关键词： 骨髓脂肪沉积   骨代谢   长期慢性低度炎症   动物模型   巨噬细胞  

摘要： 目的：衰老，肥胖，糖尿病等慢性疾病使机体处于慢性低度炎症状态，长期慢性低度炎症是导致骨量丢失的重要原因，并常常伴有髓内脂肪沉积增多，其机制未明。巨噬细胞极化表型与炎症状态密切相关并可影响骨代谢，同时内脏或皮下脂肪沉积常伴有巨噬细胞浸润及极化改变，因此我们推测巨噬细胞的极化表型改变很可能是慢性低度炎症相关的髓内脂肪沉积及骨代谢异常联结的关键所在。本研究旨在通过建立长期慢性低度炎症模型，观察骨代谢及髓内脂肪沉积的变化，并进一步探讨该过程中巨噬细胞极化状态改变，以探索巨噬细胞在相关病理状态下对骨代谢产生影响的潜在机制。　　方法：21只5周龄C57BL/6J雄性小鼠，适应性饲养三周，随机分为三组：对照组（SD组，n=7），普通饲料喂养;高脂组（HFD组，n=7），高脂饲料喂养;脂多糖组（LPS组，n=7），普通饲料喂养+腹腔注射LPS4/3μg/g/d，均处理90天;每周监测体重，观察小鼠体重变化趋势，眼球内眦静脉取血测血常规，进行白细胞计数，取左胫骨行micro-CT检查，观察胫骨干骺端骨质疏松的状态，取右胫骨行石蜡切片染色，观察成骨标志物 ALP表达，HE染色观察骨髓脂肪的变化，RT-PCR观察骨髓内炎症因子IL-1β，IL-6，TNF-α及巨噬细胞表型标志物M1：CD16，CD86，M2：CD206的表达。　　结果：小鼠每周体重变化趋势图显示，实验起始时，三组小鼠体重无明显差异（P＞0.05），应用4/3μg/g/d LPS处理小鼠第一周，小鼠体重较起始时下降约13%，第2-12周LPS组体重呈增长趋势，但仍均低于SD组，而HFD组体重均高于SD组，但处理90天后SD组，HFD组，LPS组三组体重无统计学差异。白细胞计数示：SD组,HFD组，LPS组白细胞计数依次升高，三组之间均有统计学差异。皮下脂肪/体重， SD组均高于HFD组和LPS组（**P＜0.01），HFD组高于LPS组（*P＜0.05），且均有显著差异性，附睾脂肪/体重，HFD组均高于SD组和LPS组，有统计学差异， LPS组低于SD组，无统计学差异。石蜡切片HE染色显示：空泡样结构为脂肪细胞，LPS组与HFD组脂肪细胞多于SD组，LPS组较SD组增多更明显，各组之间均存在显著差异性（P均＜0.01）。观察microCT重构胫骨三维，二维图像发现，LPS组和HFD组与SD组相比，在骨的干骺端骨小梁明显减少，LPS组减少更为显著。microCT重构分析示：LPS组与HFD组骨矿化密度（BMD）均较SD组显著性降低（**P＜0.01），而LPS组与HFD组相比，无明显差异。microCT重构分析示：LPS组与 HFD组较SD组相对骨体积(BV/TV)明显减少（*P＜0.05）,LPS组减少更明显,而LPS组与HFD组差异无显著性;LPS组和HFD组骨小梁数目（Tb.N）和骨小梁厚度（***）均较SD组降低,但是差异无统计学意义;LPS组和 HFD组骨小梁分离度（***）较 SD组轻度增高，但是无统计学差异。骨髓内 ALP染色显示：灰黑色沉淀为 ALP，LPS组和HFD组内ALP表达量均较SD组减少，LPS组减少尤为显著。LPS组和HFD组IL-6，TNF-α炎症因子基因表达均较SD组增高，均有显著差异（**P＜0.01），LPS组和HFD组与SD组相比，IL-1β表达量虽均有增高，但是只有LPS组有统计学差异。IL-1β，IL-6，TNF-α的表达量在HFD组与LPS组之间均无明显差异性。LPS组和HFD组M1型表面标志物CD16，CD86基因表达均较SD组增高，差异有显著性（**P＜0.01），LPS组M2型表面标志物CD206基因表达较SD组降低，差异有显著性（**P＜0.01），而HFD组与SD组相比，差异无显著性。　　结论：高脂和低剂量LPS长期刺激机体造成慢性低度炎症状态，导致骨髓脂肪沉积，骨量减少，巨噬细胞向M1转变，髓腔内炎症水平升高，巨噬细胞介导的炎症状态可能是骨髓脂肪对骨代谢产生的影响的关键机制。

关键词： 血小板生成素   血小板   急性炎症状态  

摘要： 研究背景与研究目的血小板生成素(Thrombopoietin,TPO)是由位于染色体3q26.3-3q27上的单拷贝基因编码的糖蛋白,编码基因由7个外显子和6个内含子组成。TPO主要由肝细胞产生,肾脏、骨髓基质细胞、内皮细胞等也可少量表达,是血小板生成最重要的调控因子,其调节巨核细胞增殖分化及促使血小板生成的作用是通过与其特异性受体c-Mpl相互作用产生。然而,c-Mpl除存在于造血细胞上,心肌细胞、神经细胞、内皮细胞等表达c-Mpl也被陆续证明。并且血小板上c-Mpl具有吸附、内化、破坏TPO的功能,结合血清中TPO水平通常与血小板、巨核细胞数量负相关,Kuter等提出外周血血小板数量对TPO的循环水平有负反馈作用。在血小板增多的人群中,血小板对TPO破坏增多,导致血浆TPO水平减少,减少血小板生成;而对于血小板减少的人群,血小板对TPO破坏明显减少,使血浆中TPO水平升高,促进血小板数量增多。然而,目前有越来越多研究提出,除受到血小板数量的调节外,TPO在血清中水平还受到其他机制的调控。其中炎症状态被认为是重要的一项调节机制。在既往对于脑梗死、川崎病、脓毒血症、手术后状态等一系列炎症性疾病与TPO水平相关的研究中显示,TPO水平与炎症状态及部分炎症因子具有相关性,其变化并可能受到炎症状态影响。但既往研究对象多为单一病种,炎症水平状态不一致,且病例数较少,难以说明在不同炎症性疾病状态下TPO均受炎症作用影响。因此,本研究将从多种急性炎症性疾病入手,评估不同炎症水平状态下血清中TPO水平的变化,并探讨其临床意义。研究内容与研究方法本研究通过病例对照研究,对急性炎症状态患者与健康体检者间TPO血清水平及血细胞计数进行比较,确定病例组(急性炎症状态患者)的TPO血清水平是否高于对照组(健康体检者),不同炎症水平下TPO血清水平是否有变化,并观察相应状态下血细胞计数的变化。1.研究对象:根据研究对象选择标准于2016年3～9月经南方医科大学南方医院、佛山市第一人民医院、深圳市罗湖区人民医院急诊科收治的急性心肌梗死、急性脑梗死、急性创伤、细菌性肺炎四种疾病共65例急性炎症状态患者作为病例组。其中男性42例,女性23例,患者年龄(47.98±12.33)岁。急性心肌梗死组患者15例,根据梗死部位有广泛前壁7例,下侧壁2例,下壁3例,心内膜下3例;急性脑梗死患者15例,根据Adama分类法有大面积梗死4例,小面积梗死6例,腔隙性梗死5例;急性创伤组患者25例,包括全身多处锐器伤9例,中等面积深Ⅱ度烫烧伤7例,肋骨、上肢骨多处断裂伤5例,严重颅脑挫裂伤4例;急性肺炎组患者10例。另选择同期体检健康者42例作为对照组,年龄(48.55±18.21)岁,其中男性27例,女性15例。2.方法:收集病例组与对照组的外周血标本测定TPO血清水平及血常规。1)外周血TPO血清水平测定:采用定量夹心酶联免疫吸附试验方法,并且所有操作由专人完成。2)血常规测定:由所在医院检验科进行。3.统计学方法采用SPSS20.0软件进行统计学分析,计量资料结果以X±SD表示。应用独立样本t检验对炎症疾病组与对照组TPO水平及血常规等临床资料进行比较;将炎症疾病组根据疾病种类不同分为四个亚组,采用多个独立样本Kruskal-Wallis H检验比较炎症疾病各亚组、对照组间TPO水平及血常规间的差异,并进一步应用Nemenyi法检验进行多个独立样本间的两两比较。所有P值均为双向,并定义P<0.05为差异有统计学意义。研究结果1.t检验结果:与对照组比较,总炎症疾病组TPO血清水平明显升高(P<0.001),且白细胞计数差异显著(P<0.001);而红细胞计数、血红蛋白及血小板计数差异无统计学意义(P>0.05);2.多重比较结果:1)TPO血清水平均数从对照组、脑梗组、心梗组、创伤组到肺炎组依次增加,其在各组间多重比较(P<0.001)。其中,与对照组比较,心梗组(P=0.002)、脑梗组(P<0.001)、创伤组(P<0.001)及肺炎组(P<0.001)的TPO血清水平差异显著;肺炎组与心梗组(P=0.048)和脑梗组(P=0.016)间、创伤组与脑梗组间(P=0.030)存在统计学差异,其余两组间比较差异不显著。2)而白细胞数均数从对照组、心梗组、脑梗组、创伤组到肺炎组依次增加,5组间差异具有统计学差异(P<0.001)。其中,与肺炎组比较,脑梗组(P=0.003)、心梗组(P=0.003)及对照组(P<0.001)的白细胞数具有统计学差异;同时,与创伤组相比,心梗组(P=0.013)、脑梗组(P=0.015)及对照组(P<0.001)也具有显著差异;而在肺炎组和创伤组间及脑梗组、心梗组和对照组间均差异不显著。3)血小板数(P=0.447)、红细胞数(P=0.121

关键词： 异烟肼   斑马鱼   肝损伤   炎症状态   凋亡   内质网应激   药物转运体  

摘要： 目的:1、利用无毒剂量的内毒素(LPS)预处理引起斑马鱼产生炎症反应,建立基于炎症状态斑马鱼的药物肝毒性评价模型。2、确定肝损伤药物异烟肼(INH)对斑马鱼的量-毒关系,比较INH对正常和炎症状态斑马鱼的肝脏毒性作用差异。3、基于炎症状态斑马鱼模型,研究炎症状态下INH的肝毒性作用特点,阐述其肝毒性作用机制。方法:1、斑马鱼内毒素炎症模型的建立:以正常发育3 dpf(day post-fertilization,dpf)的绿色荧光标记肝脏细胞、红色荧光标记中性粒细胞和巨噬细胞Tg系(lfabp:EGFP;lyz:DsRED2)转基因斑马鱼为实验对象,将不同浓度的LPS(0.025、0.05、0.1 mg/mL)以渗透方式连续给药72 h,每24 h换药液,分别于施药24、48、72 hpe(hour post exposure,hpe)时观察并记录死亡率、畸形率和体长,同时在显微镜下观察斑马鱼形态变化;应用Tg系(lfabp:EGFP;lyz:DsRED2)转基因斑马鱼实时观察不同浓度的LPS对斑马鱼红色荧光标记的中性粒和巨噬细胞迁移聚集的变化、绿色荧光标记的肝脏形态及荧光强度的影响。通过以上实验筛选LPS产生炎症且无肝损伤的造模剂量。2、炎症状态下INH的肝脏毒性研究:(1)INH对正常状态斑马鱼的量-毒关系研究。采用健康发育至3 dpf的斑马鱼,将不同浓度的INH(1、2、4、6、8、16 mM)以渗透方式连续给药72 h,每24 h换药液。分别于施药24、48、72 hpe时记录死亡率、畸形率、体长、形态和肝脏面积及荧光强度变化,HE染色观察斑马鱼肝组织病理改变。(2)INH对炎症状态斑马鱼的肝脏毒性研究。采用正常发育3 dpf的斑马鱼,应用实验1确定的LPS染毒剂量造模,实验分为溶剂对照组、LPS组、INH组、LPS+INH组,分别于施药后24、48、72 hpe观察并记录各实验组斑马鱼的死亡率、畸形情况、炎症效应、肝脏形态、肝脏荧光强度和卵黄囊吸收情况,对各组斑马鱼进行药物器官毒性评分,检测各组斑马鱼行为学差异,测定ALT和AST含量,HE染色观察斑马鱼肝组织病理改变。3、炎症状态下INH的肝毒性机制研究。采用电镜观察各组药物作用72 hpe时斑马鱼肝脏细胞内细胞核、线粒体和内质网等细胞器的变化,利用Quantitative Real-time-PCR方法检测与内质网应激、凋亡和药物转运体信号通路相关因子的基因转录水平。结果:1、0.025 mg/mL剂量的LPS可诱发斑马鱼产生炎症反应,该剂量可引起明显的中性粒和巨噬细胞聚集,但对斑马鱼幼鱼的形态发育和肝脏无毒性作用;大于0.05 mg/mL剂量可引起中性粒和巨噬细胞大量聚集,对斑马鱼有致畸作用,主要表现为斑马鱼脊柱弯曲、鱼鳔缺失、生长停滞和死亡等,并且对斑马鱼有明显的肝脏毒性作用。因此选择0.025 mg/mL的LPS预处理幼鱼构建斑马鱼内毒素炎症模型。2、(1)INH对斑马鱼的毒性呈剂量相关性。单用INH组,1mMINH对斑马鱼的形态发育和肝脏均无毒性作用,2 mM INH在72 hpe时可造成斑马鱼肝脏荧光面积轻微减小,4 mM INH可造成斑马鱼轻度畸形(主要表现为鱼鳔减小)和轻微的肝毒性,6 mMINH对斑马鱼具有中度致畸作用,主要表现在腹部水肿、鱼鳔减小/缺失、躯体弯曲和部分死亡等,并且可引起明显的肝脏荧光面积减小、荧光强度减弱、肝细胞之间连接疏松,大于8 mM剂量的INH可引起斑马鱼严重畸形和非常显著的肝毒性,HE染色观察到肝细胞出现明显的肿胀、轮廓不清晰和胞质稀疏等现象。(2)与单用INH组比,炎症状态下,INH的致畸作用更加明显,行动受抑制更加严重,肝脏荧光面积和荧光强度显著性降低,ALT和AST水平显著升高,HE染色结果显示炎症状态下肝细胞受损更加明显,主要表现在胞核萎缩变形、胞质溶解。3、电镜结果显示溶剂对照组和LPS组肝细胞结构正常,4mM INH组显示线粒体结构异常,线粒体嵴可见明显肿胀、嵴断裂或消失现象,LPS(0.025 mg/mL)+INH(4mM)组,细胞核不规则,核仁消失,粗面内质网减少,内质网出现扩张、肿胀、断裂和扭曲等现象,胞质内甚至出现部分空泡结构,线粒体数量减少,且线粒体嵴断裂、溶解现象比INH(4mM)组严重。RT-PCR检测内质网应激相关因子的转录水平,相对于单用INH组,LPS+4mMINH组斑马鱼Bip/GRP78、ATF6、PERK、IRE1、GRP94、CHOP转录水平显著性上调,LPS+2 mM、LPS+4 mM INH组斑马鱼XBP1转录水平显著性上调;RT-PCR检测凋亡相关因子的转录水平,相对于单用INH组,LPS+4 mMINH 组斑马鱼 Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、B

关键词： DPP-4抑制剂   二甲双胍   2型糖尿病   糖脂代谢   微炎症  

摘要： 目的分析DPP-4抑制剂联合二甲双胍对2型糖尿病合并代谢综合征患者糖脂代谢、微炎症状态的影响。方法选取我院2015年3月2016年12月收治的2型糖尿病合并代谢综合征患者120例分为两组,对比两组患者糖脂代谢治疗和微炎症状态。结果实验组患者的糖代谢指标以及脂质代谢指标含量明显低于对照组（P<0.05）。实验组患者HDL-C含量明显高于对照组,血清中的炎症因子含量明显低于对照组（P<0.05）。结论临床2型糖尿病合并代谢综合征患者采取DPP-4抑制剂联合二甲双胍治疗,能够有效的控制患者机体中的糖代谢和脂质代谢水平,有效抑制微炎症状态。

关键词： 维持性血液透析   血管通路   C反应蛋白  

摘要： 目的:探讨不同血管通路对维持性血液透析(MHD)患者C-反应蛋白(CRP)水平以及微炎症状态的影响。方法:采用横断面研究,共纳入220例MHD患者。根据MHD患者血管通路分为自体动静脉内瘘(AVF)组及带隧道带涤纶套导管(TCC)组。其中AVF组138例,TCC组83例。AVF组男性93例,女性45例,平均年龄为(51.7±14.2)岁。TCC组男性54例,女性28例,平均年龄(60.4±15.4)。通过检测血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血清白蛋白、总钙、磷、全段甲状旁腺激素、透析前后尿素氮、肌酐、尿酸、血清铁蛋白、转铁蛋白饱和度,并计算钙磷乘积、尿素清除指数(Kt/v)、尿素下降率(URR),分析不同血管通路对血清hs-CRP的影响。结果:TCC组hs-CRP明显高于AVF组,两组间hs-CRP差异有统计学意义(P<0.05)。两组年龄、白蛋白、肌酐差异有统计学意义(P<0.05)。白蛋白、转铁蛋白饱和度与hs-CRP呈负相关,有统计学意义(r=-0.182,r=-0.187,P=0.007,P=0.005)。尿酸与hs-CRP相关性有统计学意义,呈正相关(r=0.188,P=0.005)。多元逐步回归分析显示血管通路是hs-CRP的独立影响因素(F=26.238,P<0.001),带隧道带涤纶套导管是hs-CRP水平升高的独立危险因素。结论:不同血管通路可以影响维持性血液透析患者CRP水平,带隧道带涤纶套导管可能是维持性血液透析患者发生微炎症状态的原因之一。

关键词： 慢性肾功能衰竭   肾透析   微炎症   慢性心力衰竭   超声心动描记术  

摘要： 目的:研制慢性肾功能衰竭(CKD)微炎症状态下心力衰竭大鼠模型并探索其心衰机制。方法:SD大鼠70只,随机分为3组:对照组(10只)食用油10ml·kg-1·d-1灌胃,1次/d;CKD组(30只)3%腺嘌呤食用油10ml·kg-1·d-1灌胃;造模组(30只)初始腺嘌呤灌胃同CKD组,Scr升高1.5倍腺嘌呤灌胃减为1次/3d,开始腹腔注射阿霉素2.5mg/kg,1次/7d,10 mg/L溴酸钾溶液代替饮水。监测肾功、C-反应蛋白及心脏超声。造模成功后对比各组心脏超声、全心质量指数(HM/BM)及左心室质量指数(LVM/BM)、病理学特点。对比各组基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1),VG染色病理学及胶原面积百分比,电镜超微结构及心肌细胞的凋亡。结果:(1)模型达标情况:从CKD、心力衰竭和微炎性反应评价,造模达标。(2)心脏超声:造模组左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVESd)、左心室舒张末期容积(LVEDV)、左心室收缩末期容积(LVESV)升高,收缩末期室间隔厚度(IVSs)、左心室收缩末期后壁厚度(LVPWs)降低,缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)下降,与对照组及CKD组有统计学差异(P均<0.05);CKD组与对照组相比LVESd、LVESV升高,FS、LVEF下降(P均<0.05)。(3)HM/BM及LVM/BM:与对照组相比,CKD组及造模组增高(P均<0.05),但两组间无统计学差异。(4)病理学:HE染色造模组心肌细胞及纤维破坏伴单核细胞浸润;CKD组病变较轻且不伴炎细胞浸润。VG染色及电镜超微结构中,CKD组及造模组心肌病理损伤逐渐加重,VG染色各组胶原面积与所测视野的面积比分别为0.132、0.151、0.053。(5)金属蛋白酶测定:MMP-2,造模组低于对照组及CKD组;CKD组低于对照组,差异接近但尚未达统计学标准(P=0.058)。MMP-9和TIMP-1,各组间无统计学差异,但其比值随着心衰程度的逐渐加重而显著升高,除CKD组与造模组差异接近但尚未达统计学标准外(P=0.055),其他均有统计学意义。(6)细胞凋亡测定:未见心肌细胞凋亡。结论:(1)腺嘌呤灌胃联合阿霉素腹腔注射,溴酸钾溶液饮水可建立慢性肾功能衰竭微炎症状态下心力衰竭大鼠模型。(2)慢性肾功能衰竭微炎症状态下大鼠心力衰竭的机制是心功能下降、心脏相对增重及相应的心肌病理损害,并出现心肌细胞外基质减少,心室重构明显,但尚未出现心肌细胞凋亡。(3)除心脏相对增重外,单纯CKD上述其他表现均明显轻于慢性肾功能衰竭微炎症状态下心力衰竭。

关键词： 阿托伐他汀   早期糖尿病肾病   炎症状态   尿微量白蛋白   影响  

摘要： 目的:分析阿托伐他汀对早期糖尿病肾病炎症状态及尿微量白蛋白的影响.方法:将2016年2月-2017年2月160例早期糖尿病肾病患者根据数字随机表法分两组各80例.对照组采用常规基础治疗,他汀组在对照组基础上给予阿托伐他汀治疗.比较两组糖尿病肾病治疗效果;不良反应;干预前后患者炎症状态相关指标IL-6、IL-1β、hs-CRP以及尿微量白蛋白.结果:他汀组糖尿病肾病治疗效果高于对照组,P<0.05;两组无明显不良反应,P>0.05;干预前两组炎症状态相关指标IL-6、IL-1β、hs-CRP以及尿微量白蛋白相近,P>0.05;出院时他汀组炎症状态相关指标IL-6、IL-1β、hs-CRP以及尿微量白蛋白优于对照组,P<0.05.结论:阿托伐他汀对早期糖尿病肾病效果确切,可有效改善炎症状态,降低尿微量白蛋白,对患者预后有益,值得推广.

关键词： 生脉针   重症缺血性脑卒中   免疫及炎症反应  

摘要： 目的:通过临床研究探讨生脉注射液对于缺血性脑卒中增强免疫减少炎症反应的作用,为临床治疗提供新的思路方法:将入选患者随机分为2组,治疗组(常规治疗+生脉注射液)20例,对照组(常规治疗),分别于入院时、治疗3天、7天及10天抽血检查血常规、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)及降钙素原(PCT),记录白细胞计数、淋巴细胞计数、中性率细胞计数、ESR、CRP、PCT各数值并记录两组患者发热发生人数结果:治疗组在7天及10天CRP、ESR及PCT值明显低于对照组(p<0.05),且治疗组发热发生率低于对照组结论:生脉针对于重症缺血性脑卒中患者具有增强免疫减少炎症反应的作用.

关键词： 小檗碱   胰岛素抵抗   TNF-α   ERK1/2  

摘要： 背景:随着人类生活水平的提高以及生活方式的改变,糖尿病(Diabetes mellitus,DM)的发病率有了爆发式的增长,已成为继肿瘤和心血管疾病之后,严重影响人类健康的重大隐患。2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)占糖尿病的比重高达90%以上,是最常见的糖尿病类型。目前研究认为胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)是T2DM主要的发病机制。炎症的信号传导途径与胰岛素信号通路之间存在交互作用,从而抑制胰岛素信号传递,导致胰岛素抵抗的发生。小檗碱(Berberine,BBR)是从黄莲中得的一种季铵盐,具有抗氧化性、抗炎性、降解胆固醇、抗高血糖等活性。在肝脏、脂肪组织、肾脏、胰脏等组织中发现BBR抑制细胞氧化性应激和炎症,这可能是其抗糖尿病的原因,但其分子机制尚不清楚。目的:探讨BBR改善炎症诱导的胰岛素抵抗作用的分子机制。方法:以ob/ob小鼠为糖尿病模型,随机分为给药组和对照组,分别腹腔注射5mg/kg/day的BBR和等体积的生理盐水3周,检测小鼠血糖和胰岛素水平以及胰岛素耐量(ITT)和葡萄糖耐量(GTT)。用TNF-α模拟炎症诱导肝细胞胰岛素抵抗,利用Western Blotting方法检测BBR对TNF-α通路和胰岛素通路信号传递的影响。结果:1)BBR降低ob/ob小鼠血清中的胰岛素和葡萄糖的水平,改善胰岛素耐受并增加葡萄糖耐受;2)BBR逆转TNF-α对胰岛素信号通路的抑制;3)BBR通过抑制TNF-α诱导ERK1/2的激活而改善胰岛素抵抗;4)BBR通过MEK通路抑制由TNF-α介导的ERK1/2的激活;5)BBR阻碍了 MEKK1和Traf2的结合;6)BBR并不通过AMPK、PKC、NF-κB通路改变胰岛素的敏感性。结论:BBR 是通过抑制 TNF-R/TRADD/Traf2/MEKK1/MEK/ERK 通路逆转 TNF-α诱发的肝细胞胰岛素抵抗。

关键词： 阿托伐他汀   炎症应激   脂质积聚   人肝癌细胞株  

摘要： 目的研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株Hep G2细胞氧化应激和脂质积聚的影响。方法将普通Hep G2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·m L-1肿瘤坏死因子（TNF-α）处理]及实验组(用100 ng·m L-1TNF-α+10μmol·L-1阿托伐他汀处理),3组同时负荷100μg·m L-1低密度脂蛋白（LDL）,处理时间24 h。用油红O染色测定细胞内脂质含量;以荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测Hep G2细胞脂肪酸合酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）和固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）的基因和SREBP1蛋白表达;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯（DCFH-DA）荧光探针染色检测Hep G2细胞内活性氧化产物（ROS）的含量;以比色法检测Hep G2细胞过氧化氢（H2O2）和丙二醛（MDA）的含量。结果正常组与模型组SREBP1蛋白灰度值分别为1.01±0.001,1.61±0.34,这2组的SREBP1 mRNA水平分别为1.01±0.16,3.61±0.39,这2组的FAS的mRNA水平分别是1.03±0.32,1.99±0.36,这2组的ACC的mRNA水平分别是0.95±0.29,2.37±0.52。与正常组相比,模型组的细胞FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义（均P<0.05）。与模型组相比,实验组的Hep G2FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白灰度值分别是2.95±0.92,3.99±1.16,2.85±0.91,2.94±0.65,实验组的Hep G2 FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义（均P<0.05）。表明在炎症状态下,阿托伐他汀进一步加重了Hep G2细胞内脂质的沉积。正常组、模型组与实验组的细胞ROS含量（以荧光强度代表）分别为1.00±0.20,1.77±0.25,3.20±0.53;正常组、模型组与实验组的H2O2含量分别为（2.30±0.31）,（4.32±0.77）,（5.31±0.75）nmol·mg-1;这2组的MDA含量分别为（0.78±0.22）,（1.86±0.23）,（3.43±1.15）nmol·mg-1,与正常组比较,模型组差异均有统计学意义（均P<0.05）;与模型组比较,实验组差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论在炎症状态下,阿托伐他汀诱导Hep G2细胞氧化应激,激活SREBP1/FAS/ACC通路,加重细胞内脂质积聚。