关键词： 急性心肌梗死   直接经皮冠状动脉介入治疗   炎症状态   吸烟患者   预后评估  

摘要： 目的：　　本文通过对急性ST抬高型心肌梗死行直接经皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention，PCI)手术的吸烟患者临床指标及随访资料进行分析，并与不吸烟患者的临床特点进行比较，尝试分析急性ST抬高型心肌梗死患者吸烟与其术后白细胞(white blood cell，WBC)计数、超敏C-反应蛋白（high sensitive C-reactive protein，hs-CRP）水平的相关性，并观察吸烟对其PCI术后无复流现象的发生率及患者预后的影响。　　方法：　　回顾性连续收录我院2012年1月至2012年7月在我院行急诊PCI的急性ST段抬高型心肌梗死的患者115例，将入选患者分为吸烟组(n=85)和不吸烟组(n=30)，记录患者的年龄、性别、高血压病史、糖尿病病史、PCI围手术期白细胞水平、PIC术后24小时hs-CRP、PCI术后冠状动脉造影血流TIMI分级、心电图抬高的ST段回落程度，并随访患者有无心血管不良事件。比较两组患者PCI术后炎症状态（WBC计数、血清hsCRP水平）、心肌灌注水平（冠脉血流TIMI分级、心电图ST段回落程度）以及患者入院期间及随访期内主要心血管不良事件的发生情况。　　结果：　　吸烟组急性心肌梗死患者的发病年龄明显低于不吸烟组(P＜0.05)，且男性患病数明显多于女性;吸烟组中WBC总数和hs-CRP较不吸烟组有统计学意义(P＜0.05)，且均明显高于正常值，吸烟可以加重AMI患者的炎症反应。吸烟患者术后1小时心电图ST回落50％、冠脉血流TIMI分级和不吸烟组比较没有统计学差异。吸烟组患者住院期间及随访1年主要心血管不良事件（包括心源性死亡、急性心肌梗死、症状驱使的血运重建、脑卒中）与非吸烟组患者比较未发现显著差异。　　结论：　　在本组研究的心肌梗死患者中，吸烟者构成比为73.91％，吸烟患者人数明显多于不吸烟人数;吸烟患者急性心肌梗死发病更年轻，且男性患病数明显多于女性，提示吸烟可能是心肌梗死发病时间前移;吸烟组患者的hs-CRP及WBC数较非吸烟组显著升高，提示吸烟可加重AMI患者的炎症反应;吸烟组与非吸烟组患者相比较，未发现主要心血管不良事件的显著差异。

关键词： Inflammation   Haptoglobin   Protease inhibitor   Quantitative proteomics   Selected reaction monitoring   Trypsin digestion  

摘要： Background: The use of targeted LC-MS/MS methods for protein quantitation in clinical laboratories implies a careful evaluation of potential sources of analytical interference. In this study, we investigated whether inflammation, which is associated with both the release of proteolytic enzymes and increased expression of acute phase protease inhibitors, is affecting the accuracy of a haptoglobin selected reaction monitoring (SRM) assay. Results: A SRM assay was developed and used to quantify haptoglobin in 57 human serum samples. The SRM assay had CVs (n = 6) of 12.9% at 698 mg/L and 11.8% at 1690 mg/L. Results of the SRM assay were compared to those of a commercial immunonephelometric test. Passing-Bablok regression gave a proportional bias of 0.92 (95% CI: 0.82 to 1.04) and a constant bias of 75.40 (95% CI: -71.09 to 251.04), indicating that SRM and immunonephelometric assays provided comparable results. We then investigated whether the accuracy of the SRM assay was influenced by the patient's inflammatory state by assessing the relationship between the serum CRP concentration and the bias between the two methods. No correlation was found between the SRM/immunoassay bias and the CRP concentration (Pearson correlation coefficient r = 0.0898). Conclusions: These data indicate that neither the release of proteolytic enzymes nor the increased level of protease inhibitors occurring during inflammation processes have a significant impact on the haptoglobin SRM assay accuracy. Such studies provide important information about potential sources of analytical interferences in protein SRM assays.

关键词： 慢性肾脏病   微炎症状态   甲状腺激素  

摘要： 目的：探讨慢性肾脏病（CKD-5期）患者微炎症状态与甲状腺功能的相关性。通过本实验测定CKD-5期患者甲状腺激素的水平及其与机体微炎症状况相关指标的相关性研究，评估尿毒症微炎症状态对甲状腺功能的影响。 方法：选择2013年1月-2014年1月在青海大学附属医院肾脏内科治疗的慢性肾脏(CKD-5期)患者60例作为实验组，分为透析组和非透析组，每组各30例。入选者均符合2002年美国K/DOQI关于CKD定义及分期标准，血液透析患者透析时间介于6个月到2年之间，所选患者近期均无肺部近期感染病史、无原发性甲状腺疾病、无恶性肿瘤病史，一般情况可。另再选取年龄及性别与实验组匹配的青海大学附属医院体检中心健康体检者30例作为对照组，且均无心肺疾病，肝肾功能正常。各组的年龄、性别构成相比较，差别无统计学意义，具有可比性。应用SPSS17.0软件包进行统计分析，计量资料以x士s表示，不同组别之间采用单因素方差分析，相关性采用直线相关分析，检验标准a=0.05,以P＜0.05为有统计学意义。 结果：1、实验组与对照组血清甲状腺激素、ALB、CRP比较（P＜0.05），差别有统计学意义，提示实验组的血清甲状腺激素水平、血清ALB水平均低于对照组，血清CRP水平均高于对照组；透析组与非透析组比较（P＜0.05），差别有统计学意义。2、实验组相关指标的相关分析：血清甲状腺激素与ALB呈正相关（P＜0.05），与血清CRP呈负相关（P＜0.05）。 结论：1、在终末期肾病患者中，甲状腺激素水平、血清ALB水平相对于健康人明显降低，血清CRP水平相对于健康人明显升高，而透析后患者的甲状腺激素水平、血清ALB水平相对于非透析患者明显升高，血清CRP水平相对于非透析患者明显降低，以上可提示在终末期肾病患者中存在着非甲状腺疾病引起的甲状腺功能改变及微炎症症状，且合并白蛋白低下，而患者在接受透析治疗后上述症状比非透析时明显减轻。透析后患者的一般状况得到改善的原因可能与水负荷的减轻、炎症因子的有效清除、毒素的清除等有关。因此，当慢性肾脏病患者发展到终末期时，该研究可以为我们及早采取血液透析干预治疗措施减少以上并发症的发生提供一定的临床参考，进一步可减少因机体甲状腺功能改变可能带来的相关并发症的发生。2、在终末期肾病患者中，血清甲状腺激素与血清CRP呈负相关，与血清ALB呈正相关，可提示患者的甲功改变与微炎症状态的严重程度有一定的关系，因此，可为透析人群积极采取临床干预措施，如应用生物相容性高的透析膜等降低微炎症状态的发生或补充白蛋白等，进而防止甲功改变可能会导致的甲状腺激素减少进一步引起相关症状的发生及加重提供相关依据。

关键词： CORONARY heart disease   HYPOTHESIS   ANTI-inflammatory agents   CHOLESTEROL   ATHEROSCLEROTIC plaque  

摘要： Background. Besides their role in reverse cholesterol transport, HDL particles may affect the atherosclerotic process through the modulation of subclinical inflammation. HDL particles differ in size, composition, and, probably, anti-inflammatory properties. This hypothesis has never been explored in diabetic women, frequently having dysfunctional HDL. The potential relationship between lipid profile, Apo-AI containing HDL subclasses distribution, and common inflammatory markers (hsCRP, IL-6) was examined in 160 coronary heart disease- (CHD-) free women with and without type 2 diabetes. Results. Compared to controls, diabetic women showed lower levels of the atheroprotective large alpha-1, alpha-2, and pre-alpha-1 and higher concentration of the small, lipidpoor alpha-3 HDL particles (P < 0.05 all);diabetic women also had higher hsCRP and IL-6 serum levels (age- and BMI-adjusted P < 0.001). Overall, HDL subclasses significantly correlated with inflammatory markers: hsCRP inversely correlated with alpha-1 (P = 0.01) and pre-alpha-1 (P = 0.003);IL-6 inversely correlated with alpha-1 (P = 0.003), alpha-2 (P = 0.004), and pre-alpha-1 (P = 0.002) and positively with alpha-3 HDL (P = 0.03). Similar correlations were confirmed at univariate regression analysis. Conclusions. More atheroprotective HDL subclasses are associated with lower levels of inflammatory markers, especially in diabetic women. These data suggest that different HDL subclasses may influence CHD risk also through the modulation of inflammation.

关键词： 阿尔茨海默病   电针   免疫炎症反应   学习记忆能力   干预效应   动物模型  

摘要： 阿尔兹海默病（Alzheimer\'s Disease，AD），是发生于老年前期和老年期、以进行性认知功能障碍和行为损害为特征的中枢神经系统退行性病变，又称老年性痴呆，是老年期痴呆的最常见类型。临床上主要症状表现为记忆功能和认知能力的渐进性恶化，同时伴有相关神经精神症状及行为方面的障碍。\n 世界人口正在老化，80岁以上的高龄老人增长速度相比60岁以上的老人增长更快，为总人口增长速度的6倍。据有关资料显示，到二十一世纪中叶，我国60岁以上的老年人口数将达4亿左右，也就是说每4个中国人中就有1个老年人。AD是老年期痴呆的一个主要类型，患病人数约占老年期痴呆患者总人数的2/3。2009年，世界阿尔茨海默病报告:“全球患病人数超过3500万”，2010年，世界阿尔茨海默病报告:“由痴呆导致的损失为6040亿美元，超过全球GDP的1％”，是全球老年人的主要致残、致死疾病之一。AD已成为继心脏病、癌症、卒中之后，导致老年人死亡的第4大病因，严重地威胁着人类健康。因此，AD导致的个人及家庭经济上的负担和由此引发的社会问题日益严重，已经成为新世纪全人类需要共同面对的巨大挑战。\n AD属于中医学“老年呆病”的范畴，有关症状、病因病机等内容散见于健忘、善忘、痴呆、呆痴等相关病症文献中。本病起病较为缓慢，临床表现十分复杂，中医八纲辨证不明显，治疗难度较大。但以呆傻愚笨为其特征。病机上，AD为本虚标实之证，其“本”以肾虚为根本。脑为元神之府，实质上，脑主元神的物质基础是由肾中精气所化生汇聚的脑髓。随着年龄的增长，机体日趋衰老，肾精逐渐亏虚，髓海不足而无以充养，元神失去髓海的奉养，出现脑的记忆功能逐渐减退，智能的障碍，并伴有神情淡漠等症状。其“标”是在以肾虚为本的五脏功能逐渐衰退，机体产生气、血、痰浊等郁滞，痹阻于脑络及清窍，而出现眩晕，失眠，健忘等症状。\n 迄今为止，AD的治疗尚无特效的西药，现在应用和研发的药物均是针对其发病过程中的某个基因或靶向的单一治疗，并不能完全控制或改善AD患者复杂多样的临床症状，而且存在药物服用时间长、毒副作用大等弊端。与之相比，针灸疗法以其操作方便、疗效确切、安全经济、适应证广、无毒副作用等优点而受到整个医学界的认可和普遍关注。而且针灸疗法还具有多靶点、多途径、多层次的整体治疗的优势，符合类似AD等多因素多机制复杂性疾病的多靶向治疗策略。近年来的实验及临床研究已经表明，针灸治疗AD的效果显著，有关的对比研究更进一步发现针刺的疗效不亚于治疗药物，甚至在某些功能指标方面，如降低AD患者β淀粉样蛋白有优于西药的趋势。因此，深入探讨和研究针灸对AD的干预效应及其机制，对进一步推动AD的防治具有深远而重要的现实意义。\n 本研究在整体观念和脏腑经络理论的指导下，基于“肾虚渐亏”为衰老之本，围绕AD发病之“肾虚”与“失神”两大关键，针对其病变关键脏腑—脑、肾、心，以益肾固本、通督调神为治法，选用“肾俞”、“大椎”、“内关”穴，运用行为学检测、神经生化学检测、分子生物学检测等现代科学技术的方法和手段，进一步探讨电针对AD大鼠学习记忆障碍的影响，并从突触可塑性和炎症免疫两个角度，观察电针治疗AD的效应机制，为电针提高AD大鼠学习记忆能力提供科学依据。\n 方法:将SPF级Wistar大鼠，雄性，12月龄，按随机数字表分为假手术组、模型组、电针组，每组各10只。采用大鼠海马注射凝聚态Aβ25-35制备AD模型。模型组:双侧海马一次性注射凝聚态Aβ25-35。假手术组:双侧海马注射等量生理盐水。电针组:穴位选取“肾俞”、“内关”、“大椎”穴，接韩式电针治疗仪，强度为1mA，选择2Hz连续波，每次治疗20min，每天1次，每周连续治疗6次，6天为一个疗程，疗程间隔1天，共治疗2个疗程。\n 结果:1、行为学观察:Morris水迷宫的定位航行试验中，三组大鼠的逃避潜伏期随着游泳天数的增加而逐渐缩短，但是三组大鼠的学习记忆能力有明显差异。训练前2天，随着训练次数的不断增加，三组大鼠寻找平台的逃避潜伏期越来越短，表明大鼠对平台产生空间定位的记忆。第3天以后，各组大鼠的逃避潜伏期趋于稳定，但假手术组的表现优于模型组和电针组。与模型组相比，电针组大鼠的平均逃避潜伏期明显缩短(P＜0.05);与假手术组比较，模型组大鼠的平均逃避潜伏期显著延长(P＜0.01)。\n 空间探索实验中，在水下平台撤除后，假手术组大鼠能依靠外部空间的线索，在规定的120s内集中在原平台象限或相邻的两侧象限寻找平台。而模型组大鼠在规定的120s内较多表现为茫无目的地寻找，其轨迹分布于各象限。而电针组的运动轨迹多有曲折。经统计学分析:与假手术组比较，120s内模型组大鼠跨越平台次数明显减少(P＜0.01);与模型组相比，电针组大鼠跨越

关键词： 依托咪酯   大鼠   脓毒症   肿瘤坏死因子   肾上腺损伤  

摘要： 背景：脓毒症是由感染导致细菌扩散入血，细菌繁殖并产生大量毒素导致机体器官功能受损。机体对细菌病原体及内毒素剧烈而过度的免疫反应是导致脓毒症预后不良的病理基础。脓毒症（Sepsis）是外科病人围术期常见的并发症，也是ICU患者死亡的主要病因之一。肾上腺皮质激素具有显著的抗炎效果，被认为有助于治疗脓毒症。静脉麻醉药依托咪酯对循环功能抑制显著小于丙泊酚等同类麻醉药，尤其适用于危重患者的麻醉诱导，但它竞争性抑制肾上腺皮质激素合成酶CYP11B1，从而抑制肾上腺分泌皮质激素，因此临床上对其是否能安全用于脓毒症患者的麻醉诱导存在争议。但是，受炎症影响脓毒症下肾上腺功能往往亢进，因此，依托咪酯对肾上腺功能抑制是否是导致脓毒症患者死亡率增加的原因尚未证实；除了肾上腺功能抑制，依托咪酯是否还通过其他机制对脓毒症患者产生影响也尚未明确。肿瘤坏死因子α主要是由单核细胞产生的一种细胞因子，最初因其能导致肿瘤细胞坏死而命名，之后发现在脓毒症及脓毒性休时中表达明显，可以反映脓毒症时全身炎症的程度。因此本实验拟通过检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α水平的变化来评估依托咪酯对脓毒症大鼠炎症程度的影响。 目的：本实验在已建立静脉通路的大鼠上通过盲肠结扎穿孔手术复制脓毒症模型，观察依托咪酯对脓毒症大鼠生存率的影响，同时探索正常剂量和小剂量的依托咪酯对脓毒症大鼠全身炎症反应的影响，以及对肺和肾上腺组织的影响。 方法：选用雌性SD大鼠（200～240g），首先颈外静脉置管建立静脉通路，留置静脉导管并通过皮下隧道牵引至颈后以便在大鼠清醒状态下药物干预。然后行盲肠结扎穿孔术（CLP）复制大鼠脓毒症模型。大鼠随机分为4组（每组13只）：假手术组（Sham）；CLP组；ETOA组，CLP术后给予依托咪酯（0.6mg/kg）；ETOB组，CLP术后给予依托咪酯（1.8mg/kg）。CLP术后24小时采集动脉血，通过酶联免疫吸附法（ELISA）测定检测血清中肿瘤坏死因子（TNF-α）；取双侧肾上腺组织，采用冰冻切片荧光染色法观察组织坏死凋亡情况，取左肺叶切片HE染色观察肺损伤程度。每组另外10只大鼠用于观察术后7天存活情况绘制生存曲线。 结果：Sham组生存率为100%，CLP组和ETOA组生存率为60%，ETOB组为50%。CLP组、ETOA组和ETOB组三组间动物生存率比较无显著统计学差异。Sham组、CLP组、ETOA和ETOB组血清TNF-α浓度分别是102.84±42.46pg/mL，1394.15±177.34pg/mL，449.27±77.73pg/mL和649.27±97.77pg/mL。CLP组TNF-α水平较Sham组明显升高，ETOA和ETOB组TNF-α水平相对CLP组降低明显。荧光染色结果显示CLP组大鼠肾上腺坏死明显，ETOA组坏死程度明显低于CLP和ETOB组，Sham组单位视野活细胞计数为1437±163，CLP组、ETOA组和ETOB组分别为167±55，610±74和471±52。肺组织切片HE染色观察各组肺组织炎性病理改变明显，组间无明显差异。 结论：1、脓毒症大鼠的生存率不受依托咪酯的影响。2、脓毒症大鼠注射依托咪酯镇静后血清中TNF-α被明显抑制。3、脓毒症大鼠注射依托咪酯后没有加剧肺组织炎性改变。4、脓毒症大鼠在CLP术后即刻给予依托咪酯能减轻肾上腺细胞凋亡。

关键词： 高脂血症   黄连解毒汤   炎症因子   肠道菌群   PCR-DGGE   荧光定量PCR  

摘要： 研究目的 本论文采用高脂饮食建立实验性高脂血症动物模型,通过检测小鼠外周血内毒素、肿瘤坏死因子(TNF-α)以及白介素-6(IL-6)水平,研究中医经典方剂黄连解毒汤抗高脂血症状态下炎症的机制,并利用PCR-DGEE指纹图谱和实时荧光定量PCR技术研究黄连解毒汤对高脂血症小鼠肠道菌群变化的影响。 研究方法 将48只C57BL/6雄性小鼠随机分为6组：常规饮食组；常规饮食加抗生素组；高脂饮食组；高脂饮食加抗生素组；高脂饮食加黄连解毒汤高剂量组；高脂饮食加黄连解毒汤低剂量组。常规饮食组和高脂饮食组分别进食普通饲料和高脂饲料8周；黄连解毒汤组进食高脂饲料6周后分别给予高、低浓度黄连解毒汤,每只动物每天灌胃0.4mL,连续灌胃2周；抗生素组分别进食普通饲料和高脂饲料6周后用抗生素,自由饮用2周。8周后,进行血清TNF-α、IL-6和内毒素含量的检测,利用PCR-DGEE指纹图谱和实时荧光定量PCR技术进行肠道内菌群结构和种类的分析。 研究结果 1.高脂饮食组小鼠血液中总胆固醇(TC)水平显著升高,黄连解毒汤组小鼠总胆固醇水平在黄连解毒汤干预2周后无显著改变； 2.高脂血症小鼠血清中肿瘤坏死因子、白介素-6和内毒素含量明显升高,黄连解毒汤低剂量组小鼠在黄连解毒汤干预2周后,血清中的肿瘤坏死因子、白介素-6和内毒素含量均有明显下调,黄连解毒汤高剂量组各指标没有出现明显变化； 3.高脂饮食组肠道内细菌种类较多,多样性程度也比较高,正常饮食组及黄连解毒汤高、低剂量组次之,两个抗生素组小鼠肠道内细菌种类和多样性程度最低。黄连解毒汤高、低剂量组肠道的细菌种类和多样性比较相近,形成了相对稳定的细菌群落结构； 4.两抗生素组小鼠肠道内的三种益生菌几乎没有表达,与高脂饮食组相比,常规饮食组和黄连解毒汤高剂量组拟杆菌表达量显著升高,常规饮食组和黄连解毒汤低剂量组双歧杆菌表达量显著升高,黄连解毒汤高剂量组和黄连解毒汤低剂量组乳酸杆菌表达量明显增加。与常规饮食组相比,黄连解毒汤高剂量组和黄连解毒汤低剂量组乳酸杆菌表达量显著升高。 研究结论 黄连解毒汤低剂量具有改善高脂血症状态下的代谢性炎症的作用,并且对高脂血症状态下的内毒素水平具有明显下调的作用。高胆固醇饮食可以改变肠道菌落结构,变化的细菌可能与脂质代谢密切相关,从而影响高脂血症的发生发展。黄连解毒汤可以抑制影响脂质代谢的细菌的生长,调节肠道形成新的、更有益于脂质代谢的、稳定的菌落结构。高脂血症小鼠肠道中的益生菌受到了抑制,而黄连解毒汤低剂量对肠道益生菌具有良性调节作用。

关键词： 代谢性疾病   2型糖尿病   肠道菌群   优势菌群   炎性因子  

摘要： 背景与目的 慢性代谢性疾病（chronic metabolic diseases）是一组以肥胖、高血压、糖尿病、血脂异常、冠心病、脑卒中等疾病为主的代谢性临床症候群。代谢性疾病已成为严重影响人类健康的一组疾病，在遗传因素较为固定的背景下，环境因素显得尤为重。随着微生物技术的发展，分子微生物学较多的运用于肠道菌群的研究。在人体肠道内，结肠的微生物分布最密集，不同物种，肠腔分布的细菌群落种类及数量不同，由于技术和伦理学限制，只能通过对人体或动物模型粪便中提取的菌群研究分析，但粪便菌群是否可以反映肠道内主要菌群不得而知。许多研究将肠道微生物诠释为环境因素影响宿主营养、代谢及免疫功能，对人体健康十分重要。目前,体内肠道菌群失调和低活度慢性炎症状态发挥的重要作用在糖尿病及其并发症的发展中逐渐被关注。二甲双胍作为2型糖尿病患者的一线用药，其治疗效果随英国（UKPDS）结果公布得到充分肯定。关于二甲双胍对2型糖尿病患者肠道菌群的影响作用和机制鲜见报道。本研究旨在应用ERIC (enterobacterial repetitive intergenic consensus，肠道细菌基因间重复序列)-PCR技术建立各组肠道细菌DNA指纹图谱，初步探讨服用二甲双胍后是否可以纠正2型糖尿病患者肠道菌群失调、改变其慢性炎症状态及代谢紊乱，为其降糖外收益提供依据。 对象与方法 1.1对象 10例2013年2月至2013年6月于郑州大学第一附属医院内分泌科住院的2型糖尿病患者，年龄38～45岁，糖尿病病程0.3-6年。入选标准：符合1999年世界卫生组织（WHO）的T2DM诊断标准。 1.2标本收集 实验组给予（二甲双胍片0.85g tid）,规律应用2周，收集用药前、后患者新鲜粪便，密封于无菌厌氧袋;并抽取用药前后外周血，于4000rpm离心10min，取上清，所有标本于半小时内置于-80°冰箱内保存。同时观察服药前后血糖（空腹、三餐后）、血脂、炎性因子（血清中C反应蛋白、白细胞介素6、脂多糖）变化。收集10例健康人新鲜粪便及外周血作为对照。 1.3实验试剂及仪器 肠道菌群DNA基因组提取试剂盒;琼脂糖、无菌PCR小管;DNA marker、Dream Taq Green PCR Master Mix、Green-DNA Dye核苷酸胶体染料、引物;Biometra PCR;电泳仪;紫外凝胶成像系统;ELISA试剂盒;血糖仪;单道移液器;DNA浓度测定仪;高速台式离心机等。 1.4实验步骤 1）肠道菌群总DNA提取将粪便标本置于冰上解冻，用生理盐水洗涤，4000rpm离心1分钟取沉渣300g于灭菌EP管内，使用肠道菌群基因组DNA试剂盒，并按说明书步骤提取DNA。吸取2ulDNA样本用浓度议测定浓度。2）PCR扩增应用ERIC-PCR指纹图谱分析技术进行扩增，特异性引物序列ERIC1(5'-ATG AAG CTC CTG GGG AAT CCA一3’)，ERIC2(5'-AAG TAA GTG ACTGGG GTG ATG CG一3’)。PCR小管加入反应体系25μl：Dream Taq Green PCRMaster Mix12.5μl，ERIC10.5μl，ERIC2μl，water5.5μl，DNA模板量6μl（约80ng）。3）电泳成像产物电泳后在凝胶成像分析系统内观测电泳条带并拍照。4）指纹图谱分析。5）炎性因子的检验将血清标本置冰上解冻，应用ELISA试剂盒测定血清炎症因子水平。6）其他监测空腹及三餐前、餐后2h末梢血糖，于本院检验科行生化指标测定。 1.5统计方法 应用SPSS17.0统计学数据处理软件分析，连续型变量用均数±标准差（X±S）表示，两样本定量资料的比较应用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果 1.用药后空腹血糖、餐后2h血糖、血总胆固醇（T-CHO）、血清C反应蛋白（CRP）、脂多糖（LPS）、白细胞介素-6（LI-6）水平均较用药前下降，差异有统计学意义(P＜0.05)，差异具有统计学意义(P＜0.05);血甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）水平较前下降，血高密度脂蛋白（HDL）水平较前升高，但差异均无统计学意义(P＞0.05);2. ERIC-PCR指纹分析图谱显示健康人肠道菌群的DNA条带数目明显多于T2DM患者，且较亮主条带位置不同，个体DNA较亮主条带呈散在分布，成多样性分布;T2DM患者肠菌指纹图谱条带表现单一，且较量主条带位置与正常人不同;服用二甲双胍后T2DM患者肠道菌群的DNA条带数目增多，且较亮条带位置改变，与健康人相似。 结论 1.应用二甲双胍治疗2周后，T2DM患者血清中C反应蛋白、TN

关键词： 癫痕性脱毛   皮肤炎症   分子机制   肠道71型病毒   O-K适应株  

摘要： 癫痕性脱毛(AE)小鼠是一种由Gsdma3基因显性突变而导致自发脱毛的小鼠品系。其表型主要为随年龄增长而渐进性脱毛，与原发性脱毛表型相似，并伴随有皮肤增厚和褶皱等现象，以及自发的皮肤炎症。众所周知，炎性趋化因子和细胞因子在炎症反应中扮演者重要角色，已有的很多研究表明趋化因子如CCL1，CCL20等在自身免疫病和过敏反应等皮肤炎症中起着重要作用。　　AE小鼠与WT小鼠相比脾脏和外周淋巴结肿大，我们通过对AE小鼠炎症反应的研究，发现其皮肤中有严重的淋巴细胞浸润现象，且趋化因子CCL1表达量显著提高。　　为了进一步研究AE小鼠皮肤炎症的机制，我们采用了PMA诱导的接触性皮炎模型。当用PMA作用于小鼠耳朵，AE小鼠较野生对照小鼠耳朵红肿和增厚的程度更加严重，并且有显著增多的淋巴细胞浸润现象。通过检测一系列皮肤炎症相关的趋化因子和细胞因子的表达情况，我们发现在PMA作用后，TNF-a的表达显著性上调。药物作用与否对AE小鼠皮肤中趋化因子CCL1的高表达并无影响，表明AE小鼠对于PMA介导的接触性皮炎更易感，并且CCL1和TNF-a在其中起到了关键作用，我们的初步研究结果为AE小鼠自发脱毛及皮肤炎症机制提供了重要线索。