关键词： 白术转腰汤   转化生长因子-β1   免疫炎症反应   黄韧带纤维化   大鼠   M2巨噬细胞  

摘要： 目的探讨白术转腰汤(《辨证录》转腰汤加鸡血藤、苏木、牛膝)对腰椎黄韧带纤维化的影响及其免疫调控机制。方法(1)采用随机数字表法将24只雄性SD大鼠分为4组,即正常组、模型组、氯磷酸盐组和白术转腰汤组,每组6只。除正常组外,其余各组均采用腰椎失稳法建立黄韧带纤维化模型。白术转腰汤组灌胃白术转腰汤(13.6 g/kg),其余各组给予等量生理盐水灌胃,每天1次,持续30 d。氯磷酸盐组于造模手术后即刻及第9、18、27天沿原切口皮下注射氯磷酸二钠脂质体(5 g/L,0.5mL)。30 d后过量麻醉处死大鼠,采用HE染色和Masson染色对大鼠黄韧带进行组织学评估,计算胶原容积分数(CVF);采用免疫组化染色法检测黄韧带中转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)蛋白表达,采用免疫荧光双标法检测M2巨噬细胞中CD163与TGF-β1蛋白表达。(2)使用RT-qPCR法检测M2巨噬细胞与成纤维细胞单独培养、共培养,及经过白术转腰汤含药血清预处理的M2巨噬细胞与成纤维细胞共培养3种方式下,M2巨噬细胞与成纤维细胞TGF-β1、TNF-α和IL-1β的mRNA表达。结果(1)与正常组比较,模型组大鼠可见黄韧带纤维致密、扭曲,免疫细胞浸润,CVF增加,黄韧带组织中TGF-β1、TNF-α、IL-1β蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,氯磷盐酸组与白术转腰汤组细胞外基质堆积改善,黄韧带CVF降低,黄韧带组织中TGF-β1、TNF-α、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05);与氯磷盐酸组比较,白术转腰汤组细胞外基质堆积增加,CVF升高,黄韧带组织中TGF-β1、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05);免疫荧光结果提示,正常组与氯磷盐酸组未见CD163、TGF-β1蛋白表达,模型组CD163和TGF-β1蛋白大量表达并共定位,白术转腰汤组可见较多CD163蛋白表达,但TGF-β1蛋白表达极少。(2)与单独培养比较,共培养增加了M2巨噬细胞中TGF-β1、IL-1β及成纤维细胞中TNF-α、IL-1β的mRNA表达,而经过白术转腰汤含药血清预处理后的共培养下,M2巨噬细胞中TGF-β1、IL-1β和成纤维细胞中TNF-α、IL-1β的mRNA表达较未预处理的共培养降低(P<0.05)。结论白术转腰汤可抑制大鼠腰椎黄韧带纤维化进程,降低M2巨噬细胞中TGF-β1和IL-1β的表达,并影响成纤维细胞TNF-α和IL-1β的表达,从而抑制M2巨噬细胞TGF-β1介导的免疫炎症反应,发挥抑制黄韧带炎症-纤维化正反馈的作用。

关键词： 抽搐性运动障碍   儿童   肠道菌群   炎症反应   免疫指标   相关性  

摘要： 目的探究儿童抽动障碍与肠道菌群及炎症反应、免疫指标相关性研究。方法选取连云港市第二人民医院2022年1月至2023年6月收治的69例儿童抽动障碍病儿作为试验组,并选取69例同期在该院体检的健康儿童作为对照组。对比两组小儿肠道菌群及炎症反应[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)]、免疫指标[分化抗原(CD)3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)],同时分析试验组病儿美国耶鲁综合抽动严重程度量表(YGTSS)评分与肠道菌群、炎症反应和免疫指标的相关性。结果试验组病儿双歧杆菌水平低于对照组[(7.15±0.98)IgCFU/g比(9.24±0.85)IgCFU/g],大肠埃希菌水平高于对照组[(7.19±0.77)IgCFU/g比(6.29±0.81)IgCFU/g](均P<0.05);试验组病儿血清IL-6[(3.45±0.39)ng/L比(1.44±0.31)ng/L]和TNF-α[(10.24±1.31)ng/L比(5.43±1.29)ng/L]水平显著高于对照组(均P<0.05);试验组病儿CD3^(+)[(57.99±1.32)%比(62.08±1.27)%]和CD4^(+)[(41.87±1.23)%比(48.25±1.18)%]水平低于对照组,CD8^(+)[(36.77±1.39)%比(31.85±1.27)%]水平高于对照组(P<0.05);Pearson分析结果显示双歧杆菌水平、CD3^(+)和CD4^(+)水平与YGTSS评分呈负相关(r=−0.57、−0.66、−0.67,均P<0.05),大肠埃希菌水平、IL-6、TNF-α和CD8^(+)水平与YGTSS评分呈正相关(r=0.68、0.68、0.62、0.59,均P<0.05)。结论儿童抽动障碍病儿存在明显的肠道菌群及炎症反应、免疫指标异常,其病情程度与肠道菌群及炎症反应、免疫指标存在明显的相关性。

关键词： 新型冠状病毒感染   慢性疲劳综合征   单细胞转录组   炎症反应   氧化应激   细胞凋亡   甘草   人参   黄芩   鱼腥草   郁金   丹参  

摘要： 目的通过分析新型冠状病毒感染后(简称“新冠后”)慢性疲劳综合征(chronic fatigue syndrome,CFS)患者与正常受试者的单细胞转录组数据,探讨新冠后CFS与炎症反应、氧化应激和细胞凋亡之间的分子机制,并预测调控关键基因的潜在中药,为治疗新冠后CFS提供理论支持。方法使用R语言4.2.1中的“Seurat”包处理新冠后CFS患者与正常受试者的外周血单细胞测序数据,“CellChat”包进行细胞通讯分析,“scMetabolism”包评估细胞代谢特征,综合5种算法(AddModuleScore、AUCell、UCell、singscore和ssGSEA)计算新冠后CFS患者与正常受试者中5种免疫细胞炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分,并比较两者间的差异。使用“scCODE”包鉴定各类免疫细胞在正常受试者与新冠后CFS患者之间的差异表达(differential expression,DE)基因。Upset图分析得到新冠后CFS炎症反应相关基因(inflammatory response related genes,IRGs)、氧化应激相关基因(oxidative stress related genes,OSRGs)和细胞凋亡相关基因(apoptosis related genes,ARGs)。使用“ClusterProfiler”包分别对IRGs、OSRGs、ARGs进行基因本体生物学过程(gene ontology biological process,GOBP)富集分析。基于STRING数据库及Cytoscape软件构建“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互复杂网络,使用cytoHubba插件筛选关键基因。利用COREMINE数据库预测调控关键基因的中药,并通过古今医案云平台统计中药的性味归经、药物功效分类。结果共鉴定出5种免疫细胞,分别为B细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、NK细胞和单核细胞。相比于正常受试者,新冠后CFS患者的细胞通讯更为丰富且强度更大,两者之间并无明显差异的细胞代谢特征。新冠后CFS患者中各类免疫细胞的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡评分普遍高于正常受试者。共得到33个IRGs、17个OSRGs和54个ARGs。“IRGs-OSRGs-ARGs”分子交互网络显示,IRGs、OSRGs和ARGs之间存在密切联系,最后鉴定出8个关键基因。干预中药药性以寒为主,温、平次之;药味以苦、辛、甘为主;归经以肝、脾、肺为主;功效分类以补虚药(甘草、人参等)、清热药(黄芩、鱼腥草等)、活血化瘀药(郁金、丹参等)为主。结论新冠后CFS患者存在异常的炎症反应、氧化应激和细胞凋亡状态,且三者之间密切关联。8个关键基因(TNF、BCL2、CTNNB1、CXCL8、IFNG、HIF1A、MCL1、CYCS)可能是新冠后CFS的潜在治疗靶标。临床治疗新冠后CFS应注重补虚药、清热药及活血化瘀等药物的配伍使用。

关键词： Wnt4重组蛋白   成骨细胞   脂多糖  

摘要： 目的建立体外炎性环境,对比研究Wnt4重组蛋白在炎症状态下对成骨细胞分化及矿化能力的影响,初步探讨Wnt重组蛋白在炎症状态下调控成骨细胞分化的作用。方法通过酶消法从小鼠颅顶骨中提取成骨细胞,CCK8法检测不同浓度LPS、Wnt4重组蛋白对小鼠成骨细胞增殖分化的影响,设计浓度梯度,根据检测结果确定所需的最适浓度。体外成骨诱导培养,按是否添加LPS、Wnt4重组蛋白分为对照组、LPS组、Wnt4组、LPS+Wnt4组4个组。培养7 d后比较碱性磷酸酶(ALP)活性。培养21 d后应用茜素红染色法比较细胞矿化能力。结果经过分组培养7 d后,与LPS组比较,LPS+Wnt4组ALP活性明显升高,P<0.05。第21天的茜素红染色结果表明,LPS+Wnt4组矿化能力高于LPS组,P<0.05。结论Wnt4重组蛋白(0.05μg/mL)对炎症状态下的成骨细胞的分化具有正向调节的作用。

关键词： 急性冠状动脉综合征   经皮冠状动脉介入治疗   视黄醇结合蛋白4   全身免疫炎症指数   心血管不良事件   ROC曲线   曲线下面积  

摘要： 目的 研究血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)联合全身免疫炎症指数(SII)对急性冠状动脉综合征(ACS)患者介入术后主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法 选取2021年3月至2023年10月在重庆市云阳县人民医院接受介入术的ACS患者152例(ACS组),根据介入术后6个月是否发生MACE分为MACE组(32例)和非MACE组(120例),另选取同期57名健康体检志愿者(对照组)。收集ACS患者临床资料,检测ACS组和对照组血清RBP4水平,并计算SII。分析ACS患者介入术后MACE的影响因素和血清RBP4、SII对其的预测价值。结果 ACS组血清RBP4水平和SII明显高于对照组(P <0.05)。年龄增加、急性心肌梗死、Killip分级≥Ⅱ级、RBP4升高、SII升高为ACS患者介入术后MACE的独立危险因素(P <0.05),左心室射血分数升高为其独立保护因素(P <0.05)。血清RBP4水平联合SII预测ACS患者介入术后MACE的曲线下面积为0.833,大于RBP4、SII单独预测的0.744、0.750(P <0.05)。结论血清RBP4水平联合SII对预测ACS患者介入术后MACE的价值较高,且对预后的评估具有一定指导意义。

关键词： 慢性肾衰竭   脾肾气虚型   隔姜灸   穴位贴敷   中医证候   炎症状态   肾功能  

摘要： 目的 探究隔姜灸联合穴位贴敷治疗脾肾气虚型慢性肾衰竭患者的临床效果。方法 选择2020年8月~2022年8月我院收治的脾肾气虚型慢性肾衰竭患者92例,按随机数字表法分为两组,各46例。对照组常规西医治疗,于此基础上,观察组采用隔姜灸联合穴位贴敷治疗。比较两组中医证候、临床疗效、炎症状态、肾功能、不良反应。结果 观察组治疗总有效率较对照组高,治疗后中医证候积分、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血尿素氮(BUN)、血尿酸(UA)、血肌酐(Scr)水平均低于对照组(P<0.05);两组不良反应对比(P>0.05)。结论 隔姜灸联合穴位贴敷治疗脾肾气虚型慢性肾衰竭患者可有效减轻临床症状、炎症反应,改善肾功能。

关键词： 骨髓微环境   免疫介导   鼠巨噬细胞   骨髓活检   模型小鼠   再生障碍性贫血   免疫炎症反应   归巢  

摘要： 研究免疫介导的再生障碍性贫血(AA)模型小鼠体内巨噬细胞在不同器官的动态归巢过程、特征。通过磁珠分选出供鼠淋巴结中巨噬细胞并用PKH67荧光标记,参照AA模型制备方法造模后,分析小鼠血常规、骨髓活检及HE染色结果,验证造模效果。在造模的第4、8、12天,收集骨髓、脾脏和淋巴结单个核细胞,通过流式细胞术分析PKH67荧光标志供鼠巨噬细胞的动态变化。探究PKH67荧光标志的巨噬细胞,在AA模型小鼠发病过程中的动态变化,观测到供鼠巨噬细胞归巢到淋巴结并扩增分化,最终转运至骨髓和脾脏。通过蛋白组学质谱分析,初步揭示了巨噬细胞参与AA骨髓微环境激活后的相关免疫炎症反应通路,为病理性巨噬细胞参与AA模型小鼠的发病提供了依据。

关键词： 血液透析   护理   罗森塔尔效应   运动干预   焦虑   微炎症状态  

摘要： 目的分析透析患者采用基于罗森塔尔效应的护理联合运动干预对改善焦虑及微炎症状态的影响。方法选取2021年1月至2023年6月在我院接受维持性血液透析治疗的102例透析患者,采用随机数字表法将其分成两组,其中对照组实施常规护理,试验组实施基于罗森塔尔效应的护理联合运动干预。对比两组护理前后焦虑状态-特质量表(STAI)评分、自我护理能力量表(ESCA)评分、自我感受负担量表(SPBS)评分、微炎症反应水平、液体摄入量控制改善情况。结果两组干预前液体摄入控制量、微炎症反应水平、ESCA和SPBS评分及STAI评分相比无明显差异(P>0.05);护理6个月后,两组指标均显著改善,且试验组液体摄入控制量、微炎症反应水平、ESCA和SPBS评分及焦虑水平均优于对照组(P<0.05)。结论透析患者采用基于罗森塔尔效应的护理联合运动干预对改善患者焦虑及微炎症状态具有积极的影响,有利于降低患者的焦虑和微炎症状态,降低患者的自我感受负担,并提高患者液体摄入量控制效果和自我护理能力。

关键词： 急性冠脉综合征   全身免疫炎症指数   多支病变   中重度病变  

摘要： 目的探究急性冠脉综合征(acute coronary artery,ACS)患者全身免疫炎症指数(systemic immune inflammation index,SII)与冠状动脉病变严重程度的相关性。方法纳入2021年9月至2023年3月因出现典型胸痛、胸闷症状在鞍山市中心医院心血管内科就诊,行冠状动脉造影符合诊断标准的ACS患者206例,收集患者临床资料,计算各免疫炎症指数。根据冠状动脉造影结果分为单支病变组(n=51)和多支病变组(n=155);根据改良Gensini评分分为轻度病变组(n=89)和中重度病变组(n=117)。比较组间临床资料的差异,筛选冠状动脉病变严重程度的独立危险因素,并评价其预测价值。结果SII预测ACS患者多支病变的曲线下面积为0.93,当SII为631.31时,对ACS患者冠状动脉多支病变的预测能力最高,敏感度和特异度分别为81.9%和96.1%。结论SII是ACS患者多支病变的独立危险因素,且预测价值较高。

关键词： 结直肠癌   预后营养指数   全身免疫炎症指数   预后  

摘要： 目的探讨术前预后营养指数(PNI)和全身免疫炎症指数(SII)联合应用对接受根治性手术的结直肠癌(CRC)患者预后评估的价值。方法收集2015年6月至2018年7月于新乡医学院第一附属医院行根治性手术的120例CRC患者的临床病例资料和随访数据。根据首次入院外周血结果计算PNI和SII值,利用受试者工作特征曲线(ROC)确定PNI和SII的最佳截断值,将患者分为高/低PNI组和高/低SII组。通过单因素及Cox多因素回归模型探讨影响患者总生存期(OS)的独立因素,Kaplan-Meier曲线进行生存分析,并对比PNI、SII及其联合使用的预后预测效能。结果ROC曲线显示,PNI的最佳截断值为48.0,SII的最佳截断值为560.0,依据最佳截断值分组,PNI、SII均与分化程度、TNM分期、神经侵犯、脉管癌栓相关,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素分析指出,TNM分期、PNI及SII是影响OS的独立预后因素。生存分析表明,高PNI组和低SII组的OS显著优于对照组,进一步分析发现高PNI组和低SII组的OS显著优于其他3组,差异有统计学意义(P<0.05)。PNI联合SII预测的AUC为0.811,高于单一指标。结论PNI、SII与TNM分期均为影响CRC手术患者OS的独立预后因素,并且相较于PNI或SII单一指标,联合两个指标的预测效能更佳。