关键词： 大黄糖络丸   糖尿病大血管病变   炎症及氧化损伤   NLRP3/Caspasse-1/GSDMD通路   Nrf2/HO-1/GCLC通路  

摘要： 目的: 本研究在大黄糖络丸(Rhubarb Tangluo Pills,RTP)有效治疗糖尿病的临床基础上,进一步明确大黄糖络丸对糖尿病大鼠大血管炎症和氧化损伤的干预作用及机制。 方法: 将90只造模成功的SPF级ZDF(纯合子fa/fa)大鼠随机分为MC组、PC组(二甲双胍,0.18g/Kg)和H-RTP(2.16g/kg)、M-RTP(1.08g/kg)、L-RTP(0.54g/kg)组,另选15只ZDF(杂合子fa/+)大鼠作为NC组,干预12周后测定大鼠体质量和空腹血糖。观察大鼠一般生存状态;采用全自动生化分析仪检测血浆中TC、TG、LDLc、HDL-c的含量;采用HE染色法观察大鼠胸主动脉组织病理形态;采用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的含量;采用生化试剂盒检测血清中SOD、MDA、GSH-Px、NADPH的含量;采用免疫荧光技术检测胸主动脉组织中ROS及4-HNE表达;采用WB与qPCR法检测胸主动脉组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1 mRNA和蛋白表达水平。 结果: (1)大黄糖络丸对糖尿病大鼠一般状态影响:NC组大鼠具有较为良好的精神状态、反应迅捷,皮毛色泽黑亮柔顺,而MC组大鼠明显出现表现精神萎靡,皮毛失泽甚至大量脱毛、反应迟钝;大黄糖络丸及二甲双胍药物干预后大鼠一般生存状态具有明显改善。 (2)大黄糖络丸对糖尿病大鼠体质量与空腹血糖的影响:与NC组相比,MC组大鼠的体质量与空腹血糖显著升高(P<0.05);与MC组相比,PC及H-RTP、M-RTP组大鼠体质量及空腹血糖显著降低(P<0.05),L-RTP组大鼠体质量无显著差异,空腹血糖升高(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP、M-RTP组大鼠体质量及空腹血糖显著降低(P<0.05)。 (3)大黄糖络丸对各组大鼠血脂水平的影响:与NC组相比,MC组大鼠TC、TG、LDL-c含量均显著升高(P<0.05),HDL-c含量显著降低(P<0.05);与MC组相比,H-RTP、M-RTP组与PC组可显著降低TC、TG、LDL-c含量(P<0.05),升高HDL-c含量(P<0.05),L-RTP组可升高HDL-c含量(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP、M-RTP组大鼠TC、TG、LDL-c含量显著降低(P<0.05),H-RTP组大鼠HDL-c含量显著升高(P<0.05)。 (4)大黄糖络丸对各组大鼠胸主动脉组织病理学改变的影响:NC组大鼠胸主动脉内膜完整光滑,中层平滑肌细胞与弹性纤维排列整齐层次清晰,未见明显泡沫细胞,血管壁无增厚。与NC组相比,MC组大鼠胸主动脉内膜粗糙,中膜平滑肌细胞增值排列紊乱,弹性纤维层次不清、明显分叉,部分断裂,细胞间间院增大,可见部分细胞肿胀,空泡性变,血管壁显著增厚(P<0.05)。H-RTP、M-RTP、L-RTP组与PC组胸主动脉中膜平滑肌细胞排列紊乱,空泡性变,弹性纤维部分分叉,L-RTP组中膜弹性纤维断裂,各组血管壁厚度与MC组相比降低(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP组胸主动脉血管壁厚度降低(P<0.05)。 (5)大黄糖络丸对糖尿病大鼠胸主动脉炎症损伤的影响:与NC组相比,MC组大鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-18的含量均显著升高(P<0.05),大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.05);同时,与MC组比较,H-RTP、M-RTP、L-RTP组及PC组大鼠血清中IL-1β、IL-18的含量均显著下降(P<0.05),H-RTP、M-RTP组及PC组大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著下调(P<0.05);与L-RTP组相比,HRTP、M-RTP组大鼠血清中IL-1β、IL-18的含量均显著下调(P<0.05),H-RTP、MRTP组大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著下调(P<0.05)。 (6)大黄糖络丸对糖尿病大鼠胸主动脉氧化损伤的影响:与NC组相比,MC组大鼠血清中SOD、GSH-Px的含量均显著降低(P<0.05),MDA、NADPH的含量显著升高(P<0.05),大鼠胸主动脉DHE、4-HNE荧光强度明显增强(P<0.05),Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1 mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05);与MC组比,各给药组大鼠血清中SOD、GSH-Px的含量均有不同程度升高(P<0.05),MDA、NADPH的含量均有不同程度降低,尤其H-RTP组降低最显著(P<0.05),各给药组大鼠胸主动脉DHE

关键词： 结肠腺瘤性息肉   血脂代谢异常   炎症状态  

摘要： 目的: 结肠腺瘤性息肉是一种常见的消化系统疾病,是结肠癌的一种癌前疾病。本研究探讨结肠腺瘤性息肉与血脂、炎症水平及肥胖之间的关系,并分析甘油三脂葡萄糖指数-腰高比(Ty G-WHt R)、全身免疫炎症指数(SII)与结肠腺瘤性息肉数目和大小的相关性,期望通过简单便捷的血液学指标协助结肠镜筛查,为预防结肠腺瘤性息肉的发生提供新思路。 方法: 回顾性分析于2020年1月至2022年12月在邯郸市中心医院消化内科行电子结肠镜检查的住院患者临床资料,其中符合研究要求的对象总计270例,分为腺瘤组(n=70)和对照组(n=200),对比两组患者的实验室检查是否存在统计学差异。根据息肉的数目、大小再次分组,分别对比炎症指标、血脂水平在腺瘤组组间是否有差异,最后通过回归行进一步的分析。 结果: 1.与对照组相比,腺瘤组腰围(Waist circumference,WC)、腰高比(Waist height ratio,WHt R)、体质指数(Body mass index,BMI)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.与对照组相比,腺瘤组白细胞计数(White blood cell count,WBC)、中性粒细胞计数(Neutrophil count,NE)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血小板计数(Platelet count,PLT)以及全身免疫炎症指数(Systemic immune-inflammation index,SII)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 3.与对照组相比,腺瘤组尿酸(Uric acid,UA)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三脂葡萄糖指数(Triglyceride glucose index,Ty G)、脂质蓄积指数(Lipid accumulation product,LAP)、甘油三脂葡萄糖指数-腰围(Triglyceride glucose index-waist circumference,Ty G-WC)、甘油三脂葡萄糖指数-腰高比(Triglyceride glucose index-waist height ratio,Ty G-WHt R)及甘油三脂葡萄糖指数-体质指数(Triglyceride glucose index-body mass index,Ty G-BMI)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。 4.结肠腺瘤性息肉根据不同数目分为两组,与单发组相比,多发组WBC、淋巴细胞计数(Lymphocyte count,LY)、单核细胞计数(Monocyte count,MONO)、血小板/淋巴细胞比值(Platelet to lymphocyte ratio,PLR)、Ty G-WC以及Ty G-BMI明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 5.结肠腺瘤性息肉根据不同大小分为两组,淋巴细胞与单核细胞比值(Lymphocyte to monocyte ratio,LMR)在≤1cm组中明显升高,Ty G-WHt R在>1cm组中明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。 ***回归模型发现,Ty G-WHt R(OR=2.139)、SII(OR=1.002)、BMI(OR=1.118)是结肠腺瘤性息肉发生的独立危险因素。 结论: 1.血脂代谢异常、炎症状态与结肠腺瘤性息肉的发生具有相关性。 *** G-WHt R、SII及BMI是结肠腺瘤性息肉发生的独立危险因素。

关键词： Tau蛋白病   NLRP3炎症小体   乙酰化   小胶质细胞活化   认知功能障碍  

摘要： 背景: 微管相关蛋白Tau（microtubule-associated protein Tau,MAPT）在神经元轴突中高表达,其主要功能是促进微管的组装并维持其稳定性,对于神经元的生长发育以及功能维持等至关重要。Tau蛋白病（Tauopathies）是一类由异常Tau蛋白的聚集导致神经原纤维缠结（neurofibrillary tangles,NFTs）的形成为病理学特征的神经退行性疾病,包括阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）、额颞叶痴呆（frontotemporal dementia,FTD）、进行性核上性麻痹（progressive superanuclear palsy,PSP）、皮质基底节变性（corticobasal degeneration,CBD）以及匹克病（Pick’s disease,Pi D）等。随着人口老龄化日益加剧,Tau蛋白病患者的数量也不断增加,严重危及人类健康,给社会造成了沉重的负担,目前其发病机制尚未完全阐明,且无有效的治疗方式。除了典型的Tau病理之外,Tau蛋白病患者的易感脑区通常伴有由过度活化的小胶质细胞介导的神经炎症反应,神经炎症和Tau病理两者相互影响促进,形成恶性循环,推动疾病不断恶化。尽管既往研究已证明病理性磷酸化或聚集的Tau蛋白可导致小胶质细胞NLRP3炎症小体的组装活化,激活下游信号途径,促进细胞因子IL-1β（interleukin-1β）的释放,启动炎症反应,但其具体机制仍不明确。NLRP3炎症小体的激活受多种翻译后修饰调控,NLRP3特定位点的乙酰化会促进其组装活化。同时,Tau蛋白已被证明具有乙酰转移酶活性,能诱导包括自身在内的多种底物的乙酰化。然而,Tau蛋白是否能通过乙酰化NLRP3促进炎症小体激活,进而诱导小胶质细胞活化介导神经炎症反应的发生尚不清楚。 目的: 探讨揭示Tau蛋白通过乙酰化NLRP3导致炎症小体和小胶质细胞活化的作用与分子机制,为Tau蛋白病发病机制提供新的线索,为疾病治疗和相关药物开发提供新的靶标。 方法: （1）采用免疫沉淀（immunoprecipitation,IP）联合蛋白免疫印迹法（Western blotting,WB）检测AD患者和正常人死后尸检样本的脑海马和皮层组织以及Tau病变转基因小鼠海马组织中总Tau、磷酸化Tau（p Tau）、NLRP3、ASC、切割的Caspase-1（C-Casp1）蛋白以及NLRP3乙酰化（Ace-NLRP3）水平变化;利用Pearson相关性分析法明确Tau/p Tau、Ace-NLRP3和NLRP3炎症小体激活之间的关系; （2）用过表达Tau蛋白的HEK-293T细胞上清或细胞裂解液处理LPS预处理的BV-2小胶质细胞,或在BV-2细胞中直接过表达Tau蛋白:CCK-8法检测过表达Tau蛋白的HEK-293T细胞活力变化;WB检测HEK-293T细胞上清和细胞裂解液中Tau蛋白水平;IP联合WB检测各组BV-2细胞裂解液中NLRP3、ASC、C-Casp1以及Ace-NLRP3水平变化;采用酶联免疫吸附实验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测各组BV-2细胞培养上清中炎症因子IL-1β水平;在细胞水平,利用Pearson相关性分析法再次明确Ace-NLRP3和NLRP3炎症小体激活之间的关系; （3）以HEK-293T细胞为研究载体,建立体外NLRP3炎症小体活性检测体系,明确比较不同Tau蛋白乙酰化NLRP3和激活NLRP3炎症小体的作用差异; （4）加入重组Tau441蛋白孵育LPS预处理的BV-2细胞,采用免疫荧光（immunofluorescence,IF）染色,显微镜下观察BV-2细胞对Tau蛋白的摄取;用LPS和重组Tau441蛋白处理BV-2细胞的同时,分别加入两种乙酰转移酶抑制剂TPOP146和L-45或过表达去乙酰化酶Sirt2后,IP联合WB检测各组BV-2细胞裂解液中NLRP3、ASC、C-Casp1以及Ace-NLRP3水平变化; （5）采用（3）中的NLRP3炎症小体活性检测体系,构建NLRP3突变体K21R NLRP3、K22R NLRP3以及K24R NLRP3质粒,在供体细胞中同时转染TauS262E和野生型NLRP3或上述突变体、同时转染TauS262E和野生型NLRP3以及Sirt2,检测指标同（3）,明确上述关键位点在Tau介导的NLRP3乙酰化及炎症小体激活中的作用; （6）在HEK-293T细胞中同时过表达EGFP-NLRP3和Flag-Tau441,采用IF观察两者共定位情况,免疫共沉淀（co-immunoprecipitation,Co-IP）检测

关键词： 维持性血液透析   C-反应蛋白与白蛋白比值   红细胞分布宽度标准差   微炎症状态   左心室结构与功能  

摘要： 背景: 近年来,我国维持性血液透析(Maintenance hemodialysis,MHD)人群飞速上升。心血管疾病(Cardiovascular disease,CVD)是MHD患者最严重的并发症,也是其高住院率和高死亡率的首要原因,极大地加重了社会及家庭的负担。引起心血管并发症的因素有很多,MHD的微炎症状态是不同于普通人群发生CVD的重要机制。C反应蛋白与白蛋白比值(C-reactive protein to albumin ratio,CAR)是一种新型炎症指标,与单一指标相比,可更好地反映临床的综合效应,更具可靠性和稳健性。红细胞分布宽度(Red blood cell distribution width,RDW)是反映红细胞体积变异性的指标,已被证实可以反应炎症状态,包括红细胞分布宽度变异系数(Red blood cell distribution width-coefficient of variation,RDW-CV)和红细胞分布宽度标准差(Red blood cell distribution width-standard deviation,RDW-SD)两种。RDW-SD是针对红细胞分布曲线的直接测量,相对于RDW-CV,其结果不受平均红细胞体积(Mean corpuscular volume,MCV)影响,更为可靠。目前关于二者在MHD患者中的研究极少。本研究旨在探讨其与MHD患者微炎症状态及左心室结构与功能的关系,以期为维持性血液透析患者提供新型的受干扰较小的微炎症状态标志物,为早期发现及干预治疗心血管并发症提供新的切入点。 目的: 探讨CAR、RDW-SD与MHD患者微炎症状态及左心室结构与功能的相关性,并探讨它们是否是发生左心室舒张功能障碍(Left Ventricular Diastolic Dysfunction,LVDD)及左心室肥厚(Left Ventricular Hypertrophy,LVH)的独立危险因素,以及其对MHD患者发生左心室肥厚的预测价值。 方法: 严格按照纳入及排除标准选取于河南大学淮河医院血液透析中心治疗的患者100例。收集患者的一般资料、实验室检查和心脏彩超指标。根据CAR和RDW-SD的中位数,以及是否发生舒张功能障碍、左心室肥厚分组,比较各自组间资料差异。采用相关性分析探讨CAR、RDW-SD与各临床指标间的相关性。采用logistic回归分析探索发生LVDD、LVH的独立危险因素。运用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线评价CAR、RDW-SD对MHD患者发生LVH的预测价值。 结果: ***患者高CAR组和低CAR组间资料比较:高CAR组的WBC、PLT、Neut、RDW-SD、RDW-CV、FIB、CRP、LVDd、E/A、LVMI、LVH占比、LVFS降低占比、LVDD占比高于低CAR组,LVEF、LVFS则低于低CAR组,差异有统计学意义(P<0.05),相关性分析显示:CAR与MHD患者微炎症状态标志物CRP(r=0.986,P<0.001)呈正相关。另外CAR还与PLT、Neut、RDW-SD、RDW-CV、CRP、TG、FIB、IVST、LVDd、E/A、LVMI呈正相关,与LVEF、LVFS呈负相关。 ***患者高RDW-SD组和低RDW-SD组间资料比较:高RDW-SD组的RDW-CV、CRP、CAR、IVST、LVDd、E/A、LVMI、LVH占比、LVEF降低占比、LVFS降低占比、LVDD占比高于低RDW-SD组,高血压占比、Lym、P、LVEF、LVFS则低于低RDW-SD组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示:RDW-SD与MHD患者微炎症状态标志物CRP(r=0.319,P=0.029)呈正相关。另外,RDW-SD还与CAR、RDW-CV、IVST、LVDd、E/A、LVMI呈正相关,与HB、Lym、LVEF、LVFS呈负相关。 ***患者不同E/A水平的资料比较:E/A≥2组的RDW-SD、CRP、CAR、LVMI比E/A≤0.8组和0.8

关键词： 急性冠脉综合征   全身炎症反应指数   C2HEST   新发心房颤动  

摘要： 研究目的: 探讨全身炎症反应指数(中性粒细胞计数×单核细胞计数/淋巴细胞计数,SIRI)联合C2HEST评分对急性冠脉综合征(ACS)患者院内出现新发房颤(NOAF)的预测价值。 研究方法: 选取2023年1月至2023年10月于吉林大学第二医院心血管内科住院治疗,明确诊断为ACS的患者341例,根据是否出现新发房颤(NOAF)分为NOAF组40例和非NOAF组301例,收集两组患者的一般资料、合并疾病、实验室检查及影像学检查结果,并统计心房颤动治疗情况。对上述临床资料对比分析,应用Logistic回归分析影响ACS患者院内出现NOAF的危险因素,绘制ROC曲线评估C2HEST评分、SIRI及二者联合对ACS患者院内出现NOAF的预测价值,统计软件采用SPSS 26.0。 研究结果: 1.一般资料:NOAF组患者年龄高于非NOAF组,有统计学差异(P<0.05)。两组患者在性别、BMI、静息心率、入院时收缩压、入院时舒张压方面比较无统计学差异(P>0.05)。 2.合并疾病:NOAF组患者心力衰竭、慢性阻塞性肺疾病、C2HEST评分高于非NOAF组,有统计学差异(P<0.05)。两组患者在高血压病、糖尿病、甲状腺功能亢进方面比较无统计学差异(P>0.05)。 3.实验室检查结果:NOAF组患者NT-pro BNP、hs-ctni、MYO、WBC、N、SIRI、Cr、ALT及AST均高于非NOAF组,L低于非NOAF组患者,有统计学差异(P<0.05)。而两组在M、Hb、CRP、UA、K、e GFR、FBG、ALb、TG、TC、HDL-C、LDL-C、Hcy方面比较无统计学差异(P>0.05)。 4.影像学检查结果:NOAF组患者左心房内径高于非NOAF组,LVEF低于非NOAF组,有统计学差异(P<0.05)。而两组在病变血管方面比较无统计学差异(P>0.05)。 5.单因素Logistic回归分析结果显示年龄、C2HEST评分、NT-pro BNP、hs-ctni、MYO、WBC、L、SIRI、ALT、AST、LVEF及左心房内径与ACS患者NOAF相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示C2HEST评分、SIRI及左心房内径是ACS患者院内出现NOAF的危险因素(P<0.05)。 ***曲线分析表明,C2HEST预测ACS患者出现NOAF的截断值为2.5(即≥3),曲线下面积为0.745,敏感度为62.5%,特异度为84.7%;SIRI预测ACS患者出现NOAF的截断值为2.776,曲线下面积为0.764,敏感度为60.0%,特异度为84.1%;SIRI及C2HEST评分联合预测的曲线下面积为0.841,敏感度为75.0%,特异度为85.4%,二者联合预测的曲线下面积较单独预测最大。 研究结论: ***患者院内NOAF的发生率为11.7%,不同ACS亚型患者之间NOAF的发生率未见明显差异。 ***、C2HEST评分及左心房内径为ACS患者院内NOAF的危险因素。 ***及C2HEST评分联合预测ACS患者院内NOAF的发生优于单一指标,能够帮助临床医师发现NOAF高危患者,对预防NOAF提供重要参考。

关键词： 缺血性脑卒中   肉苁蓉苯乙醇苷   血脑屏障   小胶质细胞   神经炎症  

摘要： 目的:基于网络药理学技术筛选肉苁蓉抗脑血管疾病的潜在作用靶点;探究肉苁蓉苯乙醇苷改善缺血性脑卒中的药效作用;基于转录组学和分子对接技术研究肉苁蓉苯乙醇苷对缺血再灌注损伤大鼠差异基因表达的影响;基于特异性基因敲除/敲入技术考察肉苁蓉苯乙醇苷对小胶质细胞介导神经炎症的影响;揭示肉苁蓉苯乙醇苷改善缺血性脑卒中后血脑屏障损伤的潜在作用机制。方法:体内采用大鼠大脑中动脉阻闭(MCAO)模型,体外采用BV2小胶质细胞糖氧剥夺(OGD)模型,验证肉苁蓉苯乙醇苷的脑保护作用。(1)采用网络药理学技术预测可能作用的靶点和通路以寻找肉苁蓉的潜在作用机制。(2)观察各组大鼠的行为活动表现、体毛光泽及精神状态等一般情况,每天监测大鼠体重的动态变化。(3)采用Zea Longa单盲法评估神经功能学评分,Eliot干湿重法计算脑组织含水量,TTC染色检测各组大鼠的脑梗死面积。(4)采用H&E染色观察各组大鼠大脑组织结构的变化,Nissl染色检测大鼠尼氏小体改变情况,TUNEL染色观察缺血半暗带神经元死亡。(5)采用Western blot和免疫荧光技术检测各组大鼠脑组织ZO-1,Occludin、MMP-9蛋白的表达水平,检测各组大鼠脑组织中TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10、TGF-β、BDNF的表达含量。(6)采用Western blot和免疫荧光技术检测肉苁蓉苯乙醇苷对小胶质细胞M1-M2极化的影响。(7)采用RNA-seq测序技术考察肉苁蓉苯乙醇苷对大鼠缺血/再灌注损伤的影响。(8)采用免疫共沉淀技术考察肉苁蓉苯乙醇苷对HMGB1赖氨酸乙酰化的影响。(9)采用Western blot和免疫荧光技术检测肉苁蓉苯乙醇苷对HMGB1细胞核/质转移的影响。(10)采用Western blot和免疫荧光技术检测肉苁蓉苯乙醇苷对小胶质细胞HMGB1/TLR4/NLRP3信号通路蛋白表达的影响。(11)采用ELISA法检测小胶质细胞上清液中IL-1β和IL-18的表达含量。(12)采用HMGB1特异性激动剂/抑制剂验证小胶质细胞介导神经炎症在肉苁蓉苯乙醇苷改善缺血性脑卒中血脑屏障损伤中的作用。结果:(1)肉苁蓉与脑血管疾病筛选得到85个共同靶点,对85个共同靶点进行富集分析发现炎症相关信号通路与脑血管疾病具有密切关系。(2)与模型对照组大鼠相比,肉苁蓉苯乙醇苷显著改善大鼠神经功能评分、减少脑梗死面积、减轻脑水肿。(3)与模型对照组大鼠相比,肉苁蓉苯乙醇苷显著抑制缺血半暗带组织神经细胞死亡。(4)肉苁蓉苯乙醇苷处理抑制了MCAO大鼠脑组织Iba-1的表达,促进了小胶质细胞M1-M2极化过程,显著降低了促炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β的表达,同时增加了抗炎症因子IL-10、TGF-β、BDNF的表达含量。(5)肉苁蓉苯乙醇苷干预增加了MCAO大鼠血脑屏障结构和紧密连接蛋白(ZO-1、Occludin)的表达水平,同时降低了MMP-9的含量。(6)RNA-seq分析结果显示,肉苁蓉苯乙醇苷治疗与56个关键基因的表达变化有关,其对炎症相关脑缺血损伤的治疗作用主要与NOD样受体信号通路有关。(7)分子对接结果显示,HMGB1、TLR4和NLRP3可能是肉苁蓉苯乙醇苷能够治疗缺血性脑卒中相关损伤的主要靶点。(8)免疫共沉淀结果显示,肉苁蓉苯乙醇苷显著抑制了BV2细胞中HMGB1赖氨酸乙酰化水平。(9)肉苁蓉苯乙醇苷处理不仅降低了BV2细胞中HMGB1的总蛋白表达,而且抑制了HMGB1的易位和释放。(10)肉苁蓉苯乙醇苷降低了体内和体外模型中HMGB1、TLR4、My D88、p-P65和NLRP3的蛋白表达水平,强调了通过调节HMGB1/TLR4/NLRP3信号轴发挥作用的能力。(11)观察到肉苁蓉苯乙醇苷影响小胶质细胞的炎症和焦亡反应,抑制焦亡相关蛋白(Caspase-1和GSDMD)和炎症相关蛋白(IL-1β和IL-18)的表达水平,可能在介导肉苁蓉苯乙醇苷改善缺血性脑卒中血脑屏障损伤中扮演关键作用。(12)联合特异性激动剂/抑制剂后,进一步明确了肉苁蓉苯乙醇苷可通过HMGB1促进小胶质细胞极化介导神经炎症的能力。结论:本研究的结果表明小胶质细胞介导神经炎症参与了缺血性脑卒中的发生发展,肉苁蓉苯乙醇苷能通过HMGB1/TLR4/NLRP3信号通路调节神经炎症因子的表达,促进小胶质细胞极化过程,重塑血脑屏障的结构和功能,抑制因调节HMGB1赖氨酸乙酰化引起的炎症、焦亡等不良效应。有效的改善了缺血性脑卒中诱发的血脑屏障损伤。为肉苁蓉的临床评价和新药开发提供了新的实验依据和研究思路。