关键词： 2型糖尿病   非酒精性脂肪性肝病   炎症因子   胰岛素抵抗   二甲双胍  

摘要： 非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)被认为是代谢综合征(metabolicsyndrome,MS)的肝脏表现,是最常见的一种慢性肝病。作为全球最常见的慢性代谢性疾病之一——2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM),与NAFLD关系密切。研究表明,在我国,这2种疾病存在双向关系。二者之所以在临床上关系密切,与其存在共同的发病机制息息相关。随着研究的逐渐深入,炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)在其中所起作用有目共睹。二甲双胍不仅是“中国2型糖尿病防治指南”中治疗T2DM的一线用药,它对于NAFLD也有一定的治疗作用。本文旨在研究炎症因子在T2DM合并NAFLD大鼠中的表达,及给予二甲双胍干预后的改变,探讨炎症因子在T2DM合并NAFLD中的作用机制及二甲双胍对于T2DM合并NAFLD大鼠的保护作用。目的1.研究T2DM合并NAFLD大鼠模型胰岛素抵抗、肝功能损害、血脂异常情况、肝脏病变情况及TNF-α、IL-6、CRP的表达情况;2.研究二甲双胍干预后,T2DM合并NAFLD大鼠模型中,上述指标的改变;3.分析TNF-α、IL-6及CRP在T2DM合并NAFLD中的作用机制及二甲双胍对于T2DM合并NAFLD大鼠的保护作用。方法建立4组大鼠模型:①空白对照组(A组);②T2DM组(B组);③T2DM+NAFLD组(C组);④T2DM+NAFLD+二甲双胍组(D组)。造模后,称量大鼠体重,收集大鼠血清及肝脏标本,称量大鼠肝脏湿重。应用生化分析仪检测下述生化指标,比较差异:谷氨酰基转移酶(glutenyl transpeptidase,GGT)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspertate aminotransferase,AST)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、谷氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、空腹血糖、CRP 及甘油二酯(triglyceride,TG)。ELISA法检测:空腹胰岛素、TNF-α及IL-6。根据上述指标结果,计算:肝指数(liver index,LI)、稳态模型评估胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、胰岛素敏感指数(insulin sensitivity index,ISI)。对肝组织分别进行油红O染色、Masson染色、HE染色及网状纤维染色,而后根据HE染色的结果分别进行肝脏脂肪含量计分以及NAFLD活动度评分(NAFLD activity scores,NAS),评估肝内脂质聚集及肝脏脂肪性炎症程度。根据油红O染色的结果,进一步判断肝内是否存在脂肪聚集及聚集程度。根据Masson染色及网状纤维染色结果,评估纤维化改变情况。应用免疫组化法,检测肝组织内TNF-α、IL-6及CRP蛋白表达情况。结果1.T2DM组及T2DM+NAFLD组大鼠肝指数明显高于对照组,单纯T2DM组及二甲双胍干预组肝指数低于T2DM+NAFLD组(P均<0.01)。2.T2DM组及T2DM+NAFLD组大鼠胰岛素抵抗情况较对照组明显,T2DM+NAFLD组大鼠胰岛素抵抗情况较单纯T2DM组明显,T2DM+NAFLD+二甲双胍组大鼠胰岛素抵抗情况较T2DM+NAFLD组改善。其中,HOMA-IR值B、C组高于A组,B组及D组低于C组(P均<0.01);ISI值B、C组明显低于A组,B组及D组高于C组(P均<0.05)。3.与对照组相比较,T2DM组及T2DM+NAFLD组,均存在明显的肝损伤及血脂异常,且T2DM+NAFLD组肝损伤及血脂异常程度明显较单纯T2DM组及T2DM+NAFLD+二甲双胍组重。其中,B、C组大鼠血清ALT、AST、GGT、TG、TC、LDL-C水平显著高于A组,B组及D组低于C组(P均<0.01);各组HDL-C水平比较,B、C组显著低于A组(P<0.01),B组及D组较C组无明显差别(P>0.05)。4.T2DM 组血清 TNF-α、IL-6 及 CRP 水平分别为(3.28± 1.1())ng/ml、(4.29±0.48)ng/l、(3.12± 1.04)mg

关键词： 参黄降糖胶囊   二甲双胍   气阴两虚型   2型糖尿病   LDL/HDL比值  

摘要： 目的探讨参黄降糖胶囊联合二甲双胍治疗气阴两虚型2型糖尿病的临床效果及对患者低/高密度脂蛋白比值(LDL/HDL比值)、胰岛素抵抗及微炎症状态的影响。方法研究对象选自我院2016年4月至2017年4月收治的120例气阴两虚型2型糖尿病患者,采用随机数字表将其分成两组,每组60例。观察组给予参黄降糖胶囊联合二甲双胍治疗,对照组单用二甲双胍治疗。比较两组治疗前后中医证候积分、脂代谢指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低、高密度脂蛋白(LDL、HDL)及LDL/HDL比值]、胰岛素抵抗指标[空腹血糖(FBG)、餐后2h血糖(2 hBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、HOMA-β细胞功能指数(HBCI)]及微炎症指标[超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、急性时相血清淀粉样蛋白A(A-SAA)]变化情况。结果两组治疗后各项中医证候积分均有显著降低(P<0.05),且观察组降低更明显(P<0.05)。两组治疗后血清FBG、2hBG、TC、TG、LDL、hs-CRP、TNF-α、IL-6、ASAA水平及HOMA-IR值、LDL/HDL比值较治疗前均显著减少(P<0.05),HBCI值和血清HDL浓度均显著增加(P<0.05);且观察组同期血清FBG、2 hBG、TC、TG、LDL、hs-CRP、TNF-α、IL-6、ASAA水平及HOMA-IR值、LDL/HDL比值较对照组治疗后均明显更低(P<0.05),HBCI值和血清HDL浓度均明显更高(P<0.05)。结论 2型糖尿病(气阴两虚证)应用参黄降糖胶囊联合二甲双胍治疗可有效调节患者体内糖脂代谢紊乱,降低LDL/HDL比值,减轻胰岛素抵抗及微炎症状态,疗效确切。

关键词： 加速康复外科   胃癌   炎症反应   体液免疫   细胞免疫  

摘要： 目的本研究旨在观察加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)应用于胃癌患者围手术期管理对胃癌患者术后炎症反应和免疫功能的影响。方法选取2017年02月至2017年09月在我院胃肠外科行胃癌根治术的81例胃癌患者,随机分为两组,分别为加速康复外科实验组(ERAS组)40例和常规组(对照组)41例。对照组采取传统围手术期处理措施;ERAS组采取加速康复外科治疗模式。收集两组患者术后恢复进食时间、首次排气时间、首次排便时间、下床活动时间、理想术后住院时间、实际术后住院时间的数据,并进行比较分析。检测两组患者各时间段炎症指标(血清C-反应蛋白和PCT)、补体(C3和C4)、体液免疫指标(免疫球蛋白Ig G、Ig A和Ig M)及细胞免疫指标(CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞)的水平,并进行比较分析。使用统计学软件SPSS 20.0,组间差异比较采用t检验,分类资料差异比较采用?2检验,P<0.05认为差异具有统计学意义。结果ERAS组患者的术后恢复进食时间、首次排气时间、首次排便时间、下床活动时间、理想术后住院时间均小于对照组患者,差异具有统计学意义(P<0.001)。两组患者的术前血清C-反应蛋白(C-reaction protein,CRP)和降钙素原(procalcitonin,PCT)水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后第1天,ERAS组患者的血清CRP和PCT水平均明显低于对照组(P<0.05),两组患者的血清CRP和PCT均高于术前水平(P<0.01);术后第4天,ERAS组患者的血清CRP和PCT水平仍均小于对照组(P<0.05),两组患者的血清CRP和PCT水平仍均高于术前(P<0.01);术后第7天,ERAS组患者的血清PCT水平明显低于对照组(P<0.05),两组患者的血清CRP和PCT水平还是均高于术前(P<0.01)。两组患者的术前免疫球蛋白Ig G、Ig A及Ig M水平的比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后第1天,ERAS组患者的免疫球蛋白Ig G和Ig A水平明显高于对照组(P<0.05),两组患者的免疫球蛋白Ig G、Ig A及Ig M水平均较术前均明显降低(P<0.05);术后第4天,ERAS组患者的免疫球蛋白Ig G和Ig A水平仍高于对照组(P<0.05),ERAS组患者的免疫球蛋白Ig G、Ig M水平较术前明显降低(P<0.01),而对照组患者的免疫球蛋白Ig G、Ig A及Ig M水平仍均较术前降低(P<0.05);术后第7天,ERAS组患者的免疫球蛋白Ig G、Ig A及Ig M与对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05),对照组患者的免疫球蛋白Ig G和Ig M水平仍较术前降低(P<0.05),而ERAS组患者仅免疫球蛋白Ig G水平较术前降低(P<0.05)。两组患者的术前、术后补体C3、C4水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后第1天,两组患者的补体C3、C4水平均较术前均明显降低(P<0.05);术后第4天,只有对照组患者的补体C3、C4水平仍均较术前降低(P<0.05)。两组患者的术前、术后CD3+、CD4+和CD8+的T淋巴细胞百分比的比较,差异无统计学意义(P>0.05);术后第1天,两组患者的CD3+、CD4+和CD8+的T淋巴细胞百分比较术前均明显降低(P<0.05);术后第4天,ERAS组患者的CD4+T淋巴细胞百分比较术前明显降低(P<0.01),而对照组患者的CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比均较术前明显降低(P<0.05);术后第7天,两组患者的CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比均恢复甚至超过术前水平,差异无统计学意义(P>0.05)。结论加速康复外科应用于胃癌围手术期管理可减轻患者术后炎症反应,保护患者术后补体系统,促进患者术后免疫功能的恢复并加快患者术后的康复,值得在临床上广泛推广应用。

关键词： 重症急性胰腺炎   早期肠内营养   谷氨酰胺   全身炎症反应   免疫功能  

摘要： 目的探讨联合谷氨酰胺（Gln）的早期肠内营养对重症急性胰腺炎（SAP）患者全身炎症反应和免疫功能的影响。方法将安徽医科大学附属安庆医院普外科2015年10月至2017年5月收治的SAP患者49例随机分为实验组（24例）及对照组（25例）:实验组采用联合Gln的早期肠内营养,对照组采用单纯早期肠内营养。在入院后第1、6、11天分别检测两组患者的炎症指标(C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）)及免疫指标（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）等值。比较两组间的差异,进行统计学分析。结果（1）两组患者炎症指标（CRP、PCT、IL-6、IL-8、TNF-α）和免疫指标（CD3+、CD4+、CD4+/CD8+）相互比较,炎症指标及免疫指标在第1天的差异无统计学意义（P>0.05）;（2）第6天炎症指标CRP（实验组:56.31±18.04,对照组:98.12±11.54,P=0.037）,IL-6（45.87±10.99,54.72±4.77,P=0.026）,IL-8（45.15±9.27,59.03±4.87,P=0.013）,TNF-α（24.35±7.15,32.41±4.22,P=0.010）,PCT（1.11±0.49,1.50±0.30,P=0.024）,实验组均低于对照组（P<0.05）。而免疫指标CD3+（实验组:63.42±2.86,对照组:54.67±1.76,P=0.035）,CD4+（43.69±1.83,40.08±1.08,P=0.014）,CD4+/CD8+（2.25±0.39,1.87±0.22,P=0.006）,实验组均高于对照组（P<0.05）;（3）第11天炎症指标CRP（实验组:16.81±7.56,对照组:43.01±2.74,P=0.009）,IL-6（29.39±7.92,38.29±5.33,P=0.020）,IL-8（30.73±9.26,39.69±5.26,P=0.018）,TNF-α（13.87±5.67,20.35±3.82,P=0.019）,PCT（0.34±0.11,0.95±0.29,P=0.035）,实验组均低于对照组（P<0.05）。而免疫指标CD3+（实验组:69.68±1.87,对照组:61.14±1.21,P=0.017）,CD4+（54.27±3.23,45.30±1.59,P=0.007）CD4+/CD8+（2.98±0.51,2.01±0.28,P=0.012）,实验组均高于对照组（P<0.05）。结论联合Gln的早期肠内营养比单纯的早期肠内营养能更好的降低SAP患者的全身炎症反应,提高免疫功能。

关键词： 糖尿病   糖尿病心肌病   丹蛭降糖胶囊   免疫炎症反应   实验研究   细胞凋亡   TLR4-MyD88-NF-κB信号通路  

摘要： 目的观察丹蛭降糖胶囊保护2型糖尿病模型大鼠心肌损伤的作用;完善TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调节糖尿病心肌损伤的病理机制;揭示丹蛭降糖胶囊防治糖尿病心肌损伤的分子机制。方法在体动物实验,以高脂饲料联合链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)的方法复制2型糖尿病大鼠模型,丹蛭降糖胶囊分别按照270、540、1080 mg/kg三个剂量组连续干预8周,通过观察丹蛭降糖胶囊对模型大鼠一般体征(体重、饮水量、摄食量)、血糖和血脂水平、血流动力学指标、心肌组织病理形态学(HE和Masson染色)的影响,研究丹蛭降糖胶囊防治2型糖尿病及并发心肌损伤的药物效应;借助Western blot、RT-qPCR、免疫组化等现代分子生物学实验方法和技术,研究模型大鼠心肌组织TLR4-MyD88-NF-κB信号通路相关蛋白和基因表达及下游相关炎症因子的变化规律,观察模型大鼠心肌组织凋亡的变化,并研究丹蛭降糖胶囊的干预作用。体外细胞实验,通过体外高糖诱导H9c2心肌细胞损伤模型,TLR4特异性阻断剂TAK-242及丹蛭降糖胶囊含药血清干预后,采用MTT及流式细胞术观察高糖对心肌细胞活力及凋亡率的影响,检测TLR4-MyD88-NF-κB信号通路和相关凋亡调节蛋白的变化,阐明TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调节高糖诱导心肌细胞坏死和凋亡过程的病理机制,揭示丹蛭降糖胶囊干预高糖诱导心肌细胞凋亡作用及与调节TLR4-MyD88-NF-κB信号通路的关系。结果第一部分,TLR4-MyD88-NF-κB信号通路调节糖尿病心肌损伤的机制及丹蛭降糖胶囊的干预作用研究(1)与正常组比,模型组大鼠给药0w、4w和8w空腹血糖,8w糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三脂显著性升高(P(27)0.01);大鼠体重随时间呈降低趋势,摄食量和饮水量呈递增趋势,且部分时间点观察结果有显著差异(P(27)0.01,P(27)0.05);大鼠心脏重量指数、左心室重量指数显著增加(P(27)0.01);左心室收缩压、左室内压最大收缩率、左室内压最大舒张率显著降低(P(27)0.01),左心舒张末压显著升高(P(27)0.01);HE及Masson结果提示,模型组大鼠心肌组织出现了明显的心肌细胞坏死、间质纤维化、炎细胞浸润等病理学改变。(2)与模型组比,丹蛭降糖胶囊各剂量组干预后模型大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三脂均显著降低(P(27)0.01,P(27)0.05),同时有效改善模型大鼠体重降低及摄食和饮水量的增加;大鼠心脏重量指数、左心室重量指数显著降低(P(27)0.01,P(27)0.05);左心室收缩压、左室内压最大收缩率、左室内压最大舒张率显著升高(P(27)0.01,P(27)0.05),左心舒张末压显著降低(P(27)0.01,P(27)0.05);HE及Masson结果也提示模型大鼠心肌组织病理学损伤得到显著改善。(3)与正常组比,模型组大鼠心肌组织TLR4、MyD88、NF-κB的蛋白和mRNA表达显著增加,血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著增加,TUNEL染色显示心肌组织凋亡率显著增加(P(27)0.01);(4)丹蛭降糖胶囊各剂量组与模型组比,心肌组织TLR4、MyD88、NF-κB的蛋白和mRNA表达显著减少,血清TNF-α、IL-1β和IL-6含量显著减少(P(27)0.01,P(27)0.05),模型大鼠的凋亡率显著降低(P(27)0.01,P(27)0.05)。第二部分,丹蛭降糖胶囊调节TLR4-MyD88-NF-κB信号通路抗高糖诱导心肌细胞凋亡的机制研究。(1)不同糖浓度(5.5、15、30、45、60mmol/L)和不同干预时间(12、24、48h),对H9c2心肌细胞存活率和心肌细胞凋亡率的观察结果显示,与正常对照组(5.5mmol/L)比,高糖模型组(30mmol/L)干预48h可显著降低心肌细胞存活率和增加心肌细胞凋亡率(P(27)0.01);(2)与正常对照组比,高糖模型组心肌细胞TLR4、MyD88的蛋白表达,MyD88和NF-κB p65 mRNA表达显著增加(P(27)0.01),NF-κB p65蛋白磷酸化水平(磷酸化p65/p65比值)显著提高(P(27)0.01),同时流式细胞术检测心肌细胞凋亡率显著增加(P(27)0.01)、caspase-3蛋白表达和Bax/Bcl-2比值(蛋白相对表达量比值)显著增加(P(27)0.01);(3)TLR4特异性阻断剂TAK-242的干预组与高糖模型组比,心肌细胞MyD88的蛋白表达、MyD88和NF-κB p65的mRNA表达、NF-κB p65蛋白磷酸化水平均显著降低(P(27)0.01),心肌细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达、Bax/Bc

关键词： 序贯机械通气   重症肺炎   呼吸衰竭   肺泡氧合功能   炎症状况  

摘要： 目的:探究将序贯机械通气治疗应用于重症肺炎合并呼吸衰竭患者的治疗中,对患者肺泡氧合功能以及全身炎症反应综合征造成的影响.方法:在我院数据库中抽取时间段2015年8月至2017年4月间收入的所有重症肺炎合并呼吸衰竭患者,抽取其中76例患者,并进行两组均分,每组中录入38例患者.对照组患者应用有创机械通气进行治疗,实验组患者则应用有创-无创序贯机械通气治疗,记录两组患者的血气参数和相关炎症指标.结果:实验结果中实验组患者的各项血气指标较对照组来说明显更优,同时实验组患者体内的炎性因子较对照组来说,有明显的降低状况,组间对比差异明显(<0.05).结论:在对重症肺炎合并呼吸衰竭患者进行治疗时,应用机械通气疗法能够有效提高患者的肺泡氧合功能,值得推广使用.

关键词： 小儿   哮喘   免疫炎症反应   布地奈德   西替利嗪  

摘要： 目的分析西替利嗪口服联合布地奈德吸入对小儿哮喘急性发作过程中免疫炎症反应。方法 2016年7月至2017年10月,医院门急诊收治的小儿哮喘患儿入组,采用布的奈德为主的药物治疗76例,纳入对照组,选择西替利嗪口服联合布地奈德吸入联合治疗,纳入观察组。结果 1周后,观察组与对照组外周血淋巴细胞计数、CD4+/CD8+、CRP低于治疗前,两组IL-3高于治疗前,观察组外周血淋巴细胞计数、CD4+/CD8+、IL-6、CRP下降值高于对照组,观察组NK、IL-10下降水平低于高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论西替利嗪口服联合布地奈德吸入对小儿哮喘急性发作,其具有调节免疫、抗炎效果。

关键词： BCL6   肾脏炎症   炎性小体   血管重构   氧化应激   高血压  

摘要： 原癌基因B细胞淋巴瘤6(B-cell lymphoma 6,BCL6)是一种序列特异性的转录抑制因子,其结构包含N端疏水的BTB/POZ区域和C末端6个kruppel样的锌指结构。BCL6通过与靶基因启动子区域特异性的DNA序列结合,抑制其转录。受BCL6调控的靶基因主要与细胞的活化、分化、凋亡、细胞周期阻滞等相关。BCL6在维持巨噬细胞静息状态,终止炎症的过程中发挥重要作用。BCL6与辅抑制因子SMRT、NCoR结合,通过抑制炎症反应,改善小鼠动脉粥样硬化。本论文包括两个部分,分别探讨了(1)BCL6在高血压的肾脏炎症中的作用及其分子机制;(2)BCL6高血压的血管重构中的作用与机制。一、BCL6通过负调控NLRP3转录抑制肾脏炎症1.背景肾脏的慢性炎症在高血压的发生发展中起重要作用,改善肾脏炎症可能成为降血压的治疗手段。多种炎症疾病的模型中均存在核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白 3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptors family pyrin domain containing 3,NLRP3)炎性小体的激活,然而NLRP3炎性小体在高血压肾脏损伤中的研究还十分有限。转录抑制因子BCL6负性调节NF-κB的表达,从而抑制NF-κB介导的炎症反应。已发现BCL6是自身免疫疾病和癌症治疗的治疗靶点。BCL6在高血压的肾脏炎症中的作用尚不明确。2.目的本研究拟探讨高血压炎症模型中BCL6对NLRP3炎性小体的激活和炎症的作用及其分子机制;并探讨慢病毒过表达BCL6对自发性高血压大鼠肾脏炎症的治疗作用。3.方法人肾小管上皮细胞系(HK-2)培养在10%FBS和1%双抗(100 units/ml青霉素、100 mg/ml链霉素)的DMEM/F12培养基中,并且保持37℃,5%的CO2饱和湿度。人胚肾细胞系(293ET细胞)培养在10%FBS和1%双抗(100 units/ml青霉素、100 mg/ml链霉素)的DMEM培养基中。在体实验部分采用13周龄雄性自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)和WKY大鼠,随机各分成两组。肾实质分别注射BCL6或者对照ERFP的重组慢病毒,为确保BCL6过表达的有效性,2周后再次尾静脉分别注射BCL6或者对照ERFP的重组慢病毒。2周之后4组大鼠利用Powerlab测压系统测量清醒状态下的尾动脉收缩压(systolic arterial pressure,SBP)后分别进行取材和急性试验。利用尿素测定试剂盒和肌酐测定试剂盒检测血清尿素氮和肌酐的含量。采用蛋白质免疫分析技术(Western blotting)检测BCL6、NLRP3、含CARD结构域的凋亡相关斑点蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain,ASC)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1前体(pro-cysteinyl aspartate specific proteinase 1,pro-caspase-1)前体、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutropil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、肾损伤分子-1(Kidney injury molecule-1,kim-1)、胱抑素 C(CystatinC)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)前体及成熟体和磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)表达。免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)检测NLRP3及BCL6的表达。用real-time PCR(RT-PCR)检测BCL6、NLRP3、IL-1β、白细胞介素-6 Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosi s factor-α,TNF-α)、趋化因子 C CL2 和 CXCL2的mRNA水平。采用双荧光素酶报告基因检测BCL6 与 NLRP3启动子的结合活性。电泳迁移率变化分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)和染色质免疫共沉淀分析(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)等方法研究 BCL6 与 NLRP3 启动子结合的结合位点。4.结果(1)SHR大鼠肾皮质BCL6 mRNA和蛋白水平下调,NLRP3炎性小体激活。(2)AngⅡ或LPS抑制HK-2细

关键词： 椎间盘退变   病理机制   自身免疫炎症反应   髓核细胞   白细胞介素9   肿瘤坏死因子α   前列腺素E2  

摘要： 椎间盘退变(Intervertebral disc degeneration，IDD)是导致腰背痛及椎间盘源性腰痛的最常见原因，给患者个人家庭及社会带来极大的经济负担。IDD的特征为椎间盘发生广泛的形态学和生物力学变化，椎间隙高度减低，椎间盘结构破坏，脊柱活动度下降，最终导致椎间盘生物力学功能丧失，同时引起下腰痛等临床症状。椎间盘退变主要的生化改变为椎间盘内软骨样髓核细胞出现变性及坏死，髓核细胞功能降低和数量减少，髓核细胞外基质中Ⅱ型胶原(TypeⅡ collagen，ColⅡ)、蛋白聚糖等功能性基质大分子丢失造成细胞赖以生存的环境被破坏。炎性介质在椎间盘退变过程中发挥着重要的作用。炎症因子在椎间盘退变过程中通过引起炎症反应、诱导细胞凋亡，破坏椎间盘的组织结构。研究证明，TNF-α、白细胞介素-1β(Interlukin-1β，IL-1β)、白介素17(Interlukin-17，IL-17)、前列腺素E2(Prostaglandin GE2)、环氧化酶-2(COX-2)、一氧化氮(NO)等炎症因子在椎间盘退变进程中起重要作用。炎症因子主要通过引起炎症反应、诱导细胞凋亡等途径，促进椎间盘退变;同时椎间盘组织内炎症因子相互作用发生级联反应，进一步加剧椎间盘组织的炎症反应，加速椎间盘退变。　　IL-9最初被认为是一种T淋巴细胞生长因子，主要由活化的CD4+Th9细胞分泌，此外肥大细胞、嗜酸性细胞、中性粒细胞、其他淋巴细胞亚群也可以少量分泌。研究表明，IL9在炎症反应中能够趋化炎症细胞，促进炎症因子表达，加剧炎症反应。目前，越来越多的证据表明Th9细胞和IL-9可能与人体炎症反应和自身免疫炎性疾病的发病机制相关。IL-9在多种自身免疫炎症疾病，如哮喘、免疫性脊髓炎、骨性关节炎及炎症性肠炎中发挥了重要作用。研究表明，IL-9可以促进IL-4介导B细胞分化及IgE的表达，此外IL-9还能够促进活化T细胞和肥大细胞增殖，从而促进过敏反症的发生。IL-9作为一种细胞因子可以通过调节嗜酸粒细胞的成熟和聚集，促进支气管上皮细胞表达T细胞趋化因子，从而促进过敏性哮喘的发展。在自身免疫性炎性反应方面，Nowak等在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)小鼠模型中发现，IL9能够影响中枢神经系统IL-17A和IL-6的表达。体外试验证明，IL-9促进股骨头坏死患者的关节软骨细胞表达、释放TNF-α、COX2等炎性因子，IL-9以浓度依赖和时间依赖方式促进关节软骨细胞分泌大量TNF-α、PGE2等炎症因子，进一步放大髋关节局部的免疫炎症反应。在退变椎间盘组织中，IL-9是否诱导髓核细胞TNF-α的表达及PGE2的产生，并通过二者发挥致炎作用，导致椎间盘内炎症反应，尚无明确研究。IL-9在椎间盘组织内作用的具体作用机制也不明确　　本研究主要分为两部分:第一部分主要探索IL-9及TNF-α在退变椎间盘的表达情况，明确IL-9及TNF-α是否参与椎间盘炎性退变的病理生理过程;第二部分主要通过体外实验探讨IL-9调控退变髓核细胞分泌TNF-α和PGE2的影响，进一步明确IL-9的在椎间盘自身免疫炎症反应中的作用机制。　　第一部分:IL-9、TNF-α在退变椎间盘组织及血清表达的研究　　研究目的:椎间盘退变(intervertebral disc degeneration，IDD)是导致腰背痛和腰椎间盘突出的最常见原因。近年来，突出或脱出的退变椎间盘组织所诱发的炎症反应和自身免疫反应导致神经根炎性疼痛的观点受到重视。前期研究表明辅助性T淋巴细胞9(T helper9，Th9)细胞及其相关细胞因子IL-9在自身免疫性疾病中发挥重要作用。本研究通过检测椎间盘突出患者椎间盘组织中IL-9和TNF-α的表达，明确IL-9及TNF-α是否参与椎间盘炎性退变的病理生理过程。　　研究方法:选取2012年10月-2015年10月在山东大学齐鲁医院骨外科住院、同时经临床表现、体格检查和影像学检查明确诊断为腰椎间盘突出症患者。40例患单节段椎间盘突出症病人的椎间盘组织以及5例脊柱外伤病人的椎间盘组织，根据影像学检查和临床表现分为突出组(Group P)、脱出组(Group E)和正常对照组(Control Group)。免疫组织化学(Immunohistochemistry，IHC)染色检测各组退变椎间盘组织中IL-9和TNF-α的表达，观察上述指标在各组退变椎间盘的表达变化及定位;蛋白印迹法(Western blot)检测各组退变椎间盘组织IL-9和TNF-α蛋白表达水平;应用实时定量荧光聚合酶链式反应(real-time PCR)观察各组椎间盘组织中IL-9和TNF-α mRNA含量变化。收集患者外

关键词： 急性颅脑损伤   全身炎症反应综合征   多器官功能障碍   血清炎症因子  

摘要： 目的 探讨急性颅脑损伤后全身炎症反应综合征与多器官功能障碍的特点.方法 选择我医院于2015年8月-2018年8月收治的30例急性颅脑损伤后全身炎症反应综合征患者和30例急性颅脑损伤后多器官功能障碍患者作为研究对象,前者为观察组,后者为研究组.另选择同期30例单纯急性颅脑损伤患者作为对照组.观察三组患者的血清炎症因子TNF-α、IL-6以及CRP水平.结果 采取ELISA法观察三组患者的血清炎症因子水平后,结果显示研究组在上述血清炎症因子水平的比较上明显高于对照组和观察组(P＜0.05),观察组在上述血清炎症因子水平的比较上明显高于对照组(P＜0.05).结论 急性颅脑损伤容易合并全身炎症反应综合征和多器官功能障碍,多器官功能障碍患者血清炎症因子水平更高,实验室检查血清炎症因子水平对防治上述两种合并症具有重要参考.