关键词： 骨髓间充质干细胞   银杏叶提取物   丙二醛   超氧化物歧化酶   谷胱甘肽过氧化物酶  

摘要： 目的:探讨银杏叶提取物联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)治疗(I型)糖尿病大鼠的效果。方法:用腹腔内注射链脲酶菌素方法造模I型糖尿病wistar大鼠,BMSCs治疗(1×106/个)(DM)大鼠的同时,给予银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)治疗20天,同时设立单纯BMSCs治疗组,单纯GBE治疗组,糖尿病模型组以及正常对照组。分时段监测各组大鼠随机血糖、胰岛素、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)以及超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与其它各组相比,与正常对照组相比DM组血糖水平明显高于GBE组和BMSCs组,BMSCs联合GBE治疗组的大鼠MDA水平明显降低于各治疗组,胰岛素、GSH-Px和SOD水平则明显高于其他对照治疗组。结论:BMSCs联合GBE治疗I型DM大鼠,可以明显降低大鼠的血糖和氧化应激水平,其效果好于单独银杏叶提取物治疗或BMSCs治疗。

关键词： 脊髓缺血-再灌注损伤   骨髓间充质干细胞   超氧化物歧化酶   丙二醛  

摘要： 目的探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因转染的骨髓间充质干细胞(BMSCs)在脊髓缺血-再灌注损伤(SCII)中的治疗作用及对超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的影响。方法采用腹主动脉肾动脉下方夹闭法造成大鼠SCII模型。55只成年SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham组,n=5)只暴露腹主动脉;SC组(n=25)SCII3h后髓内注射5μl生理盐水;HIF-1α基因修饰的BM-SCs组(HB组,n=25)SCII3h后髓内微量注射5μl含1×106个/ulHIF-1α-BMSCs的悬液。SC组和HB组连续检测治疗后(sham组于假手术后)2、6、12、18、24h脊髓组织内SOD活性和MDA含量的变化。结果与Sham组比较,治疗后2、6、12、18hSC组和HB组SOD活性明显降低(P<0.05);治疗后2、6、12、18、24hSC组和HB组MDA含量明显升高(P<0.05)。与SC组比较,治疗6、12、18hHB组SOD活性明显升高,MDA含量明显降低(P<0.05)。结论 HIF-1α基因联合BMSCs移植治疗SCII,可通过减轻组织缺氧,减少自由基的产生,保护脊髓组织,促进神经功能的恢复。

关键词： 骨髓干细胞   移植   肝硬化  

摘要： 目的探讨自体骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对肝硬化失代偿期患者的治疗作用。方法25例肝硬化失代偿期及肝衰竭患者无菌抽取骨髓150—200ml，参照Wollert报道方法分离纯化MSCs，然后经肝动脉导管注入肝脏。术后定期检测肝功能和凝血功能，并观察同期的症状体征和不良反应情况。结果术后2周内所有血清学指标均无显著性改变；与术前[（26．65±5．30）g／L]比较术后4周血清白蛋白为（30．91±4．00）g／L（t=3．07，P〈0．05）。至12周升至（32．00±6．18）g／L（t=3．02，P〈0．01）；术后12周与术前比较总胆红素[（39．94±21．15）mmol／L与（125．01±150．05）mmol／L，t=2．63，P〈0．05]；总胆汁酸[（41．63±33．91）μmol／L与（78．00±59．80）μmol／L，t=2．53，P〈0．05]，差异均有统计学意义。肝酶指标术后4周与术前比较均有明显变化（P均〈0．05）。术后12周与术前比较凝血酶时间及纤维蛋白原分别为（14．71±1．59）s与（21．40±6．07）s（t=5．01，P〈0．01）和（2．64±0．61）g/L（1．66±0．94）g／L（t=4．17，P〈0．01）。术后1周食欲、体力改善分别为90．67％和88．5％；第2周16例患者（63．5％）肝病面容好转，有1例蜘蛛痣明显减少；术后12周的总生存率为77．44％，其中移植2周后死亡及失访者共3例，死因为慢性肝衰竭合并自发性细菌性腹膜炎或DIC或肝肾综合征。所有患者均未发现细胞移植并发症。结论自体MSCs移植治疗失代偿期肝硬化近期安全有效，患者肝功能、凝血功能改善明显，生存质量提高，但应严格掌握适应证。

关键词： 骨髓间充质干细胞   重症胰腺炎   移植途径  

摘要： 急性重症胰腺炎(severeacute pancreatitis,SAP)起病急,发病重,早期可致患者死亡,死亡率大约为20%-40%,急性胰腺炎主要是由胆石症和过度饮酒引起的,药物、毒素、感染、创伤、局部缺血、解剖异常、高钙血症、高脂血症、免疫疾病均可引起急性胰腺炎,但少见.尽管对于急性重症胰腺炎的诊治已经有了革命性的进步,但其死亡率仍较高.目前,对于急性重症胰腺炎的治疗方法多偏重于以抑制胰酶分泌、防止多个器官继发损害为主的原则,而对于胰腺本身功能恢复治疗的关注研究较少.因此,利用骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对急性重症胰腺炎的研究有广泛的研究前景和较为重大的临床意义.

关键词： 骨髓间充质干细胞   肺   疾病   机制  

摘要： 骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs）具有多分化潜能，可以分化为骨骼肌细胞、脂肪组织、血管、泌尿系统组织、结蹄组织等。BMSCs可自我更新，而且具有基因和表型稳定性，很容易从少量骨髓中提取，并可以高效增殖，可从实验室培养BMSCs而直接应用于临床，可采用不同的方式移植到人体，而且分化较易控制，致瘤风险小。BMSCs可逃避同种异体识别，并可抑制同种异体T细胞增殖，在免疫功能正常的受体中不会产生免疫应答。

关键词： 骨髓移植   间充质干细胞移植   肝炎   自身免疫性   T淋巴细胞   小鼠   近交C57BL  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）移植对小鼠自身免疫性肝炎（AIH）的治疗作用及机制。方法采用C57BL／6小鼠肝特异性抗原S-100与弗氏完全佐剂诱导同种系44只小鼠建立AIH模型。造模后取6只小鼠验证AIH模型，余38只分为3组，MSC移植组（A组）14只进行MsC尾静脉注射治疗，地塞米松（DXM）治疗组（B组）12只予DXM腹腔注射治疗，PBS对照组（c组）12只予腹腔注射PBS。健康对照组（D组）18只未造模未予任何处理。于实验第5、9周测小鼠体质量，测血清ALT水平，处死各组小鼠取肝组织进行病理学检查并行肝脏炎症活动度Knodell评分，分离小鼠脾脏T淋巴细胞行增殖抑制实验。统计学分析采用秩和检验、方差分析和t检验。结果A、B组小鼠治疗后体质量均呈上升趋势（F=15．678，P〈0．01；F=3．730，P=0．037），C组治疗前后变化差异无统计学意义（P〉0．05）。实验第5、9周，A、B组小鼠血清ALT水平逐渐下降，各时间点比较差异有统计学意义（F=20．267，P〈0．01；F=4．277，P=0．034）；C组小鼠血清ALT水平治疗前后变化差异无统计学意义（P〉0．05）。实验第5、9周，A组小鼠血清ALT降低程度大于B组，差异均有统计学意义（t=3．566、3．218，P均〈0．05）。实验第5、9周，A、B组小鼠Knodell评分逐渐下降，各时间点比较差异有统计学意义（F=8．070，P=0．003；F=6．547，P=0．009）；C组小鼠Knodell评分治疗前后变化差异无统计学意义（P〉0．05）。实验第9周时，A、B、C三组小鼠Knodell评分间差异有统计学意义（F=4．477，P=0．029）。体外脾淋巴细胞增殖抑制实验显示，MSC培养上清液能显著抑制S-100抗原和刀豆蛋白A刺激的T淋巴细胞增殖，吸光度值分别为0．267±0．167比0．217±0．128和O．165±0．187比0．082±0．051，差异均有统计学意义（t=7．187、4．602，P均〈0．01）。结论MSC移植可能通过抑制T淋巴细胞的增殖对小鼠AIH发挥治疗作用。

关键词： 心肌梗死   骨髓间充质干细胞  

摘要： 心肌梗死（myocardial infarction,MI）是指心肌的缺血性坏死,已成为当今社会严重威胁人类健康的疾病之一。尽管临床上保守的药物治疗、经皮冠状动脉介入治疗（PCI）和外科冠状动脉旁路移植手术等治疗方法的不断提高,但都无法逆转梗死期坏的心肌坏死。

关键词： 干细胞   干细胞移植   超顺磁性氧化铁   骨髓间充质干细胞   脊髓损伤   细胞移植   蛛网膜下腔   省级基金   干细胞图片文章  

摘要： 背景:干细胞移植可以重建中枢神经系统的结构和功能,近年来引起了广泛的关注。目的:探讨超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞对兔脊髓损伤神经功能恢复的作用。方法:采用密度梯度离心法和贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞。制作兔脊髓损伤模型,并在蛛网膜下腔置管以备移植。将实验白兔随机分为3组:标记组移植超顺磁性氧化铁标记细胞;未标记组移植未标记细胞;对照组不移植细胞只注射PBS液。结果与结论:两移植组在细胞移植14d后运动功能BBB评分高于对照组,差异有显著性意义(P<0.05);但两组间差异无显著性意义(P>0.05)。细胞移植后1,7,14,21,28,35d,脊髓损伤区域局部组织上出现大量含蓝色铁颗粒的细胞。经蛛网膜下腔移植标记骨髓间充质干细胞可定向迁移到脊髓损伤区域,并能促进脊髓损伤神经功能恢复。

关键词： 骨髓间充质干细胞   心肌梗死  

摘要： 干细胞是一类未充分分化的可自我复制与多向分化的多潜能细胞。按照发生学来源及细胞发育的各个阶段可将干细胞分为胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)和成体干细(adult stem cells,ASCs)。目前骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)治疗心肌梗死已经成为一种新的治疗趋向,在治疗应用方面有着巨大的潜力,但其可行性仍存在争议。

关键词： 血管性痴呆   动物模型   大鼠   骨髓间充质干细胞   培养   鉴定   干细胞   甘露醇   血管性痴呆   Nogo A   Nogo蛋白受体  

摘要： 第一章血管性痴呆大鼠模型的制备 [目的]探讨制备理想VD动物模型的方法,为进行BMSCs移植制备模型。 [方法]使用Morris水迷宫对实验大鼠进行初筛,以剔除在95%参考值范围以外的SD大鼠,将筛选出的实验鼠根据随机原则分为假手术组(10只)和模型组(77只)。模型组采用改良二血管结扎法(间隔三天分次结扎双侧颈总动脉)制备VD大鼠模型,假手术组实施同样的手术操作,但是不结扎双侧颈总动脉,同等条件笼养4周后,再次行水迷宫实验,以测定两组大鼠的空间学习记忆能力变化,筛选出造模成功的VD大鼠。 [结果]90只大鼠经水迷宫实验初筛后剔除3只,纳入实验87只大鼠随机分成假手术组(10只)和模型组(77只)。造模前,两组的逃避潜伏期和平台象限滞留时间差异没有统计学意义(P>0.05),造模后,两组的逃避潜伏期和平台象限滞留时间差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组由于饲养不当死亡1只,余9只；模型组大鼠因麻醉意外死亡4只,感染死亡2只,肠梗阻死亡5只,出血过多死亡2只,肺淤血死亡5只,1只出现眼球病变,3只未达痴呆标准,共制备VD大鼠模型55只,成活率为76.62%,成模率93.22%。 [结论]改良二血管结扎法制备VD模型,不仅操作简易,可重复性好,而且有较高的存活率,成模率高,是较理想的制备VD模型的方法,适用于实验研究。 第二章SD大鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定 [目的]应用全骨髓贴壁改良法分离培养SD大鼠BMSCs,形成稳定分离培养和扩增BMSCs的培养方法,以获得纯度高、活性好、形态均一的大鼠BMSCs,为移植治疗VD提供充足的细胞来源,保证实验顺利进行。 [方法]断头处死七日龄SD乳鼠,用培养基反复冲洗股骨和胫骨,收集其骨髓,采用改良的全骨髓贴壁培养法分离、培养、纯化BMSCs,观察BMSCs的形态、生长情况并绘制细胞生长曲线,了解BMSCs的形态特征及生长特性。采用流式细胞仪测定细胞表面标志物和进行成骨诱导对BMSCs进行鉴定。 [结果]光学显微镜下观察分离培养的原代BMSCs呈梭形贴壁生长。传代后细胞生长迅速,5-6天达到融合即可再次传代,细胞形态仍为梭形,鱼群样排列,集落生长呈漩涡状,第7天细胞达到饱和出现接触性抑制而生长缓慢。流式细胞仪鉴定第三代BMSCs均一表达CD29, CD90,阳性率分别为99%,99.6%；几乎不表达CD34, CD45,阳性率分别为0.169%,1.19%。对BMSCs进行成骨诱导后行茜素红染色,钙结节呈深红色。 [结论]SD大鼠的BMSCs能在体外分离、培养和纯化。全骨髓贴壁改良培养法能稳定分离培养和扩增BMSCs,获得纯度高、活性好、形态均一的大鼠BMSCs,可提供充足的实验细胞来源。 第三章 甘露醇对骨髓间充质干细胞移植治疗血管性痴呆大鼠效果观察 [目的]比较直接移植BMSCs与甘露醇预处理后再进行BMSCs移植的VD大鼠模型的行为学改变,海马CA1区Nogo蛋白及其受体表达量的变化,探讨甘露醇对静脉移植BMSCs治疗VD大鼠模型疗效的影响及机制。 [方法]造模成功的VD大鼠随机分为五组,①模型对照组8只(不进行任何处理),②甘露醇组10只(尾静脉注射37℃、20%甘露醇溶液,1.5g/kg),③培养基组10只(尾静脉注射1m工无血清低糖培养基),④BMSCs组13只(尾静脉注射细胞浓度为1×106个/ml的第三代BMSCs)⑤甘露醇预处理BMSCs组14只(尾静脉注射37℃、20%甘露醇溶液,1.5g/kg,10-20min后,注射细胞浓度为1×108个/m1的第三代BMSCs),此外设立假手术组9只。同等条件下笼养4周后,行水迷宫实验检测各组大鼠的空间学习记忆能力,使用免疫组化检测各组大鼠海马CA1区的Nogo A蛋白及其受体表达水平的变化。 [结果]BMSCs组与模型对照组、甘露醇组、培养基组比较,逃避潜伏期缩短,平台象限滞留时间延长,差异具有统计学意义(P<0.05)；甘露醇预处理BMSCs组的逃避潜伏期比BMSCs组明显缩短,其平台象限滞留时间也比BMSCs组显著延长,差异均具有统计学意义(P<0.05),尚未达到假手术组的水平。但是,甘露醇预处理BMSCs组与假手术组第3-5天的逃避潜伏期比较,差异没有统计学意义(P>0.05),两组的平台象限滞留时间比较,差异也没有统计学意义(P>0.05)。 BMSCs组海马CA1区Nogo A蛋白及其受体免疫组化阳性产物比模型对照组、甘露醇组、培养基组表达量少,染色浅；甘露醇预处理BMSCs组的Nogo A蛋白及其受体染色不但比模型对照组、甘露醇组、培养基组浅,而且也比BMSCs组浅,阳性产物也较少,但