关键词： 动态变化   炎症   预后   人乳头瘤病毒   口咽癌  

摘要： 背景:本研究旨在分析口咽癌患者动态全身免疫炎症指数(SII)、人乳头瘤病毒(HPV)感染与预后的关系。 方法:回顾性分析131例接受根治性治疗的患者,根据首次治疗前后约9个月的结果计算SII值。根据动态SII和HPV感染情况将整个队列分组,并比较其预后。 结果:不利组,特别是持续高SII组预后较差,静态SII水平不能完全反映口咽癌患者的预后。在HPV-亚组患者中,不利的动态SII和肿瘤位于舌根的位置都与无病生存率的降低显著相关。相比之下,动态SII不能被认为是HPV+患者无病生存率或总生存率的不良预后因素。 结论:动态SII值是口咽癌患者,尤其是HPV-患者较为全面的预后指标。这可能意味着经历不利的SII动态变化的HPV-口咽癌患者应该接受更频繁的检查或更积极的治疗。

关键词： 锚基蛋白重复序列和SOCS盒蛋白3   A型流感病毒   肠道炎症   肠道菌群   肿瘤坏死因子受体相关因子6   线粒体抗病毒信号蛋白  

摘要： 抗病毒免疫和炎症反应是动物维护机体健康和防御外来侵害的基本生理过程。这些过程需要精准的分子调控来确保适当的反应,以防止过度或不足的免疫活化,从而避免感染或非感染性疾病带来额外的损伤。E3泛素连接酶ASB3(Ankyrin repeat and SOCS box containing 3)是ASB蛋白家族的成员,其涉及诸多细胞信号传导事件,包括通过泛素-蛋白酶体系统介导的蛋白质降解。近年来,大量研究逐渐揭示了泛素化在调节宿主免疫应答中的关键作用,特别是通过控制信号转导分子的降解与稳态来发挥其调控功能。然而到目前为止,关于ASB3蛋白在调节宿主抗病毒天然免疫和炎症反应方面的研究仍非常有限。 E3泛素连接酶ASB3在抗病毒免疫和炎症反应中的精准调控包括五个主要研究内容,鉴定ASB3在细胞中的表达和分布、确定ASB3对抗病毒因子或炎症因子产生的影响,界定ASB3在信号传导中所扮演的角色,揭示ASB3介导的蛋白泛素化和降解的分子机制以及评估针对或协同ASB3的潜在治疗策略。为了阐明该科学问题,本研究依靠多学科的方法,包括细胞生物学、分子生物学、免疫学、生物化学以及体内动物模型深入解析ASB3在流感病毒感染和肠道炎症反应过程中的具体作用和分子机制。 我们首先通过体外实验证实,A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)能够诱导ASB3在感染过程中表达。此外,我们发现过表达ASB3蛋白能够下调由病毒RNA介导的IFN-I相关基因转录水平、信号分子磷酸化和抗病毒因子分泌水平,证实ASB3对RIG-I-IFN-I信号轴的负调控作用。进一步通过体内和体外研究发现,ASB3的缺失可以恢复Se V和H9N2感染介导的IFN-β及其下游干扰素刺激基因(Interferon stimulated genes,ISGs)的转录水平。与体外实验一致的是,体内敲除ASB3的小鼠表现出对H9N2和H1N1易感性降低和肺脏损伤减小的现象。这些研究结果暗示了信号分子间级联反应的关联性。进一步通过免疫共沉淀技术明确了ASB3蛋白与线粒体抗病毒信号蛋白(Mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)之间的相互作用,并指出ASB3能够显著影响MAVS的稳定性。采用药物抑制实验揭示了ASB3介导的MAVS降解依赖于蛋白酶体途径。最后,结合免疫共沉淀、泛素化分析和定点突变策略,我们对ASB3蛋白抑制IFN-I信号传导途径的分子机理进行了精确阐释。我们的数据表明,ASB3蛋白强化了MAVS在第297位赖氨酸残基上的K48型泛素化修饰,这导致MAVS被拖入蛋白酶体进行降解,从而有效地阻断了抗病毒信号的下游传递,增强了病毒的复制。 E3泛素连接酶ASB3已在抗病毒免疫中展示负调控功能,其介导的蛋白翻译后修饰是否参与宿主炎症反应有待破解。本研究继续使用荧光定量PCR和蛋白免疫印迹等方法系统地检测了ASB3在右旋糖酐硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱导的实验性结肠炎模型和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)诱导的结肠类器官炎症模型中的表达,发现ASB3表达水平上调并与促炎因子产生呈正相关,说明ASB3在调控肠道炎症反应中同样发挥重要作用。继而通过诱导ASB3基因敲除小鼠实验性结肠炎模型,利用RNA-seq和流式细胞术等技术,我们研究了ASB3在肠道炎症中的功能。相比于野生型小鼠,ASB3敲除小鼠的结肠炎病程得到缓解,结肠组织炎症因子表达水平下调以及固有层中3型先天淋巴细胞(Innate lymphoid cells group 3,ILC3)分泌的IL-22增加。利用ASB3真核表达载体,我们评估了ASB3对炎症因子释放的影响。体外细胞实验显示,过表达ASB3可以显著增强炎症因子NF-κB活化。暗示ASB3可能在促炎信号转导中起到正调节作用。通过免疫共沉淀等技术,发现ASB3与肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)的C端结构域发生相互作用。泛素化分析和蛋白质稳定性测试结果表明,ASB3通过促进TRAF6 K48型多聚泛素化介导其被蛋白酶体途径降解。此外,TRAF6失稳和泛素化修饰依赖于ASB3 SOCS盒结构域。进一步研究发现,ASB3在肠上皮细胞主导促炎功能,通过靶向降解TRAF6,破坏了TRAF6对黏膜相关淋巴组织淋巴瘤转录因子1(Mucosa-associated lymphoid tissue lymphoma translocation protein 1,MALT1)的维稳功能并释放了MALT1蛋白水解酶活性,从而剪切NF-κB抑制因子A20蛋白(Tumor n

关键词： 全身炎症反应指数   红细胞分布宽度   白蛋白   重症急性胰腺炎  

摘要： 目的:探究生物标志物全身炎症反应指数（SIRI）与红细胞分布宽度（RDW）/白蛋白（ALB）比值对重症急性胰腺炎的预测价值。 方法:选取2020年11月至2023年11月入住西南医科大学附属医院消化内科且符合纳排标准的急性胰腺炎患者448人,根据2012亚特兰大分类标准分为非重症急性胰腺炎组（Non-SAP）(n=342),重症急性胰腺炎组（SAP）(n=106)。再根据病因分类进一步筛选出胆源性急性胰腺炎（BAP）(n=187)和高脂血症性急性胰腺炎（HLAP）(n=174),并分别依据其病情的严重程度分为重症和非重症组。基于电子病历系统收集所有患者的一般资料、实验室指标、影像学资料及BISAP评分。采用SPSS27.0软件对收集数据进行组间比较分析,sperman等级相关分析各指标分别与病情严重程度及评分间的相关性,使用多因素logistics回归分析得到发生SAP的独立影响因素。在此基础上建立SIRI、RDW/ALB的联合预测模型,制作受试者工作特征（ROC）曲线,计算AUC、敏感性、特异性及最佳截断值,探讨SIRI、RDW/ALB及联合预测模型评估SAP的价值,并进一步分析它们对BSAP及HLSAP的预测价值。以SIRI、RDW/ALB的最佳截断值为分界点将AP患者分为2组,比较分析2组患者临床特征的差异。 结果:1)共计纳入患者448人,Non-SAP组患者342例,SAP组患者106例。两组一般资料对比,SAP组患者的年龄、住院时间及入院时的心率明显高于非SAP组,以上差异具有统计学意义（P<0.05）,而两组患者的其他一般资料比较差异无意义。2)实验室指标上,SAP组的WBC、NEU、Mono、血糖、谷氨酰转移酶、SIRI、RDW/ALB较非SAP组明显升高,而Hct、Ca2+较非SAP组有所降低,以上差异均存在统计学意义（P<0.05）。3)多因素logistic回归分析得到WBC、SIRI、RDW/ALB是发生SAP的独立危险因素,Ca2+是独立保护因素。4)sperman等级相关分析得到SIRI、RDW/ALB分别与BISAP评分以及亚特兰大分级（RAC分级）呈正相关性。5)纳入SIRI、RDW/ALB建立联合预测模型,并绘制ROC曲线分析各指标预测SAP的能力,得到SIRI、RDW/ALB及联合预测模型的AUC分别为0.766、0.851、0.902,敏感性分别为67.0%、71.7%、90.6%,特异性为73.1%、85.4%、76.6%。6)以SIRI的最佳截断值5.191或RDW/ALB的最佳截断值0.331为界点,将所有患者分为两组,发现SIRI>5.191或RDW/ALB>0.331时患者出现住院时间延长、发生胸腔积液、局部并发症及器官功能损伤的风险明显升高。7)二元logistic分析得到SIRI、RDW/ALB是BSAP和HLSAP的危险因素,SIRI、RDW/ALB及两者联合预测胆源性SAP的AUC分别为0.773、0.871、0.940,最佳截断值下灵敏度分别为0.588、0.804、0.941,特异性为0.838、0.816、0.838。同时,SIRI、RDW/ALB及两者联合预测高脂血症性SAP的AUC分别为0.810、0.833、0.881,,灵敏度分别为0.810、0.833、0.881,特异性为0.598、0.742、0.795。 结论:***患者的SIRI、RDW/ALB水平与其病情严重程度之间呈正相关性;***、SIRI、RDW/ALB是发生SAP的独立危险因素,Ca2+是SAP的独立保护因素;***、RDW/ALB对SAP、BSAP、HLSAP均具有一定诊断价值,且二者联合预测模型的预测效能更佳;***>5.191或RDW/ALB>0.331是AP患者出现住院时间延长、发生并发症或器官功能损伤的高危因素

关键词： 急性胆源性胰腺炎   全身免疫炎症指数   动态变化   严重程度  

摘要： 背景 急性胰腺炎（acute pancreatitis,AP）是临床常见的急危重症之一。其发病率在全球范围内呈上升趋势,重症患者病死率较高。急性胆源性胰腺炎（acute biliary pancreatitis,ABP）是AP的首要病因,与胆道、胰腺的炎症关系更密切。近年来,多种基于血液检测的炎症免疫标记物被开发用于评估疾病,但关于评估ABP病情严重程度的炎症相关指数研究较少。有研究表明,全身免疫炎症指数（systemic immune inflammation index,SII）可以评估和预测AP患者的病情和死亡率。但SII是否可以用于评估ABP患者的病情程度目前较少有研究,并且SII的动态变化是否与ABP存在关联也不明确。 目的 本研究通过对比分析不同SII值ABP患者的临床资料,以及ABP患者不同时间点SII的变化轨迹,从而探讨SII及其动态变化与ABP患者病情严重程度及预后的相关性。方法 1.根据本研究的纳入和排除标准,回顾性分析2017年01月至2020年12月苏北人民医院连续收治的544例ABP患者的临床资料。 2.根据计算的入院24小时内的SII,按照三等分位数分为三组,即低SII组（SII≤1153.78）、中SII组（1153.782550.94）。分别比较三组ABP患者的一般资料、实验室指标和结局指标。 3.根据ABP患者的病情严重程度,分为轻症AP（mild AP,MAP）、中度重症AP（moderately severe AP,MSAP）、重症AP（severe AP,SAP）三组,分析三组的基线资料、实验室指标,并比较患者入院一周内4个时间点（0-1d、2-3d、4-5d、6-7d）的SII和其他炎症标志物的变化轨迹。 4.计算SII相关的动态变化指标,比较ABP患者MAP、MSAP、SAP三组间高SII组的比例、SII值、SII变化量、SII下降率和变化速率,探索SII的早期动态变化指标与ABP病情严重程度的关联。 5.应用Logistic回归分析ABP患者发生全身炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）、局部并发症和持续性器官衰竭（persistent organ failure,POF）的影响因素。 6.实验室指标及炎症标志物包括:白细胞（white blood cell,WBC）、中性粒细胞（neutrophil,NEU）、血小板（platelet,PLT）、淋巴细胞（lymphocyte,LYM）、单核细胞（monocyte,MONO）、C-反应蛋白（C-reactive protein,CRP）、降钙素原（procalcitonin,PCT）、红细胞比容（hematocrit,HCT）、总胆红素（total bilirubin,TB）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）、白蛋白（albumin,ALB）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）、γ-谷氨酰转肽酶（gamma glutamyl transferase,GGT）、血尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、肌酐（creatinine,CRE）、钙离子(Ca2+)、葡萄糖（glucose,GLU）、高密度脂蛋白（high density lipoprotein-C,HDL-C）、血淀粉酶（amylase,AMY）及血脂肪酶（lipase,LIP）、C-反应蛋白与白蛋白比值（C-reactive protein to albumin ratio,CAR）、全身炎症反应指数（system inflammation response index,SIRI）、中性粒细胞-淋巴细胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio,NLR）、炎症负荷指数（inflammatory burden index,IBI）、泛免疫炎症值（pan-immune-inflammation value,PIV）。 结果 1.本研究最终纳入544例ABP患者,分为低SII组182例、中SII组181例、高SII组181例,和分为MAP组274例、MSAP组241例、SAP组29例。 2.不同SII值ABP患者的临床资料对比:一般资料方面,三组的住院天数、住院费用、既往AP发作病史≥1次有统计学差异（P<0.05）。实验室资料方面,三组患者的WBC、NEU、LYM、MONO、PLT、HCT、TB、ALB、AST、ALT、LDH、GGT、GLU、BUN、Ca2+、AMY、LIP、CRP、PCT均有统计学

关键词： 大黄糖络丸   糖尿病大血管病   免疫炎症   PI3K-Akt/NF-κB信号通路  

摘要： 目的 探讨2型糖尿病模型大鼠大血管免疫炎症反应病变,并通过磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositide3-kinases,PI3K)-蛋白激酶B(Protein Kinase B,PKB/Akt)及其下游的信号分子核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路,进一步探讨大黄糖络丸(Rhubarb Tangluo pills,RTP)防治肥胖2型糖尿病大鼠大血管免疫炎症反应的可能机制。 方法 将15只体重为(190-230 g)的雄性Zucker糖尿病ZDF(fa/+)大鼠作为对照组;96只体重为(190-230 g)的雄性ZDF(fa/fa)大鼠给予高脂饲料诱导肥胖2型糖尿病大鼠模型,将成模的90只随机分为模型组、大黄糖络丸高、中、低剂量组、二甲双胍组,每组15只。大黄糖络丸高、中、低分别按2.16、1.08、0.54 g/kg剂量灌胃、二甲双胍组按0.18 g/kg灌胃,模型组及对照组自由饮水,灌胃体积均为10 m L/kg。每日观察每组大鼠毛发、精神活动状况、饮食饮水量、大小便情况,定期监测大鼠空腹血糖(FBG)及体质量变化。药物干预12周后,心脏取血并处死,分离血清检测高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血清果糖胺(GSP);酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中表面抗原分化簇4受体(CD4+T)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、单核细胞趋化蛋白(MCP-1)的表达情况;苏木素-伊红(HE)染色法观察腹主动脉组织病理形态改变;免疫组化sp法检测腹主动脉组织中PI3K、Akt、NF-κB、MCP-1蛋白的表达情况;实时荧光定量PCR法检测大鼠腹主动脉中PI3K、Akt、NF-κB m RNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Westernblot)观察腹主动脉组织中PI3K、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化IκB(p-IκB)、NF-κB蛋白表达情况。 结果 与对照组相比,模型组大鼠毛皮枯黄,少动,饮食饮水增加,小便增多,排泄物不成形色淡;FBG持续升高(P<0.01),体重亦显著升高(P<0.01),其血清中TC、TG、LDL-C、GSP均显著升高(P<0.01)、HDL-C水平降低(P<0.01)。模型组大鼠血清中炎症介质IL-6、TNF-α、CD4+T、hs-CRP、MCP-1水平显著升高(P<0.01)。大鼠腹主动脉组织血管壁层次不清,平滑肌细胞排列紊乱且纤维变性,可见淋巴细胞点状浸润,腹主动脉组织中PI3K、Akt、NF-κB、MCP-1蛋白平均光密度值、PI3K、Akt、NF-κB m RNA表达及PI3K、Akt、p-Akt、p-IκB、NF-κB蛋白含量表达显著上调(P<0.01);与模型组相比,大黄糖络丸各剂量组及二甲双胍组大鼠精神状态好转,活动度可,多饮多食多尿现象缓解;血糖从第8周开始显著降低(P<0.01);体重缓慢下降,较模型组有显著差异(P<0.05),其血清中TC、TG、LDL-C、GSP均显著下降(P<0.01,p<0.05)、HDL-C水平升高(P<0.01,P<0.05)。二甲双胍组及大黄糖络丸各剂量组血清中炎症介质IL-6、TNF-α、CD4+T、hs-CRP、MCP-1水平显著下降(P<0.01,P<0.05),腹主动脉组织大体结构完整,中膜平滑肌基本整齐,较模型组显著改善。腹主动脉组织中PI3K、Akt、NF-κB、MCP-1蛋白平均光密度值及PI3K、Akt、NF-κB m RNA表达水平不同程度降低(P<0.01,P<0.05),PI3K、Akt、p-Akt、p-IκB、NF-κB蛋白含量表达显著下降(P<0.01),差异具有统计学意义。 结论 大黄糖络丸能改善糖尿病模型大鼠腹主动脉炎症病变,降低ZDF大鼠高血糖和高血脂,延缓炎性反应对腹主动脉的损伤,其机制可能是通过抑制PI3K-Akt/NF-κB信号通路介导的炎症反应发挥作用的。