关键词： 人骨髓间充质干细胞   心肌梗死   年龄差异   血管形成   间质重构  

摘要： 目的：既往的动物研究已经证实，移植同源或者自体骨髓间充质干细胞能有效改善心脏功能。然而，在临床研究中发现，应用自体间充质干细胞治疗心梗效果并不明显。年龄差异有可能是造成这一结果的主要原因，因此我们通过移植不同年龄的人间充质干细胞来确定年龄是否对心梗后的细胞治疗效果产生影响。　　 方法：骨髓取自不同年龄患者，年轻组为1～5岁，老年组为50～70岁，进行细胞培养，并取第3代细胞应用流式细胞仪鉴定细胞表面抗原。制作大鼠心梗模型，把2.0xl06个培养的不同年龄人骨髓间充质干细胞（对照组为相同体积培养基）注射到大鼠心梗边缘区，并每天给予5mg/kg的环孢素A以预防排斥反应。术后第1、2和4周进行心动超声检查以评价大鼠心脏功能。于术后1周取部分大鼠心脏进行RT-PCR和Western Blot的方法检测TIMP-3、MMP-9和VEGF基因和蛋白表达情况;并用酶谱和反酶谱方法检测MMP-2、MMP-9和TIMP-3蛋白活性情况。术后4周时取大鼠心脏组织进行人线粒体和CD31染色对比不同年龄细胞存活和新生血管数量情况。　　 结果：术后超声心动检查发现，年轻组大鼠心功能（射血分数和左室短轴缩短率）明显好于对照组和老年组(P<0.05)，左室收缩和舒张末期容积也要明显小于对照组和老年组(P<0.01)。术后1周，与对照组和老年组相比，年轻组大鼠心脏TIMP-3和VEGF基因和蛋白水平明显升高，而MMP-9水平明显降低(P<0.05)。与之一致的是，年轻组MMP-2、MMP-9蛋白活性低于对照组和老年组，而TIMP-3蛋白活性高于对照组和老年组(P<0.05)。术后4周，年轻组新生血管和存活细胞数量也明显多于老年组和/或对照组(P<0.05)。　　 结论：人间充质干细胞再生能力随着年龄增长明显减弱。移植年轻人间充质干细胞可以显著改善大鼠梗死后心功能，可能的机制是抑制心肌间质重构和促进血管形成。这说明临床进行干细胞移植治疗心梗有必要选取年轻来源的干细胞。

关键词： 骨髓间充质干细胞   干细胞治疗   心肌梗死   成心肌细胞   定向分化   移植治疗   MSCs   生物学基础  

摘要： 1999年Makino等[1]首次在体外应用5-氮胞杂苷（5-Aza）将骨髓间充质干细胞（mesenchymal stemcells MSCs）定向分化成心肌细胞,为MSCs移植治疗心肌梗死提供了细胞生物学基础。2001年,Orlic等[2]将Lin-C-Kit＋干细胞注射到心肌梗死小鼠的存活心肌内，发现其分化为心肌样细胞，开创了干细胞在体内移植治疗心肌梗死的先河。然而，随着研究的不断深入，众多学者对MSCs能否分化为心肌细胞、其改善心功能机制等方面产生质疑，本文就干细胞移植治疗心肌梗死存在问题与争议综述如下。

关键词： 糖尿病肾病   骨髓间充质干细胞  

摘要： 目的探索骨髓间充质干细胞(MSCs)经体外扩增培养后移植入糖尿病肾病大鼠体内能否改善或者治疗糖尿病肾病。方法SD大鼠60 mg/kg STZ一次性腹腔注射,糖尿病成模后4周,成功制备糖尿病肾病大鼠被随机分为:糖尿病肾病对照组(n=12)和干细胞移植组(n=12),另选6只正常大鼠作为对照组。MSCs经体外培养、鉴定、BrdU标记后,心脏注射到干细胞移植组大鼠体内(2×106MSCs/200μL),一周后再次注射等量干细胞。于末次注射后1、2、8周测定大鼠血糖、体质量、24 h尿总蛋白、肌酐清除率、肾脏肥大指数,观察大鼠肾脏病理变化和标记干细胞体内作用情况。结果MSCs体外扩增培养后表达间充质细胞的表型抗原,能多向分化为成骨、成脂细胞。在体内能趋化到受损肾脏,但在干细胞定植部位未发现增殖细胞。干细胞移植组和糖尿病肾病对照组在各观察时点血糖、尿总蛋白、肌酐清除率、肾脏肥大指数均明显高于正常对照组(P<0.05),体质量均低于正常对照组(P<0.01)。干细胞治疗后1周移植组较糖尿病肾病对照组血糖降低〔(26.7±2.8)vs(29.9±1.6)mmol/L,P<0.05〕。在第2、8周,移植组较糖尿病肾病对照组24 h尿总蛋白降低,但差异无统计学意义。干细胞移植组肌酐清除率低于糖尿病肾病对照组,在治疗后2周两组差异有统计学意义〔(8.6±1.9)vs(17.1±1.6)mL/min,P<0.05〕。在第2周干细胞移植组的肾脏肥大指数较糖尿病肾病对照组减少(5.5±0.1 vs 6.2±0.3,P<0.05),但高于正常对照组(3.2±0.2)。结论发现MSCs经体外培养标记后在体内能趋化到糖尿病肾病大鼠肾脏,可以暂时改善糖尿病肾病。

关键词： 糖尿病足   骨髓   干细胞   护理  

摘要： 总结了8例骨髓间充质干细胞治疗糖尿病足的护理经验。主要包括心理护理,局部伤口处理,骨髓的采集,骨髓间充质干细胞的回输,血糖监测及低血糖反应的观察,健康教育等。认为精心的护理有助于提高骨髓间充质干细胞治疗糖尿病足的疗效。

关键词： 移植   自体   骨髓间充质干细胞   骨不连  

摘要： 目的:探讨体外培养经皮移植自体骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗四肢骨折骨不连的效果.方法:12例四肢骨折骨不连患者采用体外培养经皮移植自体MSCs治疗.结果:9例获得了骨性愈合,骨折愈合平均时间为5个月(4～7月),X线显示骨折线消失,骨痂形成.骨折愈合率为75%(9/12).结论:体外培养经皮移植自体MSCs治疗四肢骨折骨不连创伤小、安全、并发症少,临床效果满意.

关键词： 骨髓间充质干细胞   刀豆蛋白A   急性肝损伤  

摘要： 为了探讨骨髓原间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)治疗急性肝损伤的可行性及有效性,本研究分离培养小鼠MSC,并建立刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)诱导的小鼠急性肝损伤模型。在ConA静脉注射后立即给予MSC静脉输注,24小时后进行小鼠血清转氨酶、肝脏组织病理学和原位细胞凋亡检测,并用实时定量RT-PCR的方法检测小鼠肝脏组织内炎症介质表达变化。结果显示,ConA静脉注射后立即给予MSC静脉输注,小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平降低(p<0.05),肝脏坏死和肝细胞凋亡减轻,肝脏组织内TNF-α、IFN-γ的水平明显降低(p<0.05),iNOS、IL-2和IL-10的表达水平基本不受影响(p>0.05)。结论:静脉输注MSC能减轻ConA诱导的小鼠急性肝损伤。

关键词： 骨髓间充质干细胞   贫血   再生障碍性   模型鼠   存活率   肿瘤坏死因子α  

摘要： 背景:骨髓间充质干细胞在体外抑制再生障碍性贫血T淋巴细胞的活化与增殖,并有支持骨髓造血作用。目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血模型鼠存活率的影响,探讨其治疗再生障碍性贫血的机制。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2009-01/04在安徽医科大学第一附属医院中心实验室完成。材料:清洁级雌性BALB/C小鼠40只,8～10周龄,体质量16～18g,作为受体。清洁级DBA/2小鼠5只,6～10周龄,体质量15～19g为淋巴细胞供体。方法:取BALB/c小鼠骨髓进行间充质干细胞体外增殖培养,传至3～5代的细胞用于实验。建立免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型。40只BALB/C小鼠随机分为3组,治疗组(n=15):造模后将1×106个骨髓间充质干细胞输注到治疗组小鼠体内进行治疗;模型组(n=15):仅造模不进行任何治疗;对照组(n=10):不进行任何干预。主要观察指标:分别于第1,2,3,4周观察各组小鼠的存活率;流式细胞仪及酶联免疫吸附法测定骨髓间充质干细胞治疗后第28天各组小鼠T淋巴细胞亚群及血浆肿瘤坏死因子α的表达。结果:①模型组小鼠3只于第2周内死亡,7只于第3周内死亡,2只于第4周内死亡,28天存活率20%;治疗组小鼠4只于第3周内死亡,28天存活率73%。②与模型组相比,治疗组和对照组CD4的表达增高[(27.12±4.23)%,(32.18±6.73)%,(38.44±7.88)%,P<0.01];CD8和肿瘤坏死因子α表达均降低[CD8:(34.42±5.13)%,(27.33±5.09)%,(23.31±5.24)%,P<0.01;肿瘤坏死因子α:(47.27±10.11),(12.34±5.87),(9.31±3.77)ng/L,P<0.01]。结论:骨髓间充质干细胞可以提高再生障碍性贫血小鼠存活率,其治疗机制可能与调节T淋巴细胞亚群及抑制T淋巴细胞分泌的肿瘤坏死因子α有关。

关键词： 心肌梗死   间质干细胞移植   细胞分化  

摘要： 目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）或经预处理分化的BMSC（induced BMSC，iBMSC）移植能否改善心肌梗死大鼠的心功能。方法雄性sD大鼠32只（250—300g），分为假手术组、磷酸缓冲液（PBS）注射组、BMSC移植组和iBMSC移植组共4组，每组8只。将分离的BMSC与心肌细胞（微环境）共培养2周进行预分化，大鼠心肌梗死模型建立1周后，将BMSC或iBMSC细胞悬液注入梗死区的边缘位置。分别于细胞移植后的第1、2和4周，超声心动图检测各组大鼠心脏的左心室射血分数（LVEF），左心室舒张末期内径（LVIDd），左心室收缩末期内径（LVIDs）及短轴缩短率（FS）。移植后第4周进行组织学观察，心脏组织石蜡包埋切片后采用免疫荧光技术检测移植细胞的示踪标记物及心肌标志蛋白的表达情况。结果iBMSC组LVEF在第4周时是（77．3±2．6）％，与假手术组（81．8±3．6）％比较差异无统计学意义（P〉0．05），而PBS组及BMSC组的LVEF值均低于假手术组（P均〈0．05）。PBS组FS移植前后没明显变化，iBMSC组FS从移植前的（24．1±3．9）％上升到第4周的（45．1±3．1）％。M型超声心电图显示iBMSC治疗组左心室收缩能力较细胞移植前明显改善。免疫荧光分析显示，SPIO标记的移植细胞在体内表达心肌细胞标志蛋白α-辅肌动蛋白和缝隙连接蛋白43。结论经过微环境预处理的BMSC较未处理的干细胞改善心功能效果更好。这一研究为干细胞的改造与细胞移植修复心肌梗死提供了强有力的证据。

关键词： 尿酸   有机阴离子转运蛋白1   有机阴离子   转运蛋白3   点突变   综述  

摘要： 颈腰背痛是骨科的一种常见病、多发病,引起这些病症的一个重要因素是椎间盘退变。椎间盘具有维持脊柱纵轴稳定性、保持脊柱活动范围的功能。随着年龄增长,椎间盘在体积、形状、结构、组成及生物力学等方面不断发生变化。椎间盘含水量下降,纤维环破裂,组织间压力重新分配,继而功能改变。传统的治疗方法包括保守治疗和手术治疗,虽然可在一定程度上缓解由椎间盘退变引起的临床症状,但不能解决根本问题,还会产生相应的并发症,如术后腰背痛、神经损伤、脊柱活动受限等。理想的外科治疗方法是修复退变的椎间盘,而干细胞技术的兴起及其在临床不同领域的应用,为椎间盘退变疾病的治疗带来了新的思路。[第一段]

关键词： 骨髓间充质干细胞   狼疮性肾炎   干细胞治疗   erythematosus   弥漫性结缔组织病   系统性红斑狼疮   自体   免疫调节作用  

摘要： 系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是自身免疫介导的、以免疫性炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病，常并发有狼疮性肾炎，国内外现有的治疗方案疗效不佳。骨髓间充质干细胞（MSC）具有的免疫调节作用、组织修复和重建作用在治疗理论上与SLN发病机理相符。现将我院采用白体骨髓MSC输注治疗狼疮肾炎1例报道如下：