关键词： 全身免疫炎症指数   血管内治疗   预后   列线图  

摘要： 目的:探究全身免疫炎症指数(Systemic Immune-inflammation Index,SII)与接受血管内治疗的急性前循环缺血性卒中患者出院90天预后的相关性及预测价值,并构建一个针对接受血管内治疗的急性前循环缺血性卒中患者预后的列线图模型。 方法:回顾性收集2018年1月至2023年10月符合标准的桂林医学院附属医院神经内科的急性前循环缺血性卒中血管内治疗患者作为研究对象,总共248例。收集患者的临床数据及入院24小时内的血液样本检测数据,依据中性粒细胞、血小板和淋巴细胞的计数来计算SII值。通过改良Rankin量表(modified Rankin Scale,m RS)评估患者出院90天的预后情况,其中m RS≤2分定义为预后良好组,m RS>2分则定义为预后不良组。根据约登指数确定SII在受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)的最佳截断值,依据此值将研究对象分为低SII组和高SII组。采用卡方检验对低SII组、高SII组与患者不良预后进行相关性分析。通过单变量和多变量Logistic回归分析及lasso回归分析筛选出关键预测变量。将患者随机分配成两个独立的数据集:训练集占总样本的75%(n=186),和验证集25%(n=62)。基于此数据建立了一个预测患者出院后90天预后不良结局的列线图,同时采用C指数和决策曲线分析法来评价模型的预测效能。p<0.05表示差异具有统计学意义。 结果:(1)研究纳入的248例患者中,90天预后不良的患者为149例,总发生率为60.08%。(2)根据约登指数得出SII在ROC曲线中的最佳截断值为1585.589,具有69.1%的灵敏度和60.6%的特异度(AUC=0.6743611,95%置信区间0.6076-0.7411)。(3)低SII组与高SII组在不良预后发生率的差异具有统计学显著性(p<0.01),表明高SII水平对患者预后有影响。(4)单因素及多因素logistic回归分析出性别(OR=0.461,95%置信区间CI0.219-0.971,p<0.05)?SII(OR=3.062,95%置信区间CI 1.731-5.416,p<0.001)以及入院时NIHSS评分(OR=1.176,95%置信区间CI 1.083-1.277,p<0.001)为独立预测因子。(5)选取了入院时NIHSS评分、SII、性别、年龄这四个变量构建列线图,建立的Logistic回归模型的训练集C指数为0.752(95%CI:0.681-0.824),验证集C指数为0.712(95%CI:0.579-0.844)。(6)校准曲线及DCA决策曲线评估列线图模型具有一定的预测价值。 结论:(1)高SII水平与接受EVT的急性前循环缺血性卒中患者90天预后显著相关,并可作为预后不良的独立预测因素。(2)构建的列线图模型可为急性前循环缺血性卒中血管内治疗患者有效控制这些危险因素提供风险评估。

关键词： 人参皂苷Rd   LPS   白细胞介素6   认知障碍   线粒体   C57BL/6J小鼠  

摘要： 全身炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS)是指在发生创伤、感染、休克等急性危重病时,发生的机体失控和自身破坏的全身性炎症反应。全身炎症的继续发展会导致败血症、低血容量性休克等疾病,进而出现多器官功能障碍,甚至死亡。在全身炎症发展过程中,由于外周促炎因子释放增加和/或血脑屏障(Blood-brain barrier,BBB)的破坏,机体外周的促炎因子和毒性物质进入中枢神经系统(Central nervous system,CNS),引起神经炎症,进而导致认知障碍等严重后果。目前治疗全身炎症的药物主要有糖皮质激素和抗生素等,然而长期使用糖皮质激素会引起严重的毒副作用,如股骨头坏死、消化性溃疡和库欣综合征等。因此,寻找出毒副作用低,抗炎效果好的药物具有重要的临床意义。 人参皂苷Rd(Ginsenoside Rd,G-Rd)属于原人参二醇型皂苷(PPD型皂苷),具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗衰老、神经保护及心血管保护等多种药理作用。本课题组前期研究发现,G-Rd可以通过抑制c GAS/STING/NLRP3炎性小体信号通路的激活缓解小鼠的免疫性肝炎,通过抑制TLR4/NF-κB信号通路激活缓解脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导的急性肺损伤,但G-Rd是否能缓解LPS诱导全身炎症小鼠的认知障碍尚不清楚。 实验目的: 本研究旨在探讨G-Rd对LPS诱导小鼠全身炎症的影响以及全身炎症所致认知障碍的保护作用和机制。 实验方法: 1.G-Rd对LPS诱导小鼠全身炎症的影响 (1)G-Rd对LPS诱导全身炎症小鼠白细胞数的影响 32只C57BL/6J小鼠适应性喂养3天,根据体重随机分为4组:对照(Vehicle)组、模型(Model)组、人参皂苷Rd小剂量(G-Rd 10 mg/kg)组和人参皂苷Rd大剂量(G-Rd 20 mg/kg)组,每组8只。除Vehicle组外,各组小鼠均腹腔注射(i.p)LPS 3.5 mg/kg,连续3天;每天给予LPS后1 h,G-Rd各剂量组小鼠分别i.p给予相应药物,Vehicle组和Model组小鼠给予等体积的溶剂,连续给药3天。末次给予LPS后2、4、6、8、10、12和24 h,尾静脉取血检测小鼠的白细胞数。 (2)G-Rd对LPS诱导全身炎症小鼠外周血IL-6、IL-1β含量及肺、肝、肾、脑组织形态学的影响 32只C57BL/6J小鼠适应性喂养3天,分组给药方案同上。末次给予LPS后12 h,观察小鼠的一般状态,i.p 1%戊巴比妥钠溶液50 mg/kg麻醉小鼠,眶静脉取血,ELISA检测小鼠血清中IL-6及IL-1β含量;采集小鼠肺、肝、肾及脑组织,H&E染色,观察小鼠肺、肝、肾及脑组织病理形态学改变。 2.G-Rd对LPS诱导全身炎症小鼠认知障碍的保护作用 120只C57BL/6J小鼠适应性喂养3天,根据体重随机分为4组:Vehicle组、Model组、G-Rd 10 mg/kg组和G-Rd 20 mg/kg组,每组30只。除Vehicle组外,各组小鼠每天i.p LPS 3.5 mg/kg,连续3天;每天给予LPS后1 h,G-Rd各剂量组小鼠分别i.p给予相应药物,Vehicle组和Model组小鼠给予等体积的溶剂,连续给药7天。给G-Rd第5天药后1 h,每组取8只小鼠,进行旷场实验(Open Field Test,OFT),计算小鼠的活动指数、运动总距离和中心停留时间。给G-Rd第6天药后1 h,每组取旷场实验后的8只小鼠,进行Y迷宫(Y-Maze)实验,计算小鼠的自发交替率;每组另取8只小鼠,进行新物体识别实验(Novel Object Recognition,NOR),计算小鼠的识别指数。给G-Rd第7天药后1 h,i.p1%戊巴比妥钠溶液50 mg/kg麻醉小鼠,取脑组织,Nissl染色观察小鼠海马组织CA3区的神经元损伤,多重免疫荧光染色检测小鼠海马组织CA3区小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP的表达情况;取小鼠海马组织,QPCR检测IL-6及IL-1βm RNA表达水平,ELISA测定IL-6及IL-1β含量,流式细胞术检测线粒体膜电位和ROS水平,Western Blot检测TLR4、NF-κB p65、pNF-κB p65、My D88、NLRP3、ASC和pro-Caspase-1蛋白表达情况。 实验结果: 1.G-Rd对LPS诱导小鼠全身炎症的影响 (1)小鼠白细胞计数结果:与Vehicle组比较,Model组小鼠末次给予LPS后2 h白细胞数有增加趋势,但无统计学差异(P>0.05),4 h白细胞数明显增加(P<0.01),12 h白

关键词： 原发性肝癌   营养不良   恶液质   生活质量   全身炎症  

摘要： 目的:研究原发性肝癌患者营养状况及恶液质的发生情况,比较PG-SGA与mPG-SGA评估原发性肝癌患者营养不良的能力,探讨其发生恶液质的危险因素及潜在预测指标,了解营养状况及恶液质对患者生活质量的影响。 方法:纳入2022年4月至2023年9月于西南医科大学附属医院首次诊断为原发性肝癌的211例患者,采用PG-SGA和mPG-SGA评估患者营养状况,EORTC QLQ-C30量表评估患者生活质量。比较不同营养状况及恶液质患者的临床资料、血液指标、人体测量指标、体力状态及生活质量的差异。绘制受试者操作特征(ROC)曲线评价mPG-SGA评估营养不良的准确性,计算二次加权Kappa系数评价两量表评估营养不良的一致性。采用Logistic回归分析原发性肝癌患者发生恶液质的危险因素,绘制ROC曲线确定相关指标的最佳截断值,并判断其敏感度和特异度。 结果: 1、211例原发性肝癌患者中,男性171例(81.04%),女性40例(18.96%),年龄≥65 岁患者 61 例(28.91%)。 2、PG-SGA和mPG-SGA分别诊断出中、重度营养不良患者169例(80.09%)、163例(77.25%)。以PG-SGA为标准,对于营养良好/轻度营养不良、中度营养不良及重度营养不良三种不同营养状态,mPG-SGA均表现出较好的准确性,AUC值分别为0.982、0.933、0.966(P<0.001),并具有强一致性(Kappa=0.945,P<0.001)。通过性别、年龄、吸烟史、饮酒史、临床分期、BMI分组分析发现,BMI<18.5kg/m2患者中,mPG-SGA表现出较强一致性(Kappa=0.659,P=0.011),其余组别均表现出强一致性(Kappa＞0.9,P<0.001)。 3、89例(42.18%)患者在确诊时患有恶液质。FARI≥0.09(OR=2.43,95%CI:1.20～4.89)、BMI<22.64kg/m2(OR=0.10,95%CI:0.05～0.22)可独立预测恶液质的发生。ROC曲线分析显示FARI与BMI的最佳截断值分别为 0.08 和 22.62,AUC 值分别为 0.736(95%CI:0.668～0.803,P<0.001)、0.765(95%CI:0.698～0.831,P<0.001)。FARI和BMI联合预测原发性肝癌恶液质的 AUC 值为 0.822(95%CI:0.763～0.880,P<0.001),优于两者单独预测。 4、与非重度营养不良组比,重度营养不良组患者在生活质量评估中情绪功能、认知功能和总体健康状况的评分更低,在C30总分、疲惫、疼痛、失眠、食欲丧失和经济困难的评分更高(P<0.05)。与非恶液质组比,恶液质组患者在生活质量评估中认知功能评分更低,在C30总分、疲惫、失眠和经济困难的评分更高(P<0.05)。 结论: 1、原发性肝癌患者营养不良和恶液质的发生率高,且与较差的生活质量有关。 2、与PG-SGA相比,mPG-SGA具有良好的准确性及一致性,是一种更简便、适用于评估原发性肝癌患者营养不良的工具。 3、FARI与BMI均是原发性肝癌患者发生恶液质的独立危险因素,使用FARI-BMI评分可快速筛查恶液质患者。

关键词： 术后心律失常   全身免疫炎症指数   食管癌切除术   中性粒细胞与淋巴细胞比率   倾向评分匹配  

摘要： 背景: 全身炎症指数,包括中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)、血小板与淋巴细胞比值(platelet to lymphocyte ratio,PLR)、淋巴细胞与单核细胞比值(lymphocyte to monocyte ratio,LMR)、衍生中性粒细胞与淋巴细胞比值(derived neutrophil to lymphocyte ratio,d NLR)和全身免疫炎症指数(systemic immune inflammation index,SII)已经被广泛用来预测各种炎症性疾病的严重程度,同时,也是预测预后的重要指标。本研究旨在探讨食管癌患者围手术期全身炎症指标与术后心律失常(postoperative arrhythmias,PA)之间的关系。 方法: 在研究中,我们收集了278例食管癌患者(non-PA=221例,PA=57例)的实验室相关参数。我们将两组手术方式(Ivor-Lewis术式和Mc Keown术式)进行了亚组分层,在两个亚组分层内分别进行了倾向性评分匹配(propensity score matching,PSM)。然后,我们将数据汇总。最后,我们建立了一个1:1(57:57)的对照模型。我们通过接收器操作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC曲线)分析,用食管癌切除术后第一天的炎症标志物来预测区分术后心律失常患者和术后非心律失常患者(postoperative non-arrhythmia,non-PA)。 结果: 在食管切除术后第一天,PA和non-PA在白细胞计数、中性粒细胞计数、中性粒细胞百分比、NLR、d NLR、LMR和SII方面存在较大差异。在进行倾向性评分匹配之后,以下变量在non-PA和PA之间存在显著性差异:中性粒细胞百分比、NLR、d NLR、LMR和SII。在ROC曲线分析中发现,白细胞、中性粒细胞、中性粒细胞百分比、NLR、d NLR、SII和LMR的曲线下面积(the area under the curve,AUC)均大于0.500,其中NLR和SII拥有最大的AUC值(AUC=0.661)。对上述指标进行二元逻辑回归分析,汇总的炎症指标提高了预测食管癌术后心律失常的能力(AUC=0.707,灵敏度=0.877)。 结论: 我们研究发现在食管癌切除术后第一天,全身炎症指标与食管癌术后心律失常有显著的相关性,并且,高全身免疫炎症指数(SII)和高中性粒细胞与淋巴细胞比率(NLR)是食管癌术后心律失常的可靠的炎症标记物。

关键词： 促炎细胞因子   tRNA组   单核细胞   鸭甲型肝炎病毒  

摘要： 鸭病毒性肝炎（Duck Viral Hepatitis,DVH）主要是由鸭甲型肝炎病毒（Duck Hepatitis A Virus,DHAV）感染引起以肝脏急性出血性损伤为特征的传染病,对养鸭业造成严重威胁。严重的病毒性肝炎与肝内过度激活的免疫反应相关,而后者与肝内大量免疫细胞浸润密切相关。这些免疫细胞与肝细胞互作调控病毒性肝炎发生的机制尚不清楚。针对这一科学问题,本研究以肝细胞中的促炎细胞因子转录与tRNA组重构为切入点,阐释了免疫细胞与肝细胞互作调控病毒感染肝细胞的炎症机制,进行了系列试验,获得如下主要研究结果: 1.鸭胚原代肝细胞的分离培养与鉴定 结合胶原酶消化法和机械分离,成功从鸭胚肝组织中分离得到肝细胞（Duck Primary Hepatocytes,DPHs）。DPHs在DMEM培养基中贴壁生长,形状呈多角型,为肝细胞典型形态;DPHs能特异性表达肝细胞核因子alpha（Hepatocyte Nuclear Factor 4 alpha,HNF4α）。油红O染色与白蛋白分泌检测结果显示,DPHs胞质富含脂滴且具有分泌白蛋白的功能。上述结果说明体外培养的DPHs具有典型的肝细胞形态与功能。 ***感染DPHs对炎症细胞因子转录的影响 DHAV感染DPHs后,炎症细胞因子定量结果显示,与未感染组相比,DHAV感染48 hpi内,DPHs中促炎症细胞因子IL-6和TNF-α的转录持续上调（2～6倍）,抑炎细胞因子IL-10先上调后下调（2～10倍）。在DHAV临床感染的雏鸭中,肝细胞损伤严重。进一步比较分析了DHAV分别感染鸭胚肝细胞、成纤维细胞和肠上皮细胞后IL-1β、IL-6和TNF-α三种促炎细胞因子的转录水平,发现肝细胞中的促炎细胞因子转录水平最低。 3.共培养PBMCs促进DHAV感染DPHs中的促炎细胞因子转录及成熟tRNA组的重构 将PBMCs与DHAV感染的DPHs共培养24 h后,与未感染组相比,PBMCs共培养显著上调共培养体系中（主要是肝细胞）促炎细胞因子的转录,其中IL-1β的上调约130倍。与此同时,共培养体系中的成熟tRNA组也被重构。通过改变共培养系统中的PBMCs数量和DHAV感染量,发现促炎细胞因子转录和成熟tRNA组的重构与PBMCs的数量、DHAV感染量密切相关。12 h到48 h动态分析表明,PBMCs共培养24 h后可显著影响共培养体系中的促炎细胞因子的转录及成熟tRNA组的重构。 4.单核细胞群是PBMCs中调控促炎细胞因子转录与成熟tRNA组重构的主效细胞群 与PBMCs和DPHs的直接作用相比,利用DPHs-PBMCs（Transwell）系统,发现它们的间接共培养削弱了DPHs中的促炎细胞因子转录,并且对DPHs中tRNA组的重构较弱。PBMCs中CD4+T或CD8+T细胞被封闭后,与未封闭组相比,共培养体系中的促炎细胞因子转录不受影响,同时进一步下调了tRNA组;然而单核细胞与肝细胞共培养后,单核细胞在促炎细胞因子的转录和tRNA组的重构上表现出与PBMCs一致的效应。因此,PBMCs中的单核细胞群是调控促炎细胞因子转录与成熟tRNA组重构的主效细胞群。 5.单核细胞协调IL-1β转录、tRNA组重构以调控DHAV感染DPHs中的IL-1β蛋白合成 动态分析单核细胞对DHAV感染DPHs中IL-1β转录、tRNA组重构及IL-1β蛋白合成的影响,发现单核细胞持续促进IL-1β的转录上调,但随共培养时间的延长,IL-1β的转录水平逐渐降低;相较于DHAV感染组,单核细胞仅在共培养24 h显著重构tRNA组;在共培养48h后,DHAV感染组和单核细胞共培养组中DPHs的tRNA组水平均低于空白对照组。共培养24 h后,与DHAV感染组相比,单核细胞显著促进IL-1β的蛋白合成（2.3倍）,随着共培养时间延长至48h,对IL-1β蛋白合成的促进效应减弱（1.2倍）。 6.阻断IL-1β分泌蛋白可有效抑制其下游信号分子的转录表达 抗体阻断单核细胞和DPHs共培养上清中的IL-1β蛋白24 h后,DPHs中的IL-1β、IFN-α、IFN-β和NF-κB的转录表达均被显著抑制,而其他炎症细胞因子包括IL-6、IL-8、IL-18和TNF-α的转录表达无明显影响。 综上,单核细胞通过协调促炎细胞因子转录与重构tRNA组的方式促进了DHAV感染肝细胞中的炎症反应。