关键词： 白芍总苷   维持性血液透析   微炎症   生存质量  

摘要： 目的1.探讨维持性血液透析(MHD)患者的微炎症状态;2.探讨白芍总苷(TGP)对维持性血液透析(MHD)患者微炎症状态的影响及部分机制。3.评估维持性血液透析(MHD)患者给予白芍总苷(TGP)治疗前、后生存质量的变化。方法1.纳入60例在我院透析中心行维持性血液透析的患者及30例在门诊体检正常者,并应用随机数字表法将60例MHD患者分成MHD治疗组和MHD对照组,体检正常者为正常对照组。***对照组行规律血液透析及降压、促红细胞生存素、补铁等药物治疗,MHD治疗组在MHD对照组基础上加用白芍总苷(TGP)胶囊,每次1.2g,每日2次,治疗时间为4个月。3.抽取3组患者治疗前、及MHD对照组和MHD治疗组治疗后清晨空腹静脉血,观察治疗前后血液中营养指标白蛋白(Alb)、血红蛋白(Hb),炎症指标白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(HsCRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)水平,及Toll样受体4((TLR4)和髓样分化因子88(MYD88)水平。4.分别比较治疗前MHD组与正常对照组营养指标、微炎症指标水平、Toll样受体4((TLR4)和髓样分化因子88(MYD88)水平;及治疗后MHD治疗组与MHD对照组上述相关指标的变化。5.同时用KDQOL-SF肾病生活质量量表分别评估治疗前、后MHD对照组和MHD治疗组生存质量评分,比较两组生存质量变化水平。结果1.治疗前,所有MHD患者外周静脉血中Alb、Hb水平较正常对照组下降,Hs-CRP、IL-6、TNF-α和NGAL水平较正常对照组明显上升,TLR4和MYD88水平较正常对照组明显上升,且差异均有统计学意义(P<0.05);2.治疗后,MHD治疗组外周静脉血中Alb、Hb水平较治疗前明显上升,Hs-CRP、IL-6、TNF-α和NGAL水平较治疗前明显下降,TLR4和MYD88水平较治疗前下降,且差异均有统计学意义(P<0.05)。3.治疗后,MHD对照组外周静脉血中Alb、Hb水平,Hs-CRP、IL-6、TNF-α和NGAL水平,TLR4和MYD88水平较治疗前变化不明显,且差异无统计学意义(P>0.05)。4.治疗前,MHD治疗组和对照组生存质量评分差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,MHD对照组生存质量评分前后变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);MHD治疗组生存质量评分提高,与治疗前自身对比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论1.维持性血液透析患者确实存在着微炎症状态;2.白芍总苷胶囊可以提高MHD患者ALB,Hb水平,纠正患者营养状态;降低IL-6、Hs-CRP、TNF-α和NGAL水平,改进了MHD患者微炎症状况,可能与抑制TLR4/MyD88信号通路有关。3.给予白芍总苷治疗后,MHD患者生存质量水平提高,可能是与改善患者微炎症状态相关。

关键词： 炎症状态   二甲双胍   线粒体脂肪酸合成通路Ⅱ   心肌细胞   糖尿病  

摘要： 研究背景：炎症与多种临床疾病的发病机制密切相关，包括心血管疾病、1型糖尿病、2型糖尿病及其并发症等。糖尿病是以高血糖为主要特征的慢性炎症疾病。高血糖和炎性因子表达的增加都会诱发炎症反应，而炎症的发生和发展过程与线粒体密切相关。脓毒症是一种全身性炎症反应性疾病，脂多糖（LPS）被广泛用于诱导心肌细胞炎症和凋亡反应，是诱导细胞脓毒症模型的常用药物。心肌细胞产生的促炎性因子和凋亡在心肌功能障碍的发病机制中至关重要。二甲双胍（Met）具有降血糖和抗炎作用，在多种组织中表现出了抗氧化特性和降低脂质氧化的作用。此外，二甲双胍已经被证明可直接作用于线粒体，保护细胞。　　目前已知，线粒体可以通过活性氧（ROS）水平、自噬、线粒体的分裂和融合等方面调控炎症的发生。线粒体脂肪酸合成通路Ⅱ（mtFASⅡ）是线粒体功能的重要组成部分，其终产物是硫辛酸（lipoicacid，LA），硫辛酸是蛋白脂酰化反应的主要原料。脂酰化是催化葡萄糖、氨基酸等分解代谢的多种酶的活化所必需的。因此，mtFASⅡ功能的维持是线粒体功能维持的必要条件。目前在炎症状态中mtFASⅡ的变化及其在治疗炎症中的意义还未有研究，因此，本课题将研究不同炎症状态中线粒体脂肪酸合成通路Ⅱ的变化及在二甲双胍治疗心肌炎症中的意义。　　研究目的：探究mtFASⅡ在多种炎症状态中的变化及其在二甲双胍治疗心肌细胞炎症中的变化及意义。　　研究内容和方法：本课题主要研究了在肿瘤坏死因子-α、高糖两种炎症状态中，mtFASⅡ的变化，以及在脂多糖诱导的炎症状态下，mtFASⅡ的变化及经二甲双胍治疗后的变化和意义。　　在肿瘤坏死因子-α和高糖诱导的炎症中，研究mtFASⅡ中丙二酰-CoA/ACP转移酶（MCAT）、3-酮脂酰-ACP合成酶（OXSM）、硫辛酸合成酶（LIAS）和丙酮酸脱氢酶（pyruvatedehydrogenase）的E2亚基（PDCE2）脂酰化变化。　　（1）用10ng/mL的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导炎症状态，按相应的时间梯度处理3T3-L1前脂肪细胞，检测mtFASⅡ中MCAT、OXSM、LIAS的mRNA水平和OXSM的蛋白水平;在DIO肥胖小鼠中，检测在TNF-α高表达的脂肪组织炎症状态下，OXSM的mRNA水平变化。　　（2）用35mM葡萄糖（D-glucose）诱导炎症状态，按相应的时间梯度处理3T3-L1前脂肪细胞，检测在高糖炎症状态下，MCAT、OXSM、LIAS的mRNA水平和OXSM的蛋白水平;在STZ糖尿病模型小鼠和db/db糖尿病模型小鼠肾脏组织中，分别检测MCAT、OXSM、LIAS的mRNA水平以及STZ糖尿病模型小鼠肾脏组织中MCAT、OXSM、LIAS蛋白水平和PDCE2脂酰化水平变化。　　在LPS诱导的心肌细胞炎症中，研究mtFASⅡ中MCAT、OXSM、LIAS和PDCE2蛋白脂酰化水平的变化，及其在二甲双胍治疗后的变化。本实验将分为对照组、LPS诱导H9C2型心肌细胞炎症组及3种不同浓度Met与LPS联合治疗组。采用MTT法测定各组细胞活力，流式细胞技术检测各组细胞的凋亡和活性氧水平，蛋白质印记法检测各组的Caspase3、BCL2、BAX、磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（P-AMPK）、腺苷酸活化蛋白激酶（t-AMPK）、Beclin1、Parkin和mtFASⅡ中MCAT、OXSM、LIAS蛋白水平和脂酰化水平。　　结果：（1）在TNF-α诱导的炎症状态中，MCAT和LIAS的mRNA水平均出现了短暂性的降低，而OXSM的mRNA水平出现了下降趋势（P＜0.05），并且其蛋白表达也出现了持续性的下降，在24h达到最低值（P＜0.001）。在TNF-α高表达的DIO小鼠脂肪组织中，OXSM的mRNA水平发生了极其显著的下降（P<0.001）。　　（2）在高糖诱导的炎症状态中，MCAT、OXSM、LIAS的表达在mRNA水平上发生了短暂性降低，最终恢复到了正常水平。在蛋白水平上，OXSM表达下降，在4h达到最低（P＜0.001），在24h时虽有所恢复，但仍低于正常水平。在STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏组织中，MCAT、LIAS的mRNA水平都发生了显著下降（P＜0.01），但OXSM的mRNA水平不变。在db/db糖尿病小鼠模型肾脏组织中，MCAT、OXSM、LIAS的mRNA水平都发生了显著下降。在STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏组织中，OXSM的蛋白水平和PDCE2脂酰化水平发生了极其显著的下降（P＜0.001）。　　（3）在LPS诱导的心肌细胞炎症组中，心肌细胞的凋亡和ROS水平发生了显著升高（P＜0.01），自噬相关蛋白、mtFASⅡ中OXSM、LIAS蛋白和PDCE2蛋白的脂酰化水平都发生了显著的下降（P＜0.01）。在Met治疗组中，细胞凋亡率和活

关键词： Molecular biology   Biochemistry   Nutrition  

摘要： Chronic pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) play key roles in the development of endothelial dysfunction and therefore induce cardiovascular disease (CVD), the number one killer of Americans. Emerging evidence shows that phytochemicals, the secondary plant metabolites present in a large variety of foods, have the potential ability in reducing risk of CVD. The aims of this study are to investigate the synergistic anti-vascular inflammatory effects of combined phytochemicals and define the relevant molecular mechanisms. Pairwise combinations from more than a dozen of phytochemicals at different concentrations were tested by the TNF-α-induced monocytes adhesion to human *** 926 endothelial cells assay to screen optimum combinations. Two combinations curcumin (1μM) and luteolin (0.5μM), curcumin (5μM) and resveratrol (5μM) were selected, and these two combinations synergistically inhibited TNF-α-induced monocytes adhesion to human *** 926 endothelial cells while the individual chemicals did not have such effect at the selected concentrations. The CI value of curcumin plus luteolin is 0.60, curcumin plus resveratrol is 0.78 respectively. Consistently, two-week dietary intake of combined curcumin (500 mg/kg) and luteolin (500mg/kg), curcumin (500 mg/kg) and resveratrol (200mg/kg) in male C57BL/6 mice synergistically prevented TNF-α-stimulated adhesion of mouse monocytes to aortic endothelium. We also found that TNF-α enhanced protein expressions of vascular cell adhesion molecule 1 (VCAM-1), monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) were synergistically reduced by these two combination in human *** 926 cells, mouse aorta and mouse plasma while the individual chemical did not have these inhibitory effects. Furthermore, these two combinations synergistically inhibited TNF-α-increased nuclear factor (NF)-κB nuclear translocation in *** 926 cells, the same patterns of inhibitions on monocytes adhesion, VCAM-1 and MCP-1 protein levels. T

关键词： 强直性脊柱炎   青藤碱   炎症   成骨分化   整合素α5  

摘要： 一、研究背景强直性脊柱炎(Ankylosing Spondylitis,AS)是一种慢性炎性自身免疫病,典型的发病部位是骶髂关节和肌腱韧带附着点。晚期可发生脊柱或外周关节的融合,导致患者丧失运动功能和生活能力,给家庭和社会带来沉重的经济负担。炎症和病理性新骨形成是AS最主要的两个病理特征,早期主要表现为炎症及其引起的骨侵蚀破坏,晚期则引起异位新骨形成。炎症作为始动因素,贯穿着疾病发展的整个过程,目前关于它的研究较多。而关于病理性新骨形成的研究和相应治疗药物的研发尚处于初级阶段。临床目前使用的AS的治疗药物主要包括非甾体类抗炎药(NSAIDs)和生物制剂(TNF-α阻滞剂),虽然取得了良好的抗炎效果,但有一定的局限性和副作用,且对于AS新骨形成的作用没有明确证据。NSAIDs作为AS治疗指南推荐的一线药物,具有良好的抗炎镇痛效果,但需长期服用,有心血管,胃肠道和肾脏毒性等副作用。同样的,TNF-α阻滞剂对部分患者无效,价格也十分昂贵,还有报道其可能增加患肿瘤的风险。因此,开发治疗AS的新型药物是非常有必要的。天然产物由于其良好的化学多样性,优秀的药理活性,相对低的毒性和便宜的价格而被广泛接受作为新药筛选研究中的主要化合物。生物碱作为其中的一组天然产物,多年来广泛应用于民间中医药和现代医学。青藤碱是生物碱中的一种,它具有广泛的生物活性,目前已知的功能包括免疫抑制、神经保护、记忆力增强、抗血管生成和抗肿瘤等。到目前为止,青藤碱对AS是否有治疗作用及其具体作用机制并没有文献报道。青藤碱对细胞成骨分化的作用也未见报道。因此,本课题主要是在体内和体外水平探索小分子化合物青藤碱对AS炎症和新骨形成的作用及其可能的具体分子机制。二、研究目的第一部分:在细胞和动物模型两个水平探索青藤碱对AS炎症的作用及具体机制。第二部分:探索青藤碱对骨髓间充质干细胞成骨分化进程的影响。第三部分:探索青藤碱抑制骨髓间充质干细胞成骨分化进程的具体分子机制。三、研究方法第一部分:(1)分离培养AS患者外周血中的单核细胞,用TNF-α刺激细胞激活炎症反应,同时细胞预敷青藤碱,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中细胞因子IL-1β和IL-6的表达情况,用免疫印迹(Western blot)法检测NF-κB信号通路的活化情况。(2)诱导单核细胞向巨噬细胞分化,用TNF-α刺激细胞激活炎症反应,同时细胞预敷青藤碱,用免疫荧光(IF)法检测NF-κB信号通路转录因子p65在细胞内的定位。(3)构建蛋白聚糖诱导的脊柱关节炎模型(PGIA),给予模型小鼠青藤碱灌胃治疗,记录各组小鼠爪子红肿评分并作图,检测外周血细胞因子IL-1β、IL-6和IL-17A的表达,收集脊柱组织并进行苏木精-伊红染色(H&E)和番红O染色,利用流式细胞术检测小鼠脾脏中Th17细胞和Treg细胞的比例。第二部分:(1)Ficoll密度梯度离心法分离培养AS患者和正常对照组的骨髓间充质干细胞,通过观察细胞形态学和增殖速度,利用流式细胞术检测干细胞特异性表面标志物来鉴定所提取培养的干细胞的纯度。(2)分别诱导AS患者和正常对照的骨髓间充质干细胞成骨分化,通过茜素红S染色和钙结节定量比较两组干细胞成骨能力的差异。(3)诱导AS患者的骨髓间充质干细胞成骨分化,同时给予青藤碱孵育细胞,通过实时定量荧光PCR(Real-Time PCR)检测成骨相关基因Runx2、ALP和COL1A1的表达,ALP染色和活性检测,茜素红S染色和钙结节定量来判断青藤碱对干细胞成骨分化的影响。第三部分:(1)将实验分为阴性对照组、成骨诱导组和成骨诱导+青藤碱组,诱导骨髓间充质干细胞成骨分化3天后进行转录组测序,通过GO富集分析和Pathway分析寻找青藤碱可能参与的生物过程和信号通路,然后通过趋势分析进一步的筛选成骨分化升高而被青藤碱抑制的信号通路,接着对挖掘到的PI3-Akt信号通路中的差异基因进行蛋白-蛋白互相作用网络(PPI)分析,寻找核心基因整合素α5(ITGA5)。(2)Real-Time PCR和western blot检测成骨分化及青藤碱抑制成骨分化过程中ITGA5的表达变化。(3)药物亲和力反应目标稳定性实验(DARTS)检测青藤碱是否和ITGA5直接结合。(4)通过siRNA和shRNA的方法敲减ITGA5的表达,观察ITGA5对成骨分化的影响。(5)R语言对AS小鼠模型脊柱组织的GEO芯片再分析,探索ITGA5在AS中的表达。四、研究结果第一部分:(1)通过TNF-α刺激AS单核细胞的炎症反应,同时给予青藤碱预敷细胞,ELISA结果显示青藤碱抑制由TNF-α诱导的单核细胞IL-1β和IL-6细胞因子的分泌,western blot结果表明青藤碱抑制由TNF-α诱导的NF-κB信号通路转录因子p65的磷酸化

关键词： 神经炎症   帕金森病   巨噬细胞   小胶质细胞   T细胞   帕金森病异动症   外周炎症反应   小胶质细胞   NR2B   mGLU5R  

摘要： 背景与目的:神经炎症反应在帕金森病的发病和疾病进展中发挥重要作用。我们的前期研究发现帕金森小鼠脑组织中存在小胶质细胞的激活、炎症因子的释放及T细胞的浸润。有文章表明在神经退行性疾病中外周免疫反应影响脑组织内神经炎症的发生及进展。但尚没有研究表明外周免疫反应对帕金森病发病及进展的影响。我们的研究将探讨帕金森小鼠外周免疫反应的变化及干预外周免疫反应后对帕金森病小鼠脑组织神经炎症及病情进展的影响。材料与方法:第一部分实验:小鼠分为对照组和帕金森病组,流式细胞术检测两组小鼠外周巨噬细胞的状态及数量变化。第二部分实验:小鼠分为对照组、帕金森病组和帕金森病加外周免疫反应干预组,利用open field test、流式细胞术、免疫组化、免疫荧光、western blot和RT-PCR等实验技术检测各组小鼠外周巨噬细胞数量及分型的变化、行为学、多巴胺能神经元存活及脑组织内T细胞、小胶质细胞和炎症因子变化情况。结果:帕金森病小鼠的外周免疫细胞数量增加,并且处于激活状态。干扰外周免疫反应后,巨噬细胞总数减少,并且M1/M2型巨噬细胞下降,通过抑制外周炎症反应后,抑制激活T细胞向脑组织的浸润,从而减轻脑组织内神经炎症因子释放和小胶质细胞的激活,从而改善帕金森小鼠的行为学、减少黑质区多巴胺能神经元的死亡。结论:外周免疫反应的激活可能是导致帕金森发病和病情进展的因素之一。干扰外周免疫反应后可以减轻帕金森的病情进展,这可能为帕金森病的治疗提供一个新的干预靶点。背景与目的:间断给予L-DOPA的帕金森病异动症大鼠脑组织中存在小胶质细胞激活和炎症因子释放。说明脑内炎症反应参与帕金森异动症的发生和进展。但尚没有研究报道,指出外周炎症反应是否参与帕金森病异动症的发生和进展。我们的研究将通过动物实验探讨外周炎症反应对帕金森病异动症发生及进展的影响及相关机制。材料与方法:第一部分:大鼠分为对照组、帕金森组、帕金森病异动症组、LPS+帕金森病异动症组,利用AIM行为学评分,western blot、RT-PCR等实验技术检测各组大鼠行为学、脑组织内小胶质细胞激活、NR2B、m GLU5R及下游信号通路的表达变化。第二部分:应用脂质体减轻LPS诱导的外周炎症反应后分析各组大鼠AIM行为学、NR2B、m GLUR5及下游信号通路的变化。结果:LPS能够增加帕金森病异动症大鼠的AIM行为学评分和脑组织纹状体区小胶质细胞、星形胶质细胞的激活和炎症因子的释放,并且通过激活NR2B/PKC/MEK/ERK信号通路加重帕金森异动症进展。脂质体减轻LPS诱导的外周炎症反应后减轻AIM行为学评分,减轻脑组织纹状体区免疫炎症反应,抑制pNR2B和NR2B的高表达及下游信号通路PKC/MEK/ERK的激活。结论:LPS诱导外周炎症反应,进一步激活脑内炎症反应,使本就激活的小胶质细胞和星形胶质细胞进一步活化,活化的胶质细胞,释放大量炎症因子,并且增加p-NR2B和NR2B表达,激活下游PKC/MEK/ERK信号通路,进一步打乱基底神经节的平衡,促进帕金森病异动症发生。

关键词： 血栓弹力图   全身炎症反应综合征   机制  

摘要： 目的探讨血栓弹力图参数变化在全身炎症反应综合征(Systemic Inflammatory Response Syndrome, SIRS)患者中的应用价值。方法选取2017年1月至2018年6月于本院重症医学科住院治疗的SIRS患者共40例作为研究的对象,根据病程严重程度将其分为轻度组(10例)、中度组(20例)和重度组(10例),分别在接受治疗1d、3d、5d和7d后测定所有患者血栓弹力图参数变化,分析血栓弹力图参数变化在评估SIRS患者病情和治疗效果中的应用价值。结果轻度组SIRS患者治疗1d、3d、5d和7d后R值、K值明显高于中度组和重度组(P<0.05),Angle值和MA值明显低于中度组和重度组(P<0.05);组间比较,轻度组、中度组和重度组患者R值、K值、Angle值和MA值均随治疗时间延长或病情变化相应改变,治疗5d、7d后各项参数与治疗1d比较差异显著。结论血栓弹力图检测能准确反映出SIRS患者凝血功能变化情况,为其病情变化和感染控制提供重要的参考依据,具有推广应用价值。

关键词： 输尿管软镜   全身炎症反应综合征   危险因素   预测模型  

摘要： 目的:寻找输尿管软镜碎石取石术后发生全身炎症反应综合征(SIRS)的危险因素,并建立预估模型。方法:回顾性分析我院在2015年9月至2018年7月期间内行输尿管软镜碎石取石术的病例,获取患者术前基本情况、术前及术后相关指标,根据术后是否出现SIRS分为两组,找出与输尿管软镜碎石取石术后发生SIRS相关的危险因素,采用Logistic多因素回归分析寻找独立危险因素,并在此基础上给出预测术后患者出现SIRS的概率的模型。结果:总病例数为2354例,其中75例(3.19%)出现SIRS。性别,术前清洁中段尿细菌培养阳性史,结石大小,术前血白细胞计数、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、尿白细胞,术后血白细胞计数、中性粒细胞百分比、CRP、降钙素原(PCT)、IL-6、尿白细胞及手术时间与术后SIRS相关,多因素回归分析提示女性患者、较大的结石、术前CRP及术前尿白细胞较高以及较长的输尿管支架管置入时间是术后发生SIRS的独立危险因素。结论:女性、较大结石、术前CRP及术前尿白细胞高和较长的术前输尿管支架置入时间是输尿管软镜碎石取石术后发生SIRS的独立危险因素,并给出评估患者术后出现SIRS概率的预测模型。

关键词： THSG   炎症   NMDA受体   神经元凋亡   小胶质细胞  

摘要： 四羟基二苯乙烯葡萄糖苷(THSG)是何首乌的有效成分之一,它已被证明具有抗氧化,抗衰老和抗动脉粥样硬化等多种药理作用,由于其显著的抗炎作用,我们探讨了THSG是否具有镇痛作用。在这项研究中,我们使用了完全弗氏佐剂注射(CFA)到小鼠后爪中引起的慢性炎症性疼痛模型。我们发现THSG以剂量依赖的方式减轻了小鼠后爪的肿胀和疼痛。在前扣带皮质(ACC)中,THSG抑制了由慢性炎症引起的含有GluN2B亚基的N甲基-D-天冬氨酸受体(GluN2BRs)的上调和GluN2ARs的下调。同时,THSG通过增加抗凋亡蛋白Bcl-2表达并降低Bax和Caspase-3等促凋亡蛋白的表达而保护神经元。此外,THSG抑制p38的磷酸化和核因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的增加。免疫组织化学染色显示,THSG阻断小胶质细胞的活化并减少其分泌的炎性细胞因子的释放,如:TNF-α、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)。综上,本研究表明THSG对缓解完全弗氏佐剂诱导的慢性炎症疼痛有一定作用。

关键词： 高通量血液透析   糖尿病肾病   维持性血液透析   微炎症状态  

摘要： 目的分析高通量血液透析对糖尿病肾病维持性血液透析患者微炎症状态的影响。方法选择2017年3月～2019年3月于本院就诊的糖尿病肾病维持性血液透析患者,共90例,按入院编号随机分为两组,每组45例。对照组与观察组分别采用低、高通量血液透析治疗,对比具体治疗情况。结果观察组β2微球蛋白(β2-MG)、白细胞介素6(IL-6)、高敏C反应蛋白(hsCRP)水平下降,对照组刚好相反,具有统计学意义(P<0.05)。结论针对糖尿病肾病维持性血液透析患者,经高通量血液透析治疗有助于改善微炎症状态,临床应用价值高。

关键词： 多囊卵巢综合征   谷氨酰胺   炎症   氧化应激  

摘要： 目的:构建多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型并给予谷氨酰胺(Glutamine,Gln)干预,探讨Gln对PCOS模型大鼠炎症状态和氧化应激状态的调节作用及最适作用浓度,为PCOS的防治提供新的思路和理论依据。方法:用皮下注射脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone,DHEA)0.6mg/100g方法构建PCOS模型大鼠,对照组注射等量油剂;PCOS模型大鼠根据Gln给药浓度不同分为以下四组:PCOS组,PCOS+0.5g/kg Gln组,PCOS+0.75g/kg Gln组,PCOS+1.0g/kg Gln组,Gln通过腹腔注射方法给药,PCOS组和对照组给予等量生理盐水。PCOS模型大鼠构建后次日晨开始给予Gln,间隔4h再次给药,共2次,首次腹腔注射后24h处死各组大鼠,收集血液和卵巢组织。主要观察指标:1、称取各组大鼠体重及双侧卵巢重量;2、卵巢组织HE染色进行形态学分析;3、激素水平检测血清雌二醇(E2)、孕激素(P)、睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH);4、胰岛素抵抗水平检测空腹胰岛素和血糖,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);5、炎症因子水平检测血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-18(IL-18)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a),并对卵巢组织进行免疫组织化学染色检测此四种炎症因子在卵巢局部的表达水平;6、氧化应激水平检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)。结果:1、PCOS组与对照组各观察指标比较结果:PCOS组大鼠卵巢组织形态呈现多囊样改变,与对照组相比,PCOS组大鼠体重、双侧卵巢重量、血清T、LH水平、血清INS、HOMA-IR、血清和卵巢IL-6、IL-18、CRP、TNF-a水平、血清MDA、NO、NOS水平均显著升高,SOD水平显著下降,差异均有统计学意义。2、Gln干预各组两两比较及其与PCOS组比较结果:(1)卵巢组织形态学上并无明显改变。(2)与PCOS组相比,Gln干预各组大鼠体重、双侧卵巢重量、血清性激素水平、血胰岛素抵抗水平均无显著性差异;Gln干预各组两两比较,这些指标也无显著性差异。(3)炎症状态比较:与PCOS组相比,PCOS+0.5g/kg Gln组和PCOS+0.75g/kg Gln组大鼠血清和卵巢组织内IL-6、IL-18、CRP、TNF-a水平均显著下降,而PCOS+1.0g/kg Gln组大鼠血清和卵巢组织内炎症因子水平无统计学差异;Gln干预各组两两比较显示,PCOS+0.5g/kg Gln组和PCOS+0.75g/kg Gln组大鼠血清和卵巢组织炎症因子水平均显著低于PCOS+1.0g/kg Gln组,两组大鼠血清中炎症因子水平无明显差异,但PCOS+0.75g/kg Gln组大鼠卵巢组织中炎症因子水平较PCOS+0.5g/kg Gln组更低,差异有统计学意义。(4)氧化应激状态比较:与PCOS组相比,PCOS+0.5g/kg Gln组和PCOS+0.75g/kg Gln组大鼠血清MDA、NO、NOS水平均显著降低,SOD水平显著升高,而PCOS+1.0g/kg Gln组大鼠血清MDA、NO、SOD水平均无明显差异,仅NOS水平较PCOS组明显降低;Gln干预各组两两比较显示,PCOS+0.5g/kg Gln组和PCOS+0.75g/kg Gln组大鼠血清氧化应激指标均无明显差异,而除NOS外,两组其他指标均优于PCOS+1.0g/kg Gln组。结论:1、本研究成功构建了PCOS大鼠模型。2、PCOS大鼠血清和卵巢组织炎症因子IL-6、IL-18、CRP、TNF-a水平异常升高,Gln能够缓解PCOS大鼠炎症状态,且最适浓度为0.75g/kg。3、PCOS大鼠血清氧化应激状态增强,MDA、NO、NOS水平显著升高,SOD水平显著下降,Gln能够缓解PCOS大鼠体内氧化应激状态,且最适浓度为0.75g/kg。