关键词： 百草枯   骨髓间充质干细胞   肺纤维化   转化生长因子-β1   肿瘤坏死因子-α   基质金属蛋白酶-9   金属蛋白酶组织抑制因子-1  

摘要： 目的研究大鼠百草枯(paraquat,PQ)中毒后不同时期输注骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSC)治疗肺纤维化的疗效并探讨可能的机制。方法于2018年10至12月,采用全骨髓贴壁培养法分离、提纯SPF级SD大鼠的BMSC培养至第三代(P3)。对P3 BMSC进行表面抗原CD29、CD90、CD45、CD34检测并进行成骨和成脂诱导分化培养,分别以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、茜素红染色和油红O染色观察ALP、钙结节和脂肪滴形成情况。随机选择36只SPF级SD雄性大鼠随机分成6组,分别是空白对照组(NC组,注射等量的生理盐水),百草枯模型组(PQ组,腹腔注射20%PQ溶液18 mg/kg),BMSC-A组、BMSC-B组、BMSC-C组和BMSC-D组(分别于PQ染毒后3 h、3 d、7 d和14 d注射BMSC悬浮液1×106 cells/只)。28 d后处死,计算各组大鼠的肺脏器系数,碱水解法计算肺组织中羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,HE染色及Masson染色观察肺损伤及肺纤维化情况,ELISA法检测血清中转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)等细胞因子的水平。结果成功分离并获得高纯度BMSC,P3 BMSC阳性表达CD29、CD90,阴性表达CD34、CD45,并具有成骨、成脂分化潜能。HE染色和Masson染色显示,NC组大鼠肺泡结构完整,均匀;PQ组肺泡结构严重破坏,大量的胶原纤维和成纤维细胞沉积;与PQ组比较,各BMSC组肺损伤程度明显减轻,以BMSC-A组和BMSC-B组减轻程度明显。与NC组比较,PQ组大鼠的肺脏器系数、肺组织中HYP含量及血清中的TGF-β1及TIMP-1水平增高,差异均有统计学意义(P<0.05),而TNF-α、MMP-9差异无统计学意义(P>0.05);与PQ组比较,BMSCA、B组的肺脏器系数、血清中TGF-β1、TIMP-1降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与PQ组比较,BMSC-C、BMSC-D组的肺脏各系数血清中TGF-β1、TIMP-1降低,差异无统计学意义(P>0.05)。结论早期注射BMSC对于减缓百草枯导致的肺纤维化效果更好,其机制可能是BMSC通过降低体内TGF-β1水平,调节TIMP-1/MMP-9的平衡,进而减轻炎症损伤、增加细胞外基质的降解而减轻肺纤维化。

关键词： 骨质疏松性骨折   骨髓间充质干细胞   移植   机制   归巢  

摘要： 骨质疏松性骨折(OPF)与骨髓间充质干细胞(BMSCs)之间有着密切的联系。BMSCs数量减少或功能减退时可发生OPF,OPF发生时骨组织中的BMSCs功能也会发生相应的变化。在骨折机体内通过细胞分泌、免疫调节、基因表达调控及相关信号转导途径等不同机制提高BMSCs的骨组织归巢移植率,且多机制相互调节发挥生物学活性,最终促进骨折愈合。因此,BMSCs有着良好的应用前景,成为目前骨折及不同病理性骨折类型的研究热点,但其具体作用机制尚未明确。

关键词： 补肾活血汤   骨髓间充质干细胞   骨不连   疼痛   血液流变学  

摘要： 目的观察补肾活血汤联合骨髓间充质干细胞治疗长骨骨折术后骨不连疗效及对血液流变学的影响。方法将河北省沧州中西医结合医院2012年1月—2018年1月收治的64例长骨骨折术后骨不连患者随机分为2组,对照组32例给予手术联合骨髓间充质干细胞治疗,观察组32例在对照组治疗基础上联合补肾活血汤治疗3个月。观察2组治疗前后疼痛、骨痂评分及日常活动能力评分、血液流变学指标水平变化情况,统计2组疗效及并发症发生情况。结果2组治疗3个月后骨痂评分、日常活动能力评分均明显高于治疗前(P均<0.05),且观察组均明显高于对照组(P均<0.05);2组治疗后疼痛评分、全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、纤维蛋白原、血细胞比容均明显低于治疗前(P均<0.05),且观察组均明显低于对照组(P均<0.05)。观察组治疗3个月后显效率为90.6%(29/32),显著高于对照组的62.5%(20/32)(P<0.05);观察组并发症发生率为6.3%(2/32),显著低于对照组的21.9%(7/32)(P<0.05)。结论补肾活血汤联合骨髓间充质干细胞治疗长骨骨折术后骨不连疗效较佳,可显著降低疼痛程度及改善血液流变学,且安全。

关键词： 糖尿病神经源性膀胱   自体骨髓间充质干细胞   自主神经病变  

摘要： 糖尿病神经源性膀胱是糖尿病常见的泌尿系统并发症之一,主要与糖尿病自主神经病变有关。近年来,应用骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗糖尿病神经源性膀胱,可干预疾病的自然病理生理过程,逆转病情进展,恢复部分膀胱功能。本文探讨了糖尿病神经源性膀胱病理生理改变,以及BMSCs在修复神经源性膀胱中的作用,为临床治疗提供可行性证据。

关键词： 股骨头坏死   骨髓间充质干细胞   髓芯减压   组织工程   综述  

摘要： 背景:股骨头坏死为骨科常见的致残性进展性疾病,其病情发展难以逆转,最终导致髋关节功能丧失,严重影响患者的生活质量。目的:对骨髓间充质干细胞治疗早期股骨头坏死的研究进展做一综述。方法:以“BMSCs,ONFH”为关键词检索PubMed英文数据库,以“骨髓间充质干细胞、股骨头坏死”为关键词检索CNKI、万方中文数据库。检索时限为2001年1月至2019年4月,排除与文章研究目的无关及重复性文章,纳入符合标准的42篇文献进行综述。结果与结论:骨髓间充质干细胞潜在修复股骨头,不仅提供修复前体细胞,还分泌细胞因子和生长因子,启动股骨头内细胞愈合过程。大量的实验与临床研究表明,骨髓间充质干细胞治疗早期股骨头坏死是一种可行的方法。

关键词： 肺纤维化   急性加重   骨髓间充质干细胞   甘草酸二铵   转化生长因子-β1   氧化应激  

摘要： 目的探讨甘草酸二铵对骨髓间充质干细胞(MSC)移植治疗博来霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化急性加重的干预作用。方法体外分离、培养雄性Wistar大鼠的MSC细胞,将24只雌性Wistar大鼠随机分为4组:NC组,气管内注入生理盐水;BLM组,气管内注入BLM;MSC组,气管内注入BLM 7 d后,经尾静脉注入雄性大鼠MSC液0.5 mL(细胞数为2.5×106个);DGMSC组,在MSC组基础上,按150 mg·kg^-1·d^-1剂量连续腹腔注射甘草酸二铵21 d。于第28 d各组均处死6只大鼠,提取肺组织,行病理学检查评估肺泡炎及肺纤维化的程度,免疫荧光法检测Ⅱ型肺泡上皮细胞数量及分布。碱水解法测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,硫代巴比妥酸法测定肺组织丙二醛(MDA)含量,比色法测定肺组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性和总抗氧化能力(T-AOC),酶联免疫吸附试验检测肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平。结果甘草酸二铵联合MSC 7 d后移入可以减轻造模大鼠肺泡炎及肺纤维化的程度,其中肺组织匀浆中的HYP及TGF-β1含量较MSC组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。甘草酸二铵联合MSC 7 d后移入可明显增加造模大鼠的抗氧化能力,与单纯MSC 7 d后移入比较,MDA含量下降,SOD活性及T-AOC能力改善明显,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅱ型肺泡上皮细胞较单独MSC移入明显增多,且细胞形态完整。结论甘草酸二铵对MSC治疗肺纤维化急性加重有协同作用。其机制可能与抑制肺纤维化过程中的炎性因子、减弱氧化应激反应以及促进MSC向肺组织移入并向Ⅱ型肺泡上皮细胞转化有关。

关键词： 骨髓间充质干细胞   脊髓损伤   研究进展  

摘要： 骨髓间充质干细胞(BMSC)是治疗脊髓损伤患者的方法之一,其具有取材方便、免疫原性低、易于分离培养、增殖和多向分化能力良好等特点。现主要介绍BMSC治疗脊髓损伤患者的生物学特征、治疗途径、时间、次数及治疗机制。

关键词： 股骨头坏死   骨髓间充质干细胞   微循环   骨代谢平衡  

摘要： 骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有高度多向分化功能,因其易培养、来源广以及使用过程中抗原性低等优点被广泛用于再生组织工程研究领域。随着研究的深入,近年来发现BMSCs除了具有高度多向分化潜能外,还具有分泌相关细胞因子调节骨代谢平衡、调节骨再生的功能。股骨头坏死(ONFH)是各种病因导致股骨头骨缺血,进而导致局部骨代谢平衡紊乱,最终促发ONFH形成,并随着病情进展而塌陷的临床常见疾病。目前,ONFH尚无特异性的临床治疗方法,主要治疗措施依据ONFH的临床分期及患者情况而定。对于Ⅲ期和Ⅳ期,股骨头塌陷严重、髋关节毁损且严重影响生活质量的患者,主要治疗方法是髓芯减压术、自体髂骨打压植骨、人工关节置换术。对于Ⅰ期和Ⅱ期的早期ONFH,股骨头轮廓良好、未塌陷或尚未发现明显塌陷者,主要以高压氧、体外冲击波、脉冲电磁场、限制负重、口服药物、针灸等方法治疗,但其治疗效果有限。随着组织工程技术的发展,在ONFH区域移植BMSCs已成为ONFH治疗研究的热点。

关键词： 股骨头坏死   骨髓间充质干细胞   干细胞移植  

摘要： 股骨头坏死(Osteonecrosis of the Femoral Head,ONFH)又称缺血性股骨头坏死,是一个渐进的病理过程,通常是股骨头血液供应遭到破坏,导致骨髓成分、骨细胞死亡,最终坏死部分塌陷,出现髋部疼痛,活动受限,严重影响生活质量,是骨科中较常见的难治性疾病。ONFH在国内的发病率非常高,可发生于任何年龄,大多数患者处于疾病发展的早中期,在15岁及以上人群中估计有812万ONFH患者[1]。

关键词： 胰腺炎,慢性   间质干细胞   星状细胞  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠慢性胰腺炎(CP)的治疗作用及其机制。方法将SD大鼠随机分为空白组(尾静脉注射无菌生理盐水),模型组(尾静脉注射二氯二丁基酯制作大鼠CP模型),治疗组(造模后尾静脉注射BMSCs),假治疗组(造模后尾静脉注射无菌生理盐水),每组10只。取大鼠胰腺组织进行病理学评分及纤维化程度评分,ELASA法检测胰腺组织中胰腺星状细胞(PSC)活化表达的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),I型胶原蛋白,瓜型胶原蛋白水平,白细胞介素10(IL-10)水平;qRT-PCR法检测胰腺组织中PSC凋亡基因BNIP3的表达,Western-blot法检测胰腺组织中TGF-β/Smad信号传导通路中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4的表达水平。将CP大鼠PSC培养体系分为对照组(单纯PSC培养组)和治疗组(PSC和BMSCs共培养组),每组5份标本,ELASA法检测α-SMA,I型胶原蛋白,Ⅲ型胶原蛋白,IL-10的表达水平;qRT-PCR法检测PSC凋亡基因BNIP3的表达,Western-blot法检测TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4的表达水平。结果(1)治疗组大鼠胰腺病理学评分及纤维化程度评分均低于模型组与假治疗组,且差别有统计学意义(P<0.05);治疗组α-SMA、I型胶原蛋白、Ⅱ型胶原蛋白水平,TGF-βl、Smad2、Smad3、Smad4的表达水平均低于模型组与假治疗组,且差别有统计学意义(P<0.05),但PSC凋亡基因BNIP3以及IL-10的表达水平高于模型组与假治疗组,且差别有统计学意义(P<0.05);(2)治疗组α-SMA、I型胶原蛋白、Ⅰ型胶原蛋白水平,TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4的表达水平均低于对照组,且差别有统计学意义(P<0.05),但PSC凋亡基因BNIP3以及IL-10的表达水平高于对照组,且差别有统计学意义(P<0.05)。结论BMSCs可通过TGF-β/Smad信号传导通路抑制PSC增殖活化,减少胰腺纤维化的形成,进而控制慢性胰腺炎。