关键词： HA1077   骨髓间充质干细胞   慢性创面  

摘要： 目的将HA1077联合自体MSCs治疗慢性皮肤溃疡创面,观察能否促进创面愈合。方法体外分离人MSCs。慢性皮肤创面病人4例,15个创面,随机分为对照组、HA1077组、细胞移植组。对照组,基本外科换药治疗。HA1077组创面局部外用0.5 ml HA1077注射液。细胞治疗组除HA1077治疗外,还局部应用骨髓间充质干细胞。治疗后3、7、14 d计算愈合指数（WCI）。结果应用HA1077复合MSCs细胞组,在14 d时的创面愈合指数为36.32±9.92,效果好于单纯应用HA1077组和对照组,而HA1077组与对照组差别不大。结论HA1077可促进MSCs细胞修复慢性皮肤创面。

关键词： 骨髓间充质干细胞   干细胞治疗   雷诺氏病   自体   上肢缺血性疾病   血管旁路移植术   人体外周血   介入手术  

摘要： 雷诺氏病属上肢缺血性疾病，治疗手段包括药物、血管旁路移植术和介入手术等，疗效常不理想，致残率高。再生医学的发展使细胞治疗成为近年尝试的一项新技术。动物实验及临床研究均表明人体外周血、脐血及骨髓间充质干细胞有修复病变血管和促进血管新生的功能。我院近来用自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病1例，取得了满意效果。

关键词： 骨髓间充质干细胞   脑梗死   诱导分化  

摘要： 脑梗死是神经系统的常见病、多发病,病死率、致残率高,且极易复发。目前临床对脑梗死的治疗尚缺乏有效的手段,寻找一种能从组织结构及功能上修复坏死神经元的种子细胞意义重大。骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)是一类存在于骨髓网状间质内的非造血干细胞,具有高度的自我复制能力和多向分化潜能,在适当的诱导条件下可分化成多种细胞。随着BMSCs的体外培养成功、分离纯化、建立细胞系及定向诱导分化等技术的成熟,作为一种良好的种子细胞日益成为有关专家关注的焦点,与此同时它也为脑梗死患者的治疗提供了新的思路。国内外有关骨髓间充质干细胞治疗脑梗死的研究取得了一定进展,现结合相关文献作一综述。[第一段]

关键词： 中胚层(Mesode   rm)   千细胞(Stern   Cells)   听觉丧失,感音神经性(Hearing   Loss,Sensorineural)   细胞分化(Cell   Differentiation)  

摘要： 多种因素引起的内耳毛细胞及与之相连螺旋神经元的受损死亡,产生感音神经性聋。在目前有关治疗的研究中,能否通过细胞移植方法在所需部位定向产生内耳细胞,成为近年来研究热点。本文从骨髓间充质干细胞的生物学特性及在内耳感音神经性聋治疗中的基础研究方面做一综述。

关键词： 脑源性神经营养因子   骨髓间质干细胞   周围神经损伤   辣根过氧化物酶  

摘要： 背景:对周围神经损伤的治疗,目前希望能提高损伤局部的脑源性神经营养因子浓度来促进神经的修复再生。目的:观察坐骨神经损伤大鼠体内植入脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞后神经纤维的再通及运动功能的恢复情况。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-05/2008-05在福建省神经病学研究所完成。材料:无菌条件下取2月龄F344雄性大鼠股骨、胫骨制备骨髓间充质干细胞。利用构建好的慢病毒载体PNL-BDNF-IRES2-EGFP制备脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间质干细胞。方法:将60只成年SD大鼠经钳夹制作成右坐骨神经损伤模型,随机分为磷酸盐缓冲液组,骨髓间质干细胞组,脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组。在损伤处分别注射磷酸盐缓冲液2μL,骨髓间质干细胞混悬液2μL和脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞混悬液2μL。主要观察指标:在术后2,4周,通过辣根过氧化物酶示踪观察损伤侧L4,5脊髓前角存活的神经细胞数目,通过测量坐骨神经功能指数值观察大鼠损伤侧肢体运动功能恢复情况,同时应用荧光激发及免疫组化技术检测骨髓间质干细胞存活和脑源性神经营养因子表达情况。结果:脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组损伤侧L4,5脊髓前角细胞的存活数目多于磷酸盐缓冲液组和骨髓间质干细胞组,并且神经功能恢复也比其他两组好。骨髓间质干细胞组和脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组可观察到神经损伤处有较多的骨髓间质干细胞存活,并且脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞组脑源性神经营养因子表达明显比骨髓间质干细胞组多。结论:脑源性神经营养因子基因修饰骨髓间质干细胞对周围神经损伤后神经纤维的再通及功能恢复有促进作用。

关键词： 人骨髓间充质干细胞   表面标记分子   体外冲击波   细胞治疗   基因治疗  

摘要： 1人骨髓间充质干细胞的生物学特性 人骨髓间充质干细胞(human mesenehymal stem cells,hMSCs)是中胚层发育的早期细胞,具有高度自我更新能力、体外培养增殖旺盛、传代过程中遗传背景稳定。一般传代20次体外扩增10^9倍以上而不丧失其分化特性、取材方便、可移植性和植入反应较弱等优点,同时具有多方向分化性而备受关注。[第一段]

关键词： 骨髓间充质干细胞   心肌梗死   细胞移植  

摘要： 骨髓间充质干细胞是一种多能干细胞，在一定条件下具有分化为各种组织的能力。心肌梗死是心血管病中最常见、最危重的病症之一，在全世界有很高的发病率。骨髓间充质干细胞活疗心肌梗死为心血管疾病的治疗提供了新的思路。现就骨髓间充质干细咆治疗心肌梗死的研究现状予以综述。

关键词： 多器官功能不全综合征   骨髓间充质干细胞   归巢   分化  

摘要： 多器官功能不全综合征（multiple organ dysfunction syndrome，MODS）是当今外科急危重患者死亡的主要原因之一，随着人们对MODS认识的不断深化，越来越多的研究证明其发病与细胞凋亡和坏死有关。而近年来骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem ceils，MSC）作为种子细胞在修复领域已运用到多种疾病的治疗研究上，并显示出初步疗效，通过对MSC进入循环后在体内的分布及分化情况的分析，发现其对MODS的治疗研究可能有重要作用。现对MSC移植治疗MODS的相关机制予以综述。

关键词： 骨髓间充质干细胞   多器官功能不全综合征   慢病毒转染   GFP标记   PCR  

摘要： 【目的】:将带有绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）标记的兔骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）,通过静脉移植患有多器官功能不全综合征（multiple organ dysfunction syndrome,MODS）模型兔,观察MSC移植对MODS模型兔各个器官功能的影响及移植后的分布情况,为MODS的治疗提供新的思路。 【方法】:无菌条件下取兔的骨髓,体外分离、扩增MSC,慢病毒转GFP标记。将30只兔子随机分为三组:正常组、模型组（失血性休克合并内毒素休克制作兔多器官功能不全综合征模型）、模型治疗组（模型组+GFP标记的MSC移植）,每组10只;将模型组、模型治疗组人为地进行失血性休克合并内毒素休克制作兔多器官功能不全综合征模型。在模型成功制作24h后,将体外分离、扩增、标记的MSC按照3×10～6cells/kg耳缘静脉注射,分别于第1天、第7天、第14天、第28天抽血检测模型组、模型治疗组PaO2、PaCO2、BUN、ALT、CK-MB的变化;模型组、模型治疗组第28天处死后取肾、肺、肝、脑、心脏组织制作病理切片;并将肾、肺、肝、脑、心脏组织匀浆提取DNA后通过PCR技术检测MSC在各个器官的分布情况。 【结果】:获得的细胞能够贴壁成长,具有分化为成骨和成脂肪细胞的能力,通过慢病毒载体转入GFP基因后仍具有分化能力,表面抗体表达CD34-,CD45-,CD73+,CD105+,符合MSC的特性。动物模型建立后,多器官功能不全综合征兔的PaO2、PaCO2、BUN、ALT、CKMB与正常组比较,有显著差异,与临床病症类似。与模型组比较,模型治疗组PaO2在第7天检测发现有所上升,肺功能有所改善;模型治疗组BUN在第7天检测发现有所下降,肾功能有所改善;模型治疗组ALT在第14天检测发现有所下降,肝功能有所改善,其他比较均无差异。死亡率也无差异。组织病理切片发现模型治疗组的肺、肾、肝、脑、心均见转有GFP标记的细胞;通过PCR技术也发现上述组织均含有GFP基因,且在肺组织分布为最多,其次为肝、肾、脑、心。 【结论】:（1）建立了GFP标记的MSC的体外分离、培养、定向分化及鉴定的技术平台。（2）成功建立了兔MODS模型。（3）静脉注射移植的MSC可通过血液系统分布到肺、肾、肝、脑、心脏等组织器官,且在肺组织分布为最多,其次为肝、肾、脑、心。接受MSC移植的MODS模型兔PaO2在第7天检测发现有所上升,肺功能有所改善;BUN在第7天检测发现有所下降,肾功能有所改善;ALT在第14天检测发现有所下降,肝功能有所改善。治疗机理可能为抑制过强免疫炎症反应,调整系统平衡;产生细胞因子,调节网络平衡;参与损伤修复。有待进一步研究。

关键词： 骨髓间充质干细胞   缺血再灌注   肾脏  

摘要： 背景及目的 急性肾功能衰竭（Acute renal failure,ARF）是多种原因引起的肾功能骤然下降而出现的临床综合征,病死率很高,目前除了支持治疗和血液透析,尚没有有效的治疗方法,是临床治疗的难点。临床ARF的最常见病因是缺血再灌注（ischemia-reperfusion,I/R）损伤,肾脏手术、肾移植及弥散内血管性出血均可引起肾脏缺血再灌注损伤,其最主要的病理损害为急性肾小管坏死（acute tubularnecrosis,ATN）。因此,如何减轻肾小管的坏死、恢复肾小管的结构和功能是治疗ARF的重要切入点。 干细胞是一群未分化的细胞,具有自我更新和多向分化潜能。骨髓中有两种干细胞,即造血干细胞（Hematopoietic stem cells,HSCs）和间充质干细胞（Mesenchymalstem cells,MSCs）。造血干细胞可分化成为不同类型的血细胞,骨髓MSCs存在于骨髓间质,为造血干细胞提供造血支持,并能分化成间质细胞,如软骨细胞、成骨细胞、脂肪细胞等。另外,干细胞可塑性研究证明,骨髓MSCs不仅可以向中胚层细胞分化,还可以向内胚层和外胚层细胞分化。基于骨髓MSCs的这些特性,它已成为组织工程学的一种重要“种子”细胞。研究报道,骨髓MSCs能够归巢到组织受损区域,参与修复损伤的组织,并能改善其功能。在心脏疾病、神经系统疾病中,骨髓MSCs移植均起到了明显的治疗疗效。 依据骨髓MSCs的生物学特性及其在多种损伤性疾病的治疗效果,我们认为骨髓MSCs移植治疗肾损伤疾病可能有效。本研究通过体外分离、培养和扩增获得骨髓MSCs,并对其生物学特性进行检测,确定所得细胞确为骨髓MSCs。同时建立了小鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,经尾静脉注射移植入骨髓MSCs,于移植后的不同时间点检测肾功能指标（BUN,Scr）、肾脏病理及肾小管上皮细胞的增殖指数等指标,评价骨髓MSCs在小鼠急性肾缺血再灌注模型中的疗效,并初步从减轻炎症反应的角度探讨骨髓MSCs的治疗机制。 材料与方法 选择18-20g（6-8周龄）的BALB/c（H-2Kd）小鼠,雄性小鼠用来制备骨髓MSCs,雌性小鼠用来建立动物模型。采用全骨髓培养法分离、培养及扩增骨髓MSCs。90只雌性小鼠随机分为假手术组、I/R组和MSCs治疗组。MSCs治疗组和I/R组小鼠采用微血管夹夹闭双侧肾蒂40分钟,1小时后,经尾静脉注射1×10～6个骨髓MSCs（0.2ml）或等剂量的RPMI 1640。假手术组只对其进行手术操作,不夹闭肾蒂。再灌注后第1天、3天、10天和30天时收集血样,采用全自动生化分析仪测定血清肌酐和尿素氮。部分小鼠于再灌注后第3天和第30天时处死,取双侧肾脏进行HE染色,根据Paller标准对肾脏的病理改变进行评分。另一部分小鼠于再灌注后第1天和第10天时处死,取双侧肾脏进行PCNA（Proliferating Cell NuclearAntigen,增殖细胞核抗原）免疫组化染色,以PCNA阳性的肾小管细胞数反应肾小管上皮细胞的增殖指数。 结果 1.小鼠骨髓MSCs呈成纤维细胞样,免疫标记:CD29+、CD44+、CD105+、Flk-1+、CD13-、CD31-、CD34-、CD45-、CD106-、HLA-DR-。 2.小鼠骨髓MSCs在特定的诱导培养基中可定向分化为成骨细胞、脂肪细胞及内皮细胞。 3.成功建立小鼠急性肾缺血再灌注损伤模型,成功率95%。 4.与假手术组对比,I/R组再灌注后第1、3天的血清BUN值、Scr值明显增高（P＜0.05）,第10、30天的血清BUN值、Scr值无明显改变（P＞0.05）;MSCs治疗组再灌注后第1天的血清BUN值、Scr值明显增高（P＜0.05）,第3、10、30天的血清BUN值、Scr值无明显改变（P＞0.05）。与I/R组对比,MSCs治疗组再灌注后第1天和第3天血清BUN值、Scr值明显降低（P＜0.05）。小鼠MSCs治疗组的肾功能恢复较早。 5.光镜下观察MSCs治疗组的肾脏病理改变较I/R组明显减轻。I/R组和MSCs治疗组再灌注后第3、30天时的肾脏HE评分显示,MSCs治疗组的评分均较I/R组明显减低（P＜0.05）。 6.与假手术组对比,I/R组再灌注后第3天的PCNA阳性细胞数没有明显变化（P＞0.05）,第10天的PCNA阳性细胞数明显增高（P＜0.05）;MSCs治疗组再灌注后第3天PCNA阳性细胞数明显增高（P＜0.05）,第10天的PCNA阳性细胞数没有明显变化（P＞0.05）。与I/R组对比,MSCs治疗组再灌注后第3天的PCNA阳性细胞数高于I/R组（P