关键词： 慢病毒属   Survivin   椎间盘退变   细胞凋亡   基因治疗  

摘要： 目的：研究慢病毒介导的生存素(Survivin)基因在体外转染人退变椎间盘髓核细胞的生物学效应。 方法：取腰椎间盘突出症患者手术切除的髓核组织,应用细胞培养技术获得人髓核细胞;用含有Survivin基因的重组慢病毒载体转染人退变髓核细胞作为实验组,阴性对照组转入等量的空病毒颗粒,空白对照组加入等量的PBS;通过Real-Time P CR技术检测Survivin基因转染后的表达情况;应用AnnexinV-PI双染法,通过流式细胞仪检测退变髓核细胞的凋亡率;应用Caspase-3活性检测试剂盒,通过酶标仪检测髓核细胞裂解液中Caspase-3的酶活性。 结果：原代髓核细胞培养7天左右开始贴壁增长,髓核细胞呈多角形,可见长短不一的突起结构,细胞核呈圆形,核中可见2-3个圆形的核仁,培养30天左右细胞达90%融合;在MOI=50时,慢病毒Survivin基因载体转染效率可达到90%;髓核细胞转染后1周左右可到达90%融合,细胞的增长和细胞形态无明显改变;在传代之后髓核细胞增长减慢且细胞形态发生改变,胞质浓缩,细胞体积变小,细胞突起变细变长;髓核细胞在转染后1周,Real-Time PCR结果显示实验组Survivin mRNA的表达量(139.55±7.43)明显高于阴性对照组(1.43±0.16)及空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);髓核细胞凋亡率检测结果实验组为(2.44±0.14)、阴性对照组为(2.36±0.14)及空白对照组为(2.43±0.20),三组组间比较差异无统计学意义(P>0.05);Caspase-3吸光度检测结果实验组为(0.115±0.01)、阴性对照组为(0.101±0.02)及为空白对照组(0.099±0.01),三组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。 结论：(1)慢病毒介导的Survivin基因在体外成功转染人退变髓核细胞并且获得过表达;(2)慢病毒介导的Survivin基因转染人退变髓核细胞后引起髓核细胞增长减慢及细胞形态学的改变,对髓核细胞的凋亡无明显抑制作用。

关键词： 腰椎间盘退变   生活质量   椎间盘突出   神经根病变   disc   人类健康   脊柱不稳   疾病  

摘要： 颈、腰椎间盘退变（intervertebral disc degeneration，IDD）是一种严重危害人类健康、降低人们生活质量的疾病。椎间盘退变可引起椎间盘突出、脊柱不稳、脊髓神经根病变等疾病，给患者工作和生活带来了巨大的痛苦和不便。

关键词： 基因治疗   椎间盘退变   临床研究  

摘要： 椎间盘退变在临床上是一种常见疾病,但手术治疗和各种非手术治疗方法仅仅停留在对椎间盘退变所引起的一些其他症状上面,并没有致力于恢复椎间盘细胞功能上面,总体治疗的效果并不是十分的令人满意,而基因治疗是一种新的治疗手段,能够改变和持续影响细胞的生理功能,本文就近年有关椎间盘退化的基因治疗的临床研究进展做一个综述。

关键词： 移植,自体   牙正畸牵引   Asporin  

摘要： 目的 观察术后加载正畸力对自体移植牙牙周愈合过程中Asporin、骨形成蛋白2（bone morphogenetic proteins-2,BMP-2）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）基因及牙周膜相关蛋白1（periodontal ligament associated protein-1,PLAP-1）表达的影响,探讨正畸加载对自体牙移植后牙周愈合的影响机制.方法 将4只纯种比格犬的32颗上下颌切牙按照同颌对侧交换原则进行自体移植,分为4组：术后不加力组（对照组）和术后1、2、4周加力组（每只犬每组2颗牙）,术后8周灌注、翻瓣,截取移植牙及牙槽骨,研磨后用实时定量PCR及蛋白质印迹法检测牙周组织中Asporin、BMP-2和ALP mRNA以及PLAP-1的表达情况.结果 对照组与术后1周加力组的Asporin、BMP-2、ALP mRNA表达量差异均无统计学意义（P＞0.05）.术后2周加力组Asporin mRNA表达水平（2.047± 0.281）最高,与其他组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）.术后2周加力组BMP-2 mRNA表达水平（1.358±0.095）比对照组、术后1周加力组显著降低（P＜0.05）,同时ALP mRNA表达水平最高（1.710 ±0.051）.术后2周加力组PLAP-1蛋白表达量（1.054±0.113）最高,与对照组、术后4周加力组相比差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 正畸加力可促进Asporin及其蛋白PLAP-1的表达;自体牙移植术后2周开始加力,Asporin基因及其蛋白PLAP-1表达最活跃.

关键词： RNA干扰   腰椎间盘退变   基因治疗   目的基因   载体  

摘要： 腰椎间盘退变(LDD)引起的腰椎疾病的治疗一直备受关注,其治疗方法主要有保守治疗和手术治疗,但均不能阻止或逆转腰椎间盘的退变进程。近年来,LDD的基因治疗逐渐受到人们重视。基因治疗主要涉及目的基因与目的细胞的筛选,用合适的载体向靶细胞内转染治疗性基因,调控目的基因的表达而达到持续地调控相关RNA和蛋白质表达的目的。通过基因治疗对腰椎间盘组织进行改造,这也许是将来治疗LDD最好的方法。

关键词： Asporin   Osteoarthritis   Knee   Polymorphism   Meta-analysis  

摘要： Objective: Knee osteoarthritis (KOA) is a common disease that is characterized by the degeneration of joint cartilage in the knee. Genetic factors have been implicated in KOA. Recently, several genetic studies have suggested that susceptibility to KOA is affected by the number of aspartic acid (D) residues in the amino-terminal of the asporin protein, but evidence remains conflicting. Therefore, the objective of the present meta-analysis was to investigate whether or not the D-repeat polymorphism is associated with susceptibility to KOA. Methods: A systematic search of all relevant studies published through Dec 2012 was conducted using the MEDLINE, EMBASE, OVID, and ScienceDirect. Allelic counts were evaluated for the D14 and D13 alleles respectively. The included studies were only assessed in the analysis of the following allele model: D14 allele vs others alleles combined, D13 allele vs others alleles combined, and D14 allele vs D13 allele. Results: Seven studies (eight comparisons) with 5515 total participants (2334 KOA patients and 3181 controls), which involved four Caucasian and four Asian populations, were eligible for inclusion. Meta-analysis was conducted for genotype D14 vs others combined, D13 vs others combined, and D14 vs D13. In the stratification based on ethnicity, studies were divided into Caucasian and Asian populations. We did not detect positive association between KOA and the D14 allele in Asian populations (OR = 1.527, 95% CI: 0.879-2.653) and in Caucasian populations (OR = 1.053, 95% Cl: 0.905-1.225). There was also no positive association between susceptibility to KOA and D13 allele in Asian populations (OR = 0.950, 95% CI: 0.732-1.233) and in Caucasian populations (OR = 0.866, 95% CI: 0.723-1.037). Conclusion: The present results suggest that the D-repeat of asporin gene (ASPN) may not be a major susceptibility locus in the Caucasian and Asian populations with KOA. Because of the limitations of the present meta-analysis, accurate conclusions

关键词： 椎间盘退变   生物学治疗   细胞移植   基因治疗   文献综述  

摘要： 目前针对椎间盘退变的生物学疗法主要包括生物分子治疗、基因治疗、细胞移植治疗和组织工程学治疗,这些治疗策略能够有效促进细胞增殖及细胞外基质合成,抑制细胞外基质分解,从而在椎间盘修复和再生方面显示出广阔前景。作者就椎间盘退变生物学治疗的相关进展、面临的问题及未来研究的主要方向做一综述。

关键词： 椎间盘退变   椎间盘细胞   基因治疗   生物学治疗   蛋白多糖   退变椎间盘   细胞数减少   髓核细胞   细胞因子   细胞外基质  

摘要： 椎间盘退变是导致腰背痛的病理生理学原因之一。多年来,对椎间盘细胞、生化特性以及微环境的研究,发现椎间盘退变时呈现细胞凋亡、细胞数减少、重要的细胞外基质蛋白多糖和Ⅱ型胶原降低和基质金属蛋白酶活性增加等。因此,20世纪90年代后期许多学者开始研究新的治疗方法,即椎间盘退变的生物学治疗。生物学治疗包括细胞治疗。

关键词： 椎间盘退变   病毒载体   基因治疗   干细胞治疗   综述  

摘要： 近几年,为了从根本上修复或逆转椎间盘退行性变,椎间盘退变生物学治疗成为了该领域的研究热点,其中以病毒作为载体将治疗基因等导入动物退变椎间盘模型中或以病毒载体介导的干细胞治疗,已成为了一种崭新的治疗思路。作者就病毒载体介导的椎间盘退变生物治疗的最新进展进行了综述。

关键词： asporin   disc degenerative disease, candidate protein  

摘要： The human spine carries the weight of the trunk, upper extremities, and head, and provides an extensiverange of motion. Due to heavy use and lack of vasculature, the intervertebral discs degenerate much more rapidly than other structures of the human body.1 Intervertebral disc degeneration is mostly age-related, 2 and spinal disorders associated with disc degeneration have a significant impact on society.3,4 Indeed, low back