关键词： 全身炎症反应综合征   急性发热   儿童   危险因素   中医证候  

摘要： 目的:探索全身炎症反应综合征在小儿急性发热中的危险因素并讨论其中医证候特点,以期为疾病早期识别、预测轻重、未病预防、已病防变提供思路。 方法:收集2021年11月至2024年1月在山东中医药大学附属医院住院的全身炎症反应综合征急性发热患儿,设计儿童病例信息收集表以进行信息采集。依据是否病情相对较重分为B组和A组,选择合适的统计学方法进行单因素分析,将有统计学意义的分析因素纳入危险因素Logistic回归分析;并对中医证候项目进行统计学分析,比较各证型间证候、疾病谱、实验室检查、病程的差异,分析全身炎症反应综合征在小儿急性发热中的中医证候特点。 结果: 研究一:危险因素研究共纳入149例患儿,其中A组95例,B组54例。1.单因素分析显示,两组的性别、年龄、身高、体重、身体质量指数、发病季节、出生情况、出生方式、喂养方式、热峰、发热程度、白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值、单核细胞计数、红细胞计数、血红蛋白、血小板、乳酸脱氢酶的差异均无统计学意义(P>0.05)。B组的超敏C反应蛋白、降钙素原、D二聚体、血沉指标均高于A组,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05)。B组的纤维蛋白原低于A组,两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。B组的合并感染病原体种类数多于A组,且差异显著(P<0.05)。2.通过危险因素分析可知,合并感染病原体种类数(P<0.05,OR=1.929,95%CI=1.137～3.270)、降钙素原(P<0.05,OR=2.207,95%CI=1.161～4.198)和血沉(P<0.05,OR=1.041,95%CI=1.012～1.071)是全身炎症反应综合征急性发热患儿病情较重、感染部位较深的独立危险因素。 研究二:1.中医证型分布:中医证候特点研究共纳入151例患儿,风热证79例(53.0%)>热毒袭肺证46例(30.9%)>表寒里热证15例(10.1%)>风寒证4例(2.7%)>暑湿发热证3例(2.0%)>阳明实热证2例(1.3%)=高热夹惊证2例(1.3%)>热陷心包证0例(0.0%)。2.中医证候比较:对组间差异有统计学意义的症状、体征进行多重比较,风热证和热毒袭肺证的有无咳嗽、有无咯痰、有无咽部不适和咳嗽频率的症状差异有统计学意义(P<0.05),表寒里热证和热毒袭肺证的有无咳嗽症状的差异有统计学意义(P<0.05),风热证和表寒里热证的有无流涕症状的差异有统计学意义(P<0.05);各证型饮食、睡眠、大小便的差异均无统计学意义(P>0.05)。3.对各中医证型的疾病谱进行比较,差异具有统计学意义(P<0.05),风热证和热毒袭肺证的疾病谱分布差异有统计学意义。4.对三个证型的各项实验室检查指标进行分析比较,风热证和热毒袭肺证的血沉差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:1.合并感染病原体种类数、降钙素原和血沉是全身炎症反应综合征急性发热患儿病情较重、感染部位较深的独立危险因素。2.全身炎症反应综合征急性发热患儿的中医证型分布以风热证和热毒袭肺证占比最高,两组的咳嗽频率差异显著,热毒袭肺证咳嗽更频繁;风热证和热毒袭肺证的疾病谱分布有显著差异,风热证中急性上呼吸道感染、扁桃体炎、支气管炎、肺炎均可以见到,且分布较平均,而热毒袭肺证中,肺炎占比颇高。3.热毒袭肺证较风热证血沉更高,血沉是全身炎症反应综合征急性发热患儿证型分类的相关因素。

关键词： ADAM8   Fra-1   脊髓损伤   小胶质细胞   神经炎症  

摘要： 研究背景:脊髓损伤(Spinal Cord Injury,SCI)是一种会导致运动、感觉和自主神经功能障碍,严重影响患者生活质量的神经系统破坏性疾病。随着我国城市化和交通化的普及,每年SCI发病率呈现上升趋势。SCI后,小胶质细胞激活诱导的神经炎症在病情加重方面发挥极大作用,可导致继发性脊髓组织和功能的严重紊乱。SCI后小胶质细胞上的Toll样受体激活,引起下游核因子-κB(NF-κB)和丝裂原激活蛋白激酶(MAPKs)通路的磷酸化,造成小胶质细胞的炎症表型并释放促炎因子和趋化因子,进一步加剧继发性神经细胞的死亡;介导更多小胶质细胞向损伤中心迁移。因此,在继发性损伤过程中,及时地抑制小胶质细胞激活在SCI后持续性的破坏行为具有重要作用。MAPKs通路是促炎转录因子复合物AP-1的上游信号,主要由细胞外信号调节激酶(ERKs)、c-Jun氨基末端激酶(JNKs)和p38组成。MAPKs参与调控细胞的活动,它被认为是介导炎症启动和发展的关键调节器。但MAPKs在小胶质细胞中的具体作用机制尚不清楚。FOS相关抗原1(Fra-1)属于FOS家族成员之一,与JUN以及其他家族转录因子组成AP-1。在炎症过程中MAPKs的激活可以刺激Fra-1的转录增加,增强Fra-1与DNA的连接强度,使得Fra-1的促炎效应进一步加强。目前,Fra-1是否可以调节小胶质激活后的神经炎症机制尚未报道。解整合素和金属蛋白酶结构域8(ADAM8)是膜锚定蛋白,具有促炎促进肿瘤侵袭的功能,包括作用于细胞表面分子以及细胞内信号的传导。ADAM8蛋白由七个部分组成,其中细胞质尾部在细胞内参与信号转导的调节。ADAM8在众多炎症性疾病中发挥重要作用,但ADAM8是否参与调节SCI后小胶质细胞的神经炎症尚不清楚。 目的:探究小胶质细胞体外炎症模型中ADAM8对炎症发生的调节作用和具体分子机制。 方法:1.原代小胶质细胞的分离和培养:用新生3日龄C57BL/6小鼠大脑皮层提取原代小胶质细胞,为了刺激神经炎症,用小鼠HMGB1蛋白处理特定时间。2.慢病毒(LV)和质粒转染:使用装载ADAM8 shRNA的慢病毒转染小胶质细胞ADAM8mRNA干扰(ADAM8i)。将HEK293T细胞转染Flag-ADAM8质粒与含有His-Fra-1的质粒共转染,收获细胞进行免疫共沉淀(Co-IP)测定。***-IP检测:检测ADAM8、ERK1/2、p-Fra-1、JNK1/2、P38之间的相互作用。用p-Fra-1做为IP,检测ADAM8具体哪个结构域在细胞内发挥信号传导作用。4.实时定量逆转录PCR(qRT-PCR):检测ADAM8和Map3k4的mRNA水平。5.蛋白质印迹(WB):检测ADAM8、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)和p-Fra-1的表达水平。检测MAPKs信号蛋白(包括ERK1/2、JNK1/2和p38)的表达与磷酸水平。6.染色质免疫沉淀测序(ChIP-Seq):用于检测受Fra-1调控的基因表达情况。***测定:用于小胶质细胞的迁移情况。8.细胞增殖试验:用于检测小胶质细胞的增殖情况。9.免疫荧光(IF)染色:用于检测iNOS、COX-2、ADAM8、Fra-1的蛋白表达情况。10.酶联免疫吸附测定:检测细胞内及细胞上清液中IL-1β和TNF-α的表达情况。 结果:***8在HMGB1介导的小胶质细胞炎症在中水平升高。使用体外HMGB1处理的小胶质细胞神经炎症,发现ADAM8的蛋白质水平在处理后9小时达到峰值。因此,选择HMGB1的处理9h来研究ADAM8在神经炎症期间在小胶质细胞中的作用。2.慢病毒搭载的shRNAs对ADAM8表达的敲降。使用shRNA抑制ADAM8的表达,表明三种shRNA对ADAM8的抑制显着抑制了ADAM8的蛋白质水平。3.敲降ADAM8后可以减少小胶质细胞的炎症、迁移和增殖。使用HMGB1处理导致iNOS和COX-2的蛋白增加,在ADAM8敲低小胶质细胞中的表达被抑制。ELISA结果显示,敲低ADAM8可显著降低炎症性小胶质细胞中IL-1β和TNF-α的表达水平;Transwell测定法结果表明ADAM8敲低时小胶质细胞的迁移被抑制;ADAM8被抑制时,EdU阳性小胶质细胞受到影响。通过IF染色,显示ADAM8敲低时小胶质细胞中iNOS和COX-2恢复到NC组的水平。***8可促进MAPKs/Fra-1信号的表达。WB显示MAPKs信号蛋白,敲低ADAM8蛋白质水平被抑制。IP结果表明,ADAM8通过直接相互作用调节ERK1/2和Fra-1。IF染色还显示敲低ADAM8减少了Fra-1与ADAM8的共定位。IP测定结果显示,表明ADAM8通过其701-826aa与Fra

关键词： 二甲双胍   扁平苔藓   角质形成细胞   NLRP3炎症小体   IL-1β  

摘要： 目的:明确NLRP3炎症小体是否参与了扁平苔藓（Lichen Planus,LP）的发生发展;探讨NLRP3炎症小体调控角质形成细胞凋亡的分子机制;研究二甲双胍（Metformin,Met）是否通过调控角质形成细胞（HaCaT）的炎症反应,从而对扁平苔藓发生发展产生抑制作用。 方法:临床实验分为3组:LP皮损组（40例）、LP皮损周边组（40例）和正常组（40例）。选取时间范围为2022年1月至2022年12月,于河北工程大学附属医院就诊的扁平苔藓患者皮肤组织,以及整形外科术后剩余正常皮肤组织为标本开展研究。采用免疫组织化学染色的方法检测NLRP3炎症小体在LP皮损中的表达情况。 细胞实验通过脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）+三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）及过氧化氢（H2O2）诱导了2个HaCaT细胞NLRP3炎症小体活化模型,根据给予的不同处理分为6组:正常对照组、LPS+ATP组、LPS+ATP+Met组、H2O2组、H2O2+Met组、Met组。分别采用CCK8法、DAPI染色法和流式细胞Annexin V-PI染色法检测各组细胞增殖与凋亡的情况;采用蛋白免疫印迹法（Western Blot）和实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,q PCR）法检测6组角质形成细胞NLRP3、Caspase-1和IL-1β的蛋白及m RNA表达水平。 结果:（1）NLRP3、IL-1β主要在LP皮损组的基底层角质形成细胞胞浆中呈阳性表达,而Caspase-1除了在基底层角质形成细胞胞浆中表达外,同时在LP皮损组表皮全层的角质形成细胞胞浆中也均有表达,且基底层表达呈强阳性,在正常人皮肤及扁平苔藓患者皮损周边皮肤组织中NLRP3、IL-1β和Caspase-1表达量较低。除此之外,在LP皮损组真皮浅层淋巴细胞胞浆中NLRP3、IL-1β和Caspase-1均有阳性表达,而LP皮损周边组及正常对照组真皮浅层淋巴细胞数量较少且NLRP3、IL-1β和Caspase-1的表达量极低。 （2）在体外实验中:与对照组相比LPS+ATP组及H2O2组HaCaT细胞增殖率降低,凋亡率升高,而LPS+ATP+Met组和H2O2+Met组HaCaT细胞增殖率升高、凋亡率下降;与对照组相比LPS+ATP组和H2O2组中NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白及m RNA表达水平均有升高趋势,而LPS+ATP+Met组和H2O2+Met组与对应的LPS+ATP组和H2O2组相比,以上蛋白及m RNA表达均有下降趋势。 结论:（1）NLRP3炎症小体可能参与了LP的发病。 （2）激活NLRP3炎症小体,可促进Caspase-1及IL-1β的产生及释放,诱导HaCaT细胞凋亡。 （3）二甲双胍通过抑制HaCaT细胞NLRP3炎症小体通路的激活,减轻炎症反应,有望成为治疗LP的潜在药物。

关键词： 大黄糖络丸   糖尿病大血管病变   炎症及氧化损伤   NLRP3/Caspasse-1/GSDMD通路   Nrf2/HO-1/GCLC通路  

摘要： 目的: 本研究在大黄糖络丸(Rhubarb Tangluo Pills,RTP)有效治疗糖尿病的临床基础上,进一步明确大黄糖络丸对糖尿病大鼠大血管炎症和氧化损伤的干预作用及机制。 方法: 将90只造模成功的SPF级ZDF(纯合子fa/fa)大鼠随机分为MC组、PC组(二甲双胍,0.18g/Kg)和H-RTP(2.16g/kg)、M-RTP(1.08g/kg)、L-RTP(0.54g/kg)组,另选15只ZDF(杂合子fa/+)大鼠作为NC组,干预12周后测定大鼠体质量和空腹血糖。观察大鼠一般生存状态;采用全自动生化分析仪检测血浆中TC、TG、LDLc、HDL-c的含量;采用HE染色法观察大鼠胸主动脉组织病理形态;采用ELISA法检测血清中IL-1β和IL-18的含量;采用生化试剂盒检测血清中SOD、MDA、GSH-Px、NADPH的含量;采用免疫荧光技术检测胸主动脉组织中ROS及4-HNE表达;采用WB与qPCR法检测胸主动脉组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1 mRNA和蛋白表达水平。 结果: (1)大黄糖络丸对糖尿病大鼠一般状态影响:NC组大鼠具有较为良好的精神状态、反应迅捷,皮毛色泽黑亮柔顺,而MC组大鼠明显出现表现精神萎靡,皮毛失泽甚至大量脱毛、反应迟钝;大黄糖络丸及二甲双胍药物干预后大鼠一般生存状态具有明显改善。 (2)大黄糖络丸对糖尿病大鼠体质量与空腹血糖的影响:与NC组相比,MC组大鼠的体质量与空腹血糖显著升高(P<0.05);与MC组相比,PC及H-RTP、M-RTP组大鼠体质量及空腹血糖显著降低(P<0.05),L-RTP组大鼠体质量无显著差异,空腹血糖升高(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP、M-RTP组大鼠体质量及空腹血糖显著降低(P<0.05)。 (3)大黄糖络丸对各组大鼠血脂水平的影响:与NC组相比,MC组大鼠TC、TG、LDL-c含量均显著升高(P<0.05),HDL-c含量显著降低(P<0.05);与MC组相比,H-RTP、M-RTP组与PC组可显著降低TC、TG、LDL-c含量(P<0.05),升高HDL-c含量(P<0.05),L-RTP组可升高HDL-c含量(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP、M-RTP组大鼠TC、TG、LDL-c含量显著降低(P<0.05),H-RTP组大鼠HDL-c含量显著升高(P<0.05)。 (4)大黄糖络丸对各组大鼠胸主动脉组织病理学改变的影响:NC组大鼠胸主动脉内膜完整光滑,中层平滑肌细胞与弹性纤维排列整齐层次清晰,未见明显泡沫细胞,血管壁无增厚。与NC组相比,MC组大鼠胸主动脉内膜粗糙,中膜平滑肌细胞增值排列紊乱,弹性纤维层次不清、明显分叉,部分断裂,细胞间间院增大,可见部分细胞肿胀,空泡性变,血管壁显著增厚(P<0.05)。H-RTP、M-RTP、L-RTP组与PC组胸主动脉中膜平滑肌细胞排列紊乱,空泡性变,弹性纤维部分分叉,L-RTP组中膜弹性纤维断裂,各组血管壁厚度与MC组相比降低(P<0.05)。与L-RTP组相比,H-RTP组胸主动脉血管壁厚度降低(P<0.05)。 (5)大黄糖络丸对糖尿病大鼠胸主动脉炎症损伤的影响:与NC组相比,MC组大鼠血清中炎症因子IL-1β、IL-18的含量均显著升高(P<0.05),大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著上调(P<0.05);同时,与MC组比较,H-RTP、M-RTP、L-RTP组及PC组大鼠血清中IL-1β、IL-18的含量均显著下降(P<0.05),H-RTP、M-RTP组及PC组大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著下调(P<0.05);与L-RTP组相比,HRTP、M-RTP组大鼠血清中IL-1β、IL-18的含量均显著下调(P<0.05),H-RTP、MRTP组大鼠胸主动脉NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD mRNA与蛋白表达均显著下调(P<0.05)。 (6)大黄糖络丸对糖尿病大鼠胸主动脉氧化损伤的影响:与NC组相比,MC组大鼠血清中SOD、GSH-Px的含量均显著降低(P<0.05),MDA、NADPH的含量显著升高(P<0.05),大鼠胸主动脉DHE、4-HNE荧光强度明显增强(P<0.05),Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1 mRNA与蛋白表达显著降低(P<0.05);与MC组比,各给药组大鼠血清中SOD、GSH-Px的含量均有不同程度升高(P<0.05),MDA、NADPH的含量均有不同程度降低,尤其H-RTP组降低最显著(P<0.05),各给药组大鼠胸主动脉DHE

关键词： 结肠腺瘤性息肉   血脂代谢异常   炎症状态  

摘要： 目的: 结肠腺瘤性息肉是一种常见的消化系统疾病,是结肠癌的一种癌前疾病。本研究探讨结肠腺瘤性息肉与血脂、炎症水平及肥胖之间的关系,并分析甘油三脂葡萄糖指数-腰高比(Ty G-WHt R)、全身免疫炎症指数(SII)与结肠腺瘤性息肉数目和大小的相关性,期望通过简单便捷的血液学指标协助结肠镜筛查,为预防结肠腺瘤性息肉的发生提供新思路。 方法: 回顾性分析于2020年1月至2022年12月在邯郸市中心医院消化内科行电子结肠镜检查的住院患者临床资料,其中符合研究要求的对象总计270例,分为腺瘤组(n=70)和对照组(n=200),对比两组患者的实验室检查是否存在统计学差异。根据息肉的数目、大小再次分组,分别对比炎症指标、血脂水平在腺瘤组组间是否有差异,最后通过回归行进一步的分析。 结果: 1.与对照组相比,腺瘤组腰围(Waist circumference,WC)、腰高比(Waist height ratio,WHt R)、体质指数(Body mass index,BMI)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.与对照组相比,腺瘤组白细胞计数(White blood cell count,WBC)、中性粒细胞计数(Neutrophil count,NE)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(Neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血小板计数(Platelet count,PLT)以及全身免疫炎症指数(Systemic immune-inflammation index,SII)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 3.与对照组相比,腺瘤组尿酸(Uric acid,UA)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、甘油三脂葡萄糖指数(Triglyceride glucose index,Ty G)、脂质蓄积指数(Lipid accumulation product,LAP)、甘油三脂葡萄糖指数-腰围(Triglyceride glucose index-waist circumference,Ty G-WC)、甘油三脂葡萄糖指数-腰高比(Triglyceride glucose index-waist height ratio,Ty G-WHt R)及甘油三脂葡萄糖指数-体质指数(Triglyceride glucose index-body mass index,Ty G-BMI)明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。 4.结肠腺瘤性息肉根据不同数目分为两组,与单发组相比,多发组WBC、淋巴细胞计数(Lymphocyte count,LY)、单核细胞计数(Monocyte count,MONO)、血小板/淋巴细胞比值(Platelet to lymphocyte ratio,PLR)、Ty G-WC以及Ty G-BMI明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 5.结肠腺瘤性息肉根据不同大小分为两组,淋巴细胞与单核细胞比值(Lymphocyte to monocyte ratio,LMR)在≤1cm组中明显升高,Ty G-WHt R在>1cm组中明显升高,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。 ***回归模型发现,Ty G-WHt R(OR=2.139)、SII(OR=1.002)、BMI(OR=1.118)是结肠腺瘤性息肉发生的独立危险因素。 结论: 1.血脂代谢异常、炎症状态与结肠腺瘤性息肉的发生具有相关性。 *** G-WHt R、SII及BMI是结肠腺瘤性息肉发生的独立危险因素。