关键词： 慢加急乙肝肝衰竭   异体骨髓间充质干细胞   不同时相  

摘要： 目的:对异体骨髓间充质干细胞治疗各个时相慢加急性乙肝肝衰竭的临床治疗效果进行探讨。方法:选取该院2013年1月至2015年1月所收治的66例慢加急性乙肝肝衰竭患者作为观察的对象,按随机数字表法分成常规组与实验组,其中,前者予以常规综合治疗,在此基础之上,对后者患者予以异体骨髓间充质干细胞治疗,然后对两组患者的临床治疗情况比较。结果:两组患者进展期患者存活率相比较,差异无统计学意义(P>0.05);而组间平台期患者存活率相对比,差异显著(P<0.05);另外,实验组平台期患者存活率高于进展期,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在常规治疗的基础之上,对慢加急性乙肝肝衰竭患者予以异体骨髓间充质干细胞治疗,效果显著,可提升患者的存活率,尤其是平台期患者,疗效更为明显,值得在临床上大力推行与应用。

关键词： 芥子气   肺损伤   BMSCs   抗炎作用   氧化应激   免疫调节  

摘要： 芥子气(sulfur mustard,SM,分子式CHClS,化学名二氯二乙硫醚,CAS登记号505-60-2)是一种双功能烃化剂,是糜烂性毒剂的典型代表,也是主要的化学威胁之一。其先后在一战、日本侵华战争及近期的两伊战争等多次冲突中大规模使用,造成了严重的人员伤亡。芥子气结构简单,容易合成,防治困难,易被国内外恐怖分子掌握和利用,造成大量人员伤亡及危害公共安全。据报道近几年伊斯兰国(ISIL)多次在叙利亚和伊拉克使用包括芥子气在内的化学战剂,造成无辜平民的重大伤害。此外,在日军侵华战争遗留的化学武器中,芥子气是主要的化学毒剂之一,对我国人民的健康及环境安全构成重大威胁。因此积极探索芥子气中毒机制,开发有效的防治药物与措施,对国家公共安全、人民群众的健康及环境都具有重大的战略意义。肺是芥子气损伤的主要靶器官之一,急性肺损伤及其继发感染是芥子气早期致死的主要原因。大量研究表明,芥子气导致的肺损伤与炎症、免疫反应和氧化应激有着密切的关系。而近年来研究表明,骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可以修复多种受损组织,而且在治疗肺损伤的方面也具有较好的应用前景。许多动物模型均证实BMSCs能够改善各种原因所致的肺损伤。BMSCs主要分泌多种可溶性细胞因子、活性分子、抑制性因子等,还可以通过直接抑制T细胞增殖、降低巨噬细胞、DC细胞的活性,从而发挥抗炎、免疫调节及抗氧化的作用。本研究首次将BMSCs用于治疗芥子气中毒,考查了BMSCs对芥子气中毒小鼠生存率的影响;研究了BMSCs对芥子气中毒小鼠肺损伤的改善作用,并从炎症、免疫反应和氧化应激三个方面,初步探讨了其可能的作用机制。一、BMSCs对芥子气中毒小鼠生存率的改善作用本课题采用皮下注射的方式建立芥子气中毒的损伤模型,设置不同梯度染毒浓度,摸索实验剂量,建立了稳定的芥子气实验模型。原代分离培养ICR小鼠BMSCs,根据目前公认的鉴定方法对BMSCs进行鉴定:结果显示细胞高表达间质类细胞的标志分子CD29和CD44,但是不表达造血干细胞的标志分子CD34和CD45;且能够成功诱导分化为成骨细胞、成脂细胞。从而确认我们分离出的细胞正是BMSCs,能够用于后续实验研究。尾静脉注入鉴定后的BMSCs,考察BMSCs移植后对小鼠生存率的影响。芥子气染毒后,连续观察14天,发现BMSCs可以显著提高芥子气中毒小鼠生存率(P<0.05)。芥子气染毒后,小鼠出现体重下降、厌食、腹泻,眼睑粘连等症状,死亡时间集中在染毒后第6天左右。与SM组比较,BMSCs治疗组的体重下降幅度、腹泻等症状均有所改善。二、BMSCs对芥子气中毒小鼠肺损伤的改善效应建立小鼠染毒模型后,BMSCs经尾静脉注入小鼠体内,我们从芥子气中毒后使用BMSCs前后肺组织损伤变化对比入手,考查BMSCs对肺组织的病理变化、炎性细胞浸润、肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)浓度、肺湿干重比(W/D)的改善情况。HE染色结果显示,BMSCs可以减轻芥子气中毒小鼠肺组织的病理损伤;且与SM组比较,BMSCs组的病理损伤评分降低(P<0.05)。免疫组化结果显示,BMSCs减少炎性细胞如MPO+中性粒细胞(P<0.01)、CD68巨噬细胞(P<0.01)及CD3T细胞(P<0.01)的浸润。同时BMSCs治疗显著降低了芥子气中毒小鼠肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)浓度(P<0.01)及肺W/D比值(P<0.05)。综上,BMSCs可有效的减轻芥子气引起的肺组织损伤。三、BMSCs改善芥子气中毒小鼠肺损伤的初步作用机制探讨通过ELISA及荧光定量PCR技术,检测了与芥子气相关的主要炎症因子如TNF-a、IL-1b、IL-10的表达情况。实验发现,与SM组比较,BMSCs可以降低肺组织内促炎因子TNF-a、IL-1b表达量(P<0.01),提高抑炎因子IL-10表达量(P<0.01)。进一步免疫组化检测核转录因子NF-kB表达,发现与SM组比较,BMSCs显著下调NF-kB的蛋白表达(P<0.01)。该结果提示BMSCs减轻芥子气引起的炎症反应可能是通过降低TNF-a、IL-1b表达量,增加IL-10的表达量,且抑制NF-kB激活实现的。液相悬浮芯片技术检测小鼠血清中多个趋化因子的含量变化,结果显示,与SM组比较,BMSCs治疗可降低LIX/CXCL5、IP-10/CXCL10、MCP-1/CCL2、MIP-1b/CCL4、RANTES/CCL5、M-CSF的表达(P<0.05),而KC/CXCL1、MIP-2/CXCL2、MIG/CXCL9、MIP-1a/CCL3的表达均无显著性差异,提示BMSCs的免疫调节作用在改善芥子气引起的肺损伤中发挥重要作用。另外,我们检测了肺组织中M

关键词： 间质干细胞移植   脊髓损伤  

摘要： 背景：骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植治疗脊髓损伤（SCI）成为国内外研究的热点，采用何种移植途径更有利于BM-SCs在脊髓损伤处存活、分化，促进神经功能恢复，更适合于临床应用，是当前亟待解决的主要问题。目的：BMSCs通过直接注射、股静脉注射和腰椎穿刺三种途径移植到脊髓损伤大鼠模型内，观察、比较并筛选适于临床应用的移植途径。方法：采用全骨髓法分离培养BMSCs。采用改良Allen’s法建立T10脊髓损伤大鼠模型，建模后3d随机分为模型对照组（A组）、直接注射组（B组）、股静脉注射组（C组）、腰椎穿刺组（D组）。BMSCs移植后3、7、14、21d采用BBB评分方法对各组大鼠评分。免疫组化检测各组5．溴．2．脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）单染的Brdu＋细胞、Brdu＋胶质纤维酸性蛋白（GFAP）3和Brdu＋神经微丝蛋白200（NF-200）双阳性细胞，并计算各组GFAP、NF-200表达的平均光密度值（MOD）。结果：BMSCs迁移至脊髓损伤部位并存活，还可表达GFAP和NF-200。移植后各组GFAP和NF-200的MOD均增加，B、C、D组大鼠功能恢复明显。结论：综合评判和比较三种移植途径，腰椎穿刺是一种侵袭性较小、较为理想的细胞植入方式，相对优于直接注射和股静脉注射，更适于临床应用。

关键词： 酒精性肝硬化   骨髓间充质干细胞   移植   疗效  

摘要： 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗失代偿期酒精性肝硬化(ALC)患者的疗效。方法2007年至2012年在我院行BMSCs移植治疗的失代偿期ALC患者28例,给予基础治疗联合BMSCs移植治疗;按照性别、年龄和并发症进行1:1倾向性评分匹配选择另28例患者为对照,只接受基础治疗。常规检测血肝功能指标,使用计算机断层扫描和DSA造影进行影像学检查。结果接受细胞移植治疗的患者在移植后谷丙转氨酶下降,总胆红素降低,白蛋白逐渐升高,凝血酶原时间及Child-Pugh评分逐渐下降,终末期肝病模型评分于移植后第4周降至(20.6±5.2)分,显著低于移植前的(26.4±5.1)分(P<0.05),也显著低于对照组的(24.7±5.1)分(P=0.009),但至第72周时移植组为(17.5±4.1)分,与对照组的(18.9±6.9)分相比,无显著性差异(P=0.536);两组144周生存率分别为32.1%和25.6%,无显著性差异(P=0.125);进行分层分析结果显示,Child-Pugh B级患者在细胞移植144周生存率为66.7%,显著高于对照组的36.4%(P=0.046),而两组Child-Pugh C级患者生存率分别为12.5%和17.6%,无显著性差异(P=0.788)。结论 BMSCs移植治疗失代偿期ALC患者的近期疗效显著,但远期疗效不显著。移植前患者病情可能影响移植后疗效,但此结论有待更大样本,多中心的随机对照试验来证实。

关键词： 病毒载体介导   干细胞治疗   骨髓间充质   骨质疏松   基因转染   骨保护素   兔  

摘要： 本研究旨在探讨慢病毒载体介导骨保护素基因转染兔骨髓间充质干细胞治疗骨质疏松。

关键词： 骨髓间充质干细胞   miR-122   细胞移植   肝损伤  

摘要： 目的:探讨miR-122在骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠急性肝损伤中的作用,阐明相关作用机制。方法:密度梯度离心法分离收集雄性大鼠的BMSCs,分为转染组和对照组,其中转染组BMSCs采用脂质体介导转染miR-122mimics,对照组BMSCs未接受转染。将60只四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤大鼠随机分为肝损伤对照组(静脉注射生理盐水)、普通治疗组(静脉移植普通BMSCs)和实验治疗组(静脉移植转染miR-122的BMSCs)(n=20)。移植细胞后1、7和14d检测大鼠肝功能,肝组织行HE染色观察其病理学改变。结果:转染miR-122mimics后7d,BMSCs中白蛋白(ALB)表达水平明显上调,而甲胎蛋白(AFP)的表达水平则明显下调。移植细胞后1d,与普通治疗组比较,实验治疗组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性差异无统计学意义(P>0.05);移植细胞后7和14d时,实验治疗组大鼠血清ALT和AST活性均低于普通治疗组(P<0.05);HE染色,实验治疗组大鼠肝脏充血、细胞质内空泡变性及肝细胞坏死情况明显好于普通治疗组。结论:上调BMSCs中miR-122表达水平能够促进其分化为肝样细胞,并可明显改善CCl4所致大鼠肝脏损伤。

关键词： 骨髓间充质干细胞   缺血再灌注   脑梗死   移植   凋亡  

摘要： 目的探讨缺血再灌注6 h后经动、静脉途径移植骨髓间充质干细胞疗效的差异。方法将27只大脑中动脉缺血2 h后再灌注SD雌性大鼠模型随机分为颈动脉BMSCs组8只、尾静脉BMSCs组7只、颈动脉PBS组6只和尾静脉PBS组6只。全骨髓贴壁法分离、培养BMSCs,流式细胞仪检测鉴定;取缺血再灌注后6 h为移植时间点;移植后第7天观察改良神经功能损伤评分(m NSS)以评价神经功能恢复和体能恢复,免疫组织化学检测梗死周围组织GFAP、Bax和Bcl-2,TUNEL法检测梗死周围组织细胞凋亡,ELISA检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α。结果 BMSCs表面抗原CD90表达率为95.7%、CD29表达率为97.3%、CD106表达率为52.7%、CD11b表达率为6.01%、CD34表达率为2.95%、CD45表达率为2.26%。BMSCs组和PBS组相比较:GFAP阳性细胞数、Bcl-2平均光密度值显著增多;m NSS、血清TNF-α浓度、TUNEL阳性细胞数显著减少;Bax平均光密度值无明显差异。颈动脉BMSCs组和尾静脉BMSCs相比较各项数据无统计学差异。结论在缺血再灌注早期动、静脉途径移植BMSCs疗效无差异,但尾静脉途径因创伤微小、可移植细胞量多,为早期最佳移植途径。

关键词： 肝细胞生长因子   骨髓间充质干细胞   肝纤维化   基因修饰  

摘要： 肝纤维化是肝脏慢性损伤导致肝细胞炎症、坏死,肝脏内结缔组织异常增生的一种可逆性的病理变化.越来越多的研究表明,肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因修饰骨髓间充质干细胞可减轻或抑制肝纤维化,其效果要好于单纯的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stromal cells)移植,被认为是一种非常有前景的抗肝纤维化的细胞疗法.

关键词： 骨髓祖代细胞   间质干细胞   细胞治疗   椎间盘退变  

摘要： 目的：总结骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗椎间盘退变（IDD）的相关研究成果,为BMSCs 治疗 IDD 的临床应用提供理论基础。方法计算机检索 CNKI 数据库和 ISI Web of Knowledge数据库,限定时间为2000—2014年,中英文检索词分别为“骨髓间充质干细胞、细胞治疗、椎间盘退变”和“bone marrow mesenchymal stem cells ,cell therapy,intervertebral disc degeneration ”。从检索所得的论文中选择近期权威杂志上发表的与 BMSCs 治疗 IDD 密切相关的实验研究或临床研究,排除重复性研究、Meta 分析以及综述类文章,主要从 BMSCs 的分离培养和生物学特性、BMSCs 向椎间盘细胞分化的影响因素、BMSCs 体内移植治疗 IDD 的研究等方面对所纳入的文章进行分析总结。结果BMSCs 能取得足够量的细胞,具有较低的免疫原性和良好的分化潜能,以其作为 IDD 基因治疗靶细胞具有显著的优越性。在改善退变椎间盘内的微环境、一定的支架材料的培养体系、细胞因子的刺激诱导、与椎间盘细胞共培养等条件下,BMSCs 可以向髓核细胞分化,表达蛋白多糖和Ⅱ型胶原。无论是自体还是同种异体,甚至是异种 BMSCs 移植均可以在退变椎间盘内长期存活、增殖,促进椎间盘细胞基质分泌,从而有效缓解 IDD 进程。结论随着对 BMSCs 和细胞治疗的研究,目前对 BMSCs 移植治疗 IDD 已经进行了大量研究并取得了一定的成果,但是真正将其应用到临床上,仍然存在很多问题,需要进一步研究解决。

关键词： 间质干细胞移植   缺血性脑卒中  

摘要： 近年来选择骨髓间充质干细胞（BMSCs）治疗缺血性脑卒中开创了治疗的新途径，展现了从组织和功能上改善缺血性脑组织的预后恢复作用，因此其应用前景受到生物医学人员瞩目。本文就BMSCs治疗缺血性脑卒中的实验研究进展做一综述。