关键词： Microbiology   Nutrition  

摘要： Background: The gut microbiome is an extensive and diverse ecosystem that has recently been highlighted as an important modulator of metabolic, immune, and neurological function. Changes in gut microbiome species can potentially contribute to various disease states including dyslipidemia, type-2 diabetes mellitus, intestinal diseases, colorectal cancer and Alzheimer’s disease (AD).Apolipoprotein E (ApoE) is a plasma protein involved in cholesterol transport. The ApoE gene has 3 variants: ε2, ε3 and ε4; where the ApoEε4 allele is greatly associated with a high risk for developing dyslipidemia and AD, especially in women. Resveratrol (RSV), a natural polyphenol, is abundant in red grapes, blueberries, peanuts and many other foods. It has been associated with marked improvement in the gut microbiota. Purpose: The purposes of this study was to determine how APOE genotype modulates the effect of resveratrol supplementation on gut microbiota composition, pro-inflammatory biomarkers, and measures of nutritional staus in female mice. Methodology: A total of thirty (30), 12-week-old female mice of different genotypes: (8) wild type C57BL/6J (BLK 6), (14) Apoε 3 (cohorts 1&2), and (8) Apoε 4 were used in this study. Mice from each of the three strains were randomly assigned to either standard diet or resveratrol (RSV) supplemented diet. The study was conducted for a total of eight weeks. Animals had free access to food and water throughout the experiment, and the housing environment was controlled. Animals were housed in groups of 3 and 4 in each cage. Body weight and food intake were measured weekly. At sacrifice, fasting blood glucose was obtained using a glucometer and blood was withdrawn for serum lipid and biochemical analyses using multiplex ELISA. Colon with fecal content was collected for microbiome analysis via cDNA conversion of extracted RNA, and gene amplification. T-tests were used to determine diet effect within genotype. Two-way ANOVA was used to determine geno

关键词： 扶正泄浊汤   慢性肾脏病3-4期   微炎症状态  

摘要： 目的:基于中西医对慢性肾脏病微炎症状态的研究进展,临床观察扶正泄浊汤治疗慢性肾脏病3-4期微炎症状态的疗效及安全性,为中医药改善慢性肾脏病3-4期微炎症状态提供临床依据。方法:选取符合标准的患者,随机数表法随机分为试验组和对照组,对照组予西医基础治疗,试验组在西医基础治疗上加用导师验方扶正泄浊汤口服,疗程2月。通过收集治疗前和治疗后临床症状、肾小球滤过率(eGFR)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等资料,探讨扶正泄浊汤治疗慢性肾脏病3-4期微炎症状态的疗效及安全性。结果:本次研究结果如下:1.中医证候积分:试验组、对照组中医证候积分治疗后较治疗前均有下降,差异有统计学意义(P<0.05);而试验组改善优于对照组,两组差异有统计学意义(P<0.05)。2.中医证候疗效:试验组中医证候有效率为79.3%,对照组中医证候有效率为60.7%;试验组中医证候疗效优于对照组,两组差异具有统计学意义(P<0.05)。3.实验室指标:(1)Scr、BUN、eGFR:两组治疗后Scr、BUN水平与治疗前比较有明显下降,eGFR较治疗前明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);试验组Scr、BUN下降幅度及eGFR上升幅度均大于对照组,两组之间差异有统计学意义(P<0.05)。(2)CHOL、TG、LDL、HDL:两组 CHOL、TG、LDL较治疗前有明显下降,HDL较治疗前明显上升,差异有统计学意义(P<0.05);试验组CHOL、TG、LDL下降幅度及HDL上升幅度均大于对照组,两组之间差异有统计学意义(P<0.05);(3)hs-CRP:试验组同治疗前比较,hs-CRP水平明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);对照组同治疗前比较,治疗后hs-CRP水平无明显下降,差异无统计学意义(P>0.05);两组之间比较差异有统计学意义(P<0.05)。(4)安全性:两组患者的血常规、尿常规、大便常规、心电图、肝功能与治疗前相比,均无明显异常。试验组1例患者出现轻微腹泻,调整方中大黄剂量后好转。结论:临床服用扶正泄浊汤可有效改善慢性肾脏病3-4期患者微炎症状态,并可改善患者临床症状、肾功能、脂代谢紊乱,从而延缓肾脏病进展。

关键词： 电针   任督脉   急性脑梗死   免疫及炎症反应   调控作用  

摘要： 背景:脑卒中在目前人类社会众多致死疾病之中排名前三,而急性脑梗死(Acute cerebral infrarction,ACI)是其中最为常见的类型,在脑卒中患者中的占比达到了 3/4。我国急性脑梗死的发病率随着中国老龄化社会的发展也出现了明显上升的趋势。该病存活的患者常遗留严重肢体残疾甚至瘫痪。因此,最大程度地促进脑梗死偏瘫患者肢体功能的恢复,提高患者的生活质量,让患者告别轮椅,重拾生活的信心,从而回归社会的学习、工作岗位对家庭和社会各界均具有重要的意义。电针广泛应用于脑梗死后功能障碍的康复治疗,然而,其作用机制尚不完全清晰。免疫应答与炎症反应是脑梗死发生发展的重要病理过程。电针能否通过调控免疫应答及炎症反应而促进脑梗死后神经功能修复,目前相关研究报道较少见,有待进一步探索。目的:本研究观察电针任督脉对ACI患者NIHSS评分、MBI评分、mRS评分的影响,明确电针任督脉对ACI患者神经功能、日常生活活动能力及疾病残损程度的影响,并检测不同时间点患者血清免疫补体C3、C4及炎症反应蛋白超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的水平,探讨电针治疗前后ACI患者C3、C4及hs-CRP水平的变化,分析其水平变化与病情严重程度的相关性及与预后的关系,从免疫应答和炎症角度初步研究电针任督脉治疗ACI的机理,为临床选择电针任督脉治疗急性脑梗死患者提供新的科学依据。方法:①纳入86例在2018年3月～2019年1月于佛山市中医院脑病科住院且在发病3天之内的ACI患者,随机分为两组,其中电针组(常规基础治疗+电针)43例、对照组(常规基础治疗)43例:另选匹配同期年龄的健康体检者30例,作为空白对照;②治疗前进行NIHSS、MBI、mRS评分;检测免疫补体C3、C4及炎症反应蛋白hs-CRP水平:③治疗后(第10d)再次进行NIHSS、MBI、mRS评分;治疗中(第5d)、治疗后(第10d)检测免疫补体C3、C4及炎症反应蛋白hs-CRP水平;④治疗结束后30天随访MBI评分、mRS评分;⑤收集汇总数据,用SPSS 22.0对数据进行统计分析。结果:1.在神经功能评分方面:治疗前两组患者的NIHSS评分无显著性差异(P>0.05);治疗后与治疗前比较,两组患者的NIHSS评分均降低,差异有显著性(P<0.01);治疗后电针组患者NIHSS评分明显低于对照组,且有显著性差异(P<0.01)。2.在日常生活活动能力方面,电针组、对照组患者治疗前MBI评分无显著性差异(P>0.05);两组患者治疗后、随访30天MBI评分均明显增高,差异有显著性(P<0.01);电针组患者治疗后MBI评分与对照组无显著性差异(P>0.05);随访30天时,电针组患者MBI评分高于对照组,差异有显著性(P<0.01)。3.在病残损程度方面:电针组、对照组患者治疗前mRS评分无显著性差异(P>0.05);两组患者治疗后、随访30天mRS评分均降低,差异有显著性(P<0.01);电针组患者治疗后mRS评分与对照组无显著性差异((P>0.05));出院第30天随访时,电针组患者mRS评分明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。***患者在急性期(治疗前)的血清补体C3、C4水平低于正常健康人群,两者差异均有显著性(P<0.01);而炎症反应蛋白hs-CRP水平高于正常健康人群,差异有显著性(P<0.01)。5.治疗前,电针组、对照组患者补体C3水平无显著性差异(P>0.05);治疗后两组患者的补体C3水平均明显上升,差异有显著性(P<0.01);治疗后电针组患者补体C3水平明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01)。6.治疗前,电针组、对照组患者补体C4水平无显著性差异(P>0.05);治疗后两组患者的补体C4水平均明显上升,差异有显著性(P<0.01);治疗后电针组患者补体C4水平明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01)。7.治疗前,电针组、对照组患者炎症反应蛋白hs-CRP水平无显著性差异(P>0.05);治疗后两组患者的hs-CRP水平均明显下降,差异有显著性(P<0.05);治疗后电针组患者hs-CRP水平明显低于对照组,差异有显著性(P<0.01)。***患者血清C3、C4水平与hs-CRP水平有显著相关性(P<0.05),其中C3水平与hs-CRP水平呈显著负相关(r=-0.235,P=0.043<0.05),C4水平与hs-CRP水平相关性不显著(r=-0.194,P=0.094>0.05)。***患者血清C3、C4、hs-CRP水平与NIHSS评分有显著相关性(P=0.000<0.01),其中血清C3水平与NIHSS评分呈显著负相关(r=-0.388,P=0.000<0.01),C4水平与NIHSS评分相关性不显著(r=-0.075,P=

关键词： Graves病   外泌体   自身免疫甲状腺病  

摘要： 目的:1、探讨Graves病患者血清来源外泌体(Exosome,exo)与正常人血清来源的外泌体是否存在质和量的差异。2、探究Graves病患者分泌的外泌体,是否与树突细胞的TLR2或TLR3结合,促进炎症反应。方法:本研究选取2016年至2019年于中国医科大学附属第一医院门诊就诊的初发Graves病患者26例(3名男性,23名女性),炎症活动期未进行激素冲击的Graves眼病(Graves ophthalmopathy,GO)患者7例(5名男性,2名女性)。从社区人群选取年龄、性别、BMI大致匹配的健康志愿者作为患者的对照组。抽取患者与对照组自愿者血液离心得到血清,分别使用试剂盒与超速离心机两种方法提取exo。首先使用蛋白免疫印迹方法(Western blot,WB)检测外泌体标志物CD63的表达,透射电镜分析其形态,外泌体浓度粒径分析其大小及浓度,对提取的外泌体进行鉴定;BCA试剂盒法来测定外泌体的浓度,评估初发Graves病、炎症活动期未进行激素冲击GO患者与对照组相比血清来源外泌体浓度有无差异;Western blot检测外泌体中甲状腺的特异性抗原。对患者血液中TRAb与血清来源外泌体中IGF-1R、HSP60、TPO蛋白水平进行相关性分析;初发Graves病患者与对照组自愿者血清通过超速离心方法提取的外泌体与健康人来源外周血单核细胞(PBMC)共培养24h,共聚焦显微镜检测外泌体与Toll样受体在细胞的定位情况。流式染色细胞分析CD11c+TLR2+、CD11c+TLR3+的表达情况。ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-1β、IL-6的表达情况。结果:(1)通过两种方法(试剂盒、超速离心法)获取的直径在30-150nm的扁圆型微泡,同时表达外泌体标志蛋白CD63,可鉴定为外泌体。(2)Graves病患者、炎症活动期未进行激素冲击GO患者、健康志愿者血清来源外泌体浓度上无差异。(3)对Graves病组患者、炎症活动期未进行激素冲击GO患者与健康志愿者血清来源外泌体进行WB蛋白组分分析,结果显示Graves病患者、炎症活动期未进行激素冲击GO患者中外泌体IGF-1R、TPO、HSP60表达明显高于对照组,TSHR在三组间无明显差异。患者血液中TRAb与血清来源外泌体中IGF-1R表达存在显著正相关。(4)共聚焦显微镜显示荧光标记的外泌体可被细胞摄取,与Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)共同表达在PBMC细胞上。(5)Graves病患者与健康人血清来源外泌体与健康志愿者来源的PBMC共培养24h,细胞流式分析显示Graves病患者血清外泌体促进CD11c+TLR2+、CD11c+TLR3+表达增高;(6)共培养24h的Graves病组细胞上清中细胞因子(IL-6、IL-1β)水平明显高于对照组结论:(1)Graves病组、未进行激素冲击GO患者组与对照组比较,血清外泌体浓度无明显差异,但蛋白组分IGF-1R、TPO和HSP60表达增高;(2)Graves病患者血清外泌体促进PBMC中CD11c+TLR2+、CD11c+TLR3+表达增高,HSP60是TLR2的配体,HSP60表达增高,推测外泌体中HSP60可能与树突细胞中TLR2结合,刺激PBMC分泌炎症因子(IL-6、IL-1β),可促进炎症反应的发生。

关键词： bone loss   bone mineral density   bone remodeling   inflammation   rheumatoid arthritis   炎症   类风湿关节炎   骨密度   骨重建   骨量丢失   bone loss   bone mineral density   bone remodeling   inflammation   rheumatoid arthritis   Language of Keywords: English   Chinese  

摘要： 目的 探讨炎症、骨重建和类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）全身骨量丢失的相关性。方法 纳入符合2010 年美国风湿病学会/欧洲抗风湿联盟RA分类标准的患者117例，采用酶联免疫吸附法测定RA患者和健康对照人群的血清肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor α，TNF-α）、白介素-6（interleukin，IL-6）和核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor-κB ligand，RANKL），采用电化学发光法检测RA患者血清I型胶原羧基端交联肽（C-terminal telopeptide of type I collagen，I-CTX）和I型胶原氨基端前肽（aminoterminal propeptide of type I collagen，PINP），通过双能X线吸收法测定患者腰椎和髋部骨密度（bone mineral density，BMD），运用Pearson’s相关系数分析血清TNF-α、IL-6、RANKL、I-CTX、PINP和RA患者腰椎及髋部骨密度的相关性。结果 纳入的患者中初发未治疗患者（初治组）为41例，其中骨量减低患者占46.3%，骨质疏松患者占24.4%；曾使用糖皮质激素和（或）传统缓解病情抗风湿药和（或）生物制剂和（或）双膦酸盐患者（复治组）为76例，其中骨量减低人群占28.9%，骨质疏松患者占44.7%。初治患者血清I-CTX、PINP与髋部骨密度呈显著负相关（P＜0.05）;复治患者血清TNF-α和IL-6水平显著高于对照组（P＜0.05），血清TNF-α水平与RANKL呈显著正相关（P＜0.05），血清IL-6与腰椎骨密度呈显著负相关（P＜0.05）。结论 骨转换增高可能是引起初治RA患者髋部骨量丢失的原因；持续的慢性炎症可能引起复治RA患者血清RANKL水平增加，导致患者腰椎骨量丢失。 [ABSTRACT FROM AUTHOR]

关键词： 维持性血液透析   慢性肾脏病矿物质骨代谢紊乱   营养   炎症  

摘要： 目的:探讨遵义医科大学附属医院维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者矿物质骨代谢紊乱(mineral bone disorder,MBD)相关指标与营养-炎症状态的关系,达到更好地控制慢性肾脏病矿物质骨代谢紊乱(chronic kidney disease-mineral bone disorder,CKD-MBD)的目的。方法:收集遵义医科大学附属医院2018年3月-2018年10月血液透析中心进行MHD的CKD5期患者共95例。CKD-MBD评估指标包括透前血钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)、甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,i PTH)。且空腹血液透析前血Ca维持在2.1～2.5 mmol/L、P维持在1.13～1.78 mmol/L、i PTH维持在150～600pg/ml(即维持在正常高限的2-9倍)分别为三项指标的目标范围,若上述三项指标均在目标范围内则为达标组,其中任何一项指标不在目标范围内即为未达标组。营养指标为白蛋白(albumin,ALB)、前白蛋白(prealbumin,PA),炎症指标为C反应蛋白(C-reactive protein,CRP),营养及炎症共同指标为β2微球蛋白。比较达标组与未达标组临床指标之间的差异性,并分析影响空腹血液透析前血Ca、P、i PTH达标的因素,总结遵义医科大学附属医院MHD患者MBD的影响因素及其与营养-炎症状态之间的关系。结果:根据纳入与排除标准,符合标准的患者共95例,其中男57例(60%),女38例(40%),平均年龄(52.79±13)岁。所研究患者病因构成:慢性肾小球肾炎49例(51.58%),糖尿病11例(11.58%),高血压10例(10.53%),梗阻性肾病3例(3.16%),肾病综合征2例(2.11%),糖尿病合并高血压8例(8.42%),其余病因共12例(12.63%)。达标组8例(8.42%),未达标组87例(91.58%)。(1)达标组与未达标组比较:达标组中血液透析前镁(magnesium,Mg)、CRP、血肌酐(serum creatinine,Scr)、β2微球蛋白显著低于未达标组(P<0.05),达标组中血液透析前ALB、PA显著高于未达标组(P<0.05)。(2)多因素logistic回归分析表明:(1)血液透析前高尿酸(uric acid,UA)及透后高平均动脉压是导致血Ca紊乱的独立危险因素;(2)血液透析前低25-羟基维生素D是导致血P紊乱的独立危险因素。结论:1.维持性血液透析患者矿物质骨代谢紊乱发生率高,且达标组较未达标组营养状态好,达标组炎症状态较未达标组控制好。2.维持性血液透析患者透前高尿酸及透后高平均动脉压更易导致血钙紊乱。3.维持性血液透析患者透前低25-羟基维生素D更易导致血磷紊乱。

关键词： 慢性肾脏病   微炎症状态   钙磷代谢  

摘要： 目的探索各期CKD(Chronic kidneydisease,慢性肾脏病)患者微炎症状态与钙磷代谢指标的相关性,对延缓CKD的进展及治疗提供依据。方法选取2017年12月至2018年8月入住本院的慢性肾脏病患者102例。根据患者肾功能分为4组,CKD1-2期16例,CKD3期患者27例,CKD4期患者29例,CKD5期患者30例,采用ELISA法检测各组患者血清白介素-6(IL-6),采用免疫比浊法检测各组血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、纤维蛋白原(Fib),全自动生化分析仪检测血肌酐、尿素氮、血钙、血磷、血脂,化学发光法检测甲状旁腺激素(PTH),全自动血沉仪检测血沉等,并对结果进行分析。结果与CKD1-2期相比,CKD4期患者血Ca明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);CKD5期患者血Ca明显低于CKD3期和CKD4期患者,差异有统计学意义(P<0.05);CDK1-2期与CDK3期、CKD3期与CKD4期、CKD1-2期与CDK5期间血Ca差异均无统计学意义(P>0.05);CKD5期患者血P明显高其他各期组,差异有统计学意义(P<0.05);CKD1-2期、CKD3期、CKD4期患者间的血P差异无统计学意义(P>0.05)。CKD5期患者血PTH明显高于其他期患者,差异有统计学意义(P<0.05);CKD3期、CKD4期患者血PTH明显高于CKD1-2期,差异有统计学意义(P<0.05);CKD3期与CKD4期患者血PTH差异无统计学意义(P>0.05)。CKD5期患者hs-CRP明显高于其他各期组,差异均有统计学意义(P<0.05);CKD1-2期、CKD3期、CKD4期两两之间的hs-CRP差异均无统计学意义(P>0.05)。CKD5期患者血IL-6明显高于CKD1-2期、CKD3期、CKD4期,差异均有统计学意义(P<0.05);CKD4期患者血IL-6明显高于CKD1-2期、CKD3期,差异均有统计学意义(P<0.05);CKD1-2期与CKD3期患者间的血IL-6差异无统计学意义(P>0.05);各期Fib相比,差异无统计学意义(P>0.05)。相关性分析:CKD5期患者hs-CRP与血Ca水平呈负相关(r<0,P<0.05);CKD5期患者hs-CRP与血P水平呈正相关(r>0,P<0.05);CKD5期患者hs-CRP与血PTH水平呈正相关(r>0,P<0.05);CKD4期患者血IL-6与血P水平呈正相关(r>0,P<0.05);CKD4期患者血IL-6与血PTH水平呈正相关(r>0,P<0.05)。CKD5期患者IL-6与血Ca水平呈负相关(r<0,P<0.05);CKD5期患者血IL-6与血P水平呈正相关(r>0,P<0.05);CKD5期患者血IL-6与血PTH水平呈正相关(r>0,P<0.05)。CKD1-2期患者Fib与血Ca水平呈负相关(r<0,P<0.05)。CKD5期患者Fib与血P、血PTH水平之间均呈负相关(r<0,P<0.05)。多元线性回归:CKD1-2期,CKD3期组患者钙磷代谢指标与血hs-CRP、血IL-6、血Fib均无明显统计学相关性(P>0.05),CKD4期,CKD5期组患者钙磷代谢指标与血hs-CRP、血IL-6有显著的统计学相关性(P<0.05)。结论CKD患者存在微炎症状态,同时伴有钙磷代谢异常,CKD患者钙磷代谢紊乱与CKD分期正相关,钙磷代谢紊乱与微炎症状态之间具有相关性。

关键词： 高迁移率蛋白   系统性炎症应答   一氧化氮合成酶2(NOS2)   血管通透性  

摘要： 研究背景与研究目的:败血症,又称脓毒症,是一种严重的可能危及生命的全身性炎症反应,其致病原因主要由感染或者组织损伤引起的全身性炎症应答综合征,可导致多器官组织损伤,甚至可因器官衰竭而导致死亡。败血症目前仍然是医院重症监护病房中最常见的死亡原因,败血症的预防与治疗依然是当前社会的巨大公共卫生负担。高迁移率(HMG-Box)蛋白家族是一类细胞核蛋白,具有独特的DNA结合域HMG-Box,与非B型DNA结构的亲和力高,通过弯曲,扭结和展开来扭曲DNA,具有维持染色质结构,DNA修复,转录调控,或者促进核糖体的生物合成等作用。然而,1999年研究者意外的发现HMGB1在全身性炎症反应中可以从细胞核中分泌到细胞外,并作为一种促炎细胞因子介导炎症反应。在败血症期间,阻止HMGB1的分泌或者用HMGB1特异性抗体靶向血液中HMGB1,可以显著提高致死性败血症的生存率。现有文献表明,高迁移率蛋白家族中的多个成员参与多种因素介导的炎症反应。HMGXB4是我们首次在哺乳动物中克隆的该家族的新成员,其是否参与炎症反应尚不清楚。本文旨在探讨Hmgxb4基因在全身性炎症诱导的败血症中的作用及其分子机制,从而为寻找治疗炎症性败血症的新靶点提供实验依据。实验方法:***刺激对小鼠巨噬细胞Hmgxb4表达的影响:1)提取WT小鼠的腹腔巨噬细胞,用不同剂量的LPS刺激巨噬细胞或者用100 ng/ml LPS刺激巨噬细胞不同的时间点,提取总RNA和总蛋白通过q RT-PCR和Western blot实验检测LPS刺激巨噬细胞对Hmgxb4表达的影响;2)用免疫荧光染色法检测LPS刺激巨噬细胞诱导HMGXB4蛋白表达的细胞定位;3)细胞质与细胞核蛋白分离法进一步分析HMGXB4蛋白的细胞定位。2.全身性敲除Hmgxb4基因小鼠及其炎症性败血症模型的建立与表型分析:1)构建全身性Hmgxb4基因敲除小鼠及其特征分析;2)利用野生型或全身性Hmgxb4基因敲除鼠制备内毒素(LPS)或多微生物感染(CLP)诱导的小鼠败血症模型,检测下述指标:a.检测小鼠的生存曲线;***染色分析小鼠肺和肾组织的损伤程度;***法分析小鼠血清促炎症细胞因子的含量;***法检测肺组织的细胞凋亡;e.肺组织免疫荧光染色检测肺组织中的巨噬细胞浸润情况;f.尾静脉注射EBD检测小鼠肺血管的通透性。3.全身性敲除Hmgxb4基因对炎症所致小鼠败血症的保护作用及其机制分析:1)RNAseq鉴定LPS刺激诱导Hmgxb4基因缺失巨噬细胞的基因差异性表达;2)结合RNAseq和ENCODE数据库中HMGXB4 Ch IP-seq数据鉴定HMGXB4直接调控的潜在靶基因;3)采用q RT-PCR和Western blot技术验证巨噬细胞缺失HMGXB4对潜在的靶基因Nos2的转录调控及其生物学功能分析;4)利用双荧光素酶报告质粒分析HMGXB4对靶基因Nos2启动子的转录调控作用;5)利用腹腔注射高剂量LPS(20 mg/kg)诱导WT和Hmgxb4基因缺失小鼠的急性肺损伤模型,并用q RT-PCR和Western blot验证HMGXB4对靶基因Nos2的转录调控;6)在WT和Hmgxb4基因缺失小鼠中腹腔注射LPS诱导全身性炎症反应,用NOS2抑制剂1400W抑制NOS2活性,尾静脉注射EBD检测小鼠肺血管的通透性。实验结果:***介导的巨噬细胞激活可诱导核蛋白HMGXB4的转录与表达:1)q RT-PCR和Western blot结果显示,LPS以时间与剂量依赖性方式诱导腹腔巨噬细胞Hmgxb4的转录与表达;2)免疫荧光染色及细胞质与细胞核蛋白分离结果显示,HMGXB4是腹腔巨噬细胞的一个核蛋白,LPS可诱导其表达,且定位在核内。2.敲除Hmgxb4基因显著改善系统性炎症反应导致的小鼠组织损伤和致死率:1)我们首先构建了Hmgxb4基因全身性敲除小鼠,结果显示敲除Hmgxb4基因对小鼠的发育与繁殖没有明显的影响;2)敲除Hmgxb4基因可以显著延长LPS或多微生物感染(CLP)诱导的致死性败血症的小鼠生存时间;3)HE染色结果显示,敲除Hmgxb4基因可以明显保护LPS诱导的急性肺和肾组织损伤;4)ELISA结果显示,敲除Hmgxb4基因对经典的促炎细胞因子分泌没有影响;5)TUNEL染色结果显示,敲除Hmgxb4基因可明显减少LPS诱导小鼠急性肺损伤的细胞凋亡;6)LGALS3(Mac2)免疫荧光染色显示,敲除Hmgxb4基因显著减少LPS诱导小鼠急性肺损伤时的巨噬细胞浸润;7)EBD结果显示,敲除Hmgxb4基因可以明显保护全身性炎症诱导的肺血管通透性。3.敲除Hmgxb4基因通过抑制LPS诱导的NOS2表达及NO产生保护LPS诱导的全身性炎症引起的肺组织损伤:1)RN

关键词： 可溶性人类白细胞Ⅰ类抗原   可溶性人类白细胞Ⅱ类抗原   中重度COPD   炎症反应  

摘要： 目的:本研究选择了健康对照人群和中重度稳定期COPD患者,分析可溶性人类白细胞抗原Ⅰ类分子（soluble human leukocyte class Ⅰ,sHLA-Ⅰ）和可溶性人类白细胞抗原Ⅱ类分子（soluble human leukocyte classⅡ,sHLA-Ⅱ）在不同人群中的水平及其在COPD炎症反应中的评估价值。方法 选择2015年9月2017年12月期间于宁波市第九医院门诊及住院稳定期COPD患者100例作为COPD组,另外选取同时期体检部门50例健康人员作为健康对照组。COPD组患者根据病变程度分为中度COPD稳定期患者50例和重度COPD稳定期患者50例。记录所有被研究对象的性别、年龄、身高、体重等一般资料;抽取被研究对象的早晨空腹肘静脉血,使用RTube系统（Respiratory Research,Ⅰnc.,USA）冲洗口腔后20分钟内收集呼出气冷凝物;酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELⅠSA）读数器在405nm波长下测定血清和呼气凝结冷凝物（exhaled breath condensate,EBC）中sHLA-1和sHLA-Ⅱ分子的浓度;肺功能仪检测第1秒用力呼气容积（forced expiratory volume in one second,FEV1）、用力肺活量（forced vital capacity,FVC）以及FEV1/FVC;检测被研究对象的痰沉渣炎症细胞计数;全自动生化分析仪测定所有研究对象的血清白细胞介素-6（Ⅰnterleukin 6,ⅠL-6）、白细胞介素-8（Ⅰnterleukin 8,ⅠL-8）、γ-干扰素（Ⅰnterferon-γ,ⅠFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平;免疫比浊法测定C反应蛋白（C-reaction protein,CRP）水平。结果 （1）COPD组患者的EBC sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ和Serum sHLA-Ⅱ高于健康对照组（P<0.05）;重度COPD患者的EBCsHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、SerumsHLA-Ⅱ高于中度COPD患者（P<0.05）。（2）COPD患者中,EBC和血清中sHLA-Ⅰ和sHLA-Ⅱ水平呈显著正相关性（P<0.05）;不同严重程度COPD患者EBC和血清中sHLA-Ⅰ和sHLA-Ⅱ水平呈显著正相关性（P<0.05）。（3）COPD组FEV1、FVC、FEV1/FVC水平低于健康对照组（P<0.05）;COPD患者的FEV1、FVC、FEV1/FVC水平随肺病情严重程度而逐渐升高（P<0.05）。中度COPD患者FEV1、FVC、FEV1/FVC与Serum sHLA-Ⅱ呈显著负相关性（P<0.05）;重度COPD患者FEV1、FVC与EBC sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、Serum sHLA-Ⅱ呈显著负相关性（P<0.05）;FEV1/FVC与EBC sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、Serum sHLA-Ⅱ水平呈显著负相关性（P<0.05）。（4）COPD组中性粒细胞计数高于健康对照组,淋巴细胞和巨噬细胞计数低于对照组,（P<0.05）;两组受试者嗜酸性粒细胞计数比较差异无统计学意义（P>0.05）。COPD患者的中性粒细胞水平随病情严重程度逐渐升高,淋巴细胞和巨噬细胞计数随病情严重程度逐渐降低（P<0.05）;各组患者之间的嗜酸性粒细胞计数比较差异无统计学意义（P>0.05）。中度COPD和重度COPD患者中性粒细胞计数与EBC sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、Serum sHLA-Ⅱ呈正相关性（P<0.05）;淋巴细胞计数与EBC sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、Serum sHLA-Ⅱ呈负相关性（P<0.05）;中度COPD患者的巨噬细胞计数与Serum sHLA-Ⅱ呈显著负相关性（P<0.05）,重度COPD患者的巨噬细胞计数与Serum sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅱ呈显著负相关性（P<0.05）;嗜酸性粒细胞计数与EBC sHLA-Ⅰ、Serum sHLA-Ⅰ、EBC sHLA-Ⅱ、Serum sHLA-Ⅱ无明显相关性（P>0.05）。（5）COPD组ⅠL-6、ⅠL-8、CRP、ⅠNF-γ、TNF-α水平均高于健康对照组（P<0.05）;COPD患者的ⅠL-6、ⅠL-8、CRP、ⅠNF-γ、TNF-α水平随肺病情严重程度而逐渐升高（P<0.05）。中度COPD和重度COPD患者的ⅠL-6、ⅠL-8、CRP、ⅠNF-γ与E

关键词： 小细胞肺癌   TNM分期   手术   中医药   炎症状态   营养状态   生存期  

摘要： 背景:肺癌是我国乃至全世界最常见的恶性肿瘤以及首位的癌症死亡原因,其发病率成逐年递增趋势,其中小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)约占肺癌比例的15%-20%。SCLC是一种起源于神经内分泌细胞的特殊类型肺癌,因其具有分化程度低、生长迅速、恶性程度高、多在早期出现纵膈及远处转移、尽管对放化疗敏感但复发率高等不同于非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的生物学特性,故预后极差。目前SCLC确切的发病机制尚不明确,但预后与多种因素相关。本研究旨在通过回顾性调查,以探讨Ⅰ-Ⅲ 期SCLC患者预后的影响因素,有利于临床医生更为全面、准确的评估患者病情,鉴别高危人群,针对不同患者的自身特征、肿瘤特征,制订出个性化的治疗方案,因人制宜,从而延长患者的生命,提高患者的生活质量。方法:根据纳入排除标准选取2008年1月至2018年1月在中日友好医院初次就诊的Ⅰ-Ⅲ期SCLC患者作为研究对象,采集患者的临床病理特征及治疗数据,并通过电话、邮件等随访方式对纳入患者进行随访,以获取生存资料。采用SAS9.4及SPSS25.0统计软件对相关临床病理因素及生存期进行分析,统计患者的中位生存期、中位无进展生存期及1年、3年、5年生存率,运用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,单因素分析采用Log-Rank检验,多因素预后分析采用Cox风险回归模型,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:本研究共纳入82例Ⅰ-Ⅲ 期SCLC患者。全体患者的中位生存期(mOS)为33个月,中位无进展生存期(mPFS)为20个月;1年、3年、5年生存率为:95%、45%、32%。单因素分析显示,肿瘤大小(T,P=0.025)、淋巴结转移(N,P<0.001)、TNM分期(P=0.002)、淋巴细胞计数(L,P<0.001)、预后营养指数(PNI,P=0.043)、神经元特异性烯醇化酶(NSE,P=0.016)、手术(P=0.001)、中医药(P=0.002)与患者的OS相关;淋巴结转移(N,P=0.041)、淋巴细胞计数(L,P=0.001)、肺癌炎症指数(ALI,P<0.001)、手术(P=0.018)、中医药(P=0.032)与患者的PFS相关。而患者在年龄、性别、吸烟史、家族史、KPS评分、副肿瘤综合征、病理类型、其他炎性指标[中性粒细胞计数(NEUT)、血小板计数(PLT)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)]、血清白蛋白(ALB)、乳酸脱氢酶(LDH)、癌胚抗原(CEA)等方面的生存差异无统计学意义(P>0.05)。多因素分析显示,N2-3(N2:P=0.028,N3:P=0.010)、淋巴细胞计数(P=0.040)是影响 Ⅰ-Ⅲ 期 SCLC 患者OS的独立因素;肺癌炎症指数(P=0.005)是影响Ⅰ-Ⅲ 期SCLC患者PFS的独立因素;是否接受手术治疗(OS、PFS均为P<0.001)及中医药治疗(OS:P<0.001;PFS:P=0.006)均是影响Ⅰ-Ⅲ 期SCLC患者OS、PFS的独立因素。结论:全体患者的中位生存期、中位无进展生存期及生存率与既往研究相比较长,这可能与患者的临床分期、炎症状态、营养状态、手术治疗及中医药治疗等多种因素协同作用有关。局限期小细胞肺癌(LS-SCLC)的异质性较大,采用与非小细胞肺癌(NSCLC)相同的美国癌症联合会(AJCC)第8版TNM分期标准,可有效区分LS-SCLC患者的预后。患者的炎症状态及营养状态与患者的预后相关,即炎症状态与患者的预后呈负相关性,营养状态与患者的预后呈正相关性。以化疗为基础的综合治疗为本研究中Ⅰ-Ⅲ 期SCLC患者的主要治疗模式。对于能够接受手术治疗的患者,手术治疗能够延长患者的生存期。中药具有抗肿瘤功效,中药联合化疗相比单纯化疗可延缓肿瘤复发、延长患者的总生存期、提高远期生存率。尽管组间比较在年龄、性别、吸烟史、家族史、KPS评分、副肿瘤综合征、病理类型、乳酸脱氢酶(LDH)等方面显示出了一定的生存差异,但差异无统计学意义(P>0.05)。