关键词： 骨髓间充质干细胞   感染性骨缺损   微小颗粒骨   骨移植  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞用于治疗感染性骨缺损是否可行，以及微小颗粒骨复合骨髓间充质干细胞治疗感染性骨缺损的效果，为应用临床提供实验依据。 方法将24只新西兰白兔制成双侧桡骨中段节断性长约1cm的感染性骨缺损的动物模型，将制备的24只动物模型随机分为2组（A组和B组），A组植入自体微小颗粒骨，B组植入自体微小颗粒骨复合骨髓间充质干细胞，与术后2、4、8、12周行放射学及组织学检查，按Lane-sandhu标准对两组感染性骨缺损修复的效果进行评分,比较两组方法修复感染性骨缺损的效果。 结果植入自体微小颗粒骨复合骨髓间充质干细胞组（B组）在术后第2、4、8周时骨缺损修复的评分高于单纯颗粒骨植骨组,评分差异具有统计学意义（P<0.05），术后第12周时两组均以完全修复，评分差异没有统计学意义（P>0.05）。 结论骨髓间充质干细胞用于治疗感染性骨缺损，可加速感染性骨缺损的愈合；自体微小颗粒骨复合骨髓间充质干细胞可作为一种新的方法治疗感染性骨缺损。

关键词： 转基因HBV小鼠   肝损伤   骨髓间充质干细胞   肝样细胞   诱导   移植  

摘要： 研究背景与目的：肝脏疾病是影响人类健康的最为常见疾病之一。各种有害因素导致的肝损伤主要有病毒性肝炎、酒精性肝炎和药物性肝炎等类型，其临床表现为肝坏死、脂肪肝、胆汁淤积、肝纤维化、肝硬化以及肝癌等。目前对肝损伤的治疗仍是一个全球性的严峻课题，而干细胞移植用于治疗肝损伤是一种新方法并显示出良好的应用前景。骨髓间充质干细胞具有极强的多向分化潜能和自我复制能力,有望成为治疗肝损伤的一种新型种子细胞。本课题基于上述问题,采用HGF和EGF联合诱导BMSCs21天为肝样细胞，再将肝样细胞移植到肝损伤的HBV小鼠肝脏来治疗，并通过鉴定来确定细胞移植治疗肝损伤的效果，以期为临床研究提供实验基础。方法：(1)分别建立HBV转基因小鼠和C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞BMSCs的分离、培养体系，并进行比较研究。(2)将纯化后的BMSCs在肝样细胞生长因子HGF和表皮生长因子EGF的作用下进行诱导培养后,免疫细胞化学检测肝样细胞表面标志物角蛋白CK18及糖原PAS的表达,明确是否可分化为肝样细胞（3）制作小鼠肝损伤模型，将标记后的BMSCs移植入肝损伤模型小鼠体内,荧光显微镜检测干细胞在肝内的定植情况,检测血清肝功能及免疫组化检测肝组织角蛋白的表达情况。结果：(1) C57BL/6小鼠的原代BMSCs生长迅速，按1:3传代后呈漩涡状生长，形态类似成纤维细胞。HBV转基因小鼠原代BMSCs生长缓慢；以1:2传代后生长缓慢，并且有明显的血清依赖性及密度依赖性。(2) BMSCs经HGF和EGF诱导培养后,免疫细胞化学检测肝样细胞表面标志物角蛋白CK18及糖原PAS的表达均为阳性。(3)血清ALT及AST活性结果，模型组A2与正常对照A1组存在显著差异（P<0.05）；模型组A2与干预组B1、B2在第四周有显著差异（P<0.05）；干预组B1、B2在第四周有显著差异（P<0.05）。结论：(1)与C57BL/6小鼠BMSCs比较，HBV转基因小鼠BMSCs体外生长存在显著的血清依赖性及密度依赖性。(2) BMSCs经HGF和EGF诱导培养后,可分化为肝样细胞。(3)在第四周时两个干预组BMSCs组、BMSCs诱导为肝样细胞组之间也存在显著差异，从ALT及AST活性及荧光标记结果来看，BMSCs诱导为肝样细胞组对受损肝脏的功能恢复上有更好的作用。

关键词： 兔   骨髓间充质干细胞   诱导分化   移植   骨折  

摘要： [目的]：了解兔骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,BMSCs)在成骨诱导剂的作用下定向分化为不同分化状态的细胞(包括多能干细胞、专能干细胞或前体骨细胞、成体骨细胞多个阶段),然后将各个阶段细胞移植到兔骨折模型后,观察不同分化阶段细胞对组织修复能力的差异及是否已归巢,以寻找出最适宜移植的细胞时间和状态。 [方法]：体外获得BMSCs,用GFP转基因标记后,向前体骨细胞定向诱导,分别在诱导第0、3、7、14、21、28d检测ALP活性。将实验兔随机分为5组：BMSCs移植组5只；成骨诱导3天移植组10只；成骨诱导7天移植组10只；成骨诱导21天移植组10只；模型对照组5只。建立兔尺骨骨折动物模型。造模成功24h后,将带GFP的各组细胞按照3×106cells/kg经尺骨骨折处局部注射,分别于第2、4和6周进行X射线检查,第6周全部处死后,取兔尺骨组织制作切片,观察不同诱导阶段的BMSCs移植后对骨折组织治疗的效果差异。 [结果]：①BMSCs能够正常贴壁成长并具有相应的分化能力,通过慢病毒转染GFP基因后不影响细胞正常生长及分化能力,抗原表达为CD34-/CD45-/CD73+/CD105+。②成骨诱导过程中进行碱性磷酸酶染色,成骨诱导0d组细胞染色为阴性；诱导3天组部分细胞染色,出现少量棕红色；诱导第7大组,大部分染色为强阳性,14、21、28天组和7天组对比阳性细胞数无明显变化。③移植后在动物的组织切片中发现骨组织中有绿色荧光存在,说明前体骨细胞已经发生归巢,并参与了机体重建。④分别于2、4、6周行X射线检查：5组参数总评分,BMSCs组和诱导7、21天组比较差异无显著性意义(P>0.05),3天组和模型对照组比较差异有非常显著性意义(P<0.01),3天组和BMSCs组.7、21天组比较差异有显著性意义(P<0.05)。组织形态学分析：3天组缺损区骨端连接紧密,连接区有大量小梁状新骨形成,排列较规则,骨髓腔再通：BMSCs组和7、21天组断端内、外骨痂已相连,骨髓腔未再通：模型对照组骨缺损区未建立连接,骨断端之间骨小梁较细且排列紊乱,骨髓腔未再通。BMSCs和诱导分化的前体骨细胞在骨损伤的治疗上都发挥了作用,但是BMSCs(?)骨诱导3天组疗效更具有显著差异。 [结论]：①建立了BMSCs的体外分离、培养、鉴定及GFP标记的技术平台。②成功建立了兔尺骨骨折模型。③开展了BMSCs诱导分化的不同阶段细胞移植.对组织损伤修复的疗效差异的研究。BMSCs成骨诱导3天移植组的各项检查指标：X射线.病理染色、扫描电镜较其它组有明显改善,结果提示诱导3天组是比较适宜移植的细胞状态。

关键词： 急性心肌梗塞   低氧诱导因子1α   骨髓间充质干细胞疗法   疗效评价  

摘要： 目的：观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在骨髓间充质干细胞(BMMSCs)治疗大鼠急性心肌梗塞中的作用,并与单纯BMMSCs移植作比较。　　方法：①BMMSCs的提取、培养、标记。②普通级SD大鼠,建立心肌梗塞模型。③实验分组:随机分为4组:对照组:在梗死部位分4个点注射低糖DMEM培养液,50μl/点。BMMSCs组:梗死部位分4点注射已标记的BMMSCs,每点50μl。HIF-1α反义寡核苷酸组:已标记的BMMSCs注入梗死部位4个点,每点50μl,HIF-1α反义寡核苷酸99μg分4点注入梗死心肌。HIF-1α错义寡核苷酸组:已标记的BMMSCs注入梗死部位4个点,每点50μl,HIF-1α错义寡核苷酸99μg分4点注入梗死心肌。④观察指标:术后4周,测定大鼠左室收缩压、舒张末压、压力变化最大上升与最大下降速率,检测细胞移植情况及新生血管密度。　　结果：①大鼠血流动力学检测:与对照组、HIF-1α反义寡核苷酸组相比,BMMSCs组与HIF-1α错义寡核苷酸组左室收缩压、压力变化最大上升与最大下降速率均明显升高,舒张末压明显降低。②心肌超微结构检测:BMMSCs组与HIF-1α错义寡核苷酸组大鼠心肌超微结构损伤少于其他两组。③移植细胞存活情况:HIF-1α反义寡核苷酸组心肌观察到少量 BrdU阳性移植细胞,BMMSCs组、HIF-1α错义寡核苷酸组心肌均明显可见BrdU阳性的移植细胞。④心肌血管密度:BMMSCs组与HIF-1α错义寡核苷酸组大鼠梗死心肌内血管密度高于其他组。　　结论：HIF-1α反义寡核苷酸对BMMSCs治疗急性心肌梗塞具有抑制作用,BMMSCs对大鼠急性心肌梗塞的部分治疗作用可能是通过HIF-1α介导的。

关键词： 骨髓间充质干细胞   气管注射   肺动脉高压   Smad2   血管重构  

摘要： 背景肺动脉高压（Pulmonary arterial hypertension，PAH），2008年在美国南加州DanaPoint举行的第4届肺动脉高压会议上提出，在静息状态下，经右心导管测定的平均肺动脉压≥25mmHg为诊断标准。PAH可由许多心、肺和肺血管疾病引起，是很多疾病进展到一定阶段的表现，肺动脉高压也可以作为一种疾病而独立存在，主要表现为肺动脉压力的上升和肺血管阻力的增加，病理生理基础主要是由于肺血管重构引起肺循环血流动力学改变，逐渐出现右心衰竭，甚至死亡。因此，在早期干预治疗肺血管的重构是治疗PAH的重中之重，而随着国内外对干细胞治疗PAH研究的逐渐深入，大规模的动物实验研究表明干细胞对PAH的治疗作用是肯定的。本实验研究证实了骨髓间充质干细胞治疗早期血管炎性损伤导致PAH的相关机制，并且进一步改善了治疗途径，使干细胞治疗PAH更加安全可靠。 目的探讨通过气管注射骨髓间充质干细胞（MSCs）的方法，研究早期血管炎性损伤所致PAH的相关作用机制，并且观察治疗2周时MSCs对肺血管结构的影响。 方法取SD大鼠的骨髓，经贴壁筛选法体外培养并纯化得到MSCs，用带有红色荧光的腺病毒标记后备用。将实验动物随机分为生理盐水空白对照组（Con组）、早期炎性损伤导致的肺动脉高压组（PAH组）、MSCs气管注射治疗组（TMSCs组），MSCs静脉注射治疗组（VMSCs组）。VMSCs组、TMSCs组和PAH组大鼠皮下注射野百合碱（MCT）造成大鼠肺血管的早期炎性损伤，Con组皮下注射等量的0.9%生理盐水代替MCT。MCT注射7天后VMSCs组及TMSCs组SD大鼠分别经股静脉、气管注射携带红色荧光蛋白病毒转染的MSCs，Con组及PAH组注射等量的低糖DMEM培养基。分别于MCT注射10天、21天时，检测TMSCs组及VMSCs组大鼠荧光在肺组织的分布，于MCT注射21天时，检测各组大鼠肺血流动力学指标肺动脉收缩压（SPAP）、肺动脉平均压（MPAP）及与血管重塑相关的转化生长因子β（TGF-β）的作用底物Smad2、磷酸化Smad2表达情况，取新鲜肺组织做病理切片观察肺血管结构和血管壁厚度的变化。 结果SD大鼠注射MCT21天时PAH组其SPAP、MPAP显著高于Con组（P<0.05）,VMSCs组、TMSCs组测得SPAP、MPAP较PAH组明显下降（P<0.05），但高于Con组（P<0.05），差异有统计学意义。PAH组、TMSCs组、VMSCs组Smad2的水平没有明显差别，但稍高于Con组；磷酸化Smad2(p-Smad2)水平在PAH组高于TMSCs组、VMSCs组，高于Con组。测量各组肺血管的血管壁厚度，血管壁在PAH组较Con组明显增厚（P<0.05），VMSCs组、TMSCs组血管壁厚度与PAH组相比明显变薄（P<0.05），差异有统计学意义。VMSCs组、TMSCs组两组间在压力、Smad2及磷酸化Smad2、血管壁厚度方面无统计学差异。 结论MSCs可以降低肺动脉压力，减轻肺血管的重构作用，这可能与MSCs降低与血管重塑相关因子TGF-β的作用底物Smad2蛋白及其活性形式磷酸化Smad2蛋白的表达有关，MSCs是治疗早期血管炎性损伤导致PAH的有效方法，并且气管注射MSCs成为一种新的可靠的给药途径。

关键词： 骨髓间充质干细胞   再生障碍性贫血   护理  

摘要： 目的:观察骨髓间充质干细胞治疗再生障碍性贫血的临床效果,探讨其护理方法。方法:对比20例再生障碍性贫血患者采用MSC治疗前后的输血时间间隔、实验室指标变化。结果:经骨髓间充质干细胞治疗,20例患者中,有6例患者的外周血细胞计数、骨髓细胞学检查和活检结果全部恢复正常,无复发;5例缓解,3例进步,2例死亡。结论:应用骨髓间充质干细胞治疗再生障碍性贫血,患者的骨髓造血功能有了明显的改善。

关键词： 间充质干细胞   体外   培养   间充质干细胞   终末期肝病   肝炎病毒   乙型   Th1-Th2平衡  

摘要： 目的：体外培养异体骨髓间充质干细胞(MSCs),观察其生长状态及评估其生物安全性。 方法：应用全骨髓贴壁培养法体外培养异体骨髓间充质干细胞,观察细胞生长形态,鉴定细胞表面标记,行细胞悬液病毒细菌检测,染色体核型分析,观察其向骨样细胞和脂肪样细胞分化的能力。 结果：异体骨髓间充质干细胞体外培养传代后,细胞表面的标记及染色体的核型稳定,细胞悬液检测无细菌,病毒的污染,可以向骨样细胞和脂肪样细胞分化。 结论：体外间充质干细胞培养结果表明,体外生长状态良好。传代后骨髓间充质干细胞的细胞表型和核型稳定。一定条件下具有分化的潜能。 目的：初步探讨异体骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗终末期肝病的短期疗效及其对Th1/Th2轴的影响。 研究对象及方法：35例乙型肝炎终末期肝病患者分为两组,干细胞治疗(治疗组)13例,对照组22例,均采用内科综合治疗,治疗组在此基础上加用异体MSCs;观察治疗前,治疗后2和4周的丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、总胆红素(TBi1)、白蛋白(ALB)与凝血酶原活动度(PTA)等变化。应用流式细胞仪检测治疗组患者外周血IFN-γ与IL-4的水平,分析Th1/Th2的比例变化。比较两组治疗前后生化指标及治疗组Th1/Th2的变化情况。 结果：13例患者干细胞移植全部成功且未出现不良反应和并发症,治疗组术后4周无死亡病例。治疗组患者的肝功能及凝血功能恢复优于对照组,其中ALT、PTA(?)(?)标与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)；而ALB、TBIL与对照比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组患者干细胞治疗后IFN-y升高,其中慢性乙型肝炎肝衰竭患者术后IL-4升高；而乙型肝炎肝硬化患者术后IL-4下降,治疗组干细胞治疗后Th1/Th2较治疗前升高。 结论：MSCs治疗乙型肝炎终末期肝病是安全有效的,其对Th1/Th2轴可能有免疫调节作用,机制有待进一步研究。

关键词： 犬   骨髓   间充质干细胞   诱导分化   多功能心腔内导管   急性心肌梗死   干细胞   移植   血管新生   干细胞   移植   心功能   血流动力学   心室重构  

摘要： 目的：探讨犬骨髓间充质干细胞(MSCs)体外分离、纯化、扩增的方法，证实其自我更新能力及多向分化潜能，为细胞移植治疗急性心肌梗死(AMI)做准备。 方法：无菌条件下用骨髓穿刺针获取骨髓液，用密度为1.073g/ml的Percoll分离液通过密度梯度离心法获取骨髓单个核细胞，用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养液种植细胞，通过贴壁筛选法获得纯化的MSCs。细胞生长融合达80%左右时，用胰酶消化传代细胞，细胞消化、传代培养三代后，可获得大量的纯度较高的MSCs。对不同代MSCs进行细胞计数，并绘制生长曲线，观察细胞生长特性。应用流式细胞仪对MSCs表面标记蛋白CD29、CD34进行表面抗原鉴定。取第3代MSCs分别进行成骨组织以及脂肪组织的诱导分化，通过茜素红以及油红O染色检测是否诱导分化为成骨组织以及脂肪组织。 结果：采用密度梯度法获得犬骨髓单个核细胞，刚分离的细胞体积较小，呈圆形。细胞培养72小时后观察可见单个或少量成集落样生长的贴壁细胞克隆，形态大多呈短梭形，原代细胞培养10-12天达到传代标准。细胞传代后增殖较快，MSCs生长曲线绘制显示，MSCs生长曲线呈S型，第6-7天生长达到高峰。流式细胞检测显示犬MSCs CD29呈阳性表达，CD34呈阴性表达。多向分化能力检测显示，在不同诱导环境下MSCs可向成骨组织以及脂肪组织分化。 结论：犬MSCs取材方便，通过密度梯度离心法可获得单核细胞。利用贴壁筛选法在体外培养、扩增可在短期内获得大量纯化的、性质稳定的MSCs。传代后MSCs生长迅速，在不同的诱导环境下可以向成骨组织以及脂肪组织分化，证实其具有多向分化能力，可为体外移植治疗急性心肌梗死提供丰富的细胞来源。 目的：探讨多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗急性心肌梗死(AMI)的可行性及对缺血心肌血管新生的影响。 方法：通过结扎犬冠状动脉左前降支的方法建立AMI模型，AMI模型建立一周后，将存活的犬随机分成细胞移植组和PBS对照组。分离颈动脉，在超声心动图的引导下，沿颈动脉将多功能导管逆主动脉送入左心室。在心腔内超声图像下，识别左室前壁心肌搏动较弱区域或搏动不规则区域，在心腔内超声监控下，通过镍钛合金注射针将体外培养、扩增的MSCs注射到梗死中心区以及梗死边界区，每个点注射0.2ml，每只犬注射5个点，对照组注射相同剂量的PBS液。完成注射后，动物继续饲养4周，处死动物，取心肌组织作冰冻切片和石蜡切片。通过冰冻切片观察移植细胞存活情况，采用HE染色以及vWF免疫组化染色观察心肌梗死区组织结构变化以及血管新生情况。 结果：所有动物均成活到实验结束，无动物死亡。镍钛合金注射针插入心肌内注射时，可发现室性早搏，但无恶性心律失常发生。整个实验过程中动物生命体征平稳，无心跳骤停、室性心动过速、血栓形成等严重并发症发生。在所有动物中，多功能心腔内导管显示靶向心肌解剖结构，能够实时观察到注射针在心肌内的位置，能够区分低回声信号的心腔、心肌以及高回声信号的注射针。组织冰冻切片显示，靶向移植心肌有移植细胞存活。HE染色显示对照组心肌梗死区心肌组织炎性细胞浸润，心肌细胞消失，纤维瘢痕组织增生显著。细胞移植组心肌细胞排列紊乱，炎性细胞浸润较少，纤维瘢痕组织增生较少。光学显微镜下观察，VWF染色微血管为棕黄色，细胞移植组新生血管数量较多，对照组血管数量较少，两组比较差异有统计学意义。 结论：多功能心腔内导管经心内膜移植MSCs治疗AMI安全、可行，可以将MSCs递送到靶向心肌， MSCs可以促进缺血心肌血管管再生。 目的：探讨多功能心腔内导管移植骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗急性心肌梗死(AMI)对缺血心肌心室重构的影响。方法：通过结扎犬冠状动脉左前降支的方法建立AMI模型，AMI建模前、建模后1周以及细胞移植4周后分别对动物进行心功能进行检测。获取二维超声心动图，于左心室乳头肌水平描记M型超声，分析心脏功能，测得左室射血分数(LVEF)。同时获得心尖2腔或4腔切面，使用双平面Simpson法验证，取三个心动周期测量的平均值。细胞移植4周后，将测量导管缓慢送入左心室，连接生理通道记录仪，描记心率、左心室收缩末压力、左心室舒张末压力，并计算左心室压力最大上升和下降速率。动物取材后，称取心脏总质量，计算心脏质量指数。标本石蜡包埋后进行VG染色,显微镜下观察染色情况并获取图片，测量左室截面积和纤维瘢痕面积，计算梗死面积。 结果：超声心动图显示，动物建模前，细胞移植组和对照组左心室射血分数LVEF相似。动物建模1周后，细胞移植组和对照组LVEF相似，都出现明显的降低。细胞移植4周后，细胞移植组LVEF有所增加，对照组LVEF减少，与对照组相比较，细胞移植组平均LVEF

关键词： 骨髓间充质干细胞   Ⅷ因子   创伤性脑损伤  

摘要： 【研究背景】 创伤性脑损伤是中枢神经系统的常见病和多发病，其可直接破坏颅内结构，导致患者神经系统功能严重、永久受损，甚至可出现植物生存状态或危及生命。 骨髓间充质干细胞具有向其他细胞分化的巨大潜能。国内外学者就这种多能干细胞是否能修复神经系统的不可逆损伤，恢复受损神经功能已展开研究。 【目的】 本课题研究利用原代培养BMSCs模拟患者受伤即时提取自体干细胞，以干细胞培养的最短周期移植BMSCs治疗创伤性脑损伤，试探索临床应用自体干细胞移植治疗急性创伤性脑损伤。 【方法】 健康成年雄性SD大鼠，体重300±20g，采用改良的Feeney方法建立模型，用大鼠立体定向仪选取位点，开骨窗，以300g·cm功力冲击大鼠大脑皮层，24h后做改良的神经功能缺损评分。建模成功后单纯随机法进行分组，分为实验组和对照组，每组10只，共用大鼠20只。选取2月龄成年雄性SD大鼠作为骨髓源。分离提取骨髓细胞，孵箱培养原代骨髓间充质干细胞。实验组在立体定向仪定位下移植原代干细胞，对照组注射生理盐水。干预14天后再次做改良的神经功能缺损评分，并将评分结果进行统计学分析。后处死大鼠取脑组织切片，用HE染色法行病理组织学检查，通过Ⅷ因子表达做血管计数，并做统计学分析。 【结果】 1．病理组织学：肉眼观察大鼠脑表面。实验组脑表面较平整，可见圆形受损区域，周边水肿带不明显；对照组脑表面粘连，组织形态错乱，坏死区域及水肿带较明显。HE染色后，可见受损区坏死脑组织，受损周边炎细胞浸润，实验组坏死区域较对照组小； ***评分：实验组评分低于对照组（P <0.05）； 3．微血管计数：两组血管计数有统计学差异，实验组血管计数高于对照组（P <0.05）。 【结论】 1．移植原代骨髓间充质干细胞治疗组神经功能恢复优于对照组； 2．移植原代骨髓间充质干细胞治疗组血管密度高于对照组； 3．原代骨髓间充质干细胞能够帮助创伤性脑损伤模型恢复神经功能，并促进血管生长。推测其通过促进血管新生帮助脑组织修复； 4．实验验证最短培养周期的原代干细胞早期移植对于治疗急性创伤性脑损伤有意义。

关键词： 骨髓间充质干细胞   重症急性胰腺炎   心肌损伤   肺损伤  

摘要： 目的： 探讨同种异体移植骨髓间充质干细胞治疗大鼠重症急性胰腺炎并发心肌、肺损伤的价值及其机制，为临床应用骨髓间充质干细胞治疗重症急性胰腺炎心肌、肺损伤提供实验理论依据。 方法： 通过全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞（BMSCs）至第三代备用；经流式细胞术鉴定BMSCs。将90只健康雌性SD大鼠，体重200±20g,根据随机数字表法分为假手术组（S组)、模型组(SAP组)和治疗组（B组）。SAP组、B组采用胰腺被膜下多点注射4％牛磺胆酸钠(0.5ml/kg)复制SAP模型。造模后24h经大鼠尾静脉注射1mlBMSCs悬液（1.0×106个/mL）于S组和B组，而SAP组只注射1mlPBS。于移植后第1、7、14d通过腹主动脉放血法将大鼠分批处死，采集血清检测血淀粉酶（AMY）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）；用ELISA法检测血清TNF-a、IL-10；并将胰腺、心肌及肺组织置于4%中性甲醛溶液中固定，常规切片、HE染色；采用免疫组织化学方法检测心肺组织中TNF-a、IL-10的表达。 结果： 1、通过全骨髓贴壁法可提取骨髓间充质干细胞，10h后可见少许细胞贴壁，培养至第10天即可生长约90%融合，传至第三代后可见细胞大小形态比较均一的骨髓间充质干细胞。 2、BMSCs定位：移植组（B组）及假手术组（S组）各时间点大鼠胰腺、肺组织、心肌组织中均可检测到Sry基因片段(雄性大鼠细胞来源的标记物)。 3、淀粉酶（AMY）：SAP组及B组血淀粉酶在各时间点显著升高，与S组比较差异有显著差异（P<0.01）；移植后24小时B组血淀粉酶低于SAP组，但差异无统计学意义（P>0.05）；移植后7天、14天有显著差异（P<0.01）。 4、肌酸激酶同工酶（CK-MB）：SAP组及B组血清CK-MB在各时间点显著升高，与S组比较有统计学意义（P<0.05）；移植后24小时B组血清CK-MB与SAP组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；移植后7天、14天有显著差异（P<0.01）。 5、胰腺组织学评分：①SAP组、B组各时间点与S组比较，有显著性差异（P<0.01）。②移植24小时后，B组与SAP组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；移植第7天、第14天相比有显著性差异（P<0.01）。 6、肺组织学评分：①SAP组、B组各时间点与S组比较，有显著性差异（P<0.01）。②移植24小时后，B组与SAP组比较，差异无统计学差异（P>0.05）；移植第7天、第14天相比有显著性差异（P<0.01）。 7、心脏组织学评分：①SAP组、B组各时间点与S组比较，有显著性差异（P<0.01）。②B组与SAP组各时间点比较，差异无统计学意义（P>0.05）。 8、组织中TNF-α、IL-10蛋白的表达：①心肌：B组、SAP组各时间点与S组比较，有显著性差异（P<0.01）；B组与SAP组各时间点比较，差异无统计学意义（P>0.05）。②肺：SAP组、B组移植后第1、7天与S组比较，有显著性差异（P<0.01）；B组与SAP组相比，移植后第1天，差异无统计学意义（P>0.05）；移植后第7天有统计学意义（P<0.05）；移植第14天后，表达有显著性差异（P<0.01）。 结论： 1、经胰腺被膜下点状注射4%牛磺胆酸钠可成功复制重症急性胰腺炎模型，并对肺脏、心脏造成不同程度损伤。 2、经尾静脉移植的骨髓间充质干细胞可迁移至损伤胰腺、肺脏、心肌组织。 3、同种异体移植骨髓间充质干细胞可以减轻SAP胰腺、肺脏病理学损伤,但对心脏病理学损伤效果稍差。 4、同种异体移植骨髓间充质干细胞可能是通过下调组织中炎性因子的表达，上调抗炎因子的表达来减轻心肺损伤。