关键词:
腹泻型肠易激综合征
肝郁脾虚证
病证结合模型
低度炎症
摘要:
目的通过构建腹泻型肠易激综合征(IBS with predominant diarrhea,IBS-D)肝郁脾虚证大鼠模型,观察大鼠低度炎症状态并对其特点进行分析。方法将20只SPF级SD雄性子鼠按随机数字表法分为正常组8只,模型组12只。模型组采用新生母子分离(Neonatal maternal separation,NMS)、2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)灌肠、慢性不可预知轻度应激刺激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)三因素复合造模方法构建IBS-D肝郁脾虚证大鼠模型,通过模型评价,大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)检测、大鼠肠组织HE染色、免疫组化TNF-α、趋化因子2[Chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2]、IL-1β、IL-10染色及电镜观察,评估IBS-D模型大鼠低度炎症状态并分析其特点。结果模型组大鼠在疾病和证候方面都表现出与正常组有显著性差异的IBS-D肝郁脾虚证特征。与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-18、TNF-α显著升高,IL-4、IL-10显著降低(P<0.01)。模型组结肠、回肠组织HE染色提示固有层轻度炎症细胞浸润;免疫组化染色结果提示模型组结肠组织促炎细胞因子TNF-α、CCL2、IL-1β染色程度增强;抗炎细胞因子IL-10染色程度减弱。电镜下观察可见模型组大鼠结肠上皮结构轻度紊乱,屏障轻度受损,细胞间紧密连接可见缝隙。结论IBS-D肝郁脾虚证模型大鼠存在以促炎因子表达升高、抗炎细胞因子表达下降、肠黏膜固有层免疫异常激活及屏障受损为特点的低度炎症状态,可以为疏肝健脾类方药治疗IBS-D低度炎症的疗效机制研究提供研究依据和思路。