关键词： 糖尿病肾病   炎症   氧化应激   娃儿藤碱   抗肿瘤  

摘要： 论文以本课题组发现的一种结构属于双苄基异喹啉类生物碱的先导化合物D901为基础,研究D901抗糖尿病肾病的分子机制;同时对本课题组合成的19个娃儿藤碱类似物进行体外抗肿瘤活性测试。在论文的第一部分,通过炎性巨噬细胞上清液培养足细胞及构建STZ诱导糖尿病肾病大鼠模型两项实验,研究炎性巨噬细胞对糖尿病肾病发病的影响及D901干预对此过程的作用。结果显示,体外高糖诱导的巨噬细胞促炎细胞因子mRNA及表面活性蛋白CD11c表达显著增加,活化巨噬细胞上清液培养的足细胞p-p38 MAPK表达增加,而D901干预可明显抑制上述变化。STZ诱导的糖尿病肾病模型中,模型组大鼠血清及肾组织氧化应激水平显著增加,同时肾脏出现大量炎性巨噬细胞浸润,肾脏巨噬细胞促炎细胞因子mRNA表达显著增加,D901干预则显著抑制上述变化。在论文的第二部分,本课题组合成了 19个菲环含有不同N-取代基的娃儿藤碱类似物,而后使用MTT法检测体外抗肿瘤活性。实验结果表明大多数化合物具有体外抗肿瘤活性,其中菲环取代基含三个杂原子(N,N,O)的类似物在20 μmol/L浓度时表现出高于90%的生长抑制活性,含两个杂原子(N,O或N,N)和含单氮原子的类似物表现出较低的抑制活性,胺基的酰胺化则导致活性几乎完全丧失。菲环上的取代基对其活性有显著影响,含多个杂原子的菲侧链可有助其体外抗肿瘤活性的提高。

关键词： 补体C3   小胶质细胞   突触   认知  

摘要： 目的:全身性炎症能够导致多器官功能损伤,在神经系统可表现为认知功能障碍,但是并不清楚炎症通过何种机制引起认知功能障碍。越来越多的证据表明,补体C3/C3a受体(C3a R)信号通路是先天性免疫防御的关键组成部分,在认知和神经退行性变中起重要作用,而其功能障碍与许多神经系统疾病有关。但是,尚不清楚补体C3/C3a R信号通路是否参与全身性炎症诱导的认知功能障碍。本研究旨在建立脂多糖(LPS)诱导全身性炎症致认知功能障碍的动物模型,观察大脑内补体C3/C3a R信号通路及突触相关蛋白的变化,并探讨C3/C3a R信号通路在全身性炎症致小鼠认知功能障碍中的作用及可能机制。方法:本研究中,我们使用腹腔注射2mg/kg脂多糖的方法诱导全身性炎症模型,通过腹腔注射C3a受体拮抗剂(SB290157)来研究补体C3/C3a R信号在成年雄性C57BL/6小鼠中的作用。12-14周雄性C57BL/6小鼠随机分为5组(n=10):生理盐水组(NS组)、脂多糖组(LPS组)、生理盐水+二甲基亚砜组(NS+DMSO组)、脂多糖+二甲基亚砜组(LPS+DMSO组)、脂多糖+C3a受体拮抗剂组(LPS+C3a Ra组)。通过液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)、蛋白印迹法以及免疫荧光法检测NS组和LPS组小鼠海马中补体C3的表达。通过免疫荧光、蛋白印迹的方法检测腹腔注射后3天三组小鼠海马炎症指标以及兴奋性/抑制性突触相关蛋白的水平。最后通过旷场、条件恐惧测试和Y迷宫等小鼠行为学范式检测海马依赖的学习记忆功能的变化。结果:与对照组相比,LPS组小鼠海马中的补体C3表达水平明显升高(P<0.05),同时,星形胶质细胞上的C3和小胶质细胞上表达的C3a受体表达水平明显上调(P<0.05)。有趣的是,LPS选择性诱导抑制性突触相关蛋白(VGAT、GAD65/67、gephyrin)的丢失(P<0.05),但不引起兴奋性突触相关蛋白(VGLUT1、synaptophysin(SYP)、PSD-95)的改变(P>0.05)。而给予C3a受体拮抗剂SB290157后可改善LPS诱导的海马神经炎症和抑制性突触相关蛋白的减少(P<0.05),进而有助于认知功能(条件恐惧测试、Y迷宫)的改善(P<0.05)。结论:我们的研究表明,LPS注射后“补体C3-小胶质细胞轴”介导的抑制性突触相关蛋白的丢失可能导致认知功能障碍。给予C3a受体拮抗剂能够有效的减轻抑制性突触相关蛋白的丢失以及认知功能的损害。

关键词： 妊娠   炎症   脂多糖   死胎   早产   低出生体重   胎盘   胎脑   mTOR   雷帕霉素  

摘要： 第一部分妊娠晚期母鼠宫内炎症对子代健康的影响背景:母体妊娠期发生炎症反应会导致不良的新生儿结局,甚至可能会增加出生以后的健康风险。目的:观察和记录母鼠在妊娠晚期遭受宫内炎症后,新生鼠出生时期的不良结局,以及评估子代出生以后的神经行为功能。方法:(1)对每只CD1母鼠在E17当天宫内注射PBS(100μL)或LPS(25μg LPS溶于100μL的PBS),构建宫内炎症模型。(2)观察和记录母鼠暴露于LPS诱发的宫内炎症后,发生早产、死胎、死产情况。(3)比较PBS组和LPS组的新生鼠出生体重、出生后生存时间。(4)对正常期分娩出生后第5天(PND5)和第9天(PND9)的小鼠分别进行了悬崖回避反射和平面翻正测试,评估LPS小鼠出生后的神经行为能力。结果:(1)LPS孕鼠的早产率达到73.1%(38/52),而PBS孕鼠无早产发生;68.4%(26/38)的早产发生于LPS术后24h内(0.05),但是该药能够显著提高LPS胎鼠的存活率(46.0%vs 30.6%,P<0.01)。(2)相对于LPS组,施加了雷帕霉素的小鼠,其行为表现为PND5的悬崖回避时间(P<0.05)以及PND9的平面翻正反应(P<0.05)的时间均显著缩短。(3)同LPS组相比,注射了雷帕霉素的LPS小鼠胎盘的p-rp S6的表达量显著降低(P<0.05)。结论:雷帕霉素可以提高LPS子代小鼠的存活率和改善LPS子代的神经行为能力,这可能与雷帕霉素抑制了LPS胎盘的p-rp S6过度活化有关。第五部分自发性早产儿胎盘的mTOR活性变化背景:第一及第二部分的研究发现母体炎症可以导致小鼠早产、低出生体重甚至死胎,并引起胎盘的mTOR通路发生异常变化。另外,研究表明新生儿早产与宫内炎症密切相关。目的:验证自发性早产的新生儿胎盘mTOR活性是否发生与因母体炎症而早产的小鼠胎盘的mTOR活性一致的变化。方法:(1)收集了人胎盘和脐带静脉血样本,包括早产样本(PTB组)5例和足月产样本(NC组)4例。(2)ELISA法检测脐带血IL-1β和IL-6的含量。(3)蛋白免疫印迹检测胎盘母体面和胎儿面的mTOR下游rp S6和4EBP1的磷酸化活性。结果:(1)早产儿的胎盘重量明显低于足月的胎盘(515.0±139.0 vs 660.0±53.5 g,P=0.092),但差异没有统计学意义;早产儿发育的多个相关指标显著低于37周左右的足月儿,包括出生体重(2402.0±405.3 vs 3512.5±545.2 g,P=0.01)、头围(31.2±1.5vs 33.6±1.3 cm,P=0.04)、腹围(38.4±1.5 vs 42.2±1.3 cm,P=0.005)和股骨长(6.42±0.2vs 7.05±0.3 cm,P=0.011)。(2)早产儿脐带血IL-1β(P<0.05)和IL-6(P<0.01)的含量均显著增高。(3)早产胎盘的胎儿面rp S6的磷酸化活性增高(P<0.05)。结论:自发性早产儿的发生可能与胎儿暴露于炎症有关,早产儿胎盘胎儿面的rp S6活性增高,进一步证明了p-rp S6可以作为胎盘或胎儿遭受炎症应激的一个敏感分子。

关键词： microRNA   成牙骨质细胞   肿瘤坏死因子alpha   钾离子通道蛋白四聚体1   白细胞介素6  

摘要： 第一部分:miR-155-3p和miR-181b-5p在TNF-α刺激的成牙骨质细胞中的表达 目的 阐明miR-155-3p和miR-181b-5p在TNF-α刺激的成牙骨质细胞中的表达。 方法 TNF-α刺激OCCM-30细胞,通过real-time PCR检测Il-1β,Il-6和Tnf-α等促炎细胞因子的表达水平来确定是否建立成牙骨质细胞的炎症环境。利用realtime PCR检测miR-155-3p和miR-181b-5p的表达。Real-time PCR检测趋化因子MCP-1和RANTES的表达水平;ELISA检测IL-6的蛋白表达。利用real-time PCR检测Opg和RANKL表达并计算RANKL/Opg的比值。将小鼠下颌第一磨牙开髓并暴露于口腔环境,在体内模拟成牙骨质细胞的炎症状态,构建根尖周炎模型。通过HE染色判断小鼠根尖周炎模型是否构建成功。Real-time PCR检测根尖周组织中Il-6和miR-181b-5p的表达水平;TUNEL染色观察根尖周组织中成牙骨质细胞凋亡。 结果 ***-α诱导的炎症状态下,miR-155-3p的表达量升高。在TNF-α刺激的OCCM-30细胞中,Il-1β,Il-6和Tnf-α的m RNA表达量显著升高,Il-6的变化更为稳定。不同浓度的TNF-α刺激OCCM-30细胞,Il-6和miR-155-3p都明显升高。 ***-α诱导的炎症状态下,miR-181b-5p的表达量降低。在不同浓度的TNF-α刺激OCCM-30细胞,miR-181b-5p的表达量都降低。在20 ng/ml TNF-α刺激下,IL-6蛋白水平、促炎趋化因子MCP-1和RANTES的m RNA表达量都明显升高。同时,我们观察到破骨相关指标的改变:Opg降低、RANKL虽有升高但无统计学差异,RANKL/Opg的比值明显升高。 ***染色结果显示,在小鼠根尖区域可见明显的根尖周组织破坏和炎症细胞浸润,表明小鼠根尖周炎模型建立成功。在根尖周组织中,Il-6的表达升高,miR-181b-5p的表达降低,这与在OCCM-30细胞的体外实验结果相符。我们也在根尖周组织中观察到TUNEL阳性的细胞,这是首次在体内观察到成牙骨质细胞凋亡。 结论 在TNF-α刺激的成牙骨质细胞中,miR-155-3p表达上调,miR-181b-5p表达下调。而且,这两个miRNAs和细胞分化、矿化及炎症调节密切相关,但其具体作用和调控机制需要进一步探讨。 第二部分:miR-155-3p靶向Kctd1调控TNF-α抑制的成牙骨质细胞分化和矿化 目的 探究miR-155-3p在TNF-α抑制的成牙骨质细胞分化矿化中的作用,阐明miR-155-3p调控成牙骨质细胞分化矿化的分子机制。 方法 通过瞬时转染技术构建miR-155-3p敲低和过表达的OCCM-30细胞,并构建稳定过表达miR-155-3p的OCCM-30细胞系。Real-time PCR和Western Blot检测成牙骨质细胞分化和矿化的指标BSP,OPN,OCN和Osterix;同时利用ALP染色,ALP活性检测和茜素红染色的方法检测矿化水平。通过数据库进行生物信息学分析寻找miR-155-3p的候选靶基因。将带有Kctd1 3'UTR野生型(pmir GLOKctd1-WT)或突变体(pmir GLO-Kctd1-Mut)的荧光素酶报告质粒分别与miR-155-3p mimics和其阴性对照共转染到细胞。双荧光素酶报告验证miR-155-3p是否靶向作用在Kctd1 m RNA的3’UTR区。Real-time PCR,Western Blot和免疫荧光检测KCTD1和β-catenin表达量的变化;同时利用双荧光素酶报告检测经典Wnt信号通路的荧光素酶活性。 结果 ***-155-3p抑制成牙骨质细胞分化和矿化。用miR-155-3p mimics过表达OCCM-30中的miR-155-3p后,m RNA水平的Bglap和Osx,以及蛋白水平的BSP,OPN,OCN和Osterix表达明显降低。与之相反,在用miR-155-3p inhibitors敲低miR-155-3p表达后,这些分子的表达升高。诱导OCCM-30矿化四天后进行ALP染色和活性检测,结果显示miR-155-3p抑制ALP活性。矿化后第14天进行茜素红染色分析,结果显示miR-155-3p抑制OCCM-30细胞矿化。 ***1是miR-155-3p的靶基因。通过生物信息学分析,Kctd1被确定为miR-155-3p的候选靶基因。MiR-155-3p显著抑制野生型的荧光素酶活性,但没有抑制突变体Kctd1 3'UTR的荧光素酶活性。此外,当用TNF-α刺激成牙骨质细胞时,Kctd1

关键词： 化瘀方   脓毒症大鼠   TLR4通路   炎症抑制   免疫保护  

摘要： 目的:在前期研究工作的基础上,通过尾静脉注射脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）建立脓毒症大鼠模型,观察不同剂量化瘀方对脓毒症大鼠血清炎症因子及外周淋巴细胞免疫功能的调控作用及对TLR4基因、蛋白表达的干预作用,观察化瘀方对脓毒症大鼠免疫系统保护的作用机制,为临床治疗脓毒症提供新的思路和方法。方法:1、实验动物造模。（1）动物:六周龄SPF级雄性Wistar大鼠（2）数量分组:共50只,随机分为空白组、模型组、中药高、中、低剂量预处理组,每组10只。（3）中药组成:丹参30g、大黄15g,分别浓煎至1g/ml、0.5g/ml和0.25g/ml。（4）造模前预处理:空白组与模型组予生理盐水灌胃2ml/日,中药高、中、低组按预设浓度予中药灌胃2ml/日。共灌胃7日。（5）造模:模型组和中药各组采取尾静脉注射法,注射LPS（剂量为6 mg/kg）,空白组尾静脉注射等剂量生理盐水。造模前与造模后第3h、第6h测大鼠肛温,造模6h后取其脾脏标本保存。2、酶联免疫吸附（ELISA）检测大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-6水平的变化。3、HE染色法观察各组大鼠脾脏病理学变化。4、流式细胞仪检测大鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞数量。5、半定量逆转录-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测脾脏细胞TLR4基因表达。Western印迹法检测脾脏TLR4蛋白表达。结果:1.动物造模后一般情况观察:与空白组大鼠相比,模型组大鼠和中药组大鼠都出现了进食饮水减少,精神不振,反应迟钝,部分出现腹泻、呼吸频率加快,个别处于濒死状态等情况。总的来讲,中药组大鼠的精神反应活动要优于模型组,中药组高剂量组优于中、低剂量组。与空白组比较,模型组大鼠注射LPS3h、6h后体温都显著降低,其差异有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,中药组大鼠注射LPS3h、6h后体温明显升高,差异具有统计学意义（P<0.01）。中药各剂量组之间比较,体温有升高趋势,但差异不明显（P>0.05）。2.各组大鼠血清炎症因子TNF-α、IL-6水平检测结果显示:与空白组比较,模型组明显升高,有统计学意义（P<0.01）;与模型组比较,中药各剂量组明显降低,有统计学意义（P<0.01）;与中药低剂量组相比,中、高剂量组降低,其中高剂量组降低较明显,有统计学意义（P<0.01）。证明中药化瘀方可以下调脓毒症大鼠的炎症反应水平,以高剂量组作用最为明显。3.各组大鼠脾脏组织病理学改变:空白组大鼠脾脏被膜光滑,细胞无充血水肿,红白髓结构清晰。脓毒症模型组大鼠脾窦扩张充血,内皮细胞水肿,巨噬细胞增多,淋巴小结结构破坏,脾细胞固缩凋亡。中药组大鼠脾脏损伤情况相比模型组大鼠减轻,其中高剂量组减轻尤为明显。4.各组大鼠脾脏组织CD4+、CD8+T细胞检测结果显示:与空白组相比,模型组大鼠脾脏细胞CD4+T的水平明显降低,CD8+T增高,CD4+/CD8+比值有所降低,差异具有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药组大鼠脾脏CD4+T增高,CD8+T降低,CD4+/CD8+比例升高,有统计学意义（P<0.01）;中药各组相比,高剂量组大鼠脾脏CD4+T增高,CD8+T降低,CD4+/CD8+比例升高尤为明显,差异具有统计学意义（P<0.01）。5.各组大鼠脾脏TLR4基因、蛋白检测结果显示:与空白组TLR4基因与TLR4蛋白的水平相比,模型组明显升高,有统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,中药组大鼠脾脏TLR4基因与TLR4蛋白的水平降低,差异具有统计学意义（P<0.01）。中药高、中、低剂量组相比,高剂量组大鼠脾脏TLR4基因与蛋白的水平降低最为明显,差异具有统计学意义（P<0.01）。结论:1、通过向大鼠尾静脉直接注射LPS的方法建立脓毒症动物模型简单可靠,与脓毒症发生时的剧烈炎症反应和脾脏细胞损伤的严重程度高度契合,对研究治疗脓毒症所采取炎症抑制和免疫调节机制研究较为合适。2、化瘀方灌胃预处理可以减少脓毒症大鼠炎症因子TNF-α、IL-6的释放,减轻脓毒症大鼠炎症反应。3、化瘀方中药灌胃预处理可以提高脾脏CD4+/CD8+的比例。调节脓毒症大鼠的免疫功能,并减轻脓毒症大鼠脾脏的损伤。4、化瘀方中药可能通过降低脓毒症大鼠TLR4基因、蛋白的表达,减轻脓毒症带来过度炎症反应,减轻脓毒症大鼠脾脏损伤,改善其免疫功能。

关键词： 维生素D   脂代谢   全身性炎症反应标志物   孕中期  

摘要： 目的维生素D(vitamin D,25（OH）D)参与调节全身性炎症的生物学途径仍然是未知的。本研究的目的是阐明孕中期维生素D、脂代谢标志物和全身性炎症反应标志物间的关系,验证维生素D状态对脂代谢与全身性炎症反应标志物关系的影响,并进一步探讨维生素D状态与脂代谢异常孕妇全身性炎症反应标志物异常发生风险的关系。方法于2015年3月～2019年2月在合肥市三家医院妇产科门诊共招募7 454名孕14～27周、单胎妊娠、定居在合肥市区（北纬32）的18～45周岁自愿参加本研究的孕妇,参与者均需完成自我设计的问卷以获得一般人口学特征,并留取空腹静脉血,随访至分娩。经过排除后并从有效研究对象（6 889人）中采用随机样表法随机抽取3 500人作为调查对象,并测定了25（OH）D、脂代谢指标高密度脂蛋白胆固醇（High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、三酰甘油（Triglyceride,TG）、总胆固醇（Total cholesterol,TC）和全身性炎症反应标志物超敏C反应蛋白（Hypersensitive C-reactive protein,hs-CRP）、白细胞（White blood cell,WBC）水平,排除任意1项生物学指标结果低于检测下限的样本,本研究最终共纳入统计分析样本为3 236人。采用Cubic非线性拟合模型探讨孕中期脂代谢指标与全身性炎症反应标志物间的关系。将脂代谢指标分组后(20,P20～P80,≥P80),采用多因素线性回归模型阐明不同维生素D状态与脂代谢指标、全身性炎症反应标志物间的关系。当以维生素D是否缺乏分组,采用多因素线性回归模型探讨脂代谢水平与hs-CRP、WBC浓度间的关系,并采用多因素Logistic回归模型分析维生素D状态与脂代谢异常(TC≥P80、TG≥P80、LDL-C≥P80或HDL-C20,任1项指标满足条件即可)孕妇高hs-CRP（hs-CRP≥5 mg/L）、WBC异常(WBC≥10（×10～9/L）)和高炎症(hs-CRP≥5 mg/L合并WBC≥10（×10～9/L）)发生风险的关系。结果孕妇25（OH）D浓度均值为（39.4±16.7）nmol/L,维生素D的缺乏率为76.9%。本研究中孕妇的TC、TG、HDL-C、LDL-C、hs-CRP以及WBC的均值分别为（6.0±1.0）mmol/L、（2.7±1.2）mmol/L、（2.0±0.4）mmol/L、（2.8±0.7）mmol/L、（3.3±2.5）mgl/L和（9.7±2.1）(×10～9/L);本研究中CRP≥5 mg/L总共有697名孕妇,WBC异常占比为41.0%,脂代谢异常率为51.8%。脂代谢指标TC、TG、LDL-C浓度与hs-CRP、WBC间均呈显著非线性关系,TC与hs-CRP间呈U型关联。与中等脂代谢水平组相比,低TC（β=0.220,95%CI:0.008～0.433,P=0.042）、LDL-C（β=0.282,95%CI:0.068～0.496,P=0.001）水平组和高TG（β=0.247,95%CI:0.029～0.465,P=0.026）水平组孕妇的hs-CRP水平显著升高,且低TG水平孕妇的hs-CRP（β=-0.488,95%CI:-0.693～-0.282,P<0.001）显著降低。与P20～P80脂代谢指标组相比,低TC（β=-0.402,95%CI:-0.594～-0.021,P<0.001）、TG（β=-0.323,95%CI:-0.512～-0.135,P=0.001）水平组孕妇的WBC浓度显著降低,而高TG（β=0.314,95%CI:0.123～0.505,P=0.001）水平组孕妇的WBC浓度则显著升高,差异均有统计学意义;孕中期维生素D状态与脂代谢指标、全身性炎症反应标志物间的关系结果显示,与维生素D缺乏组相比,维生素D非缺乏组孕妇脂代谢指标TC、TG、LDL-C和hs-CRP分别降低7.452（95%CI:4.594～11.714）、5.027（95%CI:1.218～8.837）、4.608（95%CI:2.182～7.035）mg/d L以及0.319（95%CI:0.110～0.527）mg/L,差异均有统计学意义;维生素D状态/脂质代谢物与全身性炎症反应标志物间的关系结果显示,当25（OH）D<50 mmol/L时,与中等脂代谢水平组相比,低TC（β=0.366,95%CI:0.097～0.636,P=0.008）、LDL-C（β=0.411,95%CI:0.141～0.681,P=0.003）水平孕妇的h

关键词： 鼻咽癌   放化疗   骨骼肌减少   肌少症   生存   鼻咽癌   同期放化疗   骨骼肌减少   全身炎症   毒性  

摘要： 第一部分骨骼肌减少对鼻咽癌放化疗患者生存的影响背景骨骼肌减少是一种新型的影像生物标志物,在多种实体瘤的研究中被认为是生存结果和治疗相关毒性的预测因子。本研究旨在探讨鼻咽癌患者放化疗后骨骼肌损失是否可以预测生存。方法394名非转移性鼻咽癌患者被纳入研究。测量基于计算机断层扫描的第三腰椎骨骼肌的横截面积,并计算骨骼肌指数。使用适合中国人群的临界值来定义肌肉减少症,并分析治疗后骨骼肌的相对变化以确定治疗期间骨骼肌减少程度及其对总生存的影响。结果中位随访时间为25.0(2.5-46.4)个月。130名患者(33.0%)在基线时被定义为肌肉减少症。241名患者(61.2%)患有治疗后肌肉减少症。治疗前、后的平均骨骼肌指数分别为42.8cm2/m2和38.1cm2/m2(P<0.001),平均骨骼肌面积损失为13.1cm2。虽然治疗前或治疗后肌肉减少症均与总生存无关,但在调整了性别和癌症分期之后,放化疗后发生的严重肌肉丢失是鼻咽癌总生存的独立预测因子(HR:2.79,95%CI=1.47-5.28,P=0.002)。结论在放化疗期间,鼻咽癌患者常发生不同水平的肌肉损失,并且严重的骨骼肌损失可能使患者总生存期缩短。第二部分骨骼肌减少对鼻咽癌同期放化疗严重急性毒性反应的影响背景放化疗期间肌肉组织的减少对鼻咽癌患者的远期生存有影响,但治疗前骨骼肌情况对该群体治疗相关毒性的预测作用尚不明确。本研究旨在探索骨骼肌减少是否可以预测鼻咽癌患者的治疗相关严重毒性反应。方法计算机断层扫描(CT)第三腰椎肌肉用于评估和计算SMA(骨骼肌面积),SMI(骨骼肌指数),SMD(骨骼肌密度),SMG(骨骼肌规格)并评估LBM(瘦体质量)。治疗前测量患者的握力(HGS)和日常步行速度。通过逻辑回归模型评估了与毒性相关的潜在预测因素,并报告了校正后的治疗毒性比值比(OR)。结果共有82例患者(男性67.1%,45.7±10.7岁)被纳入研究。骨骼肌减少与严重的放疗急性毒性无关。在男性中,肌肉减少症会增加剂量限制性毒性(DLT)的风险(OR:4.00,95%CI=1.20-13.36,P=0.024)。SMA(OR:0.97,95%CI=0.94-1.00,P=0.041),SMI(OR:0.91,95%CI=0.84-0.99,P=0.042)和LBM(OR:0.90,95%CI=0.81-0.99,P=0.041)的降低与DLT的发生风险增加相关。HGS倾向于增加女性发生3-4级中性粒细胞减少的风险(OR:0.80,95%CI=0.64-1.01,P=0.060)。HGS降低与3-4级白细胞减少症显着相关(OR:0.92,95%CI=0.86-0.98,P=0.007),并且与任意3-4级毒性的风险增加相关(OR:0.94,95%CI=0.89-0.99,P=0.013)。结论骨骼肌丢失与严重的放射性口腔粘膜炎和皮炎无关,但与NPC患者的任意3-4级毒性和严重的胃肠道反应有关。在男性中,治疗前的肌肉减少症可预测DLT。HGS的增加与任意3-4级毒性、血液学毒性的风险降低独立相关。

关键词： 淫羊藿苷   淫羊藿素   小胶质细胞   G蛋白偶联雌激素受体   胰岛素样生长因子-1受体  

摘要： 神经炎症是帕金森病(Parkinson’s Disease,PD),阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)等共有的突出特征。中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)内小胶质细胞(microglia,MG)激活是神经炎症的主要组成部分,每当受到伤害或发生疾病时,MG的激活为人体提供了第一道防线。患者尸检、正电子发射断层扫描(Positron Emission Computed Tomography,PET)成像和临床证据表明,在PD的发病过程中,MG会过度激活,释放大量的炎性介质损伤神经元。MG具有两种功能性表型,分别为促炎性M1型和免疫抑制性M2型。M1型MG常常在垂死的神经元和急性炎症之间建立恶性循环。M2型MG则释放多种抗炎细胞因子,抑制炎症反应,促进神经元的存活。因此抑制M1型MG激活,促进MG向M2型分化,可能是治疗炎症相关疾病可行的治疗策略。淫羊藿苷(icariin,ICA)是传统草药淫羊藿的主要活性成分,淫羊藿素(icaritin,ICT)是ICA在体内的主要代谢产物,二者均具有抗神经炎症、抗氧化和抗细胞凋亡的作用。研究显示,ICA和ICT具有类雌激素样作用,具有促乳腺癌细胞增生的作用,此作用与雌激素膜受体——G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor,GPER)介导的信号转导有关。本课题组前期工作证明,胰岛素样生长因子-1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)介导的信号途径参与了ICT对抗神经毒素对多巴胺(DA,dopaminergic)能神经元的损伤作用。ICA和ICT的抗炎神经保护作用与GPER和IGF-1R的交互对话相关,但其对MG表型的调控及抑制MG炎症反应的作用靶点,需要进一步探讨。目的1.研究ICA和ICT对原代MG表型极化的作用;2.探索ICA和ICT抑制MG炎症反应的作用靶点及其相关的信号途径。方法1.应用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)制备大鼠中脑原代MG炎症模型;2.采用实时荧光定量PCR(real time PCR,RT-PCR)技术检测Arg-1、IL-10、IL-1β、TNF-α、i NOS和COX-2的基因表达;3.采用免疫印迹技术(western blot)检测i NOS、COX-2、ERK、p38、JNK和IκB的蛋白表达;4.采用药理阻断及慢病毒介导的si RNA技术干扰GPER和IGF-1R介导的信号途径。结果***(10μM)和ICT(10μM)单用能够明显诱导M2型MG细胞标志物Arg-1和IL-10的基因表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。***(0.5μg/m L)能够明显诱导原代MG中炎性因子IL-1β、TNF-α、i NOS和COX-2的基因表达(P<0.001)。ICA和ICT预保护能够抑制上述炎性因子基因的表达(P<0.05,P<0.01,P<0.001),此作用可以被IGF-1R特异性阻断剂JB-1(1μg)和GPER特异性阻断剂G15(1μM)阻断(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。***和ICT在蛋白水平上能够抑制LPS诱导的MG中i NOS、COX-2的表达(P<0.001),此保护作用可以被JB-1和G15阻断(P<0.05,P<0.001)。***能够明显增高ERK、p38、JNK和IκB蛋白的磷酸化水平(P<0.01,P<0.001),ICA和ICT能够抑制上述蛋白的磷酸化水平(P<0.01,P<0.001),此作用可被JB-1和G15阻断(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。5.运用慢病毒介导的RNA干扰技术,敲减BV2小胶质细胞GPER基因表达,与空载病毒组相比,慢病毒组可以明显降低GPER基因的表达(P<0.01),敲除率在50%左右。6.在基因水平,慢病毒干扰组ICA、ICT对IL-1β、TNF-α、i NOS、COX-2的表达的抑制作用明显降低(P<0.01,P<0.001)。7.在蛋白水平,慢病毒干扰组ICA、ICT对i NOS、COX-2的蛋白表达的抑制作用亦明显降低(P<0.05)。结论综上所述,ICA、ICT能够促使原代MG表型向免疫抑制性M2型分化,而且能够抑制LPS诱导的促炎性M1型MG的激活,GPER可能是ICA、ICT抗炎作用的靶点,IGF-1R参与了ICA和ICT的抗炎作用。

关键词： 丹参多酚酸盐   免疫炎症反应   冠心病   效果  

摘要： 目的分析丹参多酚酸盐治疗冠心病的效果及对患者免疫炎症指标的影响。方法选取2017年1月～2019年1月我院收治的冠心病患者100例作为研究对象,对照组常规治疗,研究组在此基础上加用丹参多酚酸盐治疗,对比两组疗效及免疫炎症反应。结果研究组治疗后的CD4;、CD8;与CD4;/CD8;、SL-2R、Hs-CRP、TNF-α与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。研究组与对照组治疗有效率分别为94.0%和76.0%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论丹参多酚酸盐应用于冠心病治疗,可有效改善患者机体免疫功能,提高临床治疗效果。

关键词： 肾病综合征   丹参注射液   甲泼尼龙   微炎症状态  

摘要： 目的观察丹参注射液联合甲泼尼龙治疗肾病综合征的疗效以及对患者微炎症状态的影响。方法选取南阳市第二人民医院2018年2月—2019年2月确诊为肾病综合征的80例患者为研究对象,按随机数字表法分为对照组和观察组,每组各40例。对照组在常规治疗方法上给予甲泼尼龙片,观察组在对照组基础上静脉滴注丹参注射液。观察两组疗效以及治疗前后患者微炎症状态的变化情况。结果治疗后,观察组的总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05);观察组患者血清炎性因子白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白水平均下降且低于对照组,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论采用丹参注射液联合甲泼尼龙治疗肾病综合征,可有效改善患者微炎症状态,效果显著,值得临床应用。