关键词： 慢性肾脏病3-4期   微炎症状态   苏叶地黄汤   临床研究  

摘要： 目的:客观评价苏叶地黄汤改善慢性肾脏病3-4期(脾肾气虚、湿浊瘀阻型)患者微炎症状态的临床疗效及其安全性,为临床推广应用提供依据。方法:将符合纳入标准的70例患者随机分为对照组和试验组,每组各35例,对照组给予常规治疗,试验组在对照组治疗的基础上加用苏叶地黄汤,两组均连续治疗8个周。检测患者治疗开始及治疗结束时微炎症指标(CRP、TNF-α、ALB)、血脂(TG、TC、LDL-C)、肾功能(Scr、BUN、GFR)、中医证候积分及其安全性指标的变化,并据此进行统计学分析以客观评价其疗效和安全性。结果:(1)微炎症指标:与治疗前相比,试验组与对照组均明显降低CRP、TNF-α水平、提升ALB含量(P<0.01),且试验组疗效优于对照组(P<0.05);(2)血脂:两组TG、TC、LDL-C在治疗后水平均显著降低(P<0.01),且试验组TG、TC、LDL-C降低幅度优于对照组(P<0.05);(3)肾功能:试验组与对照组均显著降低Scr、提高GFR水平(P<0.01),两组BUN较治疗前下降(P<0.05),试验组在降低Scr及BUN水平、提高GFR优于对照组(P<0.05);(4)中医证候疗效:试验组与对照组总有效率分别为73.53%、93.94%,试验组优于对照组(P<0.05);(5)临床综合疗效:试验组、对照组总有效率分别为76.47%、93.94%,且试验组优于对照组(P<0.05);(6)安全性:两组在血、尿、大便常规、心电图、肝功能方面治疗前后均无明显异常。结论:苏叶地黄汤能够有效降低CKD3-4期(脾肾气虚、湿浊瘀阻型)患者血清CRP、TNF-α水平,提高ALB含量,改善微炎症状态,降低血脂水平,保护肾脏功能及提高临床治疗有效率,且安全可靠。

关键词： 多囊卵巢综合征   慢性低度炎症状态   二甲双胍   复方醋酸环丙孕酮  

摘要： 研究背景多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome,PCOS）是妇科最常见的内分泌疾病之一,是青年女性月经不调、闭经、月经不调的最常见原因,严重影响了青年女性的生活质量和精神状态。PCOS以持续无排卵或罕见排卵、临床或生化高雄激素血症和多囊卵巢形态慢性无排卵和高雄激素血症、月经不调、闭经、不孕、多毛、痤疮和活动性肥胖为特征。育龄妇女发病率为5%8%,常导致不孕不育。值得关注的是PCOS患者易患中枢性肥胖,被认为处于促炎状态。虽然PCOS的发病机制尚不清楚,但支持PCOS患者慢性低度炎症反应的证据正在逐渐被发现。PCOS患者炎症程度较轻,主要表现为C反应蛋白(（C-reactive protein,CRP）、白细胞介素及白细胞介素总量等炎性因子轻度升高,但其机制仍存在争议:内分泌异常、中枢性肥胖、胰岛素抵抗等都是可能的病因。此外,临床常用药物如二甲双胍和口服避孕药等对PCOS这种炎症状态的影响尚不清楚,还需要大量的研究去证实。目的PCOS患者是否存在低度炎症状态;PCOS患者慢性低度炎症状态与身体指标、性激素、血脂、空腹胰岛素、胰岛素敏感指数和血糖等哪些临床指标有相关性;复方醋酸环丙孕酮片和二甲双胍可否有效改善患者体内慢性炎症因子状态。方法选取河南省人民医院2019年1月2020年1月期间收治的多囊卵巢综合症患者85例作为研究组,同时选取这时期在我院进行体检的健康妇女85例作为对照组,对所有研究对象的各项身体指标（身高、血压、体重、臀围和腰围）、白细胞计数、C反应蛋白情况、性激素水平（睾酮、卵泡刺激素、促黄体生成素）以及糖脂代谢指标和空腹血糖情况进行检测和分析。将研究组患者随机分为A组和B组,A组患者42例,B组患者43例,给予A组患者二甲双胍进行治疗,B组患者接受复方醋酸环丙孕酮进行治疗,所有患者均持续治疗90d,然后对其身体指标和白细胞计数等指标进行复查,观察不同药物治疗后对患者身体指标等各项因素的影响以及对于多囊卵巢综合征患者慢性低度炎症状态的干预结果。结果正常组与对照组患者研究对象的年龄、体重、促卵泡激素、总胆固醇、低密度脂蛋白、载脂蛋白B以及空腹血糖等指标均无统计学意义（P>0.05）,但是研究组患者腰围和臀围方面对比差异比值显著高于对照组（P<0.05）,研究组患者的C反应蛋白和白细胞计数显著升高,且研究组在1 mg/L0.05）。空腹胰岛素、血糖、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白以及载脂蛋白A1和载脂蛋白B与患者C反应蛋白身高无相关性。相比于治疗前、治疗后A组患者体脂量、腰围、腰臀围比值、空腹胰岛素、空腹血糖、餐后两小时血糖、胰岛素敏感指数以及白细胞计数差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后A组患者的C反应蛋白水平显著低于治疗前（P<0.05）。相比于治疗前、治疗后A组患者体脂量、腰围、腰臀围比值、空腹胰岛素、空腹血糖、餐后两小时血糖、胰岛素敏感指数差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后A组患者的C反应蛋白水平显著高于治疗前（P<0.05）,治疗后患者的白细胞计数较治疗前有所上升,但是对比差异无统计学意义（P<0.05）。治疗后,B组患者体脂量、腰围、腰臀围比值、空腹胰岛素、空腹血糖、餐后两小时血糖、胰岛素敏感指数差异无统计学意义（P>0.05）,治疗后B组患者的C反应蛋白水平显著高于治疗前（P<0.05）,治疗后患者的白细胞计数较治疗前上升程度较A组高,但是对比差异无统计学意义（P<0.05）。结论（1）PCOS患者在体重正常的情况下也会存在慢性低度炎症的状态。（2）PCOS患者慢性低度炎症状态与胰岛素抵抗、体重情况以及甘油三脂有着密切的关系,但是与内分泌异常和肥胖无关。（3）二甲双胍治疗可以很大程度的改善PCOS患者慢性低度炎症的状态,复方醋酸环丙孕酮治疗则极有可能会激化患者的慢性低度炎症状态。（4）在给予PCOS慢性低度炎症患者复方醋酸环丙孕酮进行治疗的同时可以联合二甲双胍进行配合治疗,以此来达到减轻激化的情况。因此,复方醋酸环丙孕酮联合二甲双胍可有效改善PCOS患者慢性低度炎症状态。

关键词： 阿加曲班   急性脑梗死   血管内皮功能   炎症状态  

摘要： 目的 探讨急性脑梗死患者的疾病治疗期间，采用阿加曲班药物方案，对患者血管内皮功能、Hcy（同型半胱氨酸）指标、炎症状态的改善作用。方法 研究项目起始时间、终止时间范围选择2018年10月至2020年12月，研究资料共抽选60例患者，设置研究组别为常规组（n=29）与研究组（n=31），患者接受不同药物干预方案，比较两组患者的治疗效果、血管内皮功能变化和Hcy指标、炎性因子分泌水平。结果 研究组患者治疗期间有效率明显高于常规组（P<0.05）。比较组间血管内皮功能，研究组患者ET-1、NO、FMD三项水平改善更为明显；比较组间Hcy指标，在治疗后研究组低于常规组（P <0.05）。比较组间炎性因子，治疗后研究组炎性因子参数水平低于常规组（P <0.05）。结论 在对急性脑梗死患者进行疾病治疗时，积极应用阿加曲班药物，可有效改善患者脑部供血状态，减少炎性因子分泌。

关键词： 胃癌   全身免疫炎症指数(SII)   根治性手术   预后  

摘要： 背景及目的:胃癌(GC)是常见的消化道恶性肿瘤,随着近年来医疗条件的改善检出率逐年增高。根据2012年Freddie等人最新统计结果显示每年新增胃癌确诊人数达百万人,其中大约70%因胃癌死亡。19世纪Virchow等病理学家在肿瘤内部首次检测到白细胞,于是推测肿瘤内部可能存在免疫炎症反应。近年来随着科学方法的不断进步,学者们通过分子生物学的角度验证了炎症在肿瘤发展的各个阶段发挥作用。外周血的免疫因素被认为是一种能够判断恶性肿瘤预后,早期诊断及指导术后化疗的潜在标志物。有学者通过将体内的免疫指标,炎症指标及凝血指标联合构建出一种全新的标志物用于判断癌症的进展。如格拉斯哥评分(GPS)、纤维蛋白原与白蛋白比(FAR)、中性粒细胞/淋巴细胞比(NLR)等已经在胃癌、结直肠癌、肝癌、肺癌、食管癌中证实与患者的预后相关。全身免疫炎症指数(SII)作为一种新的炎症标志物最近被证实与多种恶性肿瘤生物学特性和预后相关,但在胃癌中应用尚不多见。本研究通过对比SII数值,探究影响SII的因素,评价与预后的相关性。方法:应用胃肠外科临床数据库调取823例行根治性手术的胃癌患者临床资料及随访信息。依照入院首次血常规结果计算出SII值[SII=(血小板×中性粒细胞)/淋巴细胞]。通过Youden指数选取SII临界值进行分组,采用卡方检验分析变量之间的相关性,对两组患者进行生存分析绘制生存曲线,应用单变量和多变量COX回归分析确定预后指标。结果:最佳SII截取值为427.3,全组患者其中SII≤427.3组有459例,SII>427.3组有364例。与SII低组相比,SII值高组的患者平均年龄偏大、存在较多淋巴结转移、肿瘤浸润较深、患者的营养状态偏差、肿瘤分期较晚、CEA偏高(均P<0.05)。截止到2018年3月生存的514例,死亡309例,SII≤427.3的这组患者总体生存期(overall survival,os)明显好于SII>427.3组患者,差异具有统计学意义(P=0.000)。对于年龄较大、肿瘤位置靠上、组织学分型差、浸润程度深、淋巴结转移多、分期晚、术前低营养状态(低白蛋白,前白蛋白)及术前肿瘤标记物(CEA,CA-199)高的这部分患者预后相对较差。多因素分析结果显示肿瘤的位置(HR=0.696,95%CI=0.597-0.811,P=0.000)、CA-199(HR=1.513,95%CI=1.204-1.901,P=0.000)、淋巴结转移(HR=1.337,95%CI=1.121-1.595,P=0.001)、肿瘤的浸润深度(HR=2.241,95%CI=1.184-4.244,P=0.013)、肿瘤的TNM分期(HR=1.289,95%CI=1.057-1.558,P=0.008)、前白蛋白(HR=0.720,95%CI=0.560-0.926,P=0.01)、年龄(HR=1.487,95%CI=1.162-1.902,P=0.02)及SII(HR=1.577,95%CI=1.253-1.984,P=0.000)是影响行根治性胃癌切除术患者预后的独立危险因素。结论:对于行根治性手术的胃癌患者SII是一种可靠的预测预后的指标,术前高的SII值预示着差的预后。

关键词： 粉尘暴露   白细胞   肺功能下降   全身炎症  

摘要： 目的:生产性含铁粉尘广泛存在于钢铁工人的作业环境中,是损害劳动者健康,导致职业病发生的主要有害因素。目前关于钢铁企业生产性粉尘对作业人员肺功能影响的调查多集中于小样本横断面研究,缺乏对肺功能连续变化情况监测的大样本研究。本研究旨在从钢铁作业人群队列的基线数据和纵向数据两个方向,评估长期钢铁粉尘暴露对肺功能以及白细胞参数的影响,探究职业性粉尘暴露、全身炎症和肺功能下降之间的关联,为职业病的防治和精准医疗提供科学依据。方法:该队列建立于2008年1月1日,选取河南某大型钢铁企业,对队列人群每年进行血常规检查、肺功能测量等常规健康检查,人群每两年参加一次健康体检,连续随访10年。截至2017年12月31日,共7575人进入队列。将历史监测数据与工人自诉粉尘接触史相结合,并参考现场专家经验进行粉尘暴露等级评估,计算时间加权暴露强度。使用广义线性模型分析肺功能基线水平的影响因素,使用线性混合效应模型分析肺功能下降速率的影响因素,同时分析白细胞参数与肺功能之间的关联性,校正相关的协变量。使用SAS9.4进行统计分析。结果:1、随访过程中,钢铁作业工人肺功能的年平均下降量为:第1s用力呼气量（FEV1:55.98m L/s）,用力肺活量（FVC:43.49m L）。2、随着粉尘暴露强度的增高,FEV1和FVC的基线水平降低,下降速率减慢。粉尘时间加权暴露强度每增加一个单位,人群FEV1降低20.89m L/s（P=0.013）,下降速率减慢3.55m L/s·year（P<0.001）,FVC降低39.34m L（P<0.001）,下降速率减慢6.17m L/s·year（P<0.001）。3、粉尘时间加权暴露强度每增加一个单位,人群中性粒细胞升高0.08×10～9/L（P<0.001）,升高速率减慢0.01×10～9/L·year（P<0.001）;淋巴细胞降低0.03×10～9/L（P<0.001）;中值细胞降低0.02×10～9/L（P<0.001）,下降速率减慢0.001×10～9/L·year（P<0.001）。4、随着白细胞参数升高,工人的肺功能基线水平更低。将白细胞参数纳入模型后发现,工人白细胞参数每增加一个四分位间距（2.0×10～9/L）,FEV1降低21.54m L/s（P=0.010）;FVC降低21.69m L（P=0.016）。按性别分层后,发现男性工人白细胞参数与FEV1和FVC的下降速率呈现明显的剂量反应关系(P趋势<0.05)。结论:1、钢铁粉尘暴露与作业工人肺功能的下降有关,随着粉尘暴露强度的增加,肺功能（FEV1、FVC）的基线水平降低,下降速率减慢。2、钢铁粉尘暴露可影响作业工人机体的炎性水平,粉尘暴露强度越高,中性粒细胞基线水平升高,变化速率减慢,淋巴细胞和中值细胞基线水平降低,中值细胞的变化速率减慢。3、白细胞参数的水平越高,作业工人肺功能的基线水平越低。男性工人的白细胞参数越高,肺功能FEV1和FVC的下降速率越快,存在显著的剂量反应关系。4、白细胞参数所介导或反映的炎性水平,可预示全身炎症在肺功能变化轨迹中的重要作用。

关键词： 金银花   免疫   MAPK   脓毒症   小鼠  

摘要： 目的:通过CLP脓毒症小鼠模型,观察金银花水煎剂对脓毒症小鼠生存率的影响,探究其对脓毒症炎症及免疫的调节作用及机制。方法:实验一:使用CLP脓毒症小鼠模型,分别以生理盐水和不同剂量金银花水煎剂作为干预措施,连续观察7天,对照不同剂量的金银花水煎剂对小鼠生存情况的影响。实验二:使用CLP脓毒症小鼠模型及假手术小鼠模型,以实验一中提高生存率最显著的剂量作为金银花最佳剂量,分析金银花水煎剂对脓毒症小鼠炎症及免疫的调节作用与机制。CLP造模后24、48小时处死小鼠取材,采集小鼠血清、肝脏、脾脏;石蜡切片HE染色观察小鼠脾脏、肝脏病理变化;流式细胞术分析脾脏T淋巴细胞、CD4+、CD8+等;ELISA 检测炎症因子 TNF-α,IL-1,IL-4 等;免疫印迹测 HMGB1、TLR4、p38 MAPK、IL-1β、IL-6 等。结果:实验一结果显示金银花中剂量组显著提高脓毒症小鼠7天生存率,并且可改善脓毒症小鼠内脏水肿,腹腔黏连、积液等病理状态。实验二结果显示:①病理切片观察显示金银花组小鼠肝细胞气球样变、脂肪样变、点状坏死等损伤较生理盐水组程度更轻,脾脏结构尚能识别,白髓与红髓界限不清但程度轻于生理盐水组。②ELISA结果显示与假手术组相比,生理盐水组和金银花组造模后24小时IL-4都有所下降,且差异具有统计学意义(P<0.001),造模后48小时生理盐水组IL-4持续下降,金银花组IL-4含量有所回升。IL-10与TNF-α变化无统计学差异。③流式细胞术结果显示:与假手术组相比,CLP术后24小时生理盐水组、金银花组小鼠成熟T淋巴细胞含量下降,差异具有统计学意义(P<0.05);CD4+T淋巴细胞占比下降,但金银花组显著高于生理盐水组(P<0.05);CD4+/CD8+水平显著下降,但金银花组高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05);与假手术组相比,CLP术后48小时生理盐水组与金银花组小鼠CD4+、CD4+/CD8+比值均显著下降(P<0.05),其中金银花组略高于生理盐水组,但二者之间差异无统计学意义(P=0.118、P=0.299)。④免疫印迹结果显示:与生理盐水组相比,CLP造模24小时后,金银花组小鼠HMGB1、TLR4、p38MAPK蛋白表达下降;48小时后,与假手术组相比,生理盐水组CLP术后24小时p38 MAPK蛋白表达显著增加(P<0.05),提示金银花可能抑制p38MAPK表达(P<0.05);CLP术后48h金银花组小鼠HMGB1、TLR4表达仍显著低于生理盐水组(P<0.05),p38 MAPK表达亦低于生理盐水组,但差异无统计学意义。24h时金银花组IL-6、IL-1β表达显著低于生理盐水组(P<0.05),48h时二者差异无统计学意义,但金银花组表达更接近正常值。结论:1.中剂量金银花水煎剂可提高脓毒症小鼠生存率,改善脏器损伤情况;2.金银花水煎剂对CLP脓毒症小鼠免疫系统的调节与影响主要体现在保护免疫器官、提高淋巴细胞生存能力,调节脾脏CD4+/CD8+比例、调控免疫因子分泌等方面。3.金银花水煎剂在应用于CLP脓毒症小鼠治疗中表现出一定的免疫调节能力,且这种作用可能与抑制HMGB1/TLR4/p38 MAPK信号通路相关。

关键词： 腹泻型肠易激综合征   低炎症状态   肥胖   瘦素   瘦素受体  

摘要： 第一部分:腹泻型肠易激综合征(IBS-D)患者临床症状、生活质量、肥胖、血清瘦素及瘦素受体水平的评估目的:目前对于IBS的发病机制争论较多,本研究通过收集IBS-D患者症状及生活质量评分、肥胖指标,探讨肥胖与IBS-D的相关性,同时由于瘦素在肥胖的发病中起重要作用,本研究拟从分子机制方面探讨瘦素在IBS-D中的作用。方法:本研究纳入47例IBS-D患者以及10例健康对照者。使用IBS-SSS(IBS症状严重程度量表)评估研究对象的病情严重程度,使用IBS-QOL(IBS生活质量量表)评估研究对象的生活质量,测量纳入者腰围、BMI、甘油三酯、HDL、LDL等相关指标,并利用公式计算脂质蓄积指数(LAP)及内脏脂肪指数(VAI)。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清瘦素及瘦素受体水平;钳取入选者直肠乙状结肠交界处粘膜组织,通过RT-PCR法检测瘦素及瘦素受体的表达情况。分析以上指标在IBS-D患者与健康对照者之间的差异,并多因素分析血清瘦素水平与上述各指标之间的关系。结果:与健康对照者相比,IBS-D患者IBS-SSS评分显著升高、IBS-QOL评分显著降低;BMI指标在两组中无明显差异,IBS-D患者较健康者腰围高,但差异无统计学意义;IBS-D患者的LAP、VAI明显高于健康对照者,差异具有统计学意义。IBS-D患者血清和结肠粘膜组织的瘦素水平较健康对照者均显著增高,差异具有统计学意义,而血清和粘膜瘦素受体的表达,在IBS-D患者和健康对照者中无明显差异。多因素相关分析结果显示,血清瘦素与LAP、VAI均有相关性,差异具有统计学意义;血清瘦素与BMI、腰围、IBS-SSS、IBS-QOL间的相关性不具有统计学意义。结论:***-D患者存在脂肪量的异常,且LAP、VAI指标在评估肥胖尤其是内脏性肥胖方面,可能具有更高的临床价值。2.肥胖的高IBS-D患病率可能与高瘦素水平有关,我们推测可能与肥胖以及瘦素介导的低炎症状态有关。第二部分:探讨肠易激综合征低炎症状态与瘦素的关系目的:本研究第一部分已阐明瘦素与肥胖及IBS密切相关,且目前认为肥胖症及IBS处于低炎症状态,同时文献报道瘦素可介导炎症发生,因此我们猜测肠易激综合征低炎症状态可能与瘦素有关,并通过本部分探讨IBS的低炎症状态是否与瘦素有关。方法:使用TNF-α(100ng/ml)刺激结肠上皮细胞(HT-29),将细胞分为6、12、24小时三组,运用RT-PCR法分别在不同时间检测结肠上皮细胞瘦素及其受体的表达情况;然后将细胞分为100ng/ml、200ng/ml、300ng/ml、400ng/ml四组,使用不同浓度刺激结肠上皮细胞,运用RT-PCR法检测相同时间(12h)不同浓度下瘦素及瘦素受体的表达情况。结果:结肠上皮细胞经TNF-α(100ng/ml)刺激后瘦素mRNA的表达水平呈时间和浓度依赖性的降低,在不同时间下,刺激12小时抑制程度最明显,实验组的瘦素mRNA相对表达量较对照组减少15倍,具有统计学意义;在不同浓度下,使用300ng/mlTNF-α刺激时最明显,实验组比对照组的瘦素mRNA表达量减少1.77倍,差异有统计学意义。而实验组经TNF-α刺激后瘦素受体mRNA的表达水平与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:瘦素与炎症密切相关,可能在IBS低炎症状态中起重要作用。

关键词： 自身炎症性疾病   RIPK1   切割位点变异   细胞死亡   炎症  

摘要： 自身炎症性疾病是指在没有高滴度自身抗体或抗原特异性T细胞参与的情况下,机体发生非诱发炎症的一类遗传疾病,例如家族性地中海热,主要临床表现包括周期性发热、皮疹、CRP升高、淋巴结肿大、肝脾肿大、关节炎、炎症性肠病、血管炎、结节性多动脉炎、基底节钙化或肺间质病等多种形式的系统性炎症。发现新致病基因并深入研究致病机制对患者的精准治疗和研究基因的生理功能都有重要意义。RIPK1在死亡受体或模式识别受体介导的细胞凋亡、程序性坏死和炎症信号通路的激活与转换中发挥着关键作用。肿瘤坏死因子TNF与受体TNFR1结合后,招募接头蛋白TRADD和RIPK1等形成复合体I,介导NF-κB通路的级联激活,起始促炎基因和促细胞存活基因的转录。在此过程中,RIPK1起着重要的支架作用,激酶活性受到泛素化和磷酸化修饰的限制。去泛素化或去磷酸化可以激活RIPK1,促进与FADD和caspase-8等蛋白组成复合物IIa,启动RIPK1依赖的细胞凋亡。若caspase-8酶活被抑制,激活的RIPK1会招募RIPK3和MLKL形成复合体IIb导致程序性坏死、细胞内容物泄露和炎症的发生。在小鼠模型中,Fadd敲除导致过度的细胞坏死和小鼠胚胎期死亡,通过敲除Ripk1可以挽救。Casp8敲除同样导致小鼠胚胎期死亡,通过敲除Ripk3或者Mlkl可以挽救。这提示FADD-caspase-8的激活可以抑制RIPK1/RIPK3/MLKL依赖的程序性坏死来保证小鼠胚胎发育,但具体的分子机制及在人类疾病中的生理意义尚不清楚。RIPK1第324位天冬氨酸是潜在的被caspase-8切割的位点,我们从未诊断的自身炎症性疾病病例中发现两个患病家系,分别携带新发的RIPK1杂合变异***324Val和***324His,患者主要表现出周期性发热和淋巴结肿大等症状。患者血清中炎症细胞因子和趋化因子水平升高,外周血单个核细胞(PBMCs)中炎症信号通路相关基因的转录水平升高。在机制的研究中,RIPK1切割位点变异促进了小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)中TNF诱导的RIPK1激活及其介导的细胞凋亡、程序性坏死和促炎细胞因子IL-6的产生。同样的,切割位点变异也促进了患者PBMCs中TNF诱导的细胞凋亡、程序性坏死和IL-6转录水平的升高,且都依赖于RIPK1的激酶活性。与PBMCs相反,患者的成纤维细胞(Fibroblasts)中RIPK1、TNFR1等蛋白的表达水平和胞内活性氧水平降低,表现出对TNF诱导的细胞坏死和对erastin和RSL3诱导的铁死亡的抵抗。基于RIPK1切割位点变异能引起细胞因子IL-6的显著变化,我们建议患者用IL-6受体抑制剂进行治疗,取得了很好的疗效。综上所述,我们发现caspase-8在RIPK1 D324位点的切割负调控了RIPK1的激活及其介导的细胞程序性死亡,而切割位点的变异导致患者PBMCs中RIPK1的过度激活及其介导的细胞凋亡、程序性坏死和炎症信号通路激活水平的升高,最终导致了患者表现出反复发热和淋巴结肿大等症状。而患者fibroblasts发展出了多种补偿机制,使其可以抵抗不同的死亡刺激,这也可能使患者没有皮肤受累或病变。

关键词： 哮喘   炎症反应   IL-1信号通路   泛素连接酶   Peli1   IL-1信号通路   Peli1   中性粒细胞   HDM   OVA   单核巨噬细胞   炎症因子   IL-1信号通路   Peli1   炎症因子   Peli1   IRAK3   泛素化修饰  

摘要： 背景:支气管哮喘(简称哮喘)为一种异质性疾病,以慢性气道炎症为特征。哮喘一直是全球难以攻克的顽疾。成人哮喘多数起病于婴幼儿期,而哮喘是儿童最常见最顽固的慢性呼吸系统疾病。哮喘对全球造成了沉重负担,世界卫生组织已将哮喘的防控确定为紧迫的发展问题,对实现2030年可持续发展目标至关重要。鉴于此,各国都在开展哮喘防治的研究,但目前关于哮喘的治疗措施仍未有很大进展。因此,深入研究哮喘发病机制,寻求新的诊疗策略,是当前哮喘防治亟待解决的问题。 为探讨哮喘发病机制,寻找新的诊疗策略,解决临床实际问题,本研究团队通过收集哮喘儿童外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)标本,以健康儿童PBMC为对照,应用测序手段筛选差异表达的基因,发现并证实哮喘儿童PBMC中泛素连接酶表达谱与健康儿童显著不同,并靶向研究差异最显著的E3泛素连接酶 Pellino1(Peli1)。 泛素化是蛋白翻译后修饰的一种,可对细胞功能进行广泛而复杂的调控,在泛素化修饰中,E3泛素连接酶是特异性识别底物的关键。研究表明E3泛素连接酶在炎症级联反应的调控中起重要作用。其中,E3泛素连接酶Peli1在先天免疫和适应性免疫中起重要调节作用。Peli1可负调节T细胞活化,抑制自身免疫。目前有关Peli1的报道多与白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)信号通路的激活相关。Baines团队分别于2010年、2017年报道了哮喘频繁发作的患者痰液中Peli1表达升高,并预测哮喘发作与IL-1信号通路激活相关。本课题组前期工作鉴定并报道了IL-1信号通路相关分子Peli1是儿童哮喘的重要生物标记。目前Peli1在哮喘疾病中的报道有限。 第一部分 E3泛素连接酶Peli1在哮喘患儿PBMC中表达及意义 目的:探讨哮喘患儿外周血中IL-1信号通路相关分子Peli1等表达情况及与临床表现、预后、实验室检测、肺功能检查等相关性。 方法:(1)收集急性发作期的哮喘儿童(实验组)以及健康儿童(对照组)的外周血样本,分离PBMC,提取核糖核酸(Ribonuleic acid,RNA),进行转录组测序(RNA-Seq)检测筛选差异表达的基因。(2)扩大样本量,收集哮喘儿童和成人外周血标本 qRT-PCR(Quantitative Real time polymerase chain reaction)验证差异表达的基因。(3)收集年龄、性别、体重、哮喘病程、GINA(Global initiative for asthma)分级分期、使用糖皮质激素等药物情况、并发症情况、临床化验指标、肺功能检查结果(1秒钟用力呼气容积占预计值的百分比(The percentage of forced expiratory volume in 1 second accouting for the predicted value,FEV1%predicted)、呼出气一氧化氮浓度(FeNO)等临床资料,分析候选分子在儿童哮喘中的意义。 结果:(1)RNA-Seq检测到哮喘儿童PBMC中有13个泛素连接酶上调,32个泛素连接酶下调。qRT-PCR验证得出差异最显著的泛素连接酶为Peli1。(2)IL-1信号通路的相关分子检测中,8个分子表达(IL-1RN、IL-1B、IRAK3、MYD88、IRAK2、Peli1、IL-1RAP、IL-1R1)在急性发作期患者与健康对照组比较中出现上调,4个分子(IL-1RN、IRAK3、Peli1、IL-1RAP)随哮喘进展动态波动。(3)Peli1在急性发作期、慢性持续期和健康组三组中的表达量下降与肺功能FEV1的上升呈正相关,与FeNO的下降呈正相关。 结论:哮喘儿童与健康儿童泛素连接酶表达谱显著不同,差异最显著的是Peli1分子。IL-1信号通路的关键分子是儿童哮喘的重要生物标记,IL-1信号通路关键分子Peli1等表达随哮喘进展动态变化。 第二部分 E3泛素连接酶Peli1在哮喘模型小鼠PBMC和肺组织中表达及意义 目的:通过构建卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)及尘螨提取物(House dust mite extract,HDM)诱导的小鼠哮喘模型,评估小鼠哮喘症状体征,检测支气管肺组织、肺泡灌洗液和外周血中炎症因子指标及IL-1信号通路相关分子Peli1等表达情况,以进一步证实Peli1等IL-1信号通路相关分子在哮喘发病中的重要意义。 方法:(1)建模:选择6-8周的雌性C57BL/6小鼠,通过腹腔注射结合超声雾化吸入HDM或OVA建立哮喘模型。(2)模型验证:观察小鼠每日行为学改变(哮喘症状体征如竖毛、烦躁不安、呼吸急促、点头呼吸、腹肌抽搐等);H&E(Hematoxylin and eosin)染

关键词： 心血管疾病   精神压力   RNA结合蛋白   白细胞介素  

摘要： 心血管疾病是全球范围内首要的死亡原因,每年死于心血管疾病的人数远超死于肿瘤的人数。Rbm24是一个在心脏中特异性表达的RNA结合蛋白(RNAbinding protein),在心脏的早期发育中发挥不可或缺的功能。之前有研究表明Rbm24蛋白序列上第181位的丝氨酸(Ser)磷酸化修饰能够被GSK3β激活。本项研究中我们发现,在社会隔离诱导的慢性压力小鼠模型中,其心脏组织以及血清中Rbm24 S181位点磷酸化水平随着隔离时间的延长而增加。结合蛋白质谱分析,我们证明了Rbm24 S181的磷酸化修饰可以促进该蛋白主动分泌。在随后的研究中,我们发现了一个新的Rbm24互作蛋白DAZAP2,且两者之间的互作受到Rbm24 S181磷酸化修饰的调控。同时,我们证明了IL-17E能够通过激活GSK3βSer9磷酸化从而抑制GSK3β激酶活性,进一步影响Rbm24 S181磷酸化修饰的发生。综上所述,我们证明了IL-17E调控Rbm24 S181位点磷酸化的发生,进一步诠释了Rbm24 S181磷酸化修饰的意义。