关键词： 干细胞   连接蛋白类   心肌梗死   心力衰竭  

摘要： 目的 观察移植过表达缝隙连接蛋白43（Cx43）的骨髓间充质干细胞（BMSC）对心肌梗死后心力衰竭大鼠的治疗作用.方法 将60只SD大鼠分为4组,每组15只.假手术组;DMEM/F12组：注射DMEM/F12培养基;EGFP（增强的绿荧光蛋白）组：移植转染EGFP 基因的BMSC;Cx43组：移植转染Cx43基因的BMSC.采用结扎前降支的方法,建立心肌梗死模型,于梗死后30 min,行细胞移植.移植后4周,超声心动图检测心脏功能并取心脏组织.Masson染色检测梗死面积及胶原纤维含量.激光共聚焦显微镜观察EGFP基因及Cx43的表达.RT-PCR检测移植区心肌组织Cx43 mRNA含量.结果 EGFP组和Cx43组心功能明显改善[左室射血分数分别为（76.0±6.9）%、（82.9±5.0）%,P＜0.05],心肌梗死面积缩小,胶原纤维含量降低[分别为（13.6±4.7）%、（15.9±3.2）%,P＞0.05],Cx43组心脏重构指标改善更明显.激光共聚焦显示EGFP组和Cx43组均有BMSC存活,并与宿主心肌组织间形成缝隙连接.DMEM/F12 组Cx43 mRNA水平较假手术组显著降低（0.18±0.05比0.78±0.14,P〈0.01）,EGFP组Cx43 mRNA的含量与DMEM/F12 组相比差异无统计学意义（0.20±0.09 比 0.18±0.05,P〉0.05）.Cx43组Cx43 mRNA水平较DMEM/F12 组及EGFP组明显增加（0.39±0.14 比 0.18±0.05,P〈0.01;0.39±0.14比0.20±0.09,P〈0.05）.结论 过表达Cx43 的BMSC移植改善心力衰竭的效果更为明显,可能与BMSC改善了移植区缝隙连接表达有关.

关键词： 梗死   大脑中动脉   间质干细胞移植   疾病模型   动物   颈动脉   大鼠  

摘要： 目的探讨颈动脉途径移植骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗大脑中动脉栓塞（MCAO）大鼠的疗效及作用机制。方法直接贴壁法分离培养、纯化和Brdu标记BMSCs；流式细胞仪鉴定BMSCs表面分化抗原CD90、CD29、CD106、CD34、CD45、CD11b；线栓法制作MCAO模型；颈动脉输注3×10^6 BMSCs治疗MCAO大鼠模型；改良神经功能损伤评分（mNSS）、黏附实验和体质量等评价大鼠的行为功能改善及体能恢复；Bielshowsky—LuxolFast Blue双染检测神经纤维的变化；直接免疫荧光法检测Brdu标记的BMSCs；免疫组织化学检测大鼠脑组织神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经生长抑制因子（Nogo—A）、突触素（SYN）、增殖细胞核抗原（Ki-67）、神经胶质酸性蛋白（GFAP）及血管内皮生长因子（VEGF）表达。结果BMSCs高表达CD90（91．70％）、CD29（88．40％）和CD106（52．20％），低表达CD34（2．70％）、CD45（5．65％）和CD11b（7．82％）。BMSCs组与磷酸盐缓冲液（PBS）组比较，MCAO建模后第21、28和35天的mNSS评分（4．89±1．36，7．00±1．67，3．78±1．30与6．33±1．21，2．44±1．13，5．67±1．51；t=2．69，3．83，4．75）和黏附实验时间（单位为秒；54．00±10．48，68．17±11．09，36．89±9．80与59．33±12．40，23．44±9．04，46．50±9．38；t=2．51，3．92，4．77）差异均具有统计学意义（P〈0．05）。MCAO建模后第35天，与PBS组比较，BMSCs组梗死侧的胼胝体面积显著增大，脑组织Brdu、SYN、Ki-67、GFAP和VEGF的阳性细胞明显增多，Nogo—A降低，NSE无明显变化，梗死体积差异无统计学意义。结论颈动脉移植BMSCs能改善脑梗死大鼠的脑神经功能，其作用机制可能为促进内源性细胞增殖、血管再生和突触重建，增强神经纤维修复和星形胶质细胞保护功能。

关键词： 间质干细胞   移植物抗宿主病   基因   T细胞受体  

摘要： 目的研究输注骨髓间充质干细胞（MSC）治疗慢性移植物抗宿主病（cGVHD）后患者外周血T细胞受体（TCR）Vβ基因谱系变化及克隆性增殖情况。方法1例经异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）后发生cGVHD的患者接受MSC治疗，分别于第1次输注MSC后第1、5天及第2次输注MSC后第1、10、20天采集外周血，同时将输注的MSC作为对照，利用反转录－聚合酶链反应（RT-PCR）方法扩增单个核细胞中24个TCRVβ基因的互补决定区3（CDR3），PCR产物经荧光标记和基因扫描分析CDR3长度，从而确定T细胞的克隆性。结果患者输注的MSC不表达全部TCRVβ亚家族，第1次输注MSC后第1天也未发现TCRVβ亚家族的表达，随后的时间点分别出现了3、10、14、10个Vβ亚家族的克隆增殖T细胞，增殖形式以寡克隆、多克隆为主；临床判断cGVHD表现减轻。结论MSC对allo－HSCT后患者免疫功能的恢复有一定作用，并能减轻cGVHD效应；TCRVβ亚家族谱系分析提示有部分优势表达。

关键词： 缺血性疾病   血管内皮生长因子   基因   间充质干细胞  

摘要： 缺血性疾病严重威胁人类的健康,尤其是因弥漫性血管病变、远端动脉流出道差、体质差无法耐受手术者,目前临床治疗方法疗效有限,严重影响患者生活质量。治疗性血管新生疗法为此类疾病患者带来了希望。本文就携血管内皮生长因子基因骨髓间充质干细胞治疗缺血性疾病的研究进展进行综述。

关键词： 类风湿关节炎   骨髓间充质干细胞   基质金属蛋白酶  

摘要： 目的:我们采用骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗小鼠Ⅱ型胶原性关节炎(CIA),观察BMSCs移植对CIA小鼠基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)的影响。为RA(Rheumatoid arthritis)这一难治性疾病提供新的治疗方法。方法:①采用密度梯度离心法沉降、分离单个核细胞后,应用美国BD公司FAcscaliburTM型分选式细胞分析仪,进行骨髓CD34+细胞分选。②弗氏完全佐剂+Ⅱ型胶原初次免疫近交系C57BL/6(H-2b)小鼠,14天弗氏完全佐剂+Ⅱ型胶原第2次免疫动物,建立CIA小鼠模型。③实验分组:正常对照组、模型组、BMSCs移植治疗组、甲氨喋呤治疗阳性对照组。每组10只小鼠。④BMSCs移植采用尾静脉注射,除模型组、正常对照组用生理盐水,BMSCs所含的CD34+细胞数为2×105。⑤观察42天不同分组小鼠的关节症状及进行关节炎指数和肿胀度测定。⑥移植后第42天全部处死动物取脾组织采用RT-PCR法检测MMP-2、MMP-9mRNA的表达,收集数据并做统计分析。结果:BMSCs移植治疗组MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,与甲氨喋呤治疗阳性对照组比较有显著性差异(P<0.05);与正常对照组比较,无显著性差异(P>0.05)。结论:BMSc移植治疗CIA小鼠能显著抑制MMP-2、MMP-9mRNA的表达,具有下调MMP-2、MMP-9mRNA表达的免疫调节作用。

关键词： 急性肺损伤   急性呼吸窘迫综合征   骨髓间充质干细胞   内皮祖细胞   文献综述  

摘要： 急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征是由肺毛细血管内皮细胞和肺泡上皮细胞损伤导致的急性呼吸衰竭,是威胁患者生命的常见危重症,其治疗仍局限在器官支持层面上。研究表明骨髓间充质干细胞/内皮祖细胞是理想的外源性修复种子细胞,可以修复受损的肺泡上皮及肺血管内皮细胞,调控肺局部炎症反应、提高肺组织的抗氧化能力、改善肺动脉的舒缩功能,可能是治疗急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征一个很有前景的方法。作者就骨髓间充质干细胞/内皮祖细胞移植治疗急性肺损伤及急性呼吸窘迫综合征的研究进展进行综述。

关键词： 股骨头缺血性坏死   干细胞治疗   骨髓间充质   临床研究   股骨头缺血坏死   髋关节功能受限   股骨头塌陷   保留股骨头  

摘要： 股骨头缺血坏死（avascular necrosis of the femoral head,ANFH）是骨科的常见病和多发病。在ANFH的自然病程中,多出现股骨头塌陷,导致患者髋关节功能受限甚至完全丧失,现有以保留股骨头为目的的各种治疗方法虽然取得了一定的成效．但其远期疗效往往并不理想，

关键词： 川芎嗪   大鼠骨髓间充质干细胞治疗   大鼠脑挫伤实验   免疫组织   阳性细胞数目   分组实验  

摘要： 目的观察川芎嗪联合大鼠骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑挫伤的实验方法以及效果。方法选择试验用脑挫伤wistar大鼠,采用Feeney自由落体法,复制大鼠脑挫伤动物模型,将这些动物模型随机分为空白对照组,假手术组,川芎嗪治疗组,间充质干细胞治疗组和川芎嗪联合间充质干细胞治疗组5组实验,使用微量进样器打在损伤灶周围,第24h和第72h取脑切片进行abc免疫组织化学染色。采用图象分析技术统计神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的神经元数密度。结果3组治疗组的NSE和GFAP细胞数目高于假手术组和空白对照组(P<0.05),72h组明显高于24h治疗组(P<0.05)。结论川芎嗪对脑挫伤的大鼠海马周围皮层神经元有保护作用,其机制可能部分与半暗带Bcl-2表达有关。

关键词： 脑损伤   干细胞治疗   骨髓间充质   MRI   神经功能恢复   brain   人类健康   经济负担  

摘要： 脑损伤（traumatic brain injury,TBI）一直是影响人类健康的重大问题,给家庭和社会带来巨大的社会和经济负担。因此,促进TBI患者脑神经功能恢复,提高生存率,改善生活质量等已成为当前研究热点。

关键词： 甘露醇   骨髓间充质干细胞   血管性痴呆   胆碱乙酰转移酶   乙酰胆碱酯酶  

摘要： 目的探讨甘露醇对骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植治疗血管性痴呆（VD）大鼠行为学及海马胆碱能系统活性的影响。方法体外全骨髓培养结合细胞贴壁法培养大鼠BMSCs。采用双侧颈总动脉结扎法制备VD模型。将大鼠随机分为4组：（1）甘露醇预处理BMSCs组：造模4w后,先进行尾静脉注射20%甘露醇,10~30m in后,再尾静脉注射BMSCs;（2）BMSCs组：造模4w后,经尾静脉注射等量BMSCs;（3）培养基组：造模4w后,经尾静脉注射等量BMSCs基础培养基;（4）假手术组：不进行任何干预。BMSCs移植4w后进行Morris水迷宫试验和大鼠海马内胆碱乙酰转移酶（ChAT）和乙酰胆碱酯酶（AChE）活性检测。结果甘露醇预处理BMSCs组的ChAT和AChE活性均比BMSCs组、培养基组有明显提高（P〈0.05）,同时其行为学亦较BMSCs组、培养基组有明显改善（P〈0.05）。结论甘露醇预处理后进行静脉注射移植BMSCs,使VD大鼠模型海马胆碱能系统的活性明显增强,并进一步改善VD大鼠的学习与记忆能力。