关键词： 间充质干细胞   贫血,再生障碍性   模型鼠   存活率  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)治疗再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)模型鼠的可行性。方法建立免疫介导AA小鼠模型。输入体外增殖培养的BALB/c小鼠骨髓MSC,作为MSC组,15只;用未治疗的AA模型小鼠作为第一对照组(模型组),15只;正常BALB/c小鼠作为第二对照组(正常组),10只。把MSC输注到实验组小鼠体内,分别于第1周、第2周、第3周、第4周观察各组小鼠的存活率、血常规、骨髓形态学变化等各项指标。结果模型组小鼠,3只于第2周内死亡,7只于第3周内死亡,2只于第4周内死亡,28d存活率20.0%;MSC组,4只于第3周内死亡,28d存活率73.3%,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。AA小鼠模型组与MSC组在8d时外周血象明显下降,14d时模型组外周血象仍明显降低,而MSC组开始回升,至28d血象基本恢复正常。骨髓行形态学检查显示模型组骨髓增生明显减低,有核细胞数明显减少,由大量脂肪细胞填充骨髓,而MSC组骨髓增生活跃,脂肪细胞较少。结论骨髓间充质干细胞可以提高再生障碍性贫血小鼠存活率,改善骨髓造血功能,对再生障碍性贫血模型鼠有治疗作用。

关键词： 下肢动脉闭塞症   自体骨髓间充质干细胞   细胞治疗   外周血单个核   动脉闭塞性疾病   临床工作者   肢体远端   远期效果  

摘要： 糖尿病和脉硬化闭塞症等所致的肢体远端动脉闭塞性疾病,由于其输出道不佳,手术治疗难度大且远期效果不肯定,药物治疗亦难以取得满意疗效。所以对于该类疾病的治疗一直困扰着临床工作者,很多患者长期被疾病的折磨甚至不得不进行截肢。

关键词： 骨髓干细胞   骨科常见病  

摘要： 目的:探讨骨髓干细胞对骨科治疗骨科常见病的进展、问题和前景。方法:广泛查阅近年来有关干细胞可塑性研究的文献。结论:骨髓干细胞治疗骨科常见病目前还处于起步阶段,有着广阔的前景,同时还有许多问题有待解决。

关键词： 干细胞/细胞学   骨髓祖代细胞/移植   间质干细胞移植/方法   视网膜疾病/治疗   动物   实验  

摘要： 目的观察视网膜下腔移植大鼠骨髓间充质干细胞（rMSCs）治疗碘酸钠诱发的变性性视网膜病变的效果。方法Brown—Norway（BN）大鼠120只，分为碘酸钠注射模型组、rMSCs移植治疗模型组、正常对照组，每组各40只大鼠。模型组大鼠通过尾静脉注射碘酸钠建立变性性视网膜病变模型，正常对照组大鼠给予生理盐水注射。通过视网膜眼底照相、荧光素眼底血管造影、视网膜电图（ERG）和组织学方法鉴定视网膜色素上皮（RPE）和神经视网膜损伤，进一步使用原位凋亡检测（TUNEL）的方法对碘酸钠诱导视网膜变性的细胞病理学变化进行观察。原代分离rMSCs后进行流式细胞术鉴定，将CM—DiI荧光染料标记的rMSCs移植到受体动物的视网膜下腔，采用II缶床检查手段结合组织学检查方法对细胞疗法进行评估。在移植手术后14～60d，检查rMSCs的存活，整合和分化情况。结果在碘酸钠注射14d内，模型组大鼠视网膜的功能逐渐衰竭，呈现时间依赖的关系。模型组大鼠RPE细胞破坏后，光感受器细胞外节出现断裂、缩短的变化直到核固缩。细胞核形态变化和TUNEL标记的结果表明光感受器细胞的死亡主要是凋亡。经过rMSCs移植，供体细胞能够存活并散在分布于视网膜下腔，分化为RPE细胞。ERG检查结果显示，60d后模型组ERGb波改善率为27．80％，模型组ERG震荡电位（Ops）改善率为59．38％；表明rMSCs移植治疗模型组大鼠视网膜功能得到明显保护。结论经过rMSCs移植，碘酸钠诱发的视网膜变性可以得到有效地治疗，移植后的rMSCs能够存活，分化为RPE细胞。

关键词： 骨髓间充质干细胞   胰腺损伤   胰岛样细胞   损伤修复  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)诱导后促进胰腺损伤修复的方法。方法应用贴壁法分离、纯化大鼠MSCs,经bFGF、EGF、HGF、2%B27、activeA、β巯基乙醇、尼克酰胺诱导12～14d,RT-PCR鉴定后,以DAPI标记治疗胰腺损伤模型大鼠。治疗1w后激光共聚焦显微镜观察胰岛样细胞的迁移、定位,RT-PCR鉴定参与胰腺损伤修复的细胞来源。结果MSCs经诱导12～14d,分化为可表达Ins1、Ins2的胰岛样细胞,经DAPI标记后治疗胰腺损伤模型大鼠1w,使炎性细胞浸润明显、细胞结构不清、胰岛结构崩解的损伤区的胰腺组织结构开始恢复,胰岛再建;RT-PCR检测Sry进一步证实损伤区胰腺组织内存在输注的胰岛样细胞。结论MSCs可诱导分化成胰岛样细胞,该细胞参与损伤胰腺组织的修复。

关键词： 骨髓间充质干细胞   脊髓损伤   细胞移植  

摘要： 目的研究静脉移植骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells，BMSCs）对大鼠脊髓损伤后功能恢复的影响。方法对10只同种异体SD大鼠的BMSCs进行体外分离、培养、扩增、纯化后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（5-bromodeoxyuridine，BrdU）进行标记；重物打击致瘫痪造模法制成完全性截瘫的同种大鼠脊髓损伤动物模型，制模后7d完全随机分为A、B、C三组：A组22只，作为BMSCs移植组，经鼠尾静脉注射2×10^6／ml的BMSCs细胞悬液1ml；B组22只，作为对照组，注射1ml培养液；C组22只，作为空白手术对照组。注射后2，3，6周，免疫组织化学检测BMSCs在损伤段脊髓的存活、分布、分化并计数，观察损伤段脊髓内生长相关蛋白-43（growth associated protein-43，GAP-43）、神经丝蛋白200（neurofilament 200，NF200）和巢蛋白的表达，注射后1，2，3，4，5，6周Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分评估各组后肢运动功能。结果移植后2，3，6周BrdU阳性的BMSCs主要分布于损伤段及邻近节段脊髓内。计数发现，移植后2周BrdU阳性的BMSCs约占移植细胞数的4．9％，3周占4．4％，6周占2．9％；移植后2周，BMSCs形态大多变为圆形或椭圆形，部分阳性标记的细胞长出神经元样突起，约12．6％表达胶质纤维酸性蛋白（glial fribrillary acidic protein，GAFP），约5．4％表达神经元特异性核蛋白（neuronal nuclear antigen，NeuN）；移植后2，3，6周，A组GAP-43、NF200、巢蛋白的表达明显高于B、C组（P〈0．05）；移植后3周开始，A组的BBB评分在各观察时相点明显高于B、C组（P〈0．05）。结论通过静脉注射的BMSCs能向脊髓损伤灶内迁徙、存活，表现出对损伤灶的趋化性，并向神经元和星形胶质细胞分化，上调GAP-43、NF200和巢蛋白的表达，改善神经功能，可用于脊髓损伤的细胞移植治疗。

关键词： 间质干细胞   心肌梗塞   干细胞移植  

摘要： 目的:探讨经静脉注射骨髓间充质干细胞(MSCs)对心肌梗塞大鼠模型心功能的影响及其在体内的分布情况。方法:在心肌梗塞后1周将标记的MSCs注射到大鼠舌下静脉内,在细胞移植后不同时间点取心、肝、脾、肺、肾脏器,进行组织学检查,观察移植细胞的分布。选取心肌梗塞模型大鼠通过心脏超声评价移植后3周、6周心功能改变情况。结果:静脉注射MSCs后其组织结构未发现明显异常改变,早期主要分布在正常心肌组织内,1周后主要分布在梗塞及交界区内,正常心肌组织内很少见细胞存留。超声检查发现在细胞移植后实验组(12只)左心室没有进一步扩大,左心功能明显好于对照组(12只):[左心室收缩末期内径(0.92±0.16)∶(1.078±0.15)cm;左心室舒张末期内径(0.66±0.13)∶(0.79±0.11)cm;左心室短轴缩短率(28.4±4.2)∶(24.3±3.1)%;左室射血分数(52.7±4)∶(42.89±4.2)%,P均<0.05]。结论:静脉注射移植MSCs后细胞可以分布到重要组织器官内,移植细胞有向梗塞心肌组织内迁移的趋势,能明显延缓左心室重构及其所导致的心功能恶化。

关键词： 干细胞治疗   肝损伤   骨髓间充质   终末期肝病   原位肝移植   疾病   免疫排斥反应   动物体内  

摘要： 终末期肝病的治疗十分棘手，原位肝移植一直被认为是最理想的方法，但由于缺乏供体、费用昂贵、手术风险大、手术后存在免疫排斥反应等因素限制了其广泛应用。自1999年以来，Petersen等、Theise等和Alison等的研究相继指出，骨髓干细胞能够在鼠肝内转化成为肝卵圆细胞甚至成熟的肝细胞和胆管细胞，并证明了在接受过骨髓移植或肝移植的患者体内这种现象也同样存在。随后，大量实验研究结果证明，BM—MSCs无论在动物体内、体外还是人类都可以在适当的条件下分化为成熟的有功能的肝细胞，并能改善肝损伤机体的肝功能，这为终末期肝病的治疗提供了新的思路。

关键词： 骨髓间充质干细胞   心肌梗死   心肌细胞   细胞移植  

摘要： 心肌梗死是导致人类死亡的主要疾病之一，干细胞移植为心肌梗死的治疗提供了一种新的思路。骨髓间充质干细胞（MSCs）是一种多能干细胞，在体内外可诱导分化为心肌样细胞，目前进行的动物和临床实验表明局部移植MSCs可以促进血管再生，阻止心室重构，改善心功能，为更有效的治疗心肌梗死提供了广阔的前景。

关键词： 干细胞治疗   骨缺损   骨髓间充质   BMP   自体骨移植   异种骨移植   转染   免疫反应  

摘要： 骨缺损是指骨折断端因某种原因丧失了一些骨质而形成较大的缺损，多见于创伤、感染、先天性因素及肿瘤切除等。骨移植术是最常用的治疗手段，包括自体骨移植、异体骨甚至异种骨移植。自体骨移植虽具有较好的成骨活性，不存在免疫方面的问题，但需另作切口取骨，供骨来源受限，有供骨区疼痛、失血、手术瘢痕形成和时间延长等缺点；异体骨及异种骨移植难以及时获取移植骨，且有乙肝、爱滋病等感染及免疫反应的危险。