关键词： asporin   disc degenerative disease, candidate protein  

摘要： The human spine carries the weight of the trunk, upper extremities, and head, and provides an extensiverange of motion. Due to heavy use and lack of vasculature, the intervertebral discs degenerate much more rapidly than other structures of the human body.1 Intervertebral disc degeneration is mostly age-related, 2 and spinal disorders associated with disc degeneration have a significant impact on society.3,4 Indeed, low back

摘要： 椎间盘退变(IDD)是一种以颈肩腰背痛为主要表现的临床症候群,包括临床上常见的颈、腰椎间盘突出症、颈椎病,退变性椎间盘源性腰痛、颈腰椎不稳症和腰椎管狭窄症等[1].其确切的原因至今尚未十分清楚,目前常规的治疗包括药物治疗、类固醇注射封闭、理疗及手术治疗等,且这些方法只能改善症状而无法从根本上改变椎间盘退变[2].随着对IDD发生机制的深入研究,基因治疗作为一种新的治疗方法,从分子水平阻止或延缓椎间盘退变提供了可能,本文就IDD的发生机制及基因治疗进展作一综述.

关键词： association   GWAS   replication   GDF5   asporin  

摘要： Degenerative skeletal disorders are common and serious problems worldwide, especially in aging populations. They are polygenic diseases influenced by both genetic and environmental factors, and hence the identification of susceptibility genes may provide clues to their etiology and pathogenesis, although this is still in its early stages. This review focuses on genetic studies of two representative degenerative skeletal disorders: osteoarthritis and degenerative disc disease. Genetic studies of these two diseases share common features and face similar problems, although their current statuses are very different. The two diseases have common susceptibility alleles-namely, the GDF5 rs143383 single-nucleotide polymorphism and the asporin D14 triplet repeat-which provides hints on how to investigate their genetic factors. The future success of genetic studies of these diseases will depend on accurate and reliable diagnostics, large-scale interpopulation association studies and replications, and consideration of environmental effects and related diseases with similar phenotypes.

关键词： 椎间盘退变   基因治疗   干细胞治疗   综述  

摘要： 骨髓间充质干细胞及相关的基因治疗作为一种新的生物治疗手段,在退变椎间盘修复的领域展现了巨大潜力,作者就其相关进展及问题进行综述。

关键词： 髓核细胞   TGF-β3   基因治疗   椎间盘退变   兔  

摘要： 目的探讨TGF-β3基因修饰后退变髓核细胞生物学效应以及植入兔退变椎间盘后对退变椎间盘的影响。方法将重组腺病毒载体Ad-TGF-β3与第2代退变髓核细胞按10∶1比例混合培养转染(Ad-TGF-β3组),待细胞融合后传代,MTT检测转染细胞增殖活性,Western blot检测TGF-β3蛋白含量,免疫细胞化学染色观察对数生长期转染细胞Ⅱ型胶原染色阳性率;采用病毒空载体转染髓核细胞(Adv组)和未经转染髓核细胞(空白组)作为对照。取30只新西兰兔,体重3.2～3.5 kg,雌雄不限,通过针刺L3、4、L4、5和L5、6椎间盘制备椎间盘退变模型。将实验动物按照随机数字法分为3组,转染细胞组(A组,n=12)、退变细胞组(B组,n=12)和空白对照组(C组,n=6)。A、B组将100μL浓度为1×105个/mL对应细胞悬液注射入退变椎间盘,C组同法注入等量PBS。注射后6、10、14周取A、B组各4只、C组2只实验动物处死,取L3、4、L4、5和L5、6椎间盘行组织学观察,RT-PCR检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达。结果 Ad-TGF-β3转染后髓核细胞活性明显改善;转染后3、7、14 d,TGF-β3在髓核细胞内表达逐渐升高;Ad-TGF-β3组髓核细胞细胞质内见棕黄色Ⅱ型胶原阳性染色,阳性率显著高于Adv组及空白组(P<0.05)。组织学观察示,A组椎间盘退变程度较B、C组明显减轻。6、10、14周A组Ⅱ型胶原和蛋白多糖mRNA表达显著高于B、C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β3基因修饰退变髓核细胞后可明显改善细胞生物活性,转染后髓核细胞植入兔体内可明显增加退变椎间盘的基质分泌。

关键词： 自体牙移植术   骨性粘连   发病机制   动物模型   生物力学  

摘要： 自体牙移植(autotransplantation)技术已经在临床得到成功应用,移植牙的牙周愈合过程业已进行了广泛研究。针对正畸临床常见的缺牙症状,该技术相对于种植牙有特殊优势。研究显示,自体牙移植的远期成功率可达79%,其成功有赖于健康牙周组织的重建,而牙根替代性吸收,即根骨粘连,是最常见的影响成功率的原因,目前这种异常骨化的机制尚不清楚,以往的研究多集中在引导牙周膜再生的正向促进方面。有学者对移植牙的力学环境进行研究,认为适宜的机械刺激对维持牙周组织的动态平衡有促进作用。近年来有一系列对自体移植牙进行正畸加力研究的文献,但多数为临床研究。\n Asporin基因最早于2001年报道,是人牙周膜组织中稳定且高表达的基因之一,其编码的新蛋白命名为牙周膜相关蛋白-1。研究已发现,AsporinmRNA不仅在牙周膜细胞稳定时表达,在细胞向成骨类细胞方向分化时表达增多,其作用机制为钝化BMP-2(Bone Morphogenetic Proteins,骨形成蛋白-2)的信号通路,它特征性的亮氨酸重复序列末端(LRR)在Asporin-BMP-2的相互作用中起重要作用,负性调控BMP-2诱导的细胞分化,使牙周膜在口内虽表现出高的成骨分化潜力但不会发生矿化,从而维持内环境的稳定。\n 因此,我们设计了以下实验,试图探究Asporin/PLAP-1在自体牙移植术后根骨粘连发生机制中的作用。研究内容包括两个部分:\n 第一部分Beagle犬自体牙移植术后正畸加力动物模型的建立\n 选择4只13～15月龄雄性Beagle犬,体重10～12kg。以上颌第一切牙(UI1)和第二切牙(UI2),下颌第二切牙(LI2)和第三切牙(LI3)为实验对象。实验牙拔出经体外根管治疗后,移植入同颌对侧牙槽窝中。根据实验分组于术后不同时间在移植牙唇面粘接托槽,使用螺旋推簧施加约30g持续的水平轻力。术后8周内进行定期观察。得到如下结论:\n (1)全部的犬均可耐受整个自体牙移植手术过程,加力装置在观察期间固位稳定,未发生变形、断裂。\n (2)将托槽直接粘结在牙面上安置弓丝进行加力,对牙周组织的刺激较小,减小了对牙周愈合的干扰;且不需要取印模制作带环,减少了动物的麻醉次数。\n (3)本研究所建模型符合犬的解剖特点,易操作,重复性高,是一种较为理想的自体牙移植动物模型。\n 第二部分正畸力作用下自体移植牙牙周组织中Asporin及其mRNA表达变化的研究\n 研究一:正畸力作用下自体移植牙牙周组织中Asporin表达变化的研究。在已建立动物模型基础上,采用Western blot技术检测术后不加力组,术后1周、2周、4周开始加力组的自体移植牙牙周组织中Asporin蛋白的表达变化及时间分布特点。\n 研究结果表明:术后1周开始加力组与不加力组相比,Asporin蛋白表达水平差异无统计学意义;术后2周开始加力组Asporin蛋白表达水平高于其他组,差异有统计学意义。\n 研究二:正畸力作用下自体移植牙牙周组织中AsporinmRNA表达变化的研究。在已建立的动物模型基础上,提取各样本牙周组织的总RNA,反转录合成cDNA,合成AsporinmRNA的引物,采用实时定量。PCR定量检测AsporinmRNA表达变化及时间分布特点。\n 研究结果表明:自体移植后不同时间开始加力与不加力组牙周组织中AsporinmRNA表达变化规律同Asporin的表达变化规律基本一致。\n 结论:Asporin在牙周愈合过程中的分布表达受基因转录水平的调控,Asporin参与了自体牙移植后牙周愈合的组织改建,早期施加轻的正畸力可以促进Asporin的表达。\n 本研究提示:\n (1)Asporin参与了自体牙移植牙周损伤的修复过程,也参与了正畸力作用下的牙周改建过程,并受到基因转录水平的调控。正畸轻力所引起的Asporin表达增加对牙周再生有负向调控作用。\n (2)自体牙移植后2周施加正畸轻力促进更有利于促进牙周膜愈合,防止根骨粘连。

关键词： 基因疗法   椎间盘   细胞因子类  

摘要： 椎间盘退变可引起椎间盘突出、脊柱不稳、脊髓神经根病变等疾病,给患者工作和生活带来了巨大的痛苦和不便。但是,目前的治疗方法,无论手术还是非手术均无助于椎间盘退变后病理状态的改变,疗效和并发症存在很多问题。随着椎间盘生理、生化研究不断深入,基因治疗疾病范畴不断扩大,采用基因治疗阻止或延缓椎间盘退变已具有广阔的前景。现将其进展综述如下。

关键词： 椎间盘退变   终板软骨细胞   Asporin  

摘要： 目的通过大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型,探讨大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中Asporin基因的表达及意义。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞,酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞,选取P1代及P5代,体外培养6d,在倒置显微镜下观察细胞形态,利用HE染色及甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行观察及鉴定。用RT-PCR及Westernblot检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖及Asporin基因变化。结果随着细胞传至P5代,细胞形态上有梭形变趋势,Ⅱ型胶原(P5/P1=0.111767,P=0.009842)及蛋白多糖表达(P5/P1=0.328965,P=0.002371)明显下调,Asporin蛋白表达明显上调。结论终板软骨细胞传至P5代,细胞发生自然退变,Asporin基因表达明显上调,提示Asporin基因表达与终板软骨的退变具有重要联系。

关键词： 基因治疗   腰椎间盘突出症   椎间盘退变   非手术疗法   遗传基因   退行性病变   髓核   人体   治疗方法   储水能力  

摘要： 人体腰椎间盘的形状像一个包馅的小圆饼。"饼皮"是致密的纤维环,中间的"馅"是胶状的髓核。我们周围的中老年甚至年轻人中,腰椎间盘突出症的病人比较常见。慢性损伤的累积或突然扭动的拉伤。