关键词： BMP-4   椎间盘退变   重组腺病毒   髓核   蛋白多糖   定量分析   动物模型   基因治疗  

摘要： 本研究用AdEasy方法构建了BMP-4基因的重组腺病毒载体;成功的进行了人退变髓核细胞的原代培养;在人退变椎间盘细胞离体实验中证实了BMP-4基因可以在退变髓核细胞或组织中持续大量表达,并刺激椎间盘基质蛋白多糖和Ⅱ型胶原的产生,为基因治疗椎间盘退变开辟了新的路径;在椎间盘退变动物模型中定量分析了BMP-4基因治疗对椎间盘基质合成的影响,为椎间盘退变的发病机制研究提出了新的思考。

关键词： 骨髓间充质干细胞   骨形态发生蛋白   基因治疗   椎间盘退变   体内研究  

摘要： 目的:构建含有人类重组骨形态发生蛋白- 7(bone morphogenetic protein-7 , BMP-7 )基因腺病毒载体,转染兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC),将其导入椎间盘内,观察对兔退变椎间盘的影响。方法:构建hBMP-7腺病毒载体,将其感染体外培养的兔BMSC,免疫细胞化学的方法观察hBMP-7基因在细胞内的表达情况;采用髓核抽吸法建立兔椎间盘退变动物模型,分为3组:退变对照组、BMSC治疗组、基因转染BMSC治疗组。3月后应用RT-PCR、免疫组化和蛋白质免疫印迹分析检测hBMP-7在体内的表达情况;应用核磁共振、病理形态学检测和生化分析的方法,观察椎间盘退变的修复效果。结果:与退变对照组相比,BMSC治疗组和基因转染BMSC治疗组经MRI测量的椎间盘高度和T2信号强度,免疫组化和生化分析检测的Ⅱ型胶原、蛋白多糖含量均明显增高,以基因转染BMSC治疗组尤甚(P<0.05)。hBMP-7的mRNA和蛋白水平均随治疗效果的好转而升高。结论:骨形态发生蛋白-7可促进骨髓间充质干细胞修复椎间盘退变的能力,为进一步实验提供了依据。

关键词： 椎间盘   动物模型   腺相关病毒   转化生长因子β1   血管内皮生长因子   转染   基因治疗  

摘要： 目的：建立羊椎间盘退变模型；应用腺相关病毒（adeno-associated virus，AAV）介导人转化生长因子β1（human transforming growth factor-β1，hTGF-β1）和人血管内皮生长因子（human vascular endothelial growth factor，hVEGF）基因体内转染羊退变椎间盘，观察AAV-hTGF-β1和hVEGF的表达以及单基因转染和双基因联合转染对退变椎间盘的生物学作用。 方法：成年SPF（specific pathogen free，SPF）级去势山羊，通过11号刀片损伤椎间盘前外侧纤维环的方法建立椎间盘退变模型，造模后4、8、12、24周分别进行影像学和组织学检测，观察造模椎间盘变化。将造模成功动物随机分为A、B、C、D和E5组，各组分别于造模椎间盘内注射50μL试剂：A组rAAV2-hTGFβ1、B组rAAV2-hVEGF、C组rAAV2-hTGFβ1+rAAV2-hVEGF、D组磷酸盐缓冲液（PBS）、E组rAAV2-EGFP（enhanced green fluorescent protein，EGFP）。转染后2、4、8、12周时分别进行影像学、组织学和生物化学检测。 结果：（1）影像学和组织学检测结果表明造模动物椎间盘发生缓慢、可靠的退行性变。（2）基因转染后椎间盘的变化①影像学检测：A组、C组动物椎间盘高度指数（disc heigllt index，DHI）均高于D组，C组更显著，差别有统计学意义；B组与D组无显著性差异。②组织学检测：HE、Safranine 0染色后观察到A组、C组动物椎间盘细胞数目减少量、结构紊乱程度、髓核纤维环界限模糊程度等均低于D组。B组与D组无显著性差异。免疫组化染色后观察到：A组、C组动物椎间盘髓核中Ⅱ胶原含量下降程度、纤维环中Ⅰ胶原含量下降程度均低于D组，C组更显著，差别有统计学意义，B组与D组无显著性差异；转染两周后，A组、B组和C组的rAAV2-hTGFβ1、rAAV2-hVEGF和rAAV2-hTGFβ1+rAAV2-hVEGF较D组显著增多；E组动物转染后12周仍可观察到EGFP的表达。③生物化学检测：A组、C组动物椎间盘Ⅰ、Ⅱ型胶原和蛋白多糖的含量下降程度均低于D组，C组更显著，差别有统计学意义；B组与D组无显著性差异。 结论：（1）本方法可以成功建立一种椎间盘退变动物模型；（2）rAAV2-hTGFβ1和rAAV2-hVEGF转染退变的椎间盘后，可持续表达12周；（3）hTGFβ1转染可在一定程度上逆转椎间盘退变；（4）hVEGF可协同hTGFβ1逆转椎间盘退变；（5）hTGFβ1和hVEGF共转染具有协同效应。

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   基因沉默   间接经济损失   下腰痛   常见病因   多发病  

摘要： 椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IVDD)是骨科最常见的多发病,也是下腰痛的常见病因。据资料表明,美国人在一生中发生下腰痛的概率为60%-80%,成人丧失劳动力的原因中,下腰痛排第3位。每年由IVDD导致的直接间接经济损失数目惊人,其晚期的高致残率、致死率也越来越被医学界重视,解决IVDD已成为迫在眉睫的问题,而目前唯一可能的方法就是基因治疗。[第一段]

关键词： asporin   fluorescence in situ hybridization mapping   linkage analysis   osteoglycin   quantitative trait loci   somatic cell hybrid mapping  

摘要： The porcine orthologues of human chromosome HSA9q22.31 genes osteoglycin (OGN) and asporin (ASPN) were mapped to porcine chromosome SSC3 using linkage analysis and a somatic cell hybrid panel. This mapping was refined to SSC3q11 using fluorescence in situ hybridization. These results confirm the existence of a small conserved synteny group between SSC3 and HSA9. Polymorphisms were revealed in both genes, including a pentanucleotide microsatellite (SCZ003) in OGN and two single nucleotide polymorphisms (AM181682.1:g.780G > T and AM181682.1:g.825T > C) in ASPN. The two genes were included in a set of markers for quantitative trait loci (QTL) mapping on SSC3 in the Hohenheim Meishan x Pietrain F-2 family. Major QTL for growth and carcass traits were centred in the ASPN-SW902 region.

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   修复  

摘要： 大部分慢性腰痛与椎间盘的退变有关,本文就目前基因治疗椎间盘退变的研究现状及进展作一综述。

关键词： asporin   osteoarthritis   association study  

摘要： Ostearthritis (OA) is characterized by focal areas of loss of the articular cartilage in synovial joints, associated with varying degrees of osteophyte formation, subchondral bone change and synovitis. The Asporin (ASPN) gene which encodes a protein of the extracellular cartilage matrix contains a triplet repeat encoding for aspartic acid (D) within exon 2 The D14 allele was found associated with knee and hip osteoarthritis in case-control study in the Japanese population. Genotyping Greek knee CA patients for the D repeats we determined that the D15 allele could be considered a risk allele for our population. (c) 2005 OsteoArthritis Research Society International. Published by Elsevier Ltd. All rights reserved.

关键词： 椎间盘   退变   基因治疗  

摘要： 椎间盘退变导致的下腰痛、腰腿痛、颈肩、背痛等慢性疼痛,目前尚无满意的治疗方法。基因治疗作为一种新的治疗方法,可能是治疗和预防椎间盘退变性疼痛的最好方法。本文主要介绍该病基因治疗的原理及载体选择。

关键词： 椎间盘退变   脊髓疾病   基因治疗载体   非手术治疗   disease   椎间盘突出症   临床症状   disc   病变过程   蛋白聚糖  

摘要： 椎间盘退变疾病(degenerative disc disease DDD)是一种慢性病变过程,其病理过程是髓核内蛋白聚糖(aggrecan)和水分的进行性丧失。临床上可表现多种病症,如椎间盘突出症,神经根病,脊髓疾病,椎管狭窄等。给病人带来很多痛苦,占用了大量的医疗资源。现在的治疗手段,包括非手术治疗(如卧床休息,抗炎治疗,镇痛治疗,物理治疗)和手术治疗。主要是针对DDD的临床症状对症治疗,早期阻断进一步促使椎间盘病理改变的因素。在多数病例中,非手术治疗可以在2个月内有效的缓解症状。[第一段]

关键词： asporin   osteoarthritis   single nucleotide polymorphism   high-resolution SNP map   association study  

摘要： Osteoarthritis (OA) is a very common bone and joint disease characterized by breakdown of cartilage in the joint. We recently found that an aspartic-acid repeat polymorphism of the asporin gene (ASPN) on chromosome 9 is associated with susceptibility to OA in Japanese. We provide here a high-resolution single nucleotide polymorphism (SNP) map within a 33.4-kb genomic region containing ASPN. A total of 19 SNPs were isolated from the region by systematic screening using 48 Japanese patients with OA: 7 SNPs in the 5' flanking region, 8 in introns, and 4 in the 3' untranslated region. Nine SNPs were novel. This high-resolution SNP map will be a useful resource for analyzing genes associated with OA and other bone and joint diseases.