关键词： 帕金森病   脑内炎症   小胶质细胞   单核细胞   免疫耐受  

摘要： 目的:脑内的炎症反应是许多神经系统变性病共同存在的发病机制，而帕金森病(PD)作为发病率第二的严重危害中老年人健康的神经系统变性病，包括脑内小胶质细胞的激活、前炎性因子的过度释放及细胞内活性氧(ROS)系统过度激活的脑内炎症是PD的重要病因。其中小胶质细胞是中枢神经系统免疫活动的核心，其活化后具备抗原提呈、吞噬、释放超氧离子及前炎性因子等能力，能对周围的神经元造成损伤，因而对小胶质细胞激活及脑内炎症的有效调控成为影响PD的关键。　　尽管受到血脑屏障的保护，中枢神经系统一直受到外周免疫的深刻影响。一次大剂量LPS腹腔注射诱发的外周炎症足以引起健康中枢神经系统的免疫激活和多巴胺神经元的变性死亡。外周血单核细胞(PBM)是外周免疫的启动者，处于启动调控外周免疫的核心地位，同时外周血单核细胞与小胶质细胞同属单核巨噬细胞系统，具有相似的起源、功能及受体表达，且PBM具有变形穿越能力，它能穿越血脑屏障入脑演变成小胶质细胞或血管周巨噬细胞等脑内特殊巨噬细胞群直接或间接参与中枢炎症反应，因此不难推测PBM在外周与中枢的联系中扮演了重要角色，是外周影响中枢免疫活动的重要通路。　　免疫耐受是机体面对持续抗原威胁或连续打击的一种保护机制，它避免了不必要损伤的发生，是机体防御机制的重要组成部分，而单核巨噬细胞系统在免疫耐受的整个过程中发挥了主要的作用。PD患者外周血中持续存在能够诱导PBM发生免疫耐受低剂量的LPS，而实际上PD患者外周血免疫细胞处于激活状态，提示PD患者可能存在PBM免疫耐受的障碍，而PBM的免疫耐受障碍的存在可能是PD患者脑内炎症失控的一个重要发病机制。CD200R是PBM表面常规表达的受体，积极参与了巨噬细胞的免疫下调，同时CD200/CD200R通路与免疫耐受密切相关。我们既往的研究结果显示PD患者外周血单核细胞衍生的巨噬细胞在应激环境中CD200/CD200R通路难以有效发挥作用。因此我们推测CD200/CD200R通路积极参与了PBM的免疫下调，CD200/CD200R通路异常可能是PD患者外周PBM免疫耐受失败的重要机制。　　考虑到低剂量LPS能够诱导PBM发生免疫耐受，而PBM是外周免疫与中枢连接的重要中介，我们推测低剂量LPS诱导了PBM的免疫耐受，使其免疫活动下调，后者影响并限制了脑内炎症的发展，使更多神经元免于无辜的炎症损伤，从而对损伤神经元起到保护作用。而该过程中PBM免疫耐受的形成是抑制小胶质细胞活化、下调脑内炎症、保护神经元存活的关键。因此PBM的免疫耐受有可能是中枢神经系统自身保护、避免过度炎症损伤的重要外周机制。　　方法:1、为了获得能够诱导大鼠PBM免疫耐受的合适的LPS剂量，我们采用NS、LPS0.1mg/kg、LPS0.3mg/kg、LPS0.9mg/kg剂量梯度连续4天间隔24小时腹腔注射，于第5天我们采用贴壁法得到大鼠外周血PBM并再次给予LPS100ng/ml刺激，通过刺激后细胞上清前炎性因子TNF-α、IL-1β含量及PBM表面抗原TLR4的变化情况来确定大鼠免疫状态以得到能够诱导PBM免疫耐受的合适的LPS剂量。2、我们采用大剂量LPS（5mg/kg）腹腔注射来诱导大鼠脑内炎症模型。同时为了验证PBM在外周LPS诱导脑内炎症的作用，我们采用氯膦酸二钠脂质体鼠尾静脉注射来耗竭大鼠的PBM，即PBM耗竭组。实验分为4组:正常对照组(n=15)、LPS组(n=15)、PBM免疫耐受+LPS组(n=15)、PBM耗竭+LPS组(n=15);分别对各组大鼠大剂量LPS腹腔注射后48h内的生存率进行鉴定。3、为了对PBM及PBM的免疫状态对脑内炎症的影响进行研究，分别对LPS组(n=6)、PBM免疫耐受+LPS组(n=6)、PBM耗竭+LPS组（n=6）各组予大剂量LPS注射后的2h、1d、7d对外周及中枢的免疫状态进行鉴定，包括外周血上清前炎性因子TNF-α、IL-1β含量及PBM表面抗原TLR4、CD200R的变化，脑内黑质前炎性因子TNF-α、IL-1β的含量及小胶质细胞的激活标记物CD68、MHCⅡ的表达情况及各组黑质多巴胺能神经元的存活情况。4、为了对CD200/CD200R通路在PBM免疫耐受形成中的作用进行研究，我们在体外采用以终浓度为10ng/ml的LPS的10％培养基孵育24h诱导PBM的免疫耐受并采用终浓度为5ug/ml的抗CD200R1抗体阻断CD200/CD200R通路。我们将贴壁法提取的正常大鼠的PBM分为对照组、PBM免疫耐受组(10ng/ml LPS)及PBM免疫耐受+anti-CD200R1组（10ng/ml LPS+5ug/ml anti-CD200R1抗体），分别孵育24小时后给予LPS100ng/ml再刺激4h后检测各组细胞培养上清中TNF-α及IL-1β含量，

关键词： 降钙素原   白细胞介素-6   全身炎症反应综合征   脓毒症   鉴别诊断  

摘要： 目的:探讨降钙素原（PCT）与白细胞介素-6（IL-6）联合检测鉴别诊断ICU患者脓毒性和非脓毒性全身炎症反应综合征（SIRS）的临床价值。方法:选择2013年2016年入住我院ICU的100例患者,包括61例非脓毒性SIRS患者与39例脓毒症患者,同时选择同期50例健康者作对照,分别设为非脓毒性组、脓毒血症组及对照组,采用电化学发光分析法检测三组血清PCT与IL-6水平,并以PCT为2μg/L和IL-6为50 ng/L为临界值来鉴别非感染性SIRS和脓毒血症,评价联合检测的临床诊断价值。结果:非脓毒性组PCT与IL-6最大值分别为0.91±0.54μg/L、62.77±11.75 ng/L,脓毒血症组为24.49±5.00μg/L、1542.69±361.66 ng/L,对照组为0.08±0.06μg/L、3.68±1.11 ng/L,非脓毒性组与脓毒血症组PCT与IL-6最大值均显著高于对照组（P<0.05）;与非脓毒性组比较,脓毒血症组PCT与IL-6均显著升高（P<0.05）。非脓毒性组PCT>2μg/L、IL-6>50 ng/L的占比分别为21.31%、65.57%,脓毒血症组为92.31%、87.18%,脓毒血症组PCT>2μg/L、IL-6>50 ng/L的占比均显著提高于非脓毒性组（P<0.05）。PCT的阳性预期值、灵敏度、特异度均显著高于IL-6,而联合检测的阳性预期值、特异度显著高于IL-6及PCT,联合检测的灵敏度显著高于IL-6,P均<0.05。结论:PCT与IL-6联合检测有助于脓毒性和非脓毒性SIRS的鉴别诊断。

关键词： 蛛网膜下腔出血   芬戈莫德   免疫炎症反应   调节性T细胞   自然杀伤细胞   炎症因子   早期脑损伤   脑血管痉挛  

摘要： 目的自发性蛛网膜下腔出血（SAH）具有高致残率和高死亡率的临床特点。目前,SAH的神经功能障碍尚缺乏行之有效的治疗方法。观察SAH早期免疫炎症反应的变化,并应用新型免疫抑制剂芬戈莫德（Fingolimod）干预,探索SAH治疗的新途径。方法第一部分:于基因表达数据库（GEO）下载小鼠脑基底动脉基因芯片（GSE46696）,使用微阵列分析假手术组（Sham组）和模型组（SAH组）样本各3份的基因变化,应用Cytoscape软件对差异表达基因进行功能分析、通路富集分析以及基因-基因互相作用分析。第二部分:假手术组（Sham组）和造模组（SAH组）小鼠各12只,分别于造模后1d、3d各选取6只小鼠应用流式细胞仪检测脑组织自然杀伤细胞（NK）、CD4+和CD25+内源性调节性T细胞（Treg）,分别于造模后1d、3d各选取6只小鼠应用Western Blot检测脑组织免疫炎性因子,根据本论文第一部分分析结果,对相对显著的免疫炎性因子或炎症通路IL-1β、TNF-α、NF-κB和TLR4进行检测。第三部分:本部分实验分为假手术组（Sham组）、造模+生理盐水安慰剂组（SAH+Saline组）、造模+芬戈莫德治疗组（SAH+Fingolimod组）,SAH+Fingolimod组于造模后2h、48h、72h分别给予Fingolimod（FTY720）腹腔注射,给药浓度为0.1mg/m L（按体重计算每只小鼠给药约200-230μg）。分别于3组中造模给药后第1d、3d抽取小鼠6只,应用流式细胞仪检测模型脑组织自然杀伤细胞（NK）、CD4+和CD25+内源性调节性T细胞;分别于3组中造模给药后第3d抽取小鼠6只,应用Western Blot检测模型脑组织炎症细胞因子或炎症通路IL-1β、TNF-α、NK-κB、TLR4;分别于3组中造模给药后第1d、3d、7d、14d抽取小鼠6只,检测脑组织水含量;分别于3组中造模给药后第1d、3d、7d、14d抽取小鼠6只,自鼠尾静脉注入2%伊文蓝（EB）溶液,检测脑组织EB含量;分别于3组中造模给药后第1d、3d、7d、10d、14d抽取小鼠6只,应用mNNS评分和Morris水迷宫实验,进行小鼠神经功能评估。结果第一部分:小鼠SAH模型脑基底动脉的基因芯片及免疫炎症因子的功能分析,可以发现在SAH早期免疫炎症反应有可能是导致预后不良的重要原因,其中IL-1β、TNF-α等炎症因子和NF-κB、TLR4等炎症通路的显著变化有可能是SAH早期脑损伤（EBI）严重程度的敏感标志之一。第二部分:SAH造模后早期NK细胞/CD3+T细胞的百分比明显增高,与Sham组比较,差异具有统计学意义（均P<0.05）;SAH组CD4+和Foxp3+T细胞与CD4+T细胞计数的比例,与Sham组比较,略有升高,差异无统计学意义（均P>0.05）;Western Blot检测脑组织免疫炎性因子或通路IL-1β、TNF-α、NF-κB和TLR4与β-action蛋白的比例明显升高,与Sham组比较,差异具有统计学意义（均P<0.05）。第三部分:SAH早期,SAH+Saline组和SAH+Fingolimod组NK细胞、CD3+T细胞计数高于Sham组,SAH+Fingolimod组低于SAH+Saline组,差异具有统计学意义（均P<0.05）;SAH+Fingolimod组CD4+和Foxp3+T细胞计数高于SAH+Saline组,差异具有统计学意义（均P<0.05）;SAH+Fingolimod组IL-1β、TNF-α、NF-κB和TLR4表达均低于同时间点SAH组,SAH+Fingolimod组炎性因子或通路的蛋白表达与β-action蛋白的比例均低于同时间点SAH组比较,差异具有统计学意义（均P<0.05）;第3d、7d检测SAH+Fingolimod组脑组织水含量明显低于SAH+Saline组,差异有统计学意义（均P<0.05）;第3d、7d检测SAH+Fingolimod组脑组织EB含量明显低于SAH+Saline组,差异有统计学意义（均P<0.05）;自第3d起SAH+Fingolimod组mNSS评分明显低于SAH+Saline组,差异有统计学意义（P<0.05）;应用Morris水迷宫评价,SAH+Fingolimod组认知功能改善情况明显好于SAH+Saline组,获得性训练和对位性训练指标比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论SAH后发生的EBI是多种途径的病理生理变化,对脑组织的损伤非常严重,继而出现的CVS更是加重了脑损伤的程度。免疫炎症反应越来越得到关注与重视,直接影响预后,通过本实验可以初步判定免疫炎症变化是SAH早期脑损伤的重要因素,免疫细胞和炎症因子在脑损伤及修复过程中发挥了重要的作用。

关键词： 脑梗死   全身炎症反应综合征   多器官功能障碍综合征   Th17细胞   Treg细胞  

摘要： 目的:观察Th17、Treg细胞及其相关细胞因子在急性脑梗死(ACI)诱发全身炎症反应综合征(SIRS)致多器官功能衰竭(MODS)中的变化,探讨Th17/Treg细胞失衡在ACI诱发SIRS致MODS中的作用,为ACI诱发SIRS致MODS患者的早期诊断和治疗提供重要的理论依据。方法:选择2015年7月至2016年7月我院神经内科诊断急性脑梗死患者且资料完整者139例,按照1991年美国胸科医师协会/危重病协会提出的SIRS的诊断标准以及1995年在庐山制定的MODS诊断标准分为单纯ACI组、ACI诱发SIRS组、ACI诱发SIRS致MODS组共3组,正常对照组为我院健康体检者。所有实验组患者及正常对照组均于清晨空腹采集肘静脉血5ml,EDTA抗凝。新鲜血于2小时内离心获得血清,采用双抗体ELISA法、化学比色法、鲎试验法、全自动免疫比浊定量测定法检测血清IL-6、IL-10、IL-17、IL-21、TGF-β、TNF-α、hs-CRP、内毒素水平的变化,余下的血液采用密度梯度离心法,分离外周血单个核细胞,6-8小时内上机做流式细胞检测Th17及Treg细胞。分析Th17/Treg细胞失衡在ACI诱发SIRS致MODS过程中的作用。结果:1.所有各组研究对象在性别、年龄、吸烟史、高血压、糖尿病、高脂血症的差异均无统计学差异(P>0.05)。2.正常对照组、单纯ACI组、ACI诱发SIRS组、ACI诱发SIRS致MODS组外周血中CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞占总CD4+T细胞比例的情况分别为:5.48±0.43%、4.31±0.43%、2.71±0.31%、1.37±0.33%,CD4+IL-17A+Th17细胞占总cd4+t细胞比例的情况分别为:0.96±0.33%、2.10±0.42%、5.13±0.58%、6.76±0.44%。与正常对照组相比,单纯aci组、aci诱发sirs组、aci诱发sirs致mods组外周血中cd4+cd25+foxp3+treg细胞占总cd4+t细胞比例均降低(p<0.01),cd4+il-17a+th17细胞占总cd4+t细胞比例均升高(p<0.01);aci诱发sirs组及aci诱发sirs致mods组与单纯aci组相比cd4+cd25+foxp3+treg细胞占总cd4+t细胞比例明显下降(p<0.01),而cd4+il-17a+th17细胞占总cd4+t细胞比例明显升高(p<0.01);cd4+cd25+foxp3+treg细胞占总cd4+t细胞比例及cd4+il-17a+th17细胞占总cd4+t细胞比例在aci诱发sirs致mods组和aci诱发sirs组中的变化水平亦具有差异(p<0.01)。***17细胞相关的细胞因子tnf-α、il-6、il-17、il-21在正常对照组血清中的水平分别为:11.87±2.37pg/ml、37.32±6.39pg/ml、16.57±4.58pg/ml、49.11±11.27pg/ml,单纯aci组的水平分别为:15.66±2.39pg/ml、63.35±8.95pg/ml、55.62±11.92pg/ml、76.23±15.31pg/ml,aci诱发sirs组的水平分别为:22.78±2.48pg/ml、99.32±13.83pg/ml、121.67±18.05pg/ml、106.68±9.82pg/ml,aci诱发sirs致mods组的水平分别为:32.23±4.39pg/ml、152.95±18.31pg/ml、151.08±33.72pg/ml、121.76±6.44pg/ml。单纯aci组、aci诱发sirs组、aci诱发sirs组致mods组血清中tnf-α、il-6、il-17、il-21的含量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05),与单纯aci组相比,aci诱发sirs组、aci诱发sirs致mods组升高更明显(p<0.05),aci诱发sirs组和aci诱发sirs致mods组相比,差异亦具有统计学意义(p<0.05)。***细胞相关的细胞因子il-10、tgf-β在正常对照组血清中的水平分别为:32.94±3.18pg/ml、415.33±49.31pg/ml,单纯aci组的水平分别为:24.98±3.22pg/ml、341.29±39.82pg/ml,aci诱发sirs组的水平分别为:13.46±3.44pg/ml、128.89±26.03pg/ml,aci诱发sirs致mods组的水平分别为:6.13±2.09pg/ml、73.79±16.80pg/ml。il-10、tgf-β在单纯aci组、aci诱发sirs组、aci诱发sirs致mods组血清中的含量均明显低于正常对照组(p<0.

关键词： 多囊卵巢综合征   慢性低度炎症状态   证候分布规律  

摘要： 目的:本课题以调查问卷的形式,收集多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者的临床资料,分析多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者的中医证候分布规律,为中医药治疗多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态提供辨证依据。方法:查阅相关文献、征询专家意见,结合研究目的制定“多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者的中医证候分布规律”调查表。收集多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者的临床资料,运用聚类分析的方法分析四诊资料,探讨多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症患者的中医证候分布规律。结果:(1)本课题通过对300例多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者的32个四诊指标进行系统聚类分析,最终获得四种证候分布,按构成比由高到低依次为:脾虚痰湿证、肾虚血瘀证、气滞血瘀证、肝经湿热证,脾虚痰湿证在四个证型中所占构成比最高,为34.7%,肾虚血瘀证次之,为28.7%;(2)脾虚痰湿证患者体重指数及HOMA-IR水平高于其他证型组患者;(3)随体重指数及HOMA-IR水平的升高,多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症患者体内C反应蛋白水平以及淋巴细胞水平随之增高。结论:(1)多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症患者主要有四种中医证候分布,分别为:脾虚痰湿证、肾虚血瘀证、气滞血瘀证、肝经湿热证,其中脾虚痰湿证所占的构成比最高,为多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症患者的主要中医证候分布;(2)年龄、病程与本病中医证候分布无关,体重指数及HOMA-IR水平影响本病的中医证候分布;(3)多囊卵巢综合征伴慢性低度炎症状态患者体内的C反应蛋白及淋巴细胞水平受体重指数及HOMA-IR水平的影响。

关键词： 乙肝   基因型   免疫   细胞因子  

摘要： 目的:通过观察比较B、C基因型乙肝病毒感染HEK-293T细胞后分泌细胞因子产生的免疫炎症反应差异,作为B和C基因型乙肝病毒和临床病情是否相关的参考,从而对乙肝基因型与临床相关性的发生机制作补充,为临床治疗提供方向。方法:随机选取2015年1月至2015年9月至南昌市第九医院门诊和住院就诊的慢性乙型肝炎患者(HBV-DNA均为阳性)的血清标本254例。性别、年龄不限。并排除其他合并的疾病,且未进行性抗病毒治疗。诊断符合2015年中华医学会肝病学分会,中华医学会感染病学分会联合制订的慢性乙型肝炎防治指南。采用多对型特异性引物巢式PCR法鉴定并筛选出血清标本中的B、C两种基因型,随机选取B、C基因型15例。分别扩增B、C基因型血清标本中HBV病毒的s和c基因片段。采用克隆技术构建含有s和c基因片段表达绿色荧光蛋白的重组真核表达质粒,转染至HEK-293T细胞中,检测该细胞中IL-1β、TNF-α等的细胞因子分泌的水平。分析各组间的临床特征、IL-1β、TNF-α水平的差异。采用SPSS20.0软件进行统计学分析。P<0.05具有统计学意义。结果:转染B基因型的s片段细胞中IL-1β水平为(143.89±46.48)pg/ml、TNF-α水平为(7.97±1.03)pg/ml,c片段细胞中IL-1β水平为(253.62±65.12)pg/ml、TFN-α水平为(8.65±1.07)pg/ml;C基因型的s片段中IL-1β水平为(40.96±29.29)pg/ml,TNF-α水平为(4.22±0.56)pg/ml,c片段中IL-1β水平为(35.78±19.31)pg/ml,TNF-α水平为(3.39±0.33)pg/ml。结论:乙肝病毒B基因型中基因片段在体外HEK-293T中的免疫炎症介质表达量明显高于C基因型。这或许是一个与临床致病性不同有关的因素。能从某种程度上证实两种基因型在体外细胞免疫反应过程中的不同。这为我们提供了另一个慢性乙型肝炎的研究角度。

关键词： 肺疾病,慢性阻塞性   PM2.5   肺泡巨噬细胞   吞噬   氧化应激   炎症   党参多糖   肺疾病,慢性阻塞性   PM2.5   肺泡巨噬细胞   Delta1   Delta4   IL-6   Notch1   免疫失衡   Th17   Treg   IL-17   IL-10  

摘要： PM2.5加剧慢性阻塞性肺疾病小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能障碍机制研究及党参多糖的保护作用背景与目的:大气污染物主要成分细颗粒物(空气动力学当量直径小于等于2.5μm的颗粒物,简称PM2.5)的浓度增加可导致呼吸系统疾病的发病率、就诊人次增加,慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者在PM2.5升高时更加容易发生急性加重,但具体机制不清。肺泡巨噬细胞(AM)吞噬功能降低可能与慢阻肺急性加重相关,但PM2.5对慢阻肺AM吞噬功能影响研究较少。传统中药党参因其免疫调节、抗炎、增强免疫力等作用被广泛应用于肺部疾病的预防和治疗,但因中药成分复杂,其具体作用机制不清,其主要成分党参多糖(CPP)具有提高巨噬细胞吞噬功能、抗氧化抗炎作用,但在慢阻肺中的应用鲜见报道。因此,本研究拟探讨PM2.5对慢阻肺小鼠AM吞噬功能缺陷的影响,PM2.5造成的肺组织氧化应激水平、肺组织和全身炎症反应水平,并探讨CPP对PM2.5加剧慢阻肺小鼠AM吞噬功能、氧化应激及炎症反应的保护作用及机制。方法:50只SPF级雄性BALB/c小鼠按照随机数字表法分为健康对照组、慢阻肺组、慢阻肺PM2.5组、慢阻肺CPP组、慢阻肺CPP+PM2.5组,每组10只。采用单纯香烟烟雾暴露连续90d建立慢阻肺小鼠模型,所有PM2.5干预组给予PM2.5(770μg/m3)雾化吸入连续90d,所有CPP干预组给予CPP(300mg/kg)灌胃连续90d。造模结束后采用小鼠无创体描箱检测肺功能,吸气峰流速(PIF)和呼气峰流速(PEF);颈椎脱臼法处死小鼠,经气管生理盐水全肺灌洗获得支气管肺泡灌洗液(BALF),无菌获取肺组织,检查其病理形态学改变,计算肺平均内衬间隔(MLI);采用不连续密度梯度离心法分离AM,流式细胞术检测AM吞噬荧光素异硫氰酸酯标记的大肠杆菌(***)的能力,用平均荧光强度(MFI)、吞噬***阳性细胞百分比(吞噬%)表示。分别用菲罗啉比色法、硫代巴比妥酸比色法、改良Hafeman法检测肺组织匀浆总抗氧化物能力(TAC)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)水平。用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法检测BALF和血清中白介素(IL)-6、IL-8、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平。结果:1.小鼠肺功能:慢阻肺组PIF和PEF:(7.63±0.94)、(4.43±0.63)显著低于健康对照组组(11.85±1.28)、(7.38±0.82),慢阻肺PM2.5组PIF和PEF:(5.62±0.53)、(3.11±0.41)显著低于慢阻肺组(均P<0.01),慢阻肺CPP组PIF和PEF:(8.79±0.51)、(5.98±0.34)和慢阻肺CPP+PM2.5组PIF和PEF(6.45±0.45)、(3.64±0.39)分别显著高于慢阻肺组和慢阻肺PM2.5组(均P<0.01)。2.病理学改变:慢阻肺组肺组织有炎症细胞浸润和肺泡腔扩大、肺泡壁破坏等肺气肿改变,MLI比健康对照组显著扩大(55.51±2.17比32.92±1.30)(P<0.01),慢阻肺PM2.5组上述改变较慢阻肺组严重,MLI(61.69±1.84)进一步扩大(P<0.01),慢阻肺CPP组和慢阻肺CPP+PM2.5组则分别较慢阻肺组和慢阻肺PM2.5组减轻,MLI(43.25±1.50、57.78±1.69)也较各自对照组缩小(P<0.01)。***吞噬功能:慢阻肺组MFI、吞噬%:(4939±924)、(30.90±5.19)%显著低于健康对照组(10222±1567)、(69.11±5.59)%(均P<0.01),慢阻肺PM2.5组MFI、吞噬%:(3293±543)、(20.91±3.51)%显著低于慢阻肺组(均P<0.01),慢阻肺CPP组MFI、吞噬%:(5903±484)、(38.53±2.84)%和慢阻肺CPP+PM2.5组MFI、吞噬%:(4064±418)、(26.88±1.84)%分别显著高于慢阻肺组和慢阻肺PM2.5组(均P<0.01)。4.氧化应激水平:慢阻肺组TAC和GSH-PX:(6.83±0.36)、(46.49±2.59)显著低于健康对照组(17.99±0.09)、(84.32±5.65)(均P<0.01),慢阻肺PM2.5组TAC和GSH-PX:(3.61±0.29)、(32.37±3.78)显著低于慢阻肺组(均P<0.01),慢阻肺CPP组TAC和GSH-PX:(8.80±0.26)、(53.40±4.02)和慢阻肺CPP+PM2.5组TAC和GSH-PX:(5.43±0.30)、(42.42±3.95)分别显著高于慢阻肺组和慢阻肺PM2.5组(均P<0.01)。慢阻肺组MDA水平(2.73±0.22)显著高于健康对照组(1.74±

关键词： 炙甘草汤加减   脾肾阳虚   高脂血症   微炎症状态   干预机制  

摘要： 目的:通过对脂质代谢紊乱与微炎症状态相关性文献梳理后,检测临床患者血脂与炎症因子相关指标,运用现代统计学方法进行相关处理,阐述高脂血症与微炎症状态相关性,探讨炙甘草汤加减对高脂血症的影响及微炎症状态的改善作用,揭示其临床机制,从而为完善炙甘草汤治疗高脂血症提供科学可靠的依据。方法:随机化设计对照组和观察组,每组30人,对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上给予炙甘草汤加减口服干预,疗程结束后予以空腹抽取静脉血,检测患者血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)水平。结果:治疗前两组患者TC、TG、LDL与IL-6、CRP含量水平明显升高,提示两组患者存在脂质代谢紊乱与微炎症状态;与对照组治疗后比较,观察组治疗后血清TC(P<0.05)、TG(P<0.05)、LDL(P<0.05)水平显著降低,HDL(P<0.05)水平显著升高,IL-6(P<0.05)、CRP(P<0.05)含量水平明显降低。结论:炙甘草汤加减可以调控脂质代谢紊乱,改善患者微炎症状态,其机制可能通过下调TC、TG、LDL水平,升高HDL水平,从而抑制血清IL-6分泌与释放,减少CRP合成相关。

关键词： IL-32   TSLP   角膜上皮   caspase-1   NF-κB  

摘要： 目的:探讨白介素-32(Interleukin-32,IL-32)和胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)在人角膜上皮细胞炎症反应中的作用及调控机制。方法:(1)不同浓度(2、10、50ng/ml)的IL-32刺激人角膜上皮细胞,应用荧光定量PCR和ELISA检测HCECs中TSLP、IL-6、TNFαm RNA和蛋白的表达变化,同时用免疫组化技术定位TSLP蛋白在人角膜上皮组织中的表达;(2)应用Western blot检测上述各组角膜上皮细胞中caspase-1的活性,加入caspase-1抑制剂VX-765后分别应用Western blot、荧光定量PCR和ELISA检测caspase-1活性、TSLP m RNA和蛋白水平的表达变化;(3)用同种型Ig G抗体(5μg/m L)、TSLP抗体(5μg/m L)、NF-k B抑制剂喹唑啉(NF-k B-I,10μM)以及caspase-1抑制剂VX-765预处理人角膜上皮细胞1小时,然后用IL-32(10ng/m L)刺激HCECs4小时后应用荧光定量PCR检测IL-6和TNFαm RNA水平的表达,刺激48小时后用ELISA检测IL-6和TNFα蛋白水平的表达。结果:(1)IL-32刺激人角膜上皮细胞后可引起TSLP、IL-6、TNFαm RNA和蛋白水平表达升高,呈一定的时间和浓度依赖性,差异有统计学意义(p<0.05),TSLP蛋白在未经处理的角膜组织细胞质中表达,而在经IL-32(50 ng/ml)处理48小时后的供体角膜上皮组织中,TSLP在角膜各层中的表达均显著增强;(2)IL-32促进caspase-1的活化,并且具有浓度依赖性,加入caspase-1抑制剂后,caspase-1的活性明显受到抑制,TSLP m RNA和蛋白水平的表达也明显减少,差异有统计学意义(p<0.05);(3)TSLP抗体、NF-κB抑制剂喹唑啉和caspase-1抑制剂VX-765能够显著抑制IL-32介导的促炎因子(TNFα和IL-6)m RNA和蛋白的表达,而同种型Ig G抗体对TNFα和IL-6的表达无明显的抑制作用,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:IL-32和TSLP是参与人类角膜上皮炎症反应的重要的细胞因子,IL-32通过caspase-1信号通路上调TSLP的表达;IL-32通过caspase-1/TSLP/NF-κB信号通路介导角膜上皮的炎症反应。

关键词： 钙磷代谢   血脂代谢   微炎症状态   血液透析   腹膜透析  

摘要： [目的]近年来,随着慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)发病率的增高,终末期肾脏病(end stage renal disease,ESRD)发病率也逐年升高,尽管血液透析、腹膜透析及肾移植延长了 ESRD患者生存时间,但透析患者死亡率仍明显升高[1]。ESRD患者常常出现多种并发症,如水、酸碱平衡紊乱,钙磷代谢紊乱,血脂代谢异常,心血管疾病等。已有多项研究证实ESRD患者的高磷血症和严重继发性甲状旁腺亢进,可以引起心血管系统并发症,如冠状动脉、心脏瓣膜及大动脉发生钙化,且病死率增高[2][3]。而心脑血管疾病是透析患者主要的死亡原因。目前微炎症状态已成为CKD研究领域的热点之一,有研究指出,炎症指标是维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者心血管疾病及死亡的预测因素之一[4]。也有研究指出,持续性非卧床腹膜透析(continous ambulatory peritoneal dilaysis,CAPD)患者也存在微炎症状态,这种微炎症反应一方面会逐渐使腹膜纤维化,腹膜超滤功能衰竭,另一方面会增加心血管事件的风险[5]。由此可见MHD和CAPD患者的微炎症状态可能是影响透析患者心血管事情的危险因素之一,这是国内外临床研究者的共识。但对于ESRD透析患者微炎症状态与血脂及钙磷代谢异常有无相关性,目前尚无明确定论。有研究显示:CAPD患者微炎症因子水平与肌酐、血钙、血磷、胆固醇水平无关[6]。也有研究表明MHD患者血(high sensitive C reactive protein,hs-CRP)与总胆固醇、甘油三脂、低密度蛋白胆固醇间呈明显正相关,与高密度蛋白胆固醇及钙磷代谢间无明显相关性[7]。本研究通过分析透析患者微炎症状态与脂代谢及钙、磷代谢的相关性,为透析患者减少并发症、延长生命、减少医疗费用寻找有效的方法和途径,并为今后进一步的研究透析患者微炎症反应发生机制提供理论依据。[方法]1.病例资料选取选取昆明医科大学第一附属医院及第二附属医院2015年6月-2016 年 6 月 CAPD 患者 31 例为腹膜透析(peritoneal dilaysis,PD)组:PD 组,男16例,女15例。选取同时期昆明医科大学第一附属医院MHD患者31例为血液透析(hemodialysis,HD)组:HD组,男15例,女16例。另选18名健康志愿者为对照组,男10例,女8例。2.透析方式(1)血液透析血液透析患者使用日本威高透析机,聚砜膜透析器以无糖透析液行碳酸氢盐透析,透析膜面积1.3～1.7m2,抗凝剂使用普通肝素或低分子肝素,血流量为200～250 m L/min,透析流量为500 m L/min,钾离子、钙离子浓度分别为2.0 mmol/1L和1.5mmol/L。透析2～3次/周,3～4h/次,脱水1.5～3.5kg。(2)腹膜透析即给予1.5%或2.5%浓度的乳酸盐透析液,溶液量为2000 ml/次,每天进行腹膜透析时,要在透析过程中至少更换4次腹透液,实行24 h不间断透析。3.临床血标本收集用化学发光免疫分析法检测hs-CRP、血甲状旁腺素。全自动生化分析仪检测血肌酐、尿素氮,总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、甘油三酯、血钙、血磷等。4.统计方法用统计方法分析各个观察指标,P<0.05为差异有统计学意义。[结果]***组患者血钙的达标率为45.2%,PD组患者血钙达标率为16.1%,HD患者血钙达标率高于PD组患者,差异有统计学意义(P><0.05);而PD组患者血磷达标率(45.2%)、甲状旁腺素达标率(51.6%)高于HD组患者血磷达标率(32.3%)、甲状旁腺素达标率(32.3%),但差异无统计学意义(P>0.05)。***组患者总胆固醇达标率(96.8%)、低密度脂蛋白胆固醇达标率(93.5%)、甘油三酯达标率(80.6%)高于PD组患者总胆固醇达标率(90.3%)、低密度脂蛋白胆固醇达标率(90.3%)、甘油三酯达标率(71.0%);高密度脂蛋白胆固醇达标率(38.7%)低于PD组患者高密度脂蛋白胆固醇达标率(54.8%),但差异均无统计学意义(P>0.05)。3.与正常对照组相比,HD组患者及PD组患者的血hs-CRP升高,差异有统计学意义(P<0.05),但HD组患者与PD组患者的血hs-CRP相比,差异无统计学意义(P>0.05)。***组患者总胆固醇、血钙、血磷、血甲状旁腺激素及钙磷乘积较正常对照组升高,高密度脂蛋白胆固醇较正常组下降,差异均有统计学意义(P<0.05);而甘油三脂及低密度脂蛋白胆固醇与正常对照相比较差异无明显统计学意义(P>0.05)。***组患者总胆固醇、血磷、血甲状旁腺激素及钙磷乘积较正常对