关键词： 间质干细胞   脊髓损伤   移植   自体  

摘要： 目的观察比较蛛网膜下隙注射和静脉注射两种途径移植自体骨髓间充质干细胞治疗早期脊髓损伤的近期有效性和安全性。方法2006年11月至2010年3月收治早期脊髓损伤患者96例，采用随机数字表法分为三组，其中蛛网膜下隙移植组38例患者通过蛛网膜下隙注射方式行自体骨髓间充质干细胞移植，静脉移植组32例患者通过静脉注射方式行自体骨髓间充质干细胞移植，对照组26例仅给予常规治疗。分别于治疗前，治疗后1、3、6个月采用美国脊髓损伤协会（ASIA）制定的评分标准对三组患者运动、感觉功能进行评定。同期随访血常规、凝血功能、生化全项、肿瘤标记物。结果治疗后1个月，三组患者运动、感觉功能都有不同程度恢复，感觉功能恢复更为明显，各组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。治疗后3个月，三组患者运动功能评分均有所提高，各组间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。蛛网膜下隙移植组和静脉移植组患者感觉功能评分[分别为（130．9±41．6）、（131．2±22．7）分]均显著提高，与同期对照组[（109．3±36．4）分]比较差异有统计学意义（P〈0．05），但蛛网膜下隙移植组和静脉移植组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗后6个月，对照组患者运动、感觉功能评分均未出现明显提高；蛛网膜下隙移植组和静脉移植组患者仍有明显恢复，与同期对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；蛛网膜下隙移植组感觉功能评分[（151．6±46．9）分]较同期静脉移植组[（134．6±40．7）分]有显著提高（P〈O．05）。随访各项检查结果中均未出现明显异常。结论蛛网膜下隙注射和静脉注射两种途径进行自体骨髓间充质干细胞移植治疗早期脊髓损伤均安全，近期疗效确切，但蛛网膜下隙注射途径优于静脉注射途径，但远期疗效及安全性尚待进一步观察。

关键词： 心肌梗死   间质干细胞   心室重构   肌纤维母细胞  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）对梗死心肌中肌纤维母细胞聚集的调节作用。方法采用结扎大鼠冠状动脉前降支的方法复制心肌梗死（MI）模型，实验动物应用随机数字表进行完全随机化分组，分为假手术组（仅穿线不结扎冠状动脉，n=8）、心肌梗死＋磷酸盐缓冲液（MI＋PBS）组（结扎冠状动脉＋心肌注射PBS溶液，n=8）和MI＋MSC组（结扎冠状动脉＋心肌注射MSC，n=8）。通过心脏超声检查、血液动力学检查和Masson三色染色等方法分别检测左心室射血分数（LVEF）、短轴缩短率（Fs）、左心室收缩末压力（LVSP）、左心室舒张末压力（LVEDP）、左心室压最大升降速率（±dp／dtmax）、MI面积、梗死区室壁厚度和心脏质量／体质量等指标，评价MSC对大鼠心脏功能及心室重构的影响。分别采用荧光免疫组化染色、实时定量逆转录PCR、Westernblot等方法检测肌纤维母细胞向梗死区聚集、移植MSC存活和分化、转化生长因子p，（TGF—β，）-Smad2信号通路激活等情况。结果（1）心室重构和心脏功能指标检测结果：术后28d，与MI＋PBS组比较，MI＋MSC组的心脏质量／体质量[（3．04±0．16）mg／g比（3．34±n14）mg／g，P〈Q01]及心脏梗死面积[（38．72±2．38）％比（46．36±2．81）％，P〈0．01]较低；梗死区室壁厚度较大[（0．93±0．17）mm比（0．65±0．16）mm，P=0．01]；LVEF[（32．5±5．9）％比（26．5±4．5）％，P=0．03]及Fs[（30．4±3．3）％比（24．8±4．2）％，P〈0．01]较高；改善血液动力学参数，LVSP较高（P=0．01），LVEDP较低（P〈0．01）。（2）与MI＋PBS组比较，MI＋MSC组大鼠心脏梗死区肌纤维母细胞聚集数量较高[（196±20）／mm2比（89±25）／mm2，P〈0．01]，其中部分绿色荧光蛋白（GFP）＋移植细胞同时表达d—SMA＋。（3）与注射PBS比较，移植MSC可以明显增加梗死区TGF—p，mRNA和蛋白表达水平（P均〈0．01），促进Smad2的磷酸化（P〈0．01）。结论MSC可能通过直接分化和激活TGF-β1-Smad2信号通路促进成纤维母细胞向肌纤维母细胞转型增加大鼠心脏梗死区肌纤维母细胞的聚集，从而抑制心室重构，改善心脏功能。

关键词： 干细胞   骨髓间充质干细胞   骨细胞   软骨细胞   软骨缺损   关节软骨   组织工程   股骨头坏死   脊髓损伤   文献计量  

摘要： 背景:目前,骨髓间充质干细胞已应用于临床上治疗骨关节疾病及脊髓损伤,乃至中枢神经系统病变等。目的:分析骨髓间充质干细胞在骨关节病及脊髓损伤应用的现状。方法:检索SCI数据库2002/2011有关骨髓间充质干细胞治疗骨关节病及脊髓损伤的文献,检索词为"干细胞(stem cells);骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs);骨细胞(osteocyte or bone cell);软骨细胞(chondro cyte);软骨缺损(cartilage defect);关节软骨(articular cartilage);组织工程(tissue engineering);股骨头坏死(femoral head necrosis);脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)",对骨髓间充质干细胞治疗骨关节病及脊髓损伤的临床文献进行分析。结果与结论:近年来,随着骨髓间充质干细胞研究的深入,干细胞应用于临床治疗骨科疾病成为可能。骨髓间充质干细胞主要存在于骨髓中并保持干细胞的多项分化潜能,因其在一定条件下在体内外可分化为骨、软骨,加之细胞本身的特性,已经被应用于治疗如骨缺损、骨不连股骨头坏死等一些骨科常见病。由于骨髓间充质干细胞的特性,使其在除组织工程外,创伤修复、细胞替代治疗、支持造血、基因治疗等方面的应用前景也相当广阔。

关键词： 间充质干细胞   脊髓损伤   慢病毒载体  

摘要： 目的通过观察miRNA-9在骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为神经元过程中的作用，探讨基因修饰在脊髓损伤治疗中的作用。方法分离培养大鼠MSCs并构建miRNA-9-1慢病毒载体。成功建立84只大鼠急性脊髓损伤模型，并按照随机数字表法分为对照组、MSCs组及miRNA组，每组28只。脊髓损伤后l周，对MSCs组大鼠进行MSCs移植，对miRNA组大鼠移植miRNA-9-1慢病毒载体感染的MSCs，对照组大鼠仅在损伤部位注射等量的生理盐水。选择不同时间点对大鼠后肢进行Basso Beattie Bresnahan（BBB）评分，并行神经丝蛋白200（NF-200）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫组织化学染色，对各组阳性表达面积百分比进行比较。结果细胞移植4周后，各组大鼠BBB评分差异有统计学意义，其中miRNA组评分较MSCs组及对照组明显提高。差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学染色示miRNA组的NF-200阳性面积较MSCs组及对照组明显增大，GFAP阳性面积较MSCs组及对照组明显减小，各组间的差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论miRNA-9在MSCs横向分化为神经元中起重要调控作用，并通过促进轴突再生．减，少脊髓损伤部位反应性胶质细胞的数量等机制促进脊髓损伤后的功能修复。

关键词： 骨髓间充质干细胞   糖尿病足   创面修复  

摘要： 目的评价骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)经小腿肌肉移植对大鼠糖尿病足溃疡(DFUs)的治疗效果。方法全骨髓贴壁法体外培养雄性Wistar大鼠BM-MSCs至第3代,经4,6-联脒-2-苯基吲哚(DAPI)标记。36只雄性Wistar大鼠随机分成A组(BM-MSCs小腿肌肉移植组,n=12)、B组(正常足溃疡对照组,n=12)和C组(DFUs对照组,n=12)。大鼠糖尿病经腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导,然后在其双后足背上切取3 mm×7 mm矩形全层皮肤制成大鼠DFUs模型。于移植后第2、5、8、11天评估各组大鼠的创面愈合率,冰冻切片观察DAPI标记的BM-MSCs在创伤组织中的示踪,肉芽组织的厚度采用HE染色法检测,CD31和Ki-67的表达采用免疫组化法检测,血管内皮细胞生长因子(VEGF)在创伤组织中的表达水平采用ELISA和RT-PCR检测。结果 B组的创面愈合最快(P<0.05),第8、11天A组的创面愈合率高于C组(P<0.05)。冰冻切片发现A组荧光强度和区域在第5天时达到高峰。HE染色结果显示第5天A、B两组的肉芽组织厚度相同,但比C组厚。CD31和Ki-67的免疫组化发现A、B两组的平均阳性小血管数和细胞数无差异,但与C组相比有差异(P<0.05)。ELISA和RT-PCR结果均显示,第11天A组的VEGF表达水平明显较对照组高(P<0.001)。结论 BM-MSCs经小腿肌肉移植能明显促进大鼠DFUs的愈合,这种促愈疗效可能是通过促进创伤组织中VEGF的表达实现的。

关键词： 基质细胞衍生因子   趋化因子受体   骨髓间   充质干细胞   心肌梗死  

摘要： 胎儿和新生儿的心肌能够指导DNA合成和细胞分裂，然而到发育时期，它们的分裂能力逐渐减低。成年人和哺乳动物的心肌已被认为是终末期分化，不能增生，在产后心肌细胞也不可逆地离开了细胞周期。

关键词： 脑性瘫痪   自体骨髓间充质干细胞   护理  

摘要： 总结13例脑性瘫痪患儿应用自体骨髓间充质干细胞治疗的护理。护理重点为治疗前做好心理护理、环境准备,自体骨髓间充质干细胞悬液回输时做好护理配合,回输后加强不良反应的观察,并重视出院康复指导。自体骨髓间充质干细胞输注后,无1例出现不良反应,随访1～6月,11例患儿在治疗后1～3月运动能力明显改善,2例效果不明显。

关键词： 骨髓间充质干细胞   气管注射   肺动脉高压   Smad2   血管重构  

摘要： 目的探讨气管注射骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗肺动脉高压(PAH)的作用机制,观察MSCs治疗PAH对肺血管结构的影响。方法将SD大鼠分为空白对照组(Con组)、PAH组、MSCs气管注射治疗组(TMSCs组),MSCs静脉注射治疗组(VMSCs组)。VMSCs、TMSCs、PAH组大鼠皮下注射野百合碱(MCT)造PAH动物模型,Con组皮下注射生理盐水。VMSCs组及TMSCs组大鼠于MCT注射7 d后分别经股静脉、气管注射MSCs悬液,Con组及PAH组注射等量的低糖DMEM培养基。MCT注射10、21 d时,检测荧光在TMSCs组及VMSCs组肺组织的分布。MCT注射21 d,检测肺血流动力学指标及Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)的表达情况,取肺组织做病理切片观察肺血管结构的变化。结果MCT注射21 d时,肺动脉收缩压(SPAP)、肺动脉平均压(MPAP)在VMSCs、TMSCs组较PAH组明显下降(P<0.05),但高于Con组(P<0.05);VMSCs、TMSCs组血管壁厚度较PAH组明显变薄(P<0.05);PAH、TMSCs、VMSCs组Smad2的水平无明显差别,略高于Con组;PAH组p-Smad2水平高于TMSCs、VMSCs和Con组;上述指标在VMSCs和TMSCs组间差异无统计学意义。结论 MSCs治疗可以降低肺动脉压力,减轻肺血管的重构作用,这可能与MSCs降低Smad2蛋白及其活性形式p-Smad2蛋白的表达有关,气管注射MSCs可能是治疗PAH的有效途径。

关键词： 骨髓间充质干细胞   自身免疫性脑脊髓炎   INF-γ   IL-17,IL-10  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的治疗效果。方法 MOG35-55免疫C57BL/6小鼠制备EAE模型、BMSCs进行ELISA法检测各组淋巴细胞培养上清液中细胞因子INF-γ、IL-17、IL-10的水平。结果 BMSCs能够显著抑制INF-γ和IL-17的分泌(P<0.05),促进IL-10的分泌(P<0.05)。结论 BMSCs能有效抑制小鼠EAE。

关键词： 骨髓间质干细胞   再生障碍性贫血   造血重建   疗效  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(Bone Marrow Mesenchymal Stem Cell,BMSC)输注治疗对再生障碍性贫血(AplasticAnemia,AA)患者骨髓造血功能的影响。方法选择在本院住院的原发性再障患者(重型)12例,临床应用骨髓间充质干细胞输注治疗,观察治疗前后外周血常规改变,CD4、CD8比例情况及肝肾功能指标。结果 12例患者治疗3个月左右输血间隔时间较治疗前明显延长,外周血白细胞、淋巴细胞和血小板明显恢复,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前后患者CD4、CD8比例改善,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗前后患者肝功能指标(谷丙转氨酶及总胆红素)、肾功能指标(尿素氮及肌酐)无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论输注BMSC用于再生障碍性贫血的治疗具有较好的疗效和安全性,能作为临床再生障碍性贫血的一种新的治疗方法 。