS)刺激大鼠BMSCs表达TNF-α,建立RA炎症反应的体外细胞模型;再利用siRNA干扰技术抑制TNF-α表达,进而筛选出针对TNF-α的最佳siRNA序列。LPS刺激BMSCs的结果显示,10 μg/mL LPS组细胞上清及裂解物中TNF-α量极显著高于未处理BMSCs组(P<0.01)。通过荧光强度比较,筛选出120 nM siRNA与1.5 μ1转染试剂组合为siRNA的最佳转染条件。siRNA转染BMSCs后,LPS+BMSCs+siRNA494、LPS+BMSCs+siRNA504、LPS+BMSCs+siRNA564 组细胞上清中 TNF-α 浓度分别为 278.71±6.25 pg/mL、247.96±5.72 pg/mL、283.21±5.56 pg/mL,均极显著低于 LPS+BMSCs 组(P<0.01),其中 LPS+BMSCs+siRNA504 组 TNF-α 浓度不仅极显著低于LPS+BMSCs组且极显著低于未处理BMSCs组(P<0.01)。结果显示,3条候选siRNA序列均可抑制BMSCs分泌TNF-α,其中siRNA504组效果最佳。提示10μg/mL LPS刺激BMSCs后成功模拟出RA炎性反应;siRNA504为TNF-α的最佳干扰序列。***-α-siRNA联合BMSCs对类风湿关节炎模型大鼠的治疗研究利用TNF-α-siRNA504体内转染联合BMSCs移植治疗RA模型大鼠,根据大鼠体重变化、足趾肿胀、强迫游泳、血清IL-1β及TNF-α的含量、骨组织中MMP-9及TIMP-1蛋白表达量等指标变化,探究单纯基因、细胞治疗和基因联合细胞治疗对RA的治疗效果。结果显示,所有治疗组大鼠体重增长较假治疗PBS组均极显著升高(P<0.01),其中TNF-α-siRNA504+BMSCs组体重增长最明显;足趾肿胀值由低到高依次为TNF-α-siRNA504+BMSCs 组、TNF-α-siRNA504 组、BMSCs 组、甲氨蝶呤组、PBS 组;治疗组大鼠强迫游泳不动时间均极显著低于PBS组(P<0.01),且TNF-α-siRNA504+BMSCs组极显著低于其他治疗组(P<0.01);治疗4w后

关键词： 骨髓间充质干细胞   外泌体   凋亡小体   皮肤组织再生   内皮细胞   巨噬细胞  

摘要： 皮肤是人体抵御外界环境的第一道防线,易受损伤。口腔颌面部位置突出,皮肤组织更易遭受损伤。恢复创伤皮肤组织的美观和功能,是维护口腔颌面部健康的重要保障。在目前的治疗策略中,基于间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)的治疗方法展现出极大前景。MSCs具有强大的自我更新、多向分化和免疫调节能力,被用于多种疾病和组织损伤的治疗。有文献报道外源性MSCs对皮肤创伤具有一定的治疗效果,但其中的作用机制仍未阐明。近年来,MSCs的旁分泌功能受到广泛关注,包括分泌多种可溶性因子以及细胞外囊泡(Extracellular vesicles,EVs),从而参与细胞间信号转导、功能调控、和机体稳态的维持。外泌体(Exosomes)是目前研究最多的EVs,来源十分广泛,几乎所有活细胞均能够分泌。外泌体具有双层膜结构,能够包裹多种重要物质,介导细胞之间的交流。为探讨外泌体在外源性MSCs治疗皮肤创伤中的作用,我们首先在小鼠皮肤缺损模型中,验证了外源性骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)的治疗效果,并观察到其促进创面皮肤组织血管化的现象。进一步,我们分离提取了 BMMSCs来源外泌体,在小鼠皮肤缺损模型中验证其疗效,并观察其对皮肤组织血管化水平的影响。同时,我们通过体外实验,检测了外泌体对内皮细胞血管化相关功能的影响。另外,本课题组在前期工作中发现,外源性MSCs进入宿主体内后,在短时间内会发生大量凋亡,而凋亡的MSCs通过上调自身的免疫抑制能力,同样能够促进组织损伤的修复。此外,凋亡细胞会释放大量凋亡小体(Apoptotic bodies,ABs),也是EVs的一种类型。但目前关于ABs的研究相对较少,因此其生物学功能仍不明确。为探讨ABs是否也对外源性MSCs的治疗效果有一定的贡献,我们分离提取了BMMSCs来源ABs,在小鼠皮肤缺损模型中验证其疗效。同时,通过体内外实验,明确了 BMMSCs来源ABs作用的靶细胞是巨噬细胞,并检测了其对巨噬细胞功能的影响。基于以上研究背景,设计并开展了如下实验:一、BMMSCs在小鼠皮肤缺损模型中的疗效研究1、BMMSCs的分离、培养和鉴定:取8w龄雌性C57BL/6J小鼠,自骨髓腔分离培养BMMSCs,取P2代细胞进行鉴定,包括(1)光镜下观察P0代和P2代细胞;(2)流式细胞术检测MSCs相关分子标志物的表达情况(CD11b,CD29,CD45,Sca-1,CD34,CD90,CD105,CD146);(3)克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;(4)对细胞进行成骨和成脂诱导后,分别进行碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)染色、茜素红染色和油红O染色,检测细胞多向分化能力。2、小鼠皮肤缺损模型的建立和治疗:取8 w龄雌性C57BL/6J小鼠,建立背部全层皮肤缺损模型,使用Pluronic F-127凝胶(PF-127)混合BMMSCs,在创面局部涂覆进行治疗,分别在第0d,第3d,第7d进行3次治疗,在第0d,第3d,第7 d,第10 d,第14 d对创面进行拍照,在第14 d对愈合皮肤组织进行取材。设置两个对照组,分别是PBS处理组和PF-127凝胶处理组。(1)计算伤口愈合率,统计体重变化;(2)制作皮肤组织石蜡切片,分别进行H&E染色和Masson染色,观察皮肤组织恢复情况;(3)制作皮肤组织冰冻切片,通过免疫荧光染色检测角蛋白14(Cytokeratin 14,KRT14)和 CD31 的表达情况。二、BMMSCs来源外泌体在小鼠皮肤缺损模型中的疗效研究1、BMMSCs来源外泌体的分离和鉴定:采用超速离心法,分离提取BMMSCs来源外泌体,并进行鉴定,包括(1)在透射电子显微镜下观察外泌体形貌特征;(2)通过粒径分析仪对外泌体的粒径大小和分布情况进行分析;(3)Western blot检测外泌体分子标志物表达情况(CD81,CD63,TSG101)。2、小鼠皮肤缺损模型的建立和治疗:取8 w龄雌性C57BL/6J小鼠,建立背部全层皮肤缺损模型,使用PF-127凝胶混合BMMSCs来源外泌体,在创面局部涂覆进行治疗,分别在第0d,第3d,第7 d进行3次治疗,在第0d,第3d,第7 d,第10 d,第14 d对创面进行拍照,在第14 d对愈合皮肤组织进行取材。设置两个对照组,分别是PBS处理组和PF-127凝胶处理组。(1)计算伤口愈合率,统计体重变化;(2)制作皮肤组织石蜡切片,进行H&E染色和Masson染色,观察皮肤组织恢复情况;(3)制作皮肤组织冰冻切片,通过免疫荧光染色检测KRT14和CD31的表达情况。三、BMMSCs来源外泌体对内皮细胞功能的影响1、体外外泌体吞噬实验:使用

关键词： 扶正化瘀方   骨髓间充质干细胞   肝损伤   PI3K/Akt  

摘要： 目的:通过研究扶正化瘀方联合骨髓间充质干细胞,经PI3K/Akt通路对肝损伤小鼠模型改善肝脏功能的保护机制。方法:动物分组:将6周龄雄性C57BL/6J小鼠,适应性喂养一周后随机分为5组,空白组、模型组13只,其余各组10只,分别为1.空白组2.模型组3.中药组4.间充质干细胞组5.间充质干细胞组+中药组。造模:除空白组外,其余各组用CCl4植物油配制成15%油溶液进行模型制作,按0.2 ml/100 g腹腔注射,每周三次,灭菌蒸馏水自由饮用,连续给药7周。模型鉴定:在给药第8周时,空白组处死3只,模型组处死3只小鼠,采集肝脏标本,观察肝脏有无假小叶形成,以确定肝损伤模型建立。给药方法:造模成功后,进行小鼠腹腔骨髓间充质干细胞腹腔注射移植,移植细胞数量约为5×106个,空白组及模型组均接受生理盐水注射作为对照。接受中药治疗组予扶正化瘀方中药灌胃治疗,浓度1.5mg/ml,灌胃体积为0.1 mL/10 g,1天1次,持续4周,其他组给予生理盐水0.1 mL灌胃,1天1次,持续4周。细胞移植后继续给予10%四氯化碳腹腔4周,共注射12次。在特定时间,每日观察记录动物生存、活动、进食状态。每日定时观察记录动物生存、活动、进食状态。各项指标检测:取肝脏右叶相同部位组织作常规石蜡切片;通过生化法检测血清ALT、AST、TBiL、ALB 含量水平;Real-time PCR检测PI3K、Akt、mTOR mRNA表达水平;WB检测PI3K、Akt、p-Akt、mTOR蛋白相对表达量。结果:1.空白组,中药组、间充质干细胞组、间充质干细胞+中药组小鼠毛发有光泽,活动多,精神状态好,食欲佳,而模型组小鼠毛发凌乱无光泽,食欲差,精神萎靡活动少,对外界刺激反应慢。空白组、模型组、间充质干细胞组无死亡,中药组及间充质干细胞+中药组各死亡一只。造模过程中的死亡与中药、骨髓间充质干细胞无关。2.与空白组相比,模型组ALT、AST、TBIL的指标显著升高(P<0.05),ALB显著降低(P<0.05);与模型组相比,中药组、间充质干细胞组、间充质干细胞+中药组ALT、AST、TBIL的指标显著降低(P<0.05),ALB显著增加(P<0.05);与中药组、间充质干细胞组相比,间充质干细胞+中药组ALT的指标降低更显著(P<0.05),AST、TBIL、ALB无明显差异。3.相比空白组,模型组小鼠肝脏组织PI3K mRNA相对表达量、mTOR mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)、AktmRNA相对表达量无显著变化(P>0.05);相比模型组,间充质干细胞组、间充质干细胞+中药组小鼠肝脏组织PI3K mRNA相对表达量、mTOR mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),而中药组mTOR mRNA相对表达量无明显差异(P>0.05),AktmRNA相对表达量无显著变化(P>0.05)。4.相比空白组,模型组小鼠肝脏组织PI3K蛋白相对表达量、p-Akt蛋白相对表达量、mTOR蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)、Akt蛋白相对表达量无显著变化(P>0.05);相比模型组,中药组和间充质干细胞组、间充质干细胞+中药组小鼠肝脏组织PI3K蛋白相对表达量、p-Akt蛋白相对表达量、mTOR蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),Akt蛋白相对表达量无显著变化(P>0.05)。结论:1.扶正化瘀方联合骨髓间充质干细胞共同移植到肝损伤小鼠体内,同单独进行骨髓间充质干细胞移植或中药灌胃相比,能够改善小鼠的肝脏功能2.扶正化瘀方联合骨髓间充质干细胞改善肝损伤小鼠的肝脏功能、可能与其激活PI3K/Akt通路有关3.中西医结合治疗,能够加强协同治疗的作用,对肝损伤的治疗提供了新的治疗途径。4.在15%浓度油溶液的条件下,四氯化碳橄榄油溶液腹腔注射小鼠造模,简单易行,成功率较高。

关键词： 中医药   宫腔粘连   骨髓间充质干细胞   补佳乐   子宫内膜容受性  

摘要： 第一部分 大鼠宫腔粘连模型的建立与稳定性评估目的:制备稳定的实验性宫腔粘连（IUAs）大鼠模型。方法:1选取36只动情期SD大鼠进行造模,分为三组,每组12只:（1）化学损伤组:0.5ml95%乙醇分别灌注双侧宫角5min后吸出。（2）双重损伤组:微型刮匙搔刮两侧宫角,后将细菌脂多糖（LPS）棉线置于宫腔内。（3）假手术组:仅行开关腹手术。2在术后7d,14d,21d分别处死各组SD大鼠4只,取材子宫,并通过HE及Masson染色,测量其子宫内膜的腺体数量、厚度及纤维化面积,免疫组织化学法检测MMP-9和VEGF在SD大鼠子宫内膜中的表达水平。结果:***染色和Masson染色:（1）化学损伤组:损伤7 d时,细胞破裂失去正常形态,伴见部分组织出现纤维增生粘连带;损伤14d及21d时,可观察到宫腔组织呈修复趋势。（2）双重损伤组:模型制备7d后,可见内膜上皮线完整性受损,伴见组织剥脱,碎片散落于体积缩小的宫腔内,粘连带出现,并见增生现象,损伤14d及21d时,内膜镜下与7d无明显差异,仅表现为纤维程度进行性加重,宫腔体积持续缩小且其内可见粘连带面积增加。2.病理形态学指标:（1）腺体个数:造模7d后和造模14天后,均发现假手术组腺体个数多于化学损伤组和双重损伤组,造模21d后,化学损伤组和假手术组腺体个数多于双重损伤组。（2）子宫内膜厚度:造模后7d,造模后14d,造模后21d时,均发现假手术组内膜厚度厚于化学损伤组和双重损伤组。（3）纤维化面积:造模后7d,造模后14d,造模后21d时,均发现双重损伤组纤维化程度重于化学损伤组和假手术组。***9表达:造模后7d和造模后14d时,假手术组表达显著于化学损伤组和双重损伤组;造模后21d时,假手术组和化学损伤组表达显著于双重损伤组。***表达:造模后7d时,化学损伤组和双重损伤组显著表达多于假手术组,同时,双重损伤组多于化学损伤组;造模后14d和造模后21d时,均为化学损伤组和双重损伤组表达显著于假手术组。结论:1 95%乙醇及刮宫+LPS感染两种造模方法均可损伤子宫内膜造成宫腔粘连。2机械+感染因素所致的双重损伤方法建造的模型具有更高的稳定性,亦更贴近宫腔粘连的临床表现,因此成为后续补肾活血方与骨髓间充质干细胞治疗宫腔粘连的理想动物模型。第二部分补肾活血方联合BMSCs治疗IUAs的疗效评价目的:研究补肾活血方联合骨髓间充质干细胞（BMSCs）原位移植对于宫腔粘连SD大鼠子宫内膜的影响。方法:1选取50只SD雌鼠基于第一部分稳定性高的双重损伤法造模,造模7天后实施不同治疗方案。2治疗方案分组:（1）模型组:造模7天后,连续灌胃生理盐水2ml15天;（2）补佳乐组:造模7天后,连续灌胃补佳乐混悬液2ml15天;（3）补肾活血组（BSHX组）:造模7天后,连续灌胃BSHX方混悬液2ml15天;（4）骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）:造模7天后,连续灌胃生理盐水2ml天,第10天时,麻醉后开腹沿宫角纵轴肌壁间注射BMSCs混悬液1ml;（5）中药+BMSCs组:造模7天后,连续灌胃BSHX方混悬液2ml15天,于灌胃第10天,麻醉后开腹沿宫角纵轴肌壁间注射BMSCs混悬液1ml。并于治疗结束后的第5天将所有雌鼠与雄鼠以3:1的比例合笼,受精后7d处死所有老鼠取子宫标本。3子宫标本进行以下检测:（1）HE染色法,记录各组子宫形态及腺体数量,测量内膜厚度。Masson染色法,测量各组内膜纤维化程度。（2）PCR检测MMP-9、VEGF水平的表达。（3）免疫组织化学检测MMP-9、VEGF的表达。（4）记录各组子宫妊娠数量。结果:1病理形态学变化:（1）HE染色和Masson染色:模型组的内膜、宫腔等变化同第一部分所述内容相似,而治疗组均可见内膜修复现象,其中以补佳乐组和补肾活血组（BSHX组）改善最为明显,骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）组的改善最微弱。（2）腺体个数:补肾活血组（BSHX组）、骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和中药+BMSCs组多于补佳乐组,骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和中药+BMSCs组少于补肾活血组（BSHX组）,同时,骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）少于中药+BMSCs组;（3）内膜厚度:治疗组最终测量结果皆较模型组为厚,骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和中药+BMSCs组小于补佳乐组和补肾活血组（BSHX组）。（4）纤维化面积:补佳乐组、骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）及中药+BMSCs组均大于补肾活血组（BSHX组）;补佳乐组和中药+BMSCs组均小于骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）。2 PCR结果（1）MMP-9表达:补佳乐组高于骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和中药+BMSCs组;骨髓间充质干细胞组（BMSCs组）和中药+

关键词： 脑出血   骨髓间充质干细胞   神经干细胞  

摘要： 本文目的是对骨髓间充质干细胞治疗脑出血后功能障碍的研究进展进行综述,为脑出血的治疗提供参考。脑出血是一种对脑组织损害严重的疾病,在全世界范围内造成了沉重的公共健康负担。该病具有高致残率、高死亡率的特点,且治疗效果欠佳。骨髓间充质干细胞在移植后具有能定向分化为神经元并旁分泌神经营养因子的功能,成为治疗脑出血的新选择。

关键词： 骨折不愈合   骨髓间充质干细胞   治疗   血管介入  

摘要： 目的观察经股动脉注入骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗骨折不愈合的疗效。方法选取27只体质量2.5±0.5kg普通级雄性新西兰兔,随机均分为3组:A组为经股动脉注入干细胞组,B组为局部注射干细胞组,C组为PBS对照组。所有动物建立股骨骨折不愈合模型后给予相应干预,定期监测外周血中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)水平的变化,骨折端影像学表现以及病理组织学改变。结果A组和B组术后5天ALP水平较治疗前明显升高(P<0.01),术后7天OCN水平较治疗前明显升高(P<0.01),C组治疗前后基本不变,且A和C、B和C的组间ALP与OCN水平比较差异均有统计学意义(P<0.01),但A、B两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后4周时A组骨痂形成情况较B组好(P<0.05),但术后8周时差异无统计学意义,C组未出现明显骨痂。治疗后A、B两组骨折端新生骨生成并连接骨折两端,C组骨折断端不连续。结论经股动脉注入BMSCs治疗新西兰兔骨不愈合的疗效显著,且在促进早期骨痂形成上,血管介入法的作用强于局部注射法。

关键词： 急性重症胰腺炎   骨髓间充质干细胞   干细胞移植  

摘要： 目的探索骨髓间充质干细胞(bMSCs)治疗大鼠急性重症胰腺炎(SAP)模型的高效移植方式。方法将大鼠随机分为对照组(control)、急性重症胰腺炎组(SAP)(胰胆管内逆行注射5%硫磺胆酸钠)。SAP模型制作成功6 h后,分为尾静脉骨髓间充质干细胞移植组(tail vein)、腹腔注射移植组(intraperitoneal)和尾静脉-腹腔注射联合移植组(tail vein+intraperitoneal),每组18只。在移植后第24、48和72 h分别安乐死6只大鼠,收集胰腺组织及血清,使用ELISA试剂盒测定血清中抗炎因子IL-10及炎性因子IL-1β、TNF-α和IL-6的水平;HE染色后光学显微镜下观察胰腺组织病理和第72 h后各组大鼠小肠黏膜及肺泡组织病理改变;冰冻切片在荧光显微镜下观察DAPI标记的bMSCs在胰腺组织的分布。结果SAP组胰腺组织有大量出血、水肿、炎性反应及坏死;与对照组相比,3种不同方式bMSCs移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死明显减少(P<0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平显著降低,IL-10水平显著升高(P<0.05);尾静脉+腹腔联合移植组较单纯尾静脉或腹腔移植组胰腺组织的出血、水肿、炎性反应及坏死进一步减少(P<0.05),IL-1β、TNF-α和IL-6水平进一步降低(P<0.05),IL-10的水平进一步升高(P<0.05);DAPI标记的bMSCs在移植组的胰腺组织内均有分布,且在尾静脉+腹腔联合移植组观察到更多的荧光分布;72 h后可见移植组小肠黏膜及肺泡组织完整性较SAP组明显好转,中性粒细胞浸润及出血情况较SAP组明显减轻,相比于腹腔和单纯尾静脉移植,联合移植组情况进一步改善。结论在大鼠SAP模型中,bMSCs通过尾静脉+腹腔联合移植能显著抑制炎性反应,减少SAP相关性胰腺、小肠黏膜及肺损伤,其效果显著优于单纯尾静脉移植和腹腔注射移植。

关键词： 类风湿关节炎   胶原诱导的关节炎   骨髓间充质干细胞   干扰素  

摘要： 目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗胶原诱导关节炎(CIA)小鼠的最佳方法。方法不同时间点给CIA小鼠静脉注射BMSCs,观察诱导42 d各组小鼠的关节炎临床评分和病理学评分;监测CIA小鼠诱导不同时间点的干扰素-γ(IFN-γ)浓度;进一步观察免疫第28天IFN-γ联合BMSCs对CIA小鼠的疗效。结果 PBS注射组、BMSCs 14 d注射组、BMSCs 21 d注射组、BMSCs 28 d注射组的CIA小鼠关节炎临床评分分别为(9.2±0.5)分、(5.6±0.41)分、(10.2±0.53)分、(7.5±0.40)分(P<0.05);关节破坏病理评分分别为(7.3±0.5)分、(2.9±0.3)分、(10.2±0.6)分、(5.6±0.4)分(P<0.05);故与仅注射PBS相比,第14天和第28天注射BMSCs可显著缓解CIA小鼠的关节炎症,第21天注射BMSCs则加重小鼠的关节炎症。BMSCs 14 d注射组和BMSCs 28 d注射组,血清中IFN-γ的浓度分别为(500.14±34.0)pg/mL和(480.22±36.7) pg/mL;CIA小鼠血清中IFN-γ浓度在免疫第14天和第28天达到最高峰。PBS注射组、BMSCs注射组、BMSCs+IFN-γ28 d注射组、IFN-γ注射组对CIA小鼠关节破坏影响的病理评分分别为(7.8±0.3)分、(5.4±0.3)分、(4.6±0.2)分、(8.0±0.4)分(P<0.05)。结论 IFN-γ联合BMSCs可显著提高BMSCs对CIA的治疗效果。