关键词： 泼尼松   白介素-17   白介素-23   小鼠  

摘要： 目的探讨泼尼松对IL-23/IL-17炎症轴的影响。方法分离昆明小鼠脾脏淋巴细胞制成单细胞悬液,MTT法检测不同浓度(0、0.001、0.01、0.1、1、10、100、1 000μm)泼尼松对小鼠脾淋巴细胞增殖功能的影响。另取小鼠脾淋巴细胞分为4组,A组用空白完全培养液培养、B组用含0.001μm泼尼松的培养液培养24 h后用含有转化生长因子-β1(TGF-β1)、白介素-6(IL-6)、白介素-23(IL-23)培养液继续培养48 h;C、D组用含TGF-β1、IL-6、IL-23培养液培养48 h后,C组改用含0.001μm泼尼松的培养液、D组改用空白培养液继续培养24 h。收集各组细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法检测IL-17a含量;采用实时荧光定量反转录PCR检测IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达水平。结果 0.001μm泼尼松对小鼠脾淋巴细胞的增殖即有抑制作用(P<0.05)。B组IL-17含量低于A、C、D组(P<0.05),C组IL-17含量低于A组、D组(P<0.05)。A、B两组IL-23 mRNA表达量比较,差异无统计学差异意义(P>0.05),C组IL-23 mRNA表达量低于D组(P<0.05)。结论泼尼松能够抑制淋巴细胞的增殖,当机体免疫系统失衡促炎因子高表达时,泼尼松能够抑制IL-17分泌,抑制IL-17 mRNA、IL-23 mRNA的表达而发挥免疫抑制作用。

关键词： 脓毒症   连续性血液净化   炎症状态   免疫应答   红细胞糖代谢  

摘要： 目的:分析连续性血液净化对多发伤并发脓毒症患者炎症状态、免疫应答、红细胞糖代谢的影响。方法:78例多发伤并发脓毒症患者随机分为观察组及对照组各39例,对照组患者接受常规治疗,观察组患者接受连续性血液净化治疗,对比两组患者的治疗后炎症状态、免疫应答、红细胞糖代谢等指标差异。结果:观察组患者的治疗后血清炎症因子hs-CRP、TNF-α、PCT、sTREM-1、HBP含量均显著低于对照组患者;血清Th1细胞因子IL-2、IFN-γ含量低于对照组患者,Th2细胞因子IL-4、IL-10含量高于对照组患者;红细胞液中PFK、EGSH含量高于对照组患者,G-6PD、AR、ELPO含量低于对照组患者;外周血CD11a、CD54、CD106、CD49d荧光强度均显著低于对照组患者。结论:连续性血液净化可显著降低多发伤并发脓毒症患者全身炎症反应,促使患者免疫功能及红细胞代谢恢复正常。

关键词： 慢性肾脏病   微炎症状态   生存质量  

摘要： 目的:初步明确CKD3-5期患者CRP、IL-6、Lep、ADPN的表达水平及其生存质量状况,探索CKD3-5期伴微炎症状态患者CRP、IL-6、Lep、ADPN与Hb、Hct、Scr、BUN、Cysc、PTH等主要实验室指标及生存质量间存在的关系和规律。方法:1.选取2016年3月至2017年2月就诊于河南中医药大学第一附属医院、郑州市中医院、郑州市第七人民医院及河南省中医院四家三甲医院肾内科门诊、病房、血液净化中心的CKD3-5期患者,共337例,根据其C-反应蛋白水平,分为微炎症状态组和非微炎症状态组。2.所有病例均符合慢性肾脏病诊断及分期标准。入试患者过夜禁食8-10h,清晨6-7时肘静脉采血5ml,规律血液透析患者在透析上机前采血。其中部分静脉血于当日统一由河南中医药大学第一附属医院检验科检测尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、尿酸（UA）、胱抑素C（Cysc）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（Hct）、总胆固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、血清白蛋白（Alb）、全段甲状旁腺素（i PTH）、钙（Ca）、磷（P）。另一部分静脉血静置30min后立即分离血清,置于-70℃冰箱保存待测。3.采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞因子CRP、IL-6、Lep、ADPN浓度。4.采用统一的肾脏病生存质量量表(KDQOL-SFTM1.3)中文版进行资料收集,根据Ron ***,Joel *** ***,et al提供的计分方法,进行生存质量评分,同时进行血清CRP、IL-6、Lep、ADPN与以上实验室指标及生存质量的相关分析。结果:（1）一般情况分析:本研究337例受试者中,微炎症状态组165人,占49.0%;非微炎症状态组172人,占51.0%;两组间年龄、体重、性别、原发病比较无统计学差异（P>0.05）。（2）主要实验室指标分析:Lep与IL-6、ADPN、CRP呈正相关,ADPN与CRP呈正相关,差异均有统计学意义（P<0.05）;CRP与Hb、Hct呈负相关,与BUN、Scr、Cysc、PTH呈正相关,Lep与Hb、Hct、Alb呈负相关,与Scr、PTH呈正相关,ADPN与BMI呈负相关,与Scr、Cysc、P、PTH呈正相关,差异均有统计学意义（P<0.05）;微炎症组Lep、ADPN水平高于非微炎症组,差异有统计学意义（P<0.05）;CKD3期CRP水平较CKD4期及5期低,差异有统计学意义（P<0.05）,CKD3期和4期ADPN水平较CKD5期低,差异有统计学意义（P<0.05）,CKD3期Lep水平较5期低,差异有统计学意义（P<0.05）;透析组CRP高于非透析组,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）微炎症状态与生存质量相关分析:337例受试者在性功能（15.53±28.46）、肾病带来的负担（28.75±21.27）、总体健康（34.72±16.19）、工作状况（35.31±37.19）四个维度得分较低,在透析工作人员的鼓励领域得分最高（80.70±16.76）,从整体来看,生理健康总分（50.71±13.97）较心理健康总分（56.04±7.53）低;微炎症组性功能维度得分较非微炎症组高,差异具有统计学意义（P<0.05）,在SF-36健康状况、总体健康、认知功能、症状与不适、睡眠、PCS生理健康总分6个维度得分较非微炎症组低,差异具有统计学意义（P<0.05）;微炎症状态下CRP与总体健康、症状与不适及生理健康总分呈负相关（P<0.05）,IL-6与社交质量呈负相关（P<0.05）,Lep与症状与不适呈负相关（P<0.05）。结论:1.本研究337例CKD3-5期患者中49%存在微炎症状态,且CKD分期越高,血清CRP、Lep、ADPN水平越高,透析患者CRP水平较非透析患者高。***3-5期伴微炎症状态患者血清Lep、ADPN水平普遍较非微炎症状态患者偏高,且与CRP呈正相关;高瘦素、高脂联素及高微炎症水平可能在其肾功能恶化、甲状旁腺功能亢进、贫血、营养不良等的发生发展中协同起作用。3.慢性肾脏病给患者带来的生理影响可能比心理影响更为显著。微炎症状态对CKD3-5期患者的生存质量影响较大,主要表现在总体健康、认知功能、症状与不适、睡眠、生理健康总分得分较非微炎症状态患者低,且CRP和IL-6水平越高,总体健康、生理健康水平与社交质量越低,而症状与不适越明显;CKD3-5期患者血清瘦素水平越高,其症状与不适亦越明显。

关键词： 急性颅脑外伤   右美托咪定   早期全身炎症反应  

摘要： 目的：探讨右美托咪定对急性颅脑外伤患者早期全身炎症反应的影响。　　方法：前瞻性、随机、对照研究，纳入2015年10月～2016年5月东南大学医学院附属江阴市人民医院重症医学科收治的急性颅脑外伤患者，入组后，根据随机数字表法，将患者分为两组（治疗组和对照组）。治疗组患者给予右美托咪定(0.5～1.0ug/kg/h)持续静脉泵入，对照组患者给予丙泊酚(1.0～2.0mg/kg/h)持续静脉泵入，每2h进行一次RASS评分，维持RASS评分0～-2分，根据RASS评分调整药物用量，两组镇静药物使用时间为3d。两组患者均给予瑞芬太尼(0.05～0.1ug/kg/min)持续静脉泵入，根据重症监护疼痛观察工具(CPOT)调整瑞芬太尼剂量，维持CPOT评分在0～1分。分别于入组后0d、3d、7d记录患者MAP、HR、SpO2和体温，同时留取静脉血，测定外周血白细胞计数、CRP、TNF-α、IL-6和IL-10，并记录入组后0d、3d、7d的SOFA评分以及28d病死率。　　结果　　①患者的一般情况:与对照组相比，治疗组患者性别、年龄、APACHEⅡ评分、颅脑外伤类型及损伤情况均无显著统计学意义(P＞0.05)。　　②患者的基本生命体征:入组后0d和7d治疗组患者的MAP、HR、SpO2与对照组相比，无显著统计学意义(P＞0.05)，治疗组患者入组后3d的MAP(88.97±8.33mmHg)高于对照组(83.63±9.13 mmHg)(P＜0.05)，HR及SpO2与对照组相比无显著统计学意义(P＞0.05）。与对照组比较，治疗组上述各时间点的体温无显著统计学意义(P＞0.05)。　　③炎症反应指标:治疗组患者3d的IL-6、TNF-α、CRP水平和外周血白细胞计数分别为(205.13±21.58) pg/ml、(220.03±19.05)pg/ml、（32.63±8.78）mg/L和（13.56±1.35）×109，明显低于对照组(217.47±22.24) pg/ml、（233.47±22.81）pg/ml、（38.87±9.26）mg/L和（14.42±1.45）×109(P＜0.05)，而IL-10(61.33±21.87) pg/ml水平明显高于对照组(49.63±19.39) pg/ml(P＜0.05)。入组后0d和7d治疗组IL-6、TNF-α、CRP、IL-10水平和外周血白细胞计数，与对照组相比，无显著统计学意义(P＞0.05）。　　④器官功能障碍评估:与对照组相比，治疗组患者入组后0d、3d、7d的SOFA评分无显著统计学意义(P＞0.05)，治疗组机械通气时间、去甲肾上腺素用量无显著统计学意义(P＞0.05)。　　⑤患者预后:治疗组患者28d病死率为0.00％;对照组28d病死率为3.33％。两组患者28d病死率差异无显著统计学意义(x2=1.017，P=0.313)。　　结论：右美托咪定能降低急性颅脑外伤患者早期IL-6、TNF-α、CRP水平和外周血白细胞计数，升高IL-10水平，对患者28d病死率无影响。

关键词： 中性粒细胞   全身性炎症反应综合征   Toll样受体9   表面Toll样受体9   免疫调节性ODN  

摘要： 中性粒细胞（polymorphonuclear neutrophils,PMNs）是炎症反应的第一道防线,不同亚型中性粒细胞在炎症应答中的作用不尽相同。近年发现的sTLR9+中性粒细胞（sTLR9+PMNs）在炎症应答中的作用尚不十分清楚。本文以腹腔注射TLR9激动剂Cp G ODN诱导D-Gal N预致敏BALB/c小鼠建立致死性休克全身炎症性反应模型,观察模型小鼠腹腔灌洗细胞（PLCs）中的sTLR9+PMNs比例及应答情况,给小鼠回输炎症不同时期的PLCs或腹腔注射能影响TLR9转运的抑制性脱氧寡核苷酸CCT ODN,观察模型小鼠的生存期及对sTLR9+PMNs的影响。结果发现:PMNs是模型小鼠PLCs中的主要细胞,其中10%左右为sTLR9+PMNs;给模型小鼠回输炎症早期富含PMNs的PLCs可挽救小鼠的生命,这种PMNs中sTLR9+PMNs高表达sTLR9;CCT ODN腹腔注射可挽救模型小鼠的生命,这与其能上调模型小鼠PLCs中sTLR9+PMNs sTLR9的表达水平有关。综上,早期趋化到炎症局部的sTLR9+PMNs对于致死性炎症应答起保护作用,调控sTLR9+PMNs可能成为治疗全身炎症应答综合征的一种新思路。

关键词： 不同血液透析模式   糖尿病肾病患者   同型半胱酸(Hcy)   微炎症状态  

摘要： 目的探讨不同透析模式对终末期糖尿病肾病患者同型半胱氨酸(Hcy)及微炎症状态的影响。方法选择60例在2016年3月至2017年3月行血液透析患者,按照随机数字法将其分成LFHD组、HFHD组以及HD+HP组,每组20例,对患者治疗前后的Hcy、hs-CRP、IL-6、TNF-a水平进行检测。另外选择20例健康体检者为对照组,并对以上各组的检测结果进行分析与比较。结果 LFHD组、HFHD组以及HD+HP组终末期糖尿病肾病患者透析前的Hcy、hs-CRP、IL-6、TNF-a水平均高于对照组。治疗6个月后,LFHD组Hcy、hs-CRP、IL-6、TNF-a水平没有明显变化,而HFHD组以及HD+HP组Hcy、hs-CRP、IL-6、TNF-a水平均有所下降。并且,HD+HP组各个指标的下降水平均低于HFHD组。结论终末期糖尿病肾病患者均存在不同程度的高同型半胱氨酸血症(Hcy)及微炎症状态,但采用HFHD以及HD+HP的血液透析模式,能有效地降低患者的Hcy水平,改善患者微炎症状态。

关键词： 降同型半胱氨酸   冠心病   介入治疗   全身炎症反应  

摘要： 目的:探讨降同型半胱氨酸(Hcy)疗法对冠心病介入治疗后患者全身炎症反应的影响.方法:选取冠心病采取介入治疗患者90例为研究对象,随机分为观察组和对照组各45例,介入治疗后均采取常规药物治疗,观察组在常规治疗基础上给予降Hcy治疗,比较两组患者的全身炎症反应情况.结果:治疗后,观察组患者的血清Hcy水平、前降钙素、C反应蛋白以及白介素-6水平均明显低于治疗前,且显著低于对照组,分别比较差异显著(P<0.01).结论:降同型半胱氨酸(Hcy)疗法可显著降低冠心病介入治疗后患者的Hcy水平,对减轻患者全身炎症反应有重要作用,有较高的临床应用价值.

关键词： Pyrin   炎症小体   去磷酸化   细胞焦亡   Gasdermin E   化疗药物  

摘要： Pyrin蛋白由MEFV基因编码,其点突变是引起一种分布于地中海沿岸地区的自身炎症性疾病家族性地中海热(familiar mediterranean fever, FMF)的原因。Pyrin蛋白可作为炎症小体中的重要分子,通过间接识别由病原微生物毒力因子修饰并失活的Rho GTPases引起炎症小体的激活。与天然免疫其他模式识别受体不同,Pyrin蛋白通过间接识别微生物毒力因子对自身蛋白的修饰而非直接识别病原微生物固有分子从而激活下游免疫反应。然而,Pyrin炎症小体激活的具体机制至今尚不明确。本研究主要利用蛋白质免疫印迹、蛋白质免疫共沉淀等手段,证明在免疫细胞中,Pyrin蛋白存在磷酸化修饰,其205位与241位丝氨酸的磷酸化修饰介导Pyrin蛋白与14-3-3蛋白的结合,使Pyrin蛋白维持在活性抑制状态。通过制备特异性识别两磷酸化位点的单克隆抗体,证实205、241位丝氨酸在细胞受到病原微生物刺激时共同发生去磷酸化反应。利用诱导表达系统,证明Pyrin蛋白的位点特异性去磷酸化是Pyrin炎症小体激活的原因。同时,本研究发现家族性地中海热的有效治疗性药物秋水仙素可抑制Pyrin炎症小体的激活。秋水仙素并不能抑制细胞受到病原微生物毒力因子刺激时Pyrin蛋白的去磷酸化反应,而是通过抑制激活后的Pyrin蛋白招募下游ASC蛋白从而阻碍炎症小体的激活。综上,本文第一部分工作证明Pyrin蛋白的位点特异性磷酸化修饰与正常的微管蛋白动力学平衡是Pyrin炎症小体激活的重要控制元件。细胞焦亡(pyroptosis)属于细胞炎症性坏死的一种,在机体抵抗病原微生物感染以及许多疾病的发病中发挥重要作用。细胞焦亡的直接原因是GasderminD(GSDMD)蛋白被通过炎症小体激活的Caspase-1或直接结合细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)而活化的Caspase-4/5/11切割,使GSDMD释放蛋白质N端活性部分在细胞膜上聚合形成通透性孔道所致。Gasdermin蛋白家族成员多含有膜通透N端结构域,但其生物学功能依然处于未知状态。本文通过细胞成像、蛋白质免疫印迹及流式细胞仪分析等手段,证明Gasdermin家族成员Gasdermin E(GSDME)可以被活化的Caspase-3切割激活,并以类似于GSDMD导致细胞焦亡的方式引起细胞的炎症性坏死。化疗药物处理无GSDME表达的Jurkat细胞可使细胞发生细胞凋亡,而处理高表达GSDME的SH-SY5Y细胞系与人角质化原代细胞可通过活化Caspase-3引起GSDME介导的细胞焦亡,用药物抑制Caspase-3活性或降低GSDME的表达量均能抑制细胞焦亡的发生。动物实验结果表明,Gsdme基因敲除可有效保护小鼠免受DNA损伤化疗药物造成的肺部与小肠组织的损伤。综上所述,本文第二部分工作证明Caspase-3可通过切割激活GSDME引起GSDME介导的细胞炎症性坏死,而细胞中GSDME表达与否成为在Caspase-3激活后,决定细胞死亡方式的重要指标。

关键词： 微炎症   终末期肾病   动脉粥样硬化   CXCL16   P2X7R  

摘要： 目的:慢性炎症在动脉粥样硬化发生、发展过程中发挥重要作用。本研究旨在观察微炎症状态下CXC趋化因子配体16(CXC chemokine ligand 16,CXCL16)/CXC趋化因子受体6(CXC chemokine receptor 6,CXCR6)通路激活对终末期肾病(end-stage renal disease,ESRD)患者动脉粥样硬化进展的影响,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:根据血清C反应蛋白的水平将43名ESRD患者分为对照组(n=17)和炎症组(n=26)。临床检测患者的生化指标和脂质谱。标本取材自ESRD患者动、静脉内瘘手术时部分切除的桡动脉组织,应用HE染色,Filipin染色观察桡动脉组织中泡沫细胞形成情况。免疫组化和免疫荧光染色观察桡动脉组织标本中CXCL16/CXCR6通路相关蛋白,嘌呤受体P2X配体门控通道7(purinergic receptor P2X ligand-gated ion channel 7,P2X7R)蛋白表达情况,以及解整合素样金属蛋白酶10(disintegrin and metalloproteinase-10,ADAM10),炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α),单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)及巨噬细胞标志物CD68的表达情况。结果:炎症组标本中有明显的泡沫细胞形成,主要位于血管中层,且胆固醇沉积较对照组明显增加。炎症组标本中CXCL16,CXCR6和ADAM10,TNF-α,MCP-1及CD68的表达均较对照组有显著增加,CXCL16的表达与P2X7R的表达呈正相关(P<0.05,r=0.54)。结论:微炎症状态下CXCL16/CXCR6通路的激活促进ESRD患者桡动脉中泡沫细胞的形成及胆固醇沉积,P2X7R活化可能参与了该过程的调节。

关键词： 普通血液透析   高通量血液透析   C-反应蛋白   β2-微球蛋白  

摘要： 目的探讨不同透析方法对维持性血液透析患者C-反应蛋白及β2-微球蛋白的影响。方法将我院接受透析治疗的120例患者随机分为2组,监测其透析前及透析后3个月C-反应蛋白及β2-微球蛋白水平。结果相较于对照组,观察组患者透析后C-反应蛋白及β2-微球蛋白明显减低（P<0.01）。结论高通量血液透析,可以改善血透患者的微炎症状态,有效清除β2-微球蛋白及降低C-反应蛋白水平,有助于提高患者生活质量。