关键词： 基因疗法   椎间盘   细胞因子类  

摘要： 椎间盘退变可引起椎间盘突出、脊柱不稳、脊髓神经根病变等疾病,给患者工作和生活带来了巨大的痛苦和不便。但是,目前的治疗方法,无论手术还是非手术均无助于椎间盘退变后病理状态的改变,疗效和并发症存在很多问题。随着椎间盘生理、生化研究不断深入,基因治疗疾病范畴不断扩大,采用基因治疗阻止或延缓椎间盘退变已具有广阔的前景。现将其进展综述如下。

关键词： 椎间盘退变   终板软骨细胞   Asporin  

摘要： 目的通过大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型,探讨大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中Asporin基因的表达及意义。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞,酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞,选取P1代及P5代,体外培养6d,在倒置显微镜下观察细胞形态,利用HE染色及甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行观察及鉴定。用RT-PCR及Westernblot检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖及Asporin基因变化。结果随着细胞传至P5代,细胞形态上有梭形变趋势,Ⅱ型胶原(P5/P1=0.111767,P=0.009842)及蛋白多糖表达(P5/P1=0.328965,P=0.002371)明显下调,Asporin蛋白表达明显上调。结论终板软骨细胞传至P5代,细胞发生自然退变,Asporin基因表达明显上调,提示Asporin基因表达与终板软骨的退变具有重要联系。

关键词： 基因治疗   腰椎间盘突出症   椎间盘退变   非手术疗法   遗传基因   退行性病变   髓核   人体   治疗方法   储水能力  

摘要： 人体腰椎间盘的形状像一个包馅的小圆饼。"饼皮"是致密的纤维环,中间的"馅"是胶状的髓核。我们周围的中老年甚至年轻人中,腰椎间盘突出症的病人比较常见。慢性损伤的累积或突然扭动的拉伤。

关键词： 瘢痕疙瘩   瘢痕,增生性   蛋白质组学   波形蛋白   Asporin   Osteoglycin  

摘要： 目的:通过比较病理性瘢痕与正常皮肤组织的蛋白质组表达差异,寻找和筛选出病理性瘢痕形成机制中的特异蛋白质。方法:运用蛋白质组学技术,对8例瘢痕疙瘩、8例增生性瘢痕患者的组织和3例正常皮肤组织进行差异双向电泳(2D-DIGE),选择差异蛋白质斑点,进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物信息学分析。结果:成功建立病理性瘢痕和正常皮肤组织的双向凝胶电泳图谱,瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤组织凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为2 978、2 975和3 053。与正常皮肤组织相比,我们对瘢痕疙瘩和增生性瘢痕中差异超过4倍的斑点进行质谱分析和数据库检索,共鉴定出36种不同蛋白,包括:瘢痕疙瘩和增生性瘢痕表达相同的16种蛋白,其中上调蛋白8种,下调蛋白8种;只在瘢痕疙瘩中表达的有11种不同蛋白,其中上调9种,下调2种;只在增生性瘢痕中表达的有9种不同蛋白,其中上调4种,下调5种。结论:蛋白质组学较好地显示了病理性瘢痕与正常皮肤组织间的蛋白质表达差异;进一步研究鉴定出的差异蛋白质,有可能对揭示病理性瘢痕形成机制提供新的思路。

关键词： Asporin (ASPN)   Human Articular Chondrocytes (HACs)   Small Leucine-rich Proteoglycans (SLRP)   Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)   Dedifferentiated Chondrocytes  

摘要： A significant association between a polymorphism in the D repeat of the gene encoding asporin and osteoarthritis, the most frequent of articular diseases, has been recently reported. The goal of the present study was to investigate the expression of this new class I small leucine-rich proteoglycan (SLRP) in human articular chondrocytes. First, we studied the modulation of asporin (ASPN) expression by cytokines by Western blot and reverse transcription-polymerase chain reaction. Interleukin-1 beta and tumor necrosis factor-alpha downregulated ASPN, whereas transforming growth factor-beta 1 (when incubated in a serum-free medium) upregulated it. Similarly to proinflammatory cytokines, chondrocyte dedifferentiation induced by a successive passages of cells was accompanied by a decreased asporin expression, whereas their redifferentiation by three-dimensional culture restored its expression. Finally, we found an important role of the transcription factor Sp1 in the regulation of ASPN expression. Sp1 ectopic expression increased ASPN mRNA level and promoter activity. In addition, using gene reporter assay and electrophoretic mobility shift assay, we showed that Sp1 mediated its effect through a region located between -473 and -140 bp upstream of the transcription start site in ASPN gene. In conclusion, this report is the first study on the regulation of asporin expression by different cytokines in human articular chondrocytes. Our data indicate that the expression of this gene is finely regulated in cartilage and suggest a major role of Sp1. (C) 2011 The Feinstein Institute for Medical Research, ***

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   病毒载体   胰岛素样生长因子-1  

摘要： 椎间盘退变是有多种因素共同作用而导致的疾病,在临床上主要表现为椎管狭窄、脊柱节段不稳、腰腿痛、颈椎病、椎间盘突出等病症。数十年来,国内外学者对其发病原因不断的探索研究,多数学者认为主要有以下四大类因素[1-4]：①年龄因素;②机械因素;③细胞营养及炎症介质的作用;④基因因素。然而其治疗主要分为：保守治疗和手术治疗。

关键词： PROTEINS   BIOMINERALIZATION   DENTAL pulp   STEM cells   DENTIN   PROTEOMICS   DIAGNOSTIC immunohistochemistry  

摘要： Human adult dental pulp stem cells (hDPSCs) are a unique precursor population isolated from postnatal dental pulp and have the ability to regenerate a reparative dentin-like complex. In this study, we investigated the role of Asporin in hDPSCs, which was identified as a matrix protein in our previous dentin proteomic analysis. We isolated a clonogenic, highly proliferative population of cells from adult human dental pulp. These isolated hDPSCs were confirmed by fluorescence activated cell sorting (FACS) using stem cell-specific markers and have shown multilineage differentiation potential. The localization of Asporin was identified by immunohistochemistry in the globular calcification region in the junction of predentin and dentin. The gene and protein expression levels of Asporin were enhanced at the early stage of and then reduced during the late stage of differentiation of hDPSCs in mineralization media. ASPN knock-down using a lentiviral system suppressed the mineralization of hDPSCs. These results suggest that ASPN plays positive roles in the mineralization of hDPSCs and predentin to dentin. J. Cell. Physiol. 226: 1676-1682, 2011. (C) 2010 Wiley-Liss, Inc.

关键词： 瘢痕疙瘩   蛋白质组学   Asporin   膜联蛋白V   表皮型脂肪酸结合蛋白  

摘要： 目的通过比较瘢痕疙瘩与正常皮肤组织的蛋白质组表达差异，筛选出与瘢痕疙瘩产生相关的蛋白质。方法2010年1月至6月运用蛋白质组学技术，对8例瘢痕疙瘩组织和3例正常皮肤组织进行差异双向凝胶电泳（2D—DIGE），选择差异蛋白质斑点，进行基质辅助激光解离飞行时间（MALDI—TOF／TOF）质谱分析和生物学信息分析。结果成功建立瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的双向凝胶电泳图谱，瘢痕疙瘩和正常皮肤组织凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为2978和3053，其中表达差异超过4倍的斑点共有40个，质谱分析和数据库检索共鉴定出32种蛋白质，包括上调蛋白有20种，下调蛋白有12种。从功能上可分为载体蛋白（3种）、信号转导蛋白（4种）、增殖凋亡相关蛋白（2种）、细胞骨架蛋白（6种）、细胞外基质蛋白（8种）、免疫因子（3种）、肿瘤相关蛋白（2种）和未知功能蛋白（4种）。结论蛋白质组学能较好地显示瘢痕疙瘩与正常皮肤组织间的蛋白质表达差异。对这些差异蛋白质进一步深入研究，将有助于揭示瘢痕疙瘩的发病机制，也为发现新的治疗靶点提供线索和依据。

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   目的基因   载体  

摘要： 椎间盘退变性疾病是指由椎间盘退变引起的以颈肩腰背痛为主要表现的临床症候群,包括常见的椎间盘突出症、颈椎病、退变性椎间盘源性腰痛和腰椎管狭窄症等。目前常规的治疗方法包括：药物治疗、类固醇注射封闭、理疗和手术治疗等。这些方法只是处理终末期的症状,

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   目的基因   载体  

摘要： 椎间盘退变基因治疗旨在经转基因方法维持正常椎间盘细胞种群表型和数量,增强细胞合成蛋白聚糖、Ⅱ型胶原能力,从而延缓和逆转椎间盘退变。许多研究表明目的基因通过载体转染退变椎间盘髓核、纤维环细胞,能恢复细胞的生理功能。椎间盘退变基因治疗涉及目的基因、载体、靶细胞、转染方法和基因表达调控,该文就椎间盘退变基因治疗的目的基因和基因载体研究进展作一简要综述。