关键词： 脑缺血再灌注损伤   高迁移率族蛋白B1   T细胞   炎症   免疫抑制  

摘要： 研究背景：缺血性脑卒中是发病率和致残率最高的疾病之一。缺血区血管可因再通而发生脑缺血再灌注损伤(CIRI)。CIRI诱导脑组织炎症反应和外周免疫系统抑制(SIID,以淋巴细胞数量减少,功能抑制为主要特征,其诱导感染发生率增高)双向效应,目前治疗手段有限。CIRI后,坏死神经元释放高迁移率蛋白B1(HMGB1),其是一种细胞因子样蛋白,在CIRI病理过程中发挥重要作用。前人研究表明CIRI后,小胶质细胞/巨噬细胞、中性粒细胞及T细胞等免疫细胞浸润于缺血区,参与脑组织炎症反应。已经证实,HMGB1的致炎效应,可通过作用于小胶质细胞/巨噬细胞而发挥和传递。HMGB1是否同时作用于浸润的T细胞,甚至因T细胞与巨噬细胞有交互作用而通过T细胞再间接作用于巨噬细胞,目前还不清楚。不仅如此,CIRI后,HMGB1尚可通过破损的血脑屏障进入脑脊液甚至外周血。前人研究报导,大剂量HMGB1可通过作用于树突状细胞(DCs)或者直接作用于T细胞,诱导T细胞免疫功能抑制,而脑卒中后大量入血的HMGB1,是否与外周淋巴细胞数量和功能改变有关,是否介导SIID的发生,目前尚无研究报导。 研究目的：拟采用局灶性脑缺血再灌注损伤模型,应用HMGB1抑制剂Glycyrrhizin(甘草甜素),观察CIRI后,HMGB1在缺血脑组织中的定位和表达情况,脑组织炎症反应情况,以及外周器官中T细胞数量改变,同时采用T细胞缺陷动物,离体和在体观察T细胞缺陷,对HMGB1效应的影响及二者的相关性,旨在探讨HMGB1在CIRI诱导的脑组织炎症反应和外周免疫抑制中的效应及机制,为脑卒中的治疗和预后提供新靶标。 研究方法：本研究首先采用野生型Sprague Dawley (SD)大鼠及CD57BL/6J小鼠,建立大脑中动脉短暂性阻塞的局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO),于再灌注后12、48及72小时,免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察HMGB1在缺血脑组织、局部神经元和小胶质细胞/巨噬细胞中的定位、表达情况。而后,于动物腹腔在MCAO再灌注后即刻及3.5小时各注射一次Glycyrrhizin,TTC染色法观察大鼠脑梗塞体积,免疫荧光染色法检测缺血区小胶质细胞/巨噬细胞和中性粒细胞浸润情况,以及流式细胞仪检测缺血大脑半球单核/巨噬细胞、淋巴细胞及其亚型CD4+、CD8+T细胞等免疫细胞的数量,以探讨HMGB1对CIRI脑组织炎症和脑损伤的效应及机制。然后,采用野生型SD大鼠及T细胞缺陷的裸大鼠,在短暂性局灶性脑缺血再灌注损伤(MCAO)及永久性电凝大脑中动脉远端的永久性局灶性脑缺血再灌注损伤(dMCAO)两种模型中,以及CD57BL/6J野生型小鼠及T、B联合缺陷的SCID小鼠MCAO模型中,以Glycyrrhizin抑制IMGB1, TTC染色法检测再灌注72小时后,动物脑梗塞体积,探讨T细胞缺陷对HMGB1脑损伤效应的影响;接着,将来源于野生型小鼠的脾细胞,过继回输给SCID小鼠,在有无Glycyrrhizin处理之下,观察脑梗塞体积变化,反向验证上述发现;另外,离体将来源于野生型与SCID小鼠的脾细胞,在刀豆蛋白A (ConA)刺激后,与神经元共培养,CCK-8试剂盒检测HMGB1有无被Glycyrrhizin抑制下,神经元的存活率,观察脾细胞对神经元的杀伤效应,进一步验证和支持T细胞缺陷对HMGB1作用的影响。接下来,采用Western-blot和ELISA分别检测MCAO后24小时脑脊液,以及MCAO后5、24、48小时血清中HMGB1水平以及Glycyrrhizin的效应,同时采用流式细胞仪,检测HMGB1有无被Glycyrrhizin抑制下,外周血和脾脏中单个核细胞总数,以及单核细胞/巨噬细胞、淋巴细胞及其亚型CD4+、CD8+T细胞等免疫细胞的数量,以探讨外周血高水平释放的HMGB1,与外周器官淋巴细胞数量减少的相关性。 实验结果：1、免疫荧光染色显示HMGB1早在小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)后12小时即从神经元胞核转移到胞浆,48小时释放至胞外同时伴NeuN+神经元数量减少;与此同时,CIRI后24小时WB检测到脑脊液和ELISA检测到血浆HMGB1高水平表达;2、免疫荧光显示CIRI后72小时脑缺血核心区CD68+小胶质细胞/巨噬细胞及MPO+中性粒细胞浸润增多,而且浸润的小胶质细胞/巨噬细胞亦表达HMGB1;3、应用HMGB1抑制剂Glycyrrhizin,TTC染色显示野生型大鼠脑梗塞体积减小,免疫荧光显示脑损伤核心区小胶质细胞/巨噬细胞和中性粒细胞浸润数量减少,NeuN+神经元数量增多,HMGB1转位和胞外释放减轻;4、流式检测显示缺血再灌注后脑损伤侧包括T细胞,CD4+、CD8+T细胞,NK, NKT及B细胞淋巴细胞数量增多,而Glycyrrhi

关键词： 血液透析   微炎症状态   血液透析滤过  

摘要： 目的:比较3种不同血液净化方式对维持性血液透析(MHD)患者微炎症状态的影响。方法:选取MHD患者42例,随机分为HD组、HFHD组和HDF组各14例,另选健康体检者30例为对照组。检测透析前及透析3月后血清CRP、IL-6、Alb、TNF-α、HB及TC水平。结果:三组MHD患者透析前血清CRP、IL-6、TNF-α及HB水平均高于对照组(P<0.05),各组间差异无统计学意义(P>0.05)。HD组患者透析3个月后,血清CRP、IL-6、Alb、TNF-α、HB及TC水平与透析前相比差异无统计学意义;HFHD、HDF组患者透析3个月后血清CRP、IL-6及TNF-α水平与透析前相比下降(P<0.05),但HB水平则显著升高(P<0.05);HDF组患者透析3个月后TC水平与透析前相比下降(P<0.05)。HDF组患者透析3个月后CRP、IL-6、TNF-α及TC水平低于HD、HFHD组同期水平(P<0.05)。各组Alb水平与治疗前相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HDF和HFHD透析可以降低血清CRP、IL-6、TNF-α及TC水平,改善MHD患者微炎症状态,HDF透析优于HFHD。

关键词： 猪   肺炎支原体感染   糖皮质激素受体   Toll样受体基因   基因表达   炎症状态  

摘要： 天然免疫，作为机体抵抗病原入侵的第一道防线，可在病原感染之初迅速调动机体防御系统。天然免疫这种强大功能的激活，主要依靠Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)对病原进行识别，继而激活补体系统，诱导细胞因子、化学增活素等天然免疫效应分子的分泌，调动NK细胞和吞噬细胞，从而对病原进行应答。病原入侵也可激活HPA轴(Hypothalamic-pituitary-adrenal，HPA)对天然免疫进行调控。糖皮质激素受体（Glucocorticoid receptor，GR）作为应激反应的效应器，可以对TLR信号通路进行调控。许多研究表明，GR可以在转录水平上以“蛋白-基因”、“蛋白-蛋白”等模式，对TLR所介导的信号分子进行转录调控从而抑制炎症反应。尽管如此，GR作为转录因子，直接对TLR进行转录调控的研究较少。　　众所周知，病原感染以及疫苗免疫会激发机体对病原产生特异性免疫反应。尽管如此，猪肺炎支原体（Mycoplasma hyopneumoniae）感染后GR是否直接对猪肺脏TLR2进行转录调控，以及疫苗免疫是否对此产生干扰作用，目前还不清楚。另一方面，现代养殖场的很多管理方式都会诱使家畜产生应激。许多研究采用ACTH长时间处理动物来模拟慢性应激反应，而使用脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）处理动物可模拟病原菌感染所诱导的急性炎性反应。ACTH预处理所模拟的慢性应激，是否会通过影响TLRs/GR的交互作用干扰LPS在猪组织局部诱导炎症反应，目前尚不清楚。　　本课题在猪肺炎支原体感染动物模型以及LPS诱导的炎症反应动物模型中，研究了GR对TLR2/4的转录调控机制，以及疫苗免疫或ACTH预处理对这种转录调控的影响。本论文分为三大主要部分。　　1.猪肺炎支原体感染状态下猪肺脏GR对TLR2的调控以及疫苗免疫的影响　　本试验从5窝猪群（约克×梅山）中选取15头15d仔猪（每窝3头），并将其随机分为三组，分别为对照组(CC);未免疫感染组(NI);免疫感染组猪(VI)。VI组猪通过颈部肌肉注射1 mL猪肺炎支原体疫苗，其它两组猪（CC和NI组）以相同的方式模拟注射等量PBS。一个月后，VI和NI组猪经气管注射2 mL攻毒株(109CCU/mL)，而CC猪以相同的方式模拟注射等量PBS。研究结果显示，NI组猪出现支原体感染的典型肺炎病理损伤，肺损伤评分显著高于VI组（P＜0.05），疫苗免疫可以显著缓解猪肺炎支原体感染引起的临床症状以及肉眼可见的肺脏损伤，而对照组没有出现明显的临床症状和肺脏病理变化。尽管如此，NI和VI组猪肺脏支原体DNA的含量分别为104.14 copies/mL和103.67 copies/mL，均极显著高于对照组（P＜0.01），疫苗免疫没有改变肺脏猪肺炎支原体DNA含量。NI组以及VI组猪血清皮质醇水平分别为52.2 ng/mL和33.8 ng/mL，均极显著低于CC组（CC组为76.8 ng/mL;P＜0.01），但只有VI组GR在核内的表达显著低于CC组（P＜0.05）。TLRs1～10均在猪肺脏中有表达，其中TLR2的表达量最高。NI组猪TLR2 mRNA的表达上调(P＜0.05)，而VI组无明显的变化。使用染色质免疫共沉淀技术，发现NI组猪GR与TLR2启动子的结合上调（P＜0.05），但VI组猪呈下调趋势。这表明猪肺炎支原体疫苗免疫，可能通过抑制GR核转移以及GR与TLR2启动子的结合，从而抑制肺TLR2的基因转录。　　***处理状态下GR对猪肺脏TLR表达的调控以及慢性应激的影响　　24头三元杂交（杜洛克×长白×大白）雄性仔猪，平均体重为12±0.5 kg，随机分为4个处理组，每组6头猪，分别为空白对照组(CC);无ACTH预处理的LPS注射组(LPS);ACTH单独注射组(ACTH);有ACTH预处理的LPS注射组(ACTH+LPS)。ACTH以及ACTH+LPS组猪连续两天肌肉注射ACTH（2.25 IU/kg体重），每隔6小时注射一次，共注射7次，其余两组在相同时间点等体积注射生理盐水。最后一次ACTH注射后6h，向LPS组以及ACTH+LPS组猪肌肉注射LPS（15μg/kg体重），其余两组以相同方式注射等体积生理盐水。研究结果发现，无ACTH预处理时LPS显著上调了血清肿瘤坏死因子（TNF）-α以及肺脏IL-1β mRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达水平(P＜0.05)，但对肺脏白细胞介素(IL)-6、TNF-α以及环氧合酶(COX)-2mRNA的表达无显著影响;ACTH预处理对LPS所诱导的肺脏炎症因子的表达无显著影响;ACTH单独处理对这些促炎因子的表达无显著影响。无ACTH预处理时LPS显著下调了肺脏皮质醇水平（P＜0.05）;A

关键词： 慢性肾脏病   微炎症   灸药并用   脾肾阳虚  

摘要： 目的：通过观察灸药并用治疗脾肾阳虚型慢性肾脏病(CKD)的临床疗效以及对相关微炎症指标的影响,分析灸法配合中药治疗CKD患者的作用及对微炎症状态的影响。 方法：依据纳入标准随机选取CKD非透析属脾肾阳虚型患者60例,所有患者在一般治疗基础上,加用灸法及温补脾肾白拟方剂治疗,观察时间为2个月,对患者治疗前后的主要临床症状进行中医证候量化评分,并定期检查肾功能、离子、血细胞分析、尿液常规分析、泌尿系超声、全程C-反应蛋白(CRP+***)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的水平,对临床症状积分和化验结果进行疗效判定和统计处理。 结果：1.本方法治疗脾肾阳虚型慢性肾脏病患者总有效率为61.67%。2.治疗后的中医证候量化评分优于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.01)。3.本方法可降低血清肌酐(Scr),提高肌酐清除率(Ccr),差异具有统计学意义(P<0.05),治疗前后对比Hb水平无明显差异(P>0.05)。4.本方法可降低CRP、TNF-α. IL-6水平,其差异具有统计学意义(P<0.01)。 结论：1.灸药并用能够使CKD患者临床症状、体征得到改善。2.灸药并用可以使CKD患者的肾脏功能得到保护,降低血肌酐、提高内生肌酐清除率水平。3.灸药并用可以纠正CKD患者的微炎症状态。4.灸药并用对慢性肾脏病患者贫血状态的作用不明显。

关键词： 哮喘   Shp2   IL-25   LPS  

摘要： 研究背景和目的支气管哮喘(asthma)是一种T细胞控制的,肥大细胞和嗜酸性粒细胞参与的慢性变态反应性疾病,其特征为气道炎症、气道粘液高分泌和气道壁重构,进而导致气道高反应性和气流阻塞。而上皮细胞在哮喘发病中的作用今年来的关注度越来越高。目前公认的观点认为支气管上皮细胞不仅仅是一层屏障,它们还可以通过模式识别受体(pattern recognition receptors,PRRs)识别环境中的刺激物,分泌上皮细胞来源细胞因子(Epithelium-derived cytokines,EDCs),桥接了固有免疫和适应性免疫。EDCs,包括IL-25、IL-33、TSLP等,与哮喘TH2型免疫反应的促进和维持相关。目前,关于IL-25产生及其机制的研究较少。研究表明过敏原、空气传播的病原体、寄生虫等可刺激上皮细胞产生IL-25,而其下游调控IL-25表达的相关因素研究不多。根据IL-25编码区的上游基因序列分析,有学者推断信号转导和转录激活因子 6(signal transducer and activator of transcription 6,STAT6)、GATA-3、NF-κB等转录因子可能与IL-25的表达相关。然而,上述转录因子是否在IL-25的诱导机制中起作用目前尚无相关的功能性研究。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作为一种病原相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs),广泛存在于环境中,尤其是污染的空气和尘螨中,可被上皮细胞表面Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)4识别,通过激活下游丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)p38和c-Jun氮端激酶(c-Jun N-terminal kinases,JNK)等信号,导致核因子活化B细胞κ 轻链增强子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-kappaB)核易位,进而导致前炎症细胞因子,包括EDCs的释放。我们猜想LPS可能诱导了上皮细胞IL-25的分泌,且该过程依赖于MAPK信号。Shp2(Src homology 2 domain-containing phosphatase 2)是一种细胞内经典的蛋白酪氨酸磷酸酶(protein tyrosine phosphatases,PTPs),参与了多种疾病的发生发展。ShP2在肺部也广泛表达,据报导,Shp2调控了香烟烟雾诱导的气道上皮细胞IL-8的高分泌,肺泡上皮Shp2缺失则使得肺泡表面活性物稳态失衡,导致了持续的肺纤维化。本实验室的前期研究发现,在哮喘气道重构模型中,支气管上皮细胞Shp2缺失能下调TGF-β1表达,从而抑制哮喘气道重构。然而在哮喘气道炎症过程中,Shp2对气道上皮细胞其他关键炎症因子如IL-25等的调控作用并不清楚。本研究旨在探讨支气管上皮细胞中Shp2对过敏原鸡卵白蛋白(ovalbumin,OVA)及其所含的LPS诱导的IL-25的调控作用和分子机制。首先探讨了过敏原OVA和LPS诱导支气管上皮细胞炎症因子IL-25的高表达及相关的信号通路,进而研究Shp2在该过程中的调控作用,并探索其在哮喘动物模型中潜在的调控机制。材料和方法体外研究用OVA或LPS刺激人正常细胞系Beas-2B和原代小鼠气管上皮细胞(mouse tracheal epithelial cells,MTECs),检测 IL-25 mRNA 表达和 p38 和 JNK的活化水平。为验证IL-25的高表达依赖于p38、JNK和Shp2,采用了相关抑制剂和siRNA。体内研究,首先用C57BL/6小鼠构建OVA诱导的过敏性哮喘模型,检测肺组织中IL-25和IL-33的表达。其次构建了诱导型支气管上皮细胞Shp2定向敲除动物模型---CC10-rtTA/(tet0)7-Cre/Shp2flox/flox三重杂交小鼠。给予该小鼠强力霉素(Doxycycline,DOX)诱导Shp2的敲除后用OVA诱导哮喘模型,然后观察肺组织中IL-25的表达水平变化,以及受IL-25调控的TH2型炎症,包括TH相关细胞因子的表达,TH细胞亚群的比例,肺泡灌洗液(Bronchial alveolar lavage fluid,BALF)中嗜酸性粒细胞的浸润情况。研究结果大剂量0VA(2mg/ml,20mg/ml)和小剂量LPS(100ng/ml)能够诱导支气管上皮细胞IL-25高表达(P<0.05)。大剂量OVA(2 mg/ml,20 mg/ml)和小剂量LPS(100 ng/ml)在Bea

关键词： 坎地沙坦酯   尿毒症   血液透析   微炎症   心功能  

摘要： 目的探讨坎地沙坦酯对尿毒症维持性血液透析患者微炎症状态及心功能的影响。方法将40例维持性血液透析患者随机分为研究组与对照组,研究组口服坎地沙坦酯8 mg/d,1次/d,观察治疗6个月,应用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测受试者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-18及基质金属蛋白酶(MMP-9)水平变化,彩色多普勒超声诊断仪测定两组患者左心室舒张末期内径(LVDd)、左心室收缩末期内径(LVDs)、左心室后壁厚度(LVPWT)、室间隔厚度(IVST)、左心室质量指数(LVMI)、左心室射血分数(LVEF),并对两组患者炎症因子与心功能各指标进行相关性分析。结果坎地沙坦酯组血清TNF-α、IL-6、IL-18及MMP-9水平较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),心功能各指标较对照组明显改善,差异有统计学意义(P<0.05),血清炎症因子与心超指标相关性分析显示TNF-α、IL-6及MMP-9与LVDd、LVDs、LVPWT、IVST、LVMI呈正相关关系(P<0.05),与LVEF呈负相关关系(P<0.05);IL-18与LVDs、LVPWT、IVST、LVMI呈正相关关系(P<0.05),与LVEF呈负相关关系(P<0.05);结论坎地沙坦酯对尿毒症维持性血液透析患者心功能及微炎症状态的改善发挥重要作用。尿毒症患者血清中炎症因子水平与心功能指标变化相关。

关键词： 肠源性感染   DSS造模   炎症通路   炎性蛋白  

摘要： 目的：以急性DSS诱导结肠炎组、慢性DSS诱导结肠炎组和对照组小鼠各10例为研究对象,通过对DAI、肠屏障通透性以及炎性指标的评估,明确结肠炎模型小鼠肠道通透性改变和肠黏膜受损情况。通过测定小鼠结肠长度、脾脏重量以及通过蛋白质芯片技术寻找差异性血浆炎性蛋白,获得肠源性感染全身炎症反应的途径。方法：选取17周龄雌性小鼠30只,随机分为急性组、慢性组和对照组三组,每组10只。实验期间,每天对小鼠进行称重,粪便性状评估以及测便隐血数值。小鼠处死后,分离结肠和脾脏,测量记录结肠长度和脾脏重量。观察结肠标本HE染色(及透射电镜下)肠黏膜病理组织学变化。采用紫外分光光度法检测血清DAO水平,比色法检测DLAC浓度,AAM-INF-G1芯片选取差异蛋白,测定蛋白为BLC, CD30L, Eotaxin, Eotaxin-2, Fas Ligand, Fractalkine, GCSF, GM-CSF, IFNy, IL-la, IL-1β, IL-2, IL-3, IL-4, IL-6, IL-9, IL-10, IL-12p40p70, IL-12p70, IL-13, IL-17, I-TAC, KC, leptin, LIX, lymphotactin, MCP-1, MCSF, MIG, MIP-1α, MIP-1γ, RANTES, SDF-1, TCA-3, TECK, TIMP-1, TIMP-2, TNFa, sTNFRⅠ, sTNFRⅡ。结果：与阴性对照组相比,急性组(P=0.0013)、慢性组(P=0.0000)小鼠体重指数均下降,具有统计学意义,急慢性组体重指数差异无统计学意义(P=0.8720)；急性组(P=0.0114)、慢性组(P=0.0001)小鼠DAI增加具有统计学意义,急慢性组DAI差异无统计学意义(P=0.5061)；急性组(P=0.6125)、慢性组(P=0.2898)小鼠DAO水平与对照组均无明显差异；急性组(P=0.1221)较对照组DLAC浓度较高,无统计学意义,慢性组(P=0.0412)较对照组DLAC浓度明显升高,有统计学意义,慢性组较急性组DLAC浓度较高(P=0.3198),无统计学意义;急性组(P=0.0002)、慢性组(P=0.0001)小鼠肠黏膜病理评分升高具有统计学意义,急慢性组病理评分未见明显差异(P=0.4711)；急性组(P=0.0004)、慢性组(P=0.0002)小鼠结肠长度减少具有统计学意义,急慢性组结肠长度减少无明显差异(P=0.0765)；急性组(P=0.3087)、慢性组(P=0.8605)小鼠脾脏重量指数(脾脏重量／处死前体重)均与对照组无明显差异；与阴性对照组相比,急性组sTNFRII (P=0.0425)、KC (p=0.0372)、MIG(P=0.0340)明显升高,sTNFRI (P=0.0511)、TIMP-2 (P=0.0721)非显著性升高,慢性组sTNFRII明显升高(P=0.0433), sTNFRI (P=0.1734)、KC (P=0.7715)、MIG (P=0.0833)非显著性升高。与慢性组相比,急性组TIMP-2明显升高(P=0.0228)。结论：成功构建DSS诱导急慢性肠黏膜损伤小鼠模型,并通过血浆细胞因子抗体芯片筛查炎症通路技术筛选得出包括sTNFRII, KC, MIG和TIMP-2在内共4种炎症差异蛋白。初步阐明了各炎症蛋白在肠源性感染中的作用与机制,为下一步的深入研究提供了依据。

关键词： 尿毒营养膏   维持性血液透析   微炎症状态   尿毒症   生活质量   临床疗效  

摘要： 目的:观察尿毒营养膏对尿毒症维持性血液透析(maintenancehemodialysis，MHD)患者微炎症状态的影响，探讨该方剂应用于临床的科学依据，改善MHD患者的生活质量。\n 方法:研究对象为贵阳中医学院第二附属医院肾内科门诊和住院的血透病人，在其中选取60例患者（符合纳入标准），随机分为治疗组、对照组各30例。对照组给予常规西医治疗（优质低蛋白、低盐、低脂、低磷饮食;常规补充重组人促红素注射液、左卡尼汀;控制血压、血糖，维持水电解质、酸碱平衡;均接受维持性碳酸氢盐血液透析治疗，每周3次，每次4小时），治疗组在对照组的治疗基础上加服尿毒营养膏，每日3次，每次20ml，疗程为8周。观察比较两组治疗前后的体格检查情况;检测两组治疗前后的实验室检查指标的水平变化，即血红蛋白(HGB)、血清白蛋白(ALB)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、β2-微球蛋白的水平;观察比较两组治疗后的临床疗效，比较两组治疗前后的中医证候积分的变化;检测安全指标:肝功能和电解质中的钾离子(K+)。\n 结果:(1)体格检查情况:两组治疗前后的相关营养状况评价指标均无显著性差异(P＞0.05)。(2)实验室检查指标:1）两组治疗后的HGB水平均较治疗前明显上升，两组治疗后组间比较具有显著性差异(P＜0.01);2)两组治疗后ALB水平上升但无统计学意义(P＞0.05);3)两组治疗后的CRP、IL-6、β2-微球蛋白水平均较治疗前下降且具有显著性差异(P＜0.01)，两组治疗后组间比较有显著性差异(P＜0.01)。(3)临床疗效:治疗组总有效率:96.7％，对照组总有效率:86.7％，两组治疗后疗效差异有统计学意义(P＜0.05)。(4)中医证候积分:两组治疗后的中医证候积分均较治疗前有显著性差异(P＜0.01)，两组治疗后组间比较差异具有统计学意义(P＜0.05)。(5)安全指标:1）治疗前后患者血清K+均在正常范围之内，治疗前后比较无明显差异(P＞0.05)。2)在服药过程中及疗程结束后未发现有肝功能异常的患者。\n 结论:尿毒营养膏可以降低尿毒症维持性血液透析(MHD)患者的CRP、IL-6β2-微球蛋白水平，从而可以改善MHD患者的微炎症状态。可以提升血清HGB水平改善贫血症状，能减轻临床症状，提高生活质量，其疗效优于单纯的西医治疗。其机制可能与降低了体内的炎性因子和炎性蛋白有关。用药后不会升高血清K+水平，未损害肝功能。

关键词： 腹水草   胃溃疡   炎症反应   NF-κB信号转导通路   分子调控机制  

摘要： 目的观察腹水草(Veronicastrum axillare(*** Zucc)Yamazaki)水提液抗大鼠乙醇型胃溃疡的作用效果,研究腹水草抗胃溃疡的作用靶点,然后从TNF-α靶点着手,研究腹水草对TNF-α介导的炎症信号通路------F-κB信号转导通路关键基因表达的干预作用,探讨腹水草水提液通过干预炎症反应抗胃溃疡的分子信号转导调控机制。方法①SPF级SD大鼠随机分成正常组、模型组、雷尼替丁组,腹水草低、中、高剂量组,每组8只。正常组和模型组分别给予0.9%生理盐水灌胃;雷尼替丁组给予0.18%雷尼替丁混悬液灌胃(***-1·d-1);腹水草各剂量组分别给予低、中、高剂量腹水草水提液灌胃(***-1·d-1、1.4 g·kg-1·d-1、2.8 ***-1·d-1),每天1次,连续14d。于最后1次灌胃1h后,采用1mL无水乙醇造模。1h后处死大鼠,比较各组大鼠胃溃疡指数及溃疡抑制率,并从组织形态学和病理形态学角度观察腹水草水提液对大鼠胃黏膜的保护作用。②分别采用硝酸还原酶法、黄嗓呤氧化酶法、酶联免疫吸附试验(ELISA)和荧光定量RT-PCR法,检测各组大鼠血清中一氧化氮(NO)、胃黏膜组织中一氧化氮合酶(iNOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内皮素-1(ET-1)、表皮生长因子(EGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达量。探究腹水草水提液抗炎的作用途径。③采用ELISA和荧光定量RT-PCR检测腹水草水提液对TNF-α介导的炎症信号通路------F-κB信号转导通路关键因子NF-κB、TNFR-1、TRADD、RIP1、IKBα、IL-1β蛋白和mRNA表达的影响。探讨腹水草通过TNF-α介导的NF-κB信号转异通路干预胃溃疡的作用靶点及分子机制。结果①腹水草水提液显著地抑制无水乙醉诱.导的胃溃疡。低、中、高剂量给药组的溃疡抑制率分别为45.93%、70.26%、90.83%。与模型组相比,各给药组大鼠的胃黏膜组织形态和细胞形态更加规则完整;②与模型组相比,腹水草水提液显著下调胃黏膜组织中TNF-α、ET-1蛋白和mRNA的表达水平(P<0.05或P<0.01),提高大鼠血清中NO含量及胃黏膜组织中iNOS和SOD的活力及其mRNA的表达量(P<0.05或P<0.01),但对EGF、VEGF蛋白和mRNA的表达无显著影响;③与模型组相比,腹水草水提液显著下调胃黏膜组织中NF-1κB、TNFR-1、RIP1、IKBα、IL-1β蛋白和 mRNA 的表达水平(P<0.05 或P<0.01),而对TRADD的表达则无显著影响。结论①腹水草水提液具有显著地抗大鼠乙醇型胃黏膜损伤的作用;②腹水草水提液抗乙醇型胃溃疡的作用与以下途径相关:降低炎症反应,抑制细胞凋亡,维持黏膜屏障功能;促进黏膜血流量,改善局部微循环;减少自由基生成、促进氧自由基清除。③腹水草水提液能显著地抑制TNF-α介导的NF-κB信号转导通路关键因子NF-κB、TNFR-1、RIP1、IKBα、IL-1β蛋白因子和mRNA的表达,阐明腹水草可以通过调控TNF-α介导的NF-κB信号转导通路来抑制炎症反应达到抗胃溃疡的作用。

关键词： 泻浊化瘀方   微炎症状态   血液透析   尿毒症  

摘要： 目的:评价泻浊化瘀方治疗维持性血液透析（MHD）患者微炎症状态的临床疗效和安全性，以提高MHD患者的透析充分性、减少透析并发症及保护残余肾功能，为临床提供有效方法和依据。\n 方法:研究病例选择符合纳入标准的MHD患者60例，随机分为两组，治疗组30例，对照组30例，两组患者均采用常规MHD治疗2～3次/周，4～5h/次及积极对症处理（如纠正高血压、高血糖、贫血及钙磷脂代谢紊乱等）;对照组在基础治疗上服用尿毒清颗粒，每日4次，在6、12、18时各服用1袋，22时服用2袋;治疗组在基础上则服用泻浊化瘀方，日一剂，分三次服，每次约100ml，疗程共12周;两组患者在治疗开始前和疗程结束后均空腹抽血1次，对比观察两组患者治疗前后C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)及中医临床证候的变化。实验数据通过SPSS15.0统计学软件进行分析。\n 结果:两组患者在年龄、性别、病程、透析龄等方面经统计学分析无明显差异(P＞0.05)，具有可比性。\n 1.中医临床证候比较:两组经治疗后临床积分均较治疗前下降且统计学有差异性(P＜0.05);治疗组总有效率为:83％，对照组总有效率为:63％，两组治疗后组间比较有统计学差异(P＜0.05)。\n 2.微炎症状态指标比较:两组治疗前组间比较无统计学意义(P＞0.05)，两组治疗前后CRP、IL-6、TNF-α组内比较均有差异(P＜0.05)，两组治疗后组间比较具有明显差异(P＜0.01)，且治疗组疗效优于对照组。\n 3.安全性指标:两组患者安全性相关指标（血压、大便常规、肝功能等）未见明显异常。\n 结论:\n 1.泻浊化瘀方可明显改善MHD患者的主要中医临床证候。\n 2.泻浊化瘀方可降低MHD患者的微炎症状态。\n 3.泻浊化瘀方治疗MHD患者微炎症状态的疗效优于尿毒清颗粒。\n 4.泻浊化瘀方临床使用是安全的。