关键词： 谷氨酰胺   肠外营养   营养状况   免疫功能  

摘要： 目的评价谷氨酰胺强化肠外营养对全身炎症反应综合征(SIRS)患者术后营养状况的改善及炎性反应的影响。方法入选SIRS患者40例并随机分为试验组和对照组,各20例。患者每日所需热卡量按20 kcal·kg-1,用糖、脂双能源供能方法;试验组的氮量由20%L-丙氨酰-L-谷氨酰胺溶液供给(0.5 g·kg-1·d-1),其余部分用7%~11.4%氨基酸溶液供给,对照组的氮量仅用7%~11.4%氨基酸溶液供给。2组疗程均持续1周。比较2组患者肠外营养前后的血红蛋白、白蛋白、转铁蛋白及免疫球蛋白(Ig G、Ig A和Ig M)水平,并记录肠外营养后2组患者的营养风险筛查评分和急性生理与慢性健康评分。结果营养支持后,试验组患者血红蛋白、白蛋白和转铁蛋白水平分别为(116.5±9.2),(35.7±2.4)和(66.3±2.4)g·L-1,对照组分别为(102.5±8.6),(30.8±2.2)和(59.6±2.1)g·L-1,试验组显著高于对照组(P<0.05);试验组患者Ig G、Ig A和Ig M水平明显高于对照组,且营养风险筛查评分和急性生理与慢性健康评分显著低于对照组(P<0.05)。结论谷氨酰胺强化肠外营养对SIRS患者效果显著,可改善患者的营养状况,并有利于其免疫功能的恢复。

关键词： DUCHENNE muscular dystrophy   INFLAMMATION   OBESITY complications   PHYSIOLOGICAL effects of cytokines   C-reactive protein   LEPTIN   ADIPONECTIN   CREATINE kinase   THERAPEUTIC use  

摘要： Inflammation described in patients with Duchenne muscular dystrophy (DMD) may be related to loss of muscle function or to obesity. It is unknown if circulating proinflammatory cytokines (IL-6, IL-1, and TNF-alpha) levels are associated with muscle function. The purpose was to evaluate whether an association exists between systemic inflammation with muscle function and nutritional status in DMD patients. In 66 DMD patients without corticosteroid treatment, the following were evaluated in serum: cytokines (IL-1, IL-6, and TNF-alpha), C-reactive protein (CRP), leptin, adiponectin, and creatine kinase (CK). Muscle function was evaluated using Vignos Scale. Patients with better muscle function had the highest concentration of CK, IL-1, and TNF-alpha compared with less muscle function. No differences in IL-6 and adiponectin concentration were identified among groups with different levels of muscle function. Also, no differences were observed in the concentration of cytokines among groups with different nutritional status levels (underweight, normal weight, and overweight/obese). However, CRP and leptin were increased in the obese group compared with normal and underweight subjects. Systemic inflammation is increased in patients with better muscle function and decreases in DMD patients with poorer muscle function;nevertheless, systemic inflammation is similar among different levels of nutritional status in DMD patients.

关键词： 免疫炎症反应   MST4基因   泛素连接酶   磷酸化调控   巨噬细胞  

摘要： 脊椎动物在进化的过程中产生了两种免疫系统（固有性免疫系统和获得性免疫系统），固有性免疫系统构成了人体抵御外界病原体感染的第一道防线。其中Toll样受体(TLRs)是一类重要的病原体模式识别受体(PRR)，通过识别病原体相关的分子模式(PAMP)，大多数的Toll样受体(TLRs)会激活中间信号分子TRAF6。TRAF6的活化会促进NF-κB转录因子的激活和炎症细胞因子的产生。因此，TLR通过TRAF6所介导的免疫炎症反应的正确调控对机体抵抗病原体入侵以及自身稳态的维持具有重要的意义。　　MST4是GCKⅢ激酶家族的成员，已有的研究证据表明MST4在免疫相关的组织中高表达，如胸腺，淋巴细胞以及周边血细胞等。而在固有性免疫反应过程中，我们发现在细菌感染刺激的情况下MST4的转录水平和表达水平都会出现剧烈的波动，而同时MST4能够抑制TLR4所介导的免疫炎症反应。进而发现MST4能够直接和TRAF6相互作用并通过磷酸化TRAF6的第463和486位的苏氨酸来抑制TRAF6自身的寡聚以及自身的泛素化修饰。Traf6-/-的MEF细胞中过表达的TRAF6突变体(T463A/T486A)在LPS刺激下能够促进细胞因子的产生，但这种促进作用不受MST4的抑制。在败血症休克刺激的条件下，MST4水平被敲低的小鼠会表现出炎症反应的加剧以及存活率的下降;然而在Traf6杂合（Traf6+/-）的小鼠中，上述因MST4水平的敲低而导致的机体损伤会被减弱，这说明MST4通过TRAF6发挥抑制免疫炎症反应的作用。进而发现当小鼠的巨噬细胞被敲除后，在LPS刺激情况下，MST4水平被敲低的小鼠不再会表现出炎症反应的加剧以及存活率的下降。综上所述，本论文的研究揭示了MST4通过TRAF6的磷酸化来调控免疫炎症反应的新机制，并且突出了MST4对免疫炎症反应的抑制作用主要是通过巨噬细胞来实现的。

关键词： 抑郁   细胞因子   免疫   CA125   人附睾蛋白4   凝血异常  

摘要： 目的分析抑郁对卵巢癌患者炎性细胞因子、细胞免疫功能及肿瘤标志物CA125、人附睾蛋白4(HE4)、血胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)水平和预后的影响以及相互关系研究。方法选取2010年1月～2013年1月肥城矿业中心医院妇科收治的130例Ⅱ-Ⅲ期(国际妇产科协会,FIGO)卵巢癌患者。所有患者均符FIGO临床分期Ⅱ期～Ⅲ期。患者入院后以Beck抑郁问卷量表评分分为正常组(24例)、轻度抑郁组(抑郁组轻,21例)、中度抑郁组(抑郁组中,36例)、重度抑郁组(抑郁组重,49例)。于检测当日晨空腹抽取外周静脉血测淋巴细胞计数变化及流式细胞仪分析T细胞亚群,比较***8阳性细胞及NK细胞的比率,分析调节性T细胞(CD4+CD25+T细胞)亚群水平,对比分析2组患者免疫功能水平变化。利用电化学发光法及酶联免疫吸附法检测患者血清及腹水中CA125、人附睾蛋白4(HE4)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)水平变化,利用酶联免疫吸附法检测患者血清中白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)含量,采用乳胶增强免疫比浊法检测血浆D-二聚体,血液分析仪检测血小板计数水平。追踪随访2年,比较2组患者临床生存率差异。结果1、细胞免疫功能变化：正常组、抑郁组轻,抑郁组中,抑郁组重患者血浆中CD4-细胞的百分率分别为[(37.93±6.28)%.(33.04±5.29)%.(27.91±6.05)% 、(21.38±4.76)%.F=2.989,P=0.005]；CD8+细胞的百分率分别为[(28.82±5.16)%、(29.05±4.28)%、(31.84±3.79)%、(34.39±3.16)%、F=2.653,P=0.005] ; CD3+细胞的百分率分别为[(72.48±6.73)%、(70.65±5.86)%、(67.36±4.94) %、(63.10±3.40)%、F=3.039,P=0.003]；NK细胞的百分率分别为[(25.84±3.96)%、(23.86±4.05)%、(19.58±3.78)%、(16.26±3.81)%、F=2.684,P=0.005] :CD4+CD25+T细胞占CD4+T淋巴细胞的比例分别为[(8.93±1.37)%、(14.95±3.86)%、(28.36±4.89)%、(34.26±5.75)%、F=3.068,P=0.003]、外周血淋巴细胞计数[(1.47±0.39)×109/L、(1.52±0.33)×109/L、(1.32±0.39)×109/L、 (1.11±0.40)×109/L；t=2.884],4组之间差异有统计学有意义(P<0.05)。2、血清及腹水中CA125、HE4、IGF-I水平变化：正常组、抑郁组轻,抑郁组中,抑郁组重患者血清CA125分别为[(32.81±3.76)U/ml.(39.16±4.28)U/ml、 (51.36±5.27)U/ml.(79.35±8.28)U/ml、F=3.895,P=0.001]；血清HE4水平分别为[(345.87±89.26)pmol/L、(376.28±78.53)pmol/L、(412.38±81.36)pmol/L (465.28±90.21)pmol/L、F=3.158,P=0.003]；血清IGF-I水平分别为[(187.37±45.28)ng/mL、(179.28±51.89)ng/mL、(168.27±69.02)ng/mL、(121.58±42.31)ng/mL 、F=2.853,P=0.005]；腹水CA125分别为[(38.39±4.28)U/ml、(47.16±5.05)U/ml 、(59.84±6.03)U/ml、(88.26±8.94)U/ml、F=3.683,P=0.001]；腹水HE4水平分别为[(368.27±90.26)pmol/L、(399.26±88.23)pmol/L、(456.82±89.75)pmol/L 、(499.64±93.58)pmol/L、F=3.263,P=0.003]；腹水IGF-I水平分别为[(154.49±41.06 )ng/mL、(168.16±47.35)ng/mL、(139.51±42.92)ng/mL、(105.38±37.28)ng/mL 、F=2.990,P=0.005]；血清与腹水中CA125、HE4、IGF-I的相关系数分别为0.863、0.617、0.361。3、血浆D-二聚体、血小板计数水平：正常组、抑郁组轻,抑郁组中,抑郁组重患者血清PLT计数分别为[(156.98±36.71)×109/L、(168.25±47.03)×109/L、 (171.90±52.64)×109/L、(316.85±69.17)×109/L、F=3.048,P

关键词： VNN1   Hepcidin   炎症   铁代谢  

摘要： 铁代谢紊乱是一种常见的疾病,与炎症、糖尿病、心血管等代谢性疾病息息相关,严重影响着人们的生活质量。因此,深入研究机体铁代谢的精密调控显得尤为重要。Hepcidin是一种肝脏合成并分泌的抗菌多肽,富含半胱氨酸,它在调控机体铁稳态中起着关键性作用。简单地说,机体内的Hepcidin可以与位于巨噬细胞和肠细胞的细胞膜表面的Ferroportin1 (FPN1)蛋白结合,进而将其内化和降解。由于FPN1是胞内铁输出的唯一通道,所以,Hepcidin可以通过调节FPN1来调控机体铁运输。机体内Hepcidin的水平处于动态平衡中,如果这个平衡被打破,会导致铁的缺乏或过载,从而引发一系列疾病。因此,维持机体Hepcidin的动态平衡就变得至关重要。研究表明,Hepcidin的表达受多种因素的调节,如机体的铁水平、炎症和缺氧。除此以外,人类许多代谢性紊乱疾病也与Hepcidin的紊乱密切相关,如遗传性血色素沉着病(hereditary hemochromatosis, HH)、炎性贫血(anemia of inflammation, AI)、慢性肾病(chronic kidney diseases)等。临床数据显示,在慢性炎症病人体内Hepcidin的表达比健康人群要高,从而引发炎性贫血。对于这方面的机制研究,目前仅停留在炎性因子IL-6可通过STAT-3 (signal transduction and activator of transcription-3)信号通路增加Hepcidin的表达,但哪些媒介物传递炎症信号来调控肝铁稳态尚未知晓。VNN1是一种在肠和肝脏组织中高表达的GPI-锚定蛋白质,具有泛酰巯基乙胺酶的活性。该酶水解泛酰巯基乙胺(pantetheine)形成巯基乙胺(pantothenic acid, vitamin B5)和半胱胺(Cysteamine)。研究表明,半胱胺(Cysteamine)在体内通过巯基二硫化物的交换反应生成氧化形式的胱胺(Cystamine),而胱胺正是许多重要代谢途径的关键调节因子。实验证明,VNN1全身性敲除的小鼠能抵抗2,4,6-三硝基苯磺酸基酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS)造成的大肠炎。然而,令人惊奇的是,用胱胺处理上述小鼠可以完全逆转这种保护机制。综合前人的研究结果,我们不难发现炎症信号、VNN1及Hepcidin之间似乎存在着某种联系,因此,本文主要探究在炎症状态下,VNN1调节肝脏Hepcidin表达及肝铁稳态的分子机制。本文主要采用功能获得(gain-of-function)和功能缺失(loss-of-function)的过表达和干扰的方法。在细胞水平研究炎症状态下,VNN1调节Hepcidin表达及其分子机制。运用VNN1腺病毒和小干扰RNA siVNN1介导的过表达和干扰技术,采用实时定量PCR和Western Blot分析VNN1对Hepcidin表达的影响。同时,运用普鲁士蓝染色的方法分析肝铁堆积情况。在分子机制层面,我们检测了NF-κB的活性变化。随后,运用荧光素酶报告基因检测(Luciferase reporter assay)实验,研究VNN1调控hepcidin基因启动子的转录活性的机制。我们的研究结果证明,在小鼠的原代肝细胞中,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)能显著性地上调VNN1和Hepcidin的表达水平,该结果暗示了VNN1可能在LPS调控Hepcidin表达的过程中发挥着潜在的作用。过表达VNN1浓度梯度依赖性地增加Hepcidin的表达和肝铁堆积,而干扰VNN1出现相反的效果。上述结果表明,VNN1和Hepcidin的表达水平呈正相关性。最重要的是,干扰VNN1有效地拮抗LPS诱导Hepcidin的表达及肝铁紊乱。在分子机制层面上,NF-κB作为经典的信号通路参与调控炎症反应,同时,近年报道也表明在hepcidin基因启动子的-509 bp有一个NF-κB的结合位点,可以激活hepcidin基因的转录,所以,我们推测VNN1可能是通过激活NF-κB的活性在转录水平调控hepcidin基因的表达。我们通过细胞免疫荧光实验表明VNN1激活NF-κB的核转位。此外,BAY 11-7082 (NF-κB的抑制剂)处理能部分削弱过表达VNN1对Hepcidin的上调效果。普鲁士蓝染色的结果也验证了上述结果。细胞免疫荧光实验进一步说明NF-κB参与VNN1调控Hepcidin表达的过程。而干扰VNN1也能部分缓解LPS对NF-κB的激活效果。荧光素酶报告基因检测实验表明,干扰VNN1有效地抑制LPS对hepcidin基因启动子的激活作用。另一方面,我们的实验中VNN1的水解产物半胱胺(C

关键词： 全身炎症反应综合征   阳明热证   白虎汤   炎症因子  

摘要： 目的:通过观察白虎汤对全身炎症反应综合征模型大鼠炎症因子的影响、各重要脏器(肝脏、肺脏、肾脏)的损伤程度及体温变化水平等情况,从炎症因子表达及调控的角度评价SIRS发热期与阳明热证的相关性以及中医治疗阻断SIRS发热期发生发展的作用机理,并在方证相应理论指导下,阐释SIRS发热期的关键中医病机,为SIRS的临床治疗提供新的实验依据及中西医结合理论指导。方法:健康Wistar大鼠70只,均为雄性,大鼠体重控制在200±20g,饲养于室温为(22±2)℃的实验室中,正常喂养一周。在制造SIRS大鼠模型前3天,每日测量大鼠体温1次,测量部位选为肛门,尽量保证在每天同一时间和同一地点测量,减少误差。排除体温波动大于1.0℃的和某一次测量体温高于38.0℃的大鼠。从中选出合格大鼠60只,采用随机数字表法,随机分成5组,即空白组、模型组、安慰剂组、中药组及西药组,每组大鼠为12只。按实验要求造模及药物干预后,观察大鼠肝脏、肺脏、肾脏病理情况、血浆促炎细胞因子(TNF-α和IL-6)及抗炎细胞因子(IL-10)的浓度水平及体温变化情况。结果:1.空白组大鼠无明显改变,呼吸平稳,活动正常,大便成形,颜色为棕黑色。剩余各组在注射大肠杆菌内毒素0.5 h后,大鼠出现呼吸频率加快、被毛凌乱无光泽、活动减少等症状,部分大鼠甚至出现腹泻症状。中药组合西药组小鼠状态比模型组略好。模型组在24h内死亡4只大鼠,安慰剂组在24h内死亡3只大鼠,2组大鼠死亡率比较无统计学意义。2.除空白组外各组大鼠静脉注射大肠杆菌内毒素后,体温均明显升高。但各组大鼠发热达到体温最高值时的时间点不同,发热持续时间也不同。给予药物治疗后,中药组体温最先开始下降,其次是西药组,模型组最后。在3h时中药组、西药组体温明显低于模型对照组,差别有统计学意义。3.中药组和西药组的IL-6、IL-10、TNF-α水平均低于模型对照组和安慰剂组,其中IL-6差别都有统计学意义(P<0.05),中药组的TNF-α水平低于模型组,差别有统计学意义(P<0.05)。IL-10中药组、西药组水平皆低于对照组和安慰剂组,但差别不明显,无统计学意义。4.病理组织学观察结果肝脏、肾脏未见明显病理改变,组间差异不明显。肺组织肉眼观察可见模型组、安慰剂组肺组织颜色加深,呈暗红色,肺组织表面肿胀明显,柔软度下降,甚至可见明显的片状淤斑和片状出血。中药组和西药组肺组织肿胀不明显,组织表面可见散在的淤斑和点状出血,中药组略好与西药组。光镜观察可见空白组大鼠肺组织结构无明显病理改变;模型组大鼠肺间质充血明显伴多量以淋巴细胞为主的炎细胞浸润,肺泡隔明显增厚,部分肺泡代偿性扩张;西药组大鼠肺间质轻度充血,肺泡隔轻度增厚,偶见局灶性炎(淋巴细胞为主);中药组大鼠肺间质充血,肺泡隔增厚,增厚范围较模型组减小。结论:本实验采用治疗阳明热证的白虎汤治疗LPS诱导的大鼠SIRS,结果证实白虎汤能明显降低细胞因子TNF-α、IL-6的水平,提高动物的存活率,并减轻肺等器官损害。以方测证,说明阳明热证与全身炎症反应综合征发热期具有密切的相关性,通过采用治疗阳明热证的方药可阻断SIRS的进一步传变,将有效降低MODS、MOF的发生。

关键词： 脓毒症   抑炎因子   促炎因子   炎性反应   免疫功能  

摘要： 目的：通过腹腔注射LPS建立脓毒症大鼠动物模型,分别予四逆汤及其组方中各味药灌胃,观察并比较其对大鼠模型炎性反应和免疫功能的影响,探索四逆汤中起主要作用的药材,以及证实中药配伍后的药效相对于各自单味药药效的提升作用,探讨其可能机制。方法：选36只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组(n=6)、模型组(n=6)、附子组(n=6)、干姜组(n=6)、炙甘草组(n=6)及四逆汤组(n=6)。腹腔注射LPS (5mg/kg)制备脓毒症大鼠模型。药物按照《伤寒论》中四逆汤原方比例选取中药颗粒剂,即附子、干姜、甘草按照5：3：2比例配置。除正常对照组及模型组外,其余各组均于制模后立刻予药物汤剂灌胃(10ml/kg),每12小时给药一次。模型组给予等量生理盐水。正常对照组不予任何处理。分别于制模后2、24、48小时经眼眶采血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脓毒症大鼠血清HLA-DR、白细胞介素(IL-1、IL-10)和肿瘤坏死因子-a(TNF-a)的表达水平,并于造模后48小时,处死大鼠取其肺组织标本,染色后观察其病理改变情况。结果：在腹腔注射LPS后,各组大鼠IL-1和TNF-a水平均较正常对照组升高(P<0.01),而各组大鼠IL-10水平较正常组出现明显下降(P<0.01)。造模2h后,各组大鼠IL-1、IL-10和TNF-a水平无明显差异(P>0.05)。在24h和48h两个节点,附子组(FZ组)和四逆汤组(SNT组)IL-1和TNF-a水平均较除正常对照组外的其余组下降,且存在统计学意义(P<0.01),其中SNT组下降幅度明显优于FZ组(P<0.01)。模型组(NS组)、干姜组(GJ组)和甘草组(GC组)IL-1和TNF-a水平在这两个时间节点均无明显差异(P>0.05)。在24h、48h两个节点,GC组和SNT组IL-10水平均较其余造模的大鼠组升高(P<0.01),其中SNT组上升幅度高于GC组(P<0.05),NS组、FZ组和GJ组IL-10水平在24h、48h无明显差异(P>0.05)。在2h和24h,造模后的各组大鼠HLA-DR水平均较正常组升高,且无差异(P>0.05),但到48h,较除正常对照组外的其它组,SNT组HLA-DR水平下降幅度明显较小,存在明显统计学差异(P<0.01),而NS组、FZ组、GJ组、GC组在三个时间节点的HLA-DR水平均无明显差异(P>0.05)。肺组织病理结果示：在造模后48h, SNT组部分肺泡扩张融合,而NS组、FZ组、GJ组和GC组肺泡扩张融合明显,并有肺泡隔的增厚和大量炎症细胞的浸润。结论：口逆汤能够调节机体全身炎症反应的平衡,具有促进血浆中抑炎因子IL-10表达以及抑制促炎因子IL-1、TNF-α表达的双向调节作用,可以延缓HLA-DR的下降趋势,并可以减轻肺组织的炎症细胞浸润,保护肺泡完整性；附子对血浆中促炎因子IL-1、TNF-α表达有一定的抑制作用,但对抑炎因子IL-10表达和肺组织的保护无明显作用；甘草对抑炎因子IL-10表达有一定的上调作用,但对促炎因子IL-1、TNF-α以及HLA-DR表达无明显影响,对肺组织亦无保护作用；干姜无论是对促炎因子IL-1、TNF-α,抑炎因子IL-10及HLA-DR表达均无影响,对肺组织亦无保护作用。但四逆汤中各单味药对机体炎症反应的影响均远不如四逆汤成方的作用,并且均无四逆汤对肺组织结构的保护作用。

关键词： 全身炎症反应综合征   粘连性小肠梗阻   预测因子  

摘要： 目的:研究全身炎症反应综合征(SIRS)作为粘连性小肠梗阻(ASBO)手术治疗独立预测因子的可行性。方法:回顾性分析2008年5月至2014年8月青岛大学附属医院和潍坊市益都中心医院普外科524例诊断为ASBO的患者资料,按照手术与否分为手术组(254例)和非手术组(270例)。分析对比两组间SIRS的每个变量(体温T,心率HR,呼吸R,白细胞WBC);SIRS因子的数量(0,1,2,3,4);SIRS(是或否)、及其他因素。结果:SIRS诊断指标中T、HR、R、WBC阳性与否与是否进行手术治疗密切相关,手术组与非手术组卡方检验差异均有统计学意义(P<0.05)。SIRS检验阳性参数项每增加一项,病人进行手术的风险增加2.444倍(OR=2.444);SIRS阳性病人需要进行手术的风险是阴性的3.043倍(OR=3.043)。结论:SIRS可以作为判断是否对粘连性小肠梗阻病人进行手术治疗的独立预测因子,以指导粘连性小肠梗阻病人治疗。

关键词： 血液透析患者   微炎症   炎症状态   特发性膜性肾病   生血宁片   肾脏病理   腹膜透析   慢性肾脏病  

关键词： 小肠干细胞   谱系追踪   炎性细胞   放射损伤  

摘要： 小肠绒毛是机体内增殖最活跃的组织之一,小肠粘膜上皮细胞终身在不断地自我更新,这一过程依赖小肠隐窝中的干细胞的持续增殖、分化取代外层的终末分化细胞来完成。当照射剂量<8Gy，隐窝细胞出现凋亡,照射剂量>14Gy,隐窝细胞消失,绒毛出现脱落。因此胃肠的放射损伤及恢复程度与隐窝细胞或者干细胞的损伤、再生密切相关。小肠干细胞分子表面标志的研究进展缓慢,一直制约着对小肠干细胞调控及胃肠损伤机制的研究。直到近几年来,利用基因小鼠模型和谱系追踪技术,才成功的鉴定到了多种小肠干细胞的分子表面标志,确定了小肠干细胞的位置和分群。目前鉴定的小肠干细胞主要分为2类,一类为静息干细胞,主要位于小肠隐窝基底部+4位,表面标志包括Bmi1, mTert, Hopx及Lrig1等,另一类为Lgr5标记的循环干细胞。其中,lgr5循环干细胞对辐射敏感,而辐射耐受的静息干细胞可在激活后补充循环干细胞和快速增殖的TA细胞。前期我们的研究结果表明,S1P1受体调节剂对小肠隐窝细胞有明显的保护作用。S1P1是磷脂类分子S1P的的G蛋白偶联受体,主要分布在血管内皮细胞和淋巴细胞上。在维持血管通透性和完整性、淋巴细胞发育和循环上有重要的作用。因此本实验第一部分主要应用带有小肠干细胞特征标志的模式动物,如小鼠、小鼠等,研究Lgr5标记的连续分裂ISCs和Bmi1标记的静态ISCs放射损伤特点,研究S1P1受体调节剂对放射后小肠干细胞组织重建的调控作用。首先我们培育并鉴定、鼠,然后通过他莫西芬诱导并在诱导后5d观察到荧光细胞从隐窝开始向绒毛顶尖处移动,由此建立了小肠干细胞分析检测方法。其次通过不同照射剂量的摸索观察放射对小肠干细胞的影响,发现在10Gy腹部照射和12Gy全身照射下,可观察到小肠干细胞在照射后从消失到再生的过程。随后研究了S1P1受体调节剂对不同照射剂量下小肠干细胞组织重建的调控作用,发现S1P1受体调节剂CYM5442对16Gy高剂量局部照射小鼠没有明显的治疗作用;在15Gy全身照射后3.5d CYM5442并不能有效的增加Lgr5+细胞的数量,但能有效的促进隐窝细胞的增殖。我们通过分离不同肠道组织(十二指肠、空肠、回肠、结肠),发现10Gy和12Gy全身照射下S1P1受体激动剂CYM5442能在照射后3.5d和7d提高各个肠段组织再生隐窝的数量。应用qPCR的方法检测了15Gy照射后干细胞相关基因(Lgr5、olfm4、mTert、Hopx、Lrig1、Bmi1、Ascl2)的表达,发现S1P1受体调节剂CYM5442在照后6h显著提高这些基因的表达、照后1d对mTert、Bmil等+4位基因依然有着提高的作用,照后3.5d对干细胞相关基因则影响不大。小肠粘膜在辐射诱导的免疫炎性反应中是高敏感的器官。小肠在受到放射损伤后会产生大量的细胞因子。因此在第二部分实验中我们应用流式细胞分析等技术重点观察天然免疫细胞如中性粒细胞、单核—巨噬细胞等在照后不同时间的变化,分析炎症免疫细胞浸润与放射损伤发生、发展的关系,并研究S1P1受体调节剂对炎性反应的调控作用。我们通过分离小鼠小肠固有层细胞,发现在15Gy全身照射后24h和48h,SlP1受体调节剂CYM5442能显著减少中性粒细胞的数量,但对其它类型的细胞群体没有影响。随后用qPCR的方法检测了15Gy照射后炎性因子相关基因(白介素类IL-1b、IL-6、IL-10、IL-12b,趋化因子Ccl2、Ccl5, Cxcl1、Cxcl2、Cxcl10,粘附分子Icaml、Vcaml)的表达,发现S1P1受体调节剂CYM5442在照射后6h抑制白介素类和趋化因子,提高粘附分子的表达。照射后1d反而提高白介素类和趋化因子,抑制粘附分子。照射后3.5d则对这些基因影响不大。我们通过S1P1受体调节剂对小肠干细胞组织功能重建机制以及放射引起的肠道组织炎性反应的研究,可以更好的揭示急性放射病发病新机制,同时也为基于靶点的抗放药物设计提供了基础。